一种用于装载多肽类药物的缓释微球及其制备方法

本发明涉及医药，具体涉及一种用于装载多肽类药物的缓释微球及其制备方法。

背景技术：

1、多肽和蛋白质药物由于其低毒性和的高特异性，几十年来一直显示出巨大的潜力。除了疫苗接种和诊断外，多肽和蛋白质药物的主要应用是治疗慢性疾病、自身免疫性疾病、艾滋病和癌症等。由于多肽和蛋白质的低吸收和高酶降解性，口服、肺、鼻、眼部和经皮给药在长期治疗中并不常用。相比之下，通常采用静脉注射、植入和皮下注射、肌肉注射等给药方法。然而由于大多数肽和蛋白质药物在体内的半衰期较短，给药初期血浆中药物含量很高，药物进入体内后迅速被清除，很快就会低于有效血药浓度，患者需要长时间、高频率注射药物，以维持药物治疗的效果，长期注射导致患者的顺应性较差。此外，代谢系统中丰富的蛋白酶和ph的波动可能导致蛋白质的变性或降解，进而诱导严重的免疫反应。

2、为了克服这些缺点，研究人员开发出缓控释给药系统，通过延长药物释放时间，在避免重复给药的同时，很大程度上提高了患者的依从性。特别是对于半衰期较短的药物，缓控释给药系统改变了药物在体内的药物动力学参数，提高了生物利用度。在缓控释给药系统的研究中，通常采用多功能聚合物载药材料作为载体。常用的高分子材料包括合成的聚酯、聚酰胺、聚氨基酸，其中最流行的聚合物之一是聚乳酸-羟基乙酸共聚物(plga)，由于其优越的生物相容性和生物降解性，已被美国食品和药物管理局(fda)批准用于临床使用和药物递送。

3、然而以聚乳酸-羟基乙酸共聚物(plga)为载体的多肽类微球类制剂易发生突释高和释放平台期长的问题，如上市制剂在体内5～14天几乎不释放。同时plga亲水性较差，水分不易进入微球内部，其水合降解过程缓慢，而且药物在plga微球内的分布不均匀。因此，为了缩短多肽类微球的释放平台期，提高亲水性以及改善体内释药行为。寻求一种减少药物突释、缩短微球的释放平台期，延长快速释放期的缓控释递送载药微球是本领域亟待解决的技术问题。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种装载多肽类药物的缓释微球，该载药微球具有较强的亲水性，能延长快速释放期，缩短微球的释放平台期。

2、为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：

3、第一个方面，本发明提供了一种用于装载多肽类药物的载药微球，所述微球由多肽类药物活性物质、亲水凝胶、水难溶性聚合物、含乳化剂的溶液组成；

4、所述多肽类药物递送载药微球为w1/o/w2结构；由多肽类药物活性物质与亲水凝胶组成内水相(w1)，水难溶性聚合物的有机溶剂作为油相(o)，含乳化剂的溶液作为外水相(w2)。

5、优选地，所述亲水凝胶为二聚乳酸-羟基乙酸共聚物聚乙二醇、泊洛沙姆、黄原胶、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙甲纤维素、聚维酮、卡波姆、海藻酸盐、壳聚糖，以及它们的共聚物和/或混合物中的至少一种。

6、优选地，所述亲水凝胶为二聚乳酸-羟基乙酸共聚物聚乙二醇。

7、优选地，所述水难溶性聚合物为聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚丙交酯、聚乙交酯、丙交酯-乙交酯共聚物及它们与聚己内酯或聚乙二醇的共聚物、聚己内酯及其与聚乙二醇的共聚物、聚羟基丁酸、聚羟基戊酸、聚对二氧环己酮、壳聚糖、海藻酸及其盐、聚氰基丙烯酸酯、纤维蛋白、聚酸酐、聚原酸酯、聚酰胺、聚磷腈、聚磷酸酯，以及它们的共聚物和/或混合物中的至少一种；

8、优选地，所述水难溶性聚合物为聚乳酸-羟基乙酸共聚物。

9、优选地，所述乳化剂为聚乙烯醇、油酸皂、硬脂酸皂、月桂酸皂、松香油皂、烷基硫酸盐、烷基苯磺酸盐、烷基磺酸盐、烷基萘基磺酸盐、木质素磺酸盐、磷酸酯盐、硫酸酯盐、季铵盐、烷基铵盐、卵磷脂、脂肪酸甘油酯、蔗糖脂肪酸酯、脂肪酸山梨坦、聚山梨酯、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪醇醚、聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、碳氟表面活性剂、含硅表面活性剂、生物表面活性剂、冠醚型表面活性剂、阿拉伯胶、西黄蓍胶、明胶、杏树胶、卵黄、聚乙烯吡咯烷酮或固体微粒乳化剂中的任意一种或几种的混合物；

