包含作为活性成分的蕨素化合物及其衍生物的组合物，用于预防或治疗退行性脑疾病的制作方法

本发明涉及一种用于预防或治疗退行性脑疾病的组合物，该组合物含有作为活性成分的蕨素化合物及其衍生物，本发明尤其涉及一种用于预防或治疗退行性脑疾病的药物组合物和一种用于预防或减轻退行性脑疾病的食品组合物，这些药物组合物和食品组合物均包括作为活性成分的由化学式1定义的蕨素化合物或其衍生物。

背景技术：

1、本技术要求于2017年6月16日提交的韩国专利申请第10-2017-0076701号和于2017年6月21日提交的韩国专利申请第10-2017-0078655号的优先权，这两篇的全部内容通过引用并入本文。

2、痴呆是一种综合征，其中由于对神经细胞的损害和神经细胞的丧失，导致记忆、注意力、语言和认知的严重损害会在很长一段时间内恶性发展，最终导致智力和社会活动能力下降。在引起痴呆的疾病中代表性的是阿尔茨海默氏病。根据阿尔茨海默氏病的病因，它分为散发型和家族型，分别影响5％的65岁以上人群和20％的80岁以上人群(launer etal.,1999,in:iqbal et al.,(eds.)alzheimer’s disease and related disorders:etiology,pathogenesis and therapeutics,john wiley&sons,new york,ny,usa.pp.9-15)。尽管对80-90％的阿尔茨海默病病例了解甚少，但其致病机制通常是由淀粉样蛋白假说和胆碱能假说引起的。早老素(ps)1型和2型等基因突变的人在65岁之前罹患阿尔茨海默氏病的比例为100％。

3、根据淀粉样蛋白假说，阿尔茨海默氏病的症状主要由淀粉样蛋白β(以下简称“aβ”)和过度磷酸化的tau蛋白引起，淀粉样蛋白β在脑组织神经细胞外部形成老年斑，而过度磷酸化的tau蛋白则在神经细胞内部形成一对螺旋状丝状体(querfurth and laferia,2010,n engl j med,362:329-344)。aβ表示40-42个氨基酸的肽，是由app的氨基酸序列通过β-和γ-分泌酶特异性代谢而形成的。据报道，aβ分子自身聚集以引起神经毒性，突触损失和炎症(cappari et al,neurochem res,2008,33:526-532)。tau蛋白与微管结合，起到维持细胞形态和骨骼的作用。过度磷酸化的tau蛋白与微管分离，破坏微管，并形成导致神经元死亡的神经原纤维缠结(iqbal et al,acta neuropathol,2009,acta neuropathol,118(1):53-69)。

4、β分泌酶(β位点app裂解酶1)，也称为bace(β位点app裂解酶)，是在产生淀粉样β分子中起最重要作用的酶。bace有两种：bace-1和bace-2。其中，bace-1占大部分β-分泌酶活性(约90％)，因此bace-1对淀粉样β的产生负有更大责任(vassar r.,advanced drugdelivery review,2002,54:1589-1602)。因此，已经充分认识到选择性抑制bace-1活性的物质作为阿尔茨海默氏型痴呆的治疗剂是有价值的。

5、乙酰胆碱是一种神经递质，在记忆和思维能力中发挥作用，在痴呆症患者的特定大脑部位不常见(tricco et al.,2012,syst rev,28:1-31)。因此，乙酰胆碱酯酶(ache)和丁酰胆碱酯酶(bche)活性的抑制剂已被用于治疗痴呆症(alzheimer's association,alzheimer’s dement,2012,8:131-168)。

6、据报道，截至2008年，全球阿尔茨海默氏病患者约为2600万人，由于老年人口的增加，预计到2050年将增长到1亿多，但是基本治疗剂的发展进展非常缓慢。

7、市场上当前的药物中有保持恒定浓度的乙酰胆碱的乙酰胆碱酯酶抑制剂(如aricept，exelon，reminy1等)和抑制ca2+相关神经元细胞死亡的nmda受体拮抗剂(美金刚)。但是，这些药剂仅用于减轻症状的进展。因此，迫切需要开发显示出更有效的治疗效果的治疗剂。

技术实现思路

1、技术问题

2、上述技术问题导致本公开，本发明人对退行性脑病的治疗进行了深入研究，结果发现蕨类植物提取物中含有新型蕨素类化合物及其衍生物，并且这些蕨素化合物及其衍生物通过抑制体内测定的bace1、ache和bche的活性来治疗退行性脑病。

3、因此，本公开的目的是提供一种用于预防或治疗退行性脑病的药物组合物，其包含作为活性成分的由以下化学式1定义的蕨素化合物或其衍生物：

4、化学式1

5、

6、其中，

7、r1、r2、r3、r4、r5、r6和r8各自独立地为h、oh，具有1-4个碳原子的烷基或醇或烷基-o-葡萄糖；并且

8、r7选自卤素、h、oh、o-烷基、o-烯基、o-炔基、o-醇、o-羧基、o-醚、o-磺酸(-so3h)、o-环烷基、o-杂环烷基、葡萄糖和o-葡萄糖中的一种。

9、本公开的另一个目的是提供一种制备根据权利要求1所述的蕨素化合物或衍生物的方法，该方法包括以下步骤：(a)将蕨类浸入水或具有1-4个碳原子的有机溶剂中以获得提取物；(b)将步骤(a)中获得的提取物用乙酸乙酯分馏；(c)通过浓度梯度色谱法分离纯化步骤(b)中得到的乙酸乙酯分馏物。

10、本公开的另一个目的是提供一种用于预防或减轻退行性脑病的食品组合物，其包含作为有效成分的由化学式1表示的蕨素化合物或其衍生物。

11、本公开的另一个目的是提供一种用于增强认知功能的食品组合物，其包含作为有效成分的由化学式1定义的蕨素化合物或其衍生物。

12、本公开的另一个目的是提供由化学式1定义的化合物及其药学上可接受的盐在制备治疗退行性脑病种的用途

13、本公开的另一个目的是提供一种用于向有需要的受试者施用有效量的组合物的方法，其中所述组合物含有作为有效成分的由化学式1定义的化合物及其药学上可接受的盐。

14、本公开的另一个目的是提供由化学式1定义的化合物或其盐在制备用于增强认知功能的试剂中的用途。

15、本公开的另一个目的是提供一种增强认知功能的方法，该方法包括向有需要的受试者施用有效量的组合物，该组合物包含作为有效成分的由化学式1定义的化合物或其盐

16、本公开的另一个目的是提供由以下化学式2定义的新型化合物：

17、[化学式2]

18、

19、本公开的另一个目的是提供一种制备该新型化合物的方法，该方法包括以下步骤：(a)将蕨类浸泡在水或1-4个碳原子的有机溶剂中以获得提取物；(b)将步骤(a)中获得的提取物用乙酸乙酯分馏；(c)通过浓度梯度色谱法分离纯化步骤(b)中得到的乙酸乙酯分馏物。

20、本公开的另一个目的是提供一种用于预防或治疗退行性脑病的药物组合物，其包含作为有效成分的由以下化学式2定义的新化合物或其药学上可接受的盐。

21、本公开的另一个目的是提供一种用于预防或减轻退行性脑病的食品组合物，其包含作为有效成分的由化学式2定义的新型化合物。

22、本公开的另一个目的是提供一种用于增强认知功能的食品组合物，其包含作为有效成分的由化学式2定义的新型化合物。

23、本公开的另一个目的是提供由化学式2定义的化合物或其药学上可接受的盐在制备退行性脑疾病的治疗制剂中的用途。

24、本公开的另一个目的是提供治疗退行性脑疾病的方法，该方法包括向有需要的受试者施用有效量的包含由化学式2定义的化合物或其作为有效成分的药学上可接受的盐的组合物。

25、本公开的另一个目的是提供由化学式2定义的化合物或其盐在制备用于增强认知功能的试剂中的用途。

26、本公开的另一个目的是提供一种增强认知功能的方法，该方法包括向有需要的受试者施用有效量的组合物，该组合物包含作为有效成分的化学式2所定义的化合物或其盐。

27、技术方案

28、为了实现该目的，本公开的一个方面提供了一种用于预防或治疗退行性脑病的药物组合物，其包含作为有效成分的由以下化学式1定义的蕨素化合物或其衍生物，：

29、[化学式1]

30、

31、其中，

32、r1、r2、r3、r4、r5、r6和r8各自独立地为h、oh、具有1-4个碳原子的烷基或醇或烷基-o-葡萄糖；和

33、r7选自卤素、h、oh、o-烷基、o-烯基、o-炔基、o-醇、o-羧基、o-醚、o-磺酸(-so3h)、o-环烷基、o-杂环烷基、葡萄糖和o-葡萄糖中的一种。

34、本公开的另一方面提供了一种制备根据权利要求1所述的蕨素化合物或衍生物的方法，该方法包括以下步骤：(a)将蕨类浸泡在水或具有1-4个碳原子的有机溶剂中以获得提取；(b)将步骤(a)中获得的提取物用乙酸乙酯分馏；(c)通过浓度梯度色谱法分离纯化步骤(b)中得到的乙酸乙酯分馏物。

35、本公开的另一方面提供了一种用于预防或减轻退行性脑病的食品组合物，其包含作为有效成分的由化学式1定义的蕨素化合物或其衍生物：

36、<化学式1>

37、

38、其中，

39、r1、r2、r3、r4、r5、r6和r8各自独立地为h、oh、具有1-4个碳原子的烷基或醇或烷基-o-葡萄糖；和

40、r7选自卤素、h、oh、o-烷基、o-烯基、o-炔基、o-醇、o-羧基、o-醚、o-磺酸(-so3h)、o-环烷基、o-杂环烷基、葡萄糖和o-葡萄糖中的一种。

41、本公开的另一方面提供了一种用于增强认知功能的食品组合物，其包含作为有效成分的由化学式1定义的蕨素化合物或其衍生物：

42、<化学式1>

43、

44、其中，

45、r1、r2、r3、r4、r5、r6和r8各自独立地为h、oh、具有1-4个碳原子的烷基或醇或烷基-o-葡萄糖；和

46、r7选自卤素、h、oh、o-烷基、o-烯基、o-炔基、o-醇、o-羧基、o-醚、o-磺酸(-so3h)、o-环烷基、o-杂环烷基、葡萄糖和o-葡萄糖中的一种。

47、本公开的另一方面提供了由化学式1定义的化合物或其盐在制备用于治疗退行性脑病的药剂中的用途。

48、本公开的另一方面提供了用于治疗退行性脑疾病的方法，该方法包括向有需要的受试者施用有效量的组合物，所述组合物包含作为有效成分的由化学式1定义的化合物或其盐。

49、本公开的另一方面提供了由化学式1定义的化合物或其盐在制备用于增强认知功能的试剂中的用途。

50、本公开的另一方面提供了用于增强认知功能的方法，该方法包括向有需要的受试者施用有效量的组合物，所述组合物包含作为有效成分的化学式1定义的化合物或其盐。

51、本公开的另一方面提供由以下化学式2定义的新颖化合物：

52、[化学式2]

53、

54、本公开的另一方面提供了制备所述新型化合物的方法，所述方法包括以下步骤：(a)将蕨类浸入水或1-4个碳原子的有机溶剂中以获得提取物；(b)将步骤(a)中获得的提取物用乙酸乙酯分馏；(c)通过浓度梯度色谱法分离纯化步骤(b)中得到的乙酸乙酯分馏物。

55、本公开的另一方面提供了一种用于预防或治疗退行性脑病的药物组合物，其包含由作为有效成分的由以下化学式2定义的新化合物或由其药学上可接受的盐。

56、本公开的另一方面提供了一种用于预防或减轻退行性脑病的食品组合物，其包含作为有效成分的由化学式2定义的新型化合物。

57、本公开的另一方面提供了一种用于增强认知功能的食品组合物，其包含作为有效成分的由化学式2定义的新型化合物。

58、本公开的另一方面是提供由化学式2定义的化合物或其药学上可接受的盐在制备退行性脑疾病的治疗制剂中的用途。

59、本公开的另一方面提供了用于治疗退行性脑疾病的方法，该方法包括向有需要的受试者施用有效量的组合物，所述组合物包含作为有效成分的化学式2所定义的化合物或其药学上可接受的盐。

60、本公开的另一方面提供了由化学式1定义的化合物或其盐在制备用于增强认知功能的试剂中的用途。

61、本公开的另一方面提供了一种增强认知功能的方法，该方法包括向有需要的受试者施用有效量的组合物，该组合物包含作为有效成分的化学式2所定义的化合物或其盐下面，将给出本公开的详细描述。

62、本公开提供了一种用于预防或治疗退行性脑病的药物组合物，其包含作为有效成分的由以下化学式1定义的蕨素化合物或其衍生物：

63、[化学式1]

64、

65、其中，

66、r1、r2、r3、r4、r5、r6和r8各自独立地为h、oh、具有1-4个碳原子的烷基或醇或烷基-o-葡萄糖；和

67、r7选自卤素、h、oh、o-烷基、o-烯基、o-炔基、o-醇、o-羧基、o-醚、o-磺酸(-so3h)、o-环烷基、o-杂环烷基、葡萄糖和o-葡萄糖中的一种。

68、本文所用的术语“烷基”用于描述带有1-4个碳原子的直链或支链烷基的自由基或该自由基的一部分，其实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基。

69、如本文所用，术语“烯基”是指其中具有一个或多个双键的2-10个碳原子(例如，c2-c10)的直链或支链单价或二价烃。烯基的实例包括但不限于乙烯基、丙烯基、亚丙烯基、烯丙基和1，4-丁二烯基。

70、如本文所用，术语“炔基”是指其中具有一个或多个三键的2-10个碳原子(例如，c2-c10)的直链或支链的单价或二价烃。炔基的实例包括但不限于乙炔基、乙烯、1-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基和1-甲基-2-丁炔基。

71、如本文所用，术语“醇”用于描述具有1-4个碳原子的直链或支链的醇或烷