10、优选地，所述乳化剂为聚乙烯醇与和nacl的混合溶液。

11、优选地，所述多肽类药物递送载药微球中，所述油相(o)有机溶剂为二氯甲烷、冰醋酸、乙腈、三氟乙酸、二甲基亚砜、无水乙醚、己烷、正庚烷、脂肪烃、卤代烃、脂肪酸酯、芳香烃、醚、无水乙醚、环己烷、正己烷、正庚烷中的任意一种或几种的混合物；

12、优选地，所述有机溶剂为二氯甲烷。

13、优选地，所述多肽类药物递送载药微球中所述水难溶性聚合物浓度为10～500mg·ml-1；所述聚乙烯醇浓度为0.1～10％；所述nacl浓度为0～10％。

14、优选地，所述多肽类药物递送载药微球中所述水难溶性聚合物浓度为30～250mg·ml-1，优选为：100mg·ml-1；所述外水相中聚乙烯醇浓度为0.1～2％，优选为1％；所述外水相nacl浓度为1～5％，优选为5％。

15、优选地，所述多肽类药物活性物质与水难溶性聚合物质量之比(即药载比，wex:wplga(％))为1～20％；所述内水相(w1)与油相(o)体积比为1:2～20；所述油相(o)与外水相(w2)体积比为1:2～10。

16、优选地，所述多肽类药物递送载药微球中，多肽类药物活性物质与水难溶性聚合物质量之比(即药载比，wex:wplga(％))为4～10％，优选为：5％；所述内水相(w1)与油相(o)体积比为1:5～10，优选为1:10；优选地，所述油相(o)与外水相(w2)体积比为1:4～8，优选为1:4.5。

17、优选地，所述多肽类药物递送载药微球，还包括将多肽类药物活性物质与金属盐溶液形成不溶性复合物，所述不溶复合物与所述亲水凝胶组成内水相(w1)。

18、优选地，所述多肽类药物活性物质与金属盐溶液质量之比为1:1～10。

19、优选地，所述多肽类药物活性物质与金属盐溶液质量之比(即mex:mzn)为1:1～4，优选为1:1。

20、优选地，所述金属盐溶液包括醋酸锌溶液、硫酸锌溶液、碳酸锌溶液、硝酸锌溶液、氯化锌溶液、亚硝酸锌溶液、亚硫酸锌溶液、硫酸铜溶液、氯化铜溶液、硝酸铜溶液、硝酸镁溶液、氯化镁溶液、硫酸镁溶液、氯化钙溶液、氯酸钙溶液、葡萄糖酸钙溶液、次氯酸钙溶液、高氯酸钙溶液。

21、优选地，所述金属盐溶液为醋酸锌溶液。

22、优选地，所述多肽类药物活性物质为艾塞那肽或艾塞那肽盐。

23、优选地，所述多肽类药物活性物质为索马鲁肽或索马鲁肽盐。

24、第二个方面，本发明提供了一种多肽类药物递送载药微球的制备方法，所述方法包括如下步骤：

25、(1)制备亲水温敏凝胶；

26、(2)将多肽类药物活性物质溶于上述温敏凝胶作为内水相(w1)；

27、(3)将水难溶性聚合物溶于有机溶剂中作为油相(o)；

28、(4)将内水相(w1)倒入油相(o)中，高速剪切溶液，形成w1/o初乳；

29、(5)将w1/o初乳倒入含乳化剂的外水相(w2)中，高速剪切形成w1/o/w2复乳；

30、(6)旋蒸去除有机溶剂，将上述液体离心，弃去上清液，收集到微球，即得多肽类药物递送载药微球。

31、优选地，所述步骤(4)初乳剪切速度为6000～20000r·min-1；初乳剪切时间为0.5～10min；所述步骤(5)复乳剪切速度为3000～12000r·min-1，复乳剪切时间为0.5～10min。

32、优选地，所述步骤(4)初乳剪切速度为8000～16000r·min-1，优选为12000r·min-1。

33、优选地，所述步骤(4)初乳剪切时间为1～3min，优选为3min。

34、优选地，所述步骤(5)复乳剪切速度为8000r·min-1，复乳剪切时间为1～3min，优选为2min。

35、优选地，所述多肽类药物递送载药微球的制备方法还包括制备金属盐与多肽复合物的步骤。

36、优选地，所述制备金属盐与多肽复合物步骤具体为：将金属盐溶液与多肽溶液混合均匀，低温孵育，冻干，即得金属盐溶液多肽复合物。

37、优选地，所述步骤低温孵育具体为：4℃，孵育24小时，孵育溶剂体积为5～10ml，优选为10ml。

38、本发明的有益效果在于：本发明的用于装载多肽类药物的缓释微球(ex-gel-ms和x-ex-gel-ms，“x”表示金属离子)引入亲水性温敏凝胶(例如：plga-peg-plga)与水难溶性聚合物(例如：plga)共同载药，增加了载体的亲水性，并将多肽类药物制成x-ex不溶性复合物降低药物溶解度，从而降低药物突释。ex-gel-ms和x-ex-gel-ms的平台期均比ex-ms短，平台期越短，快速释放期的起点越早，提高了药物的生物利用度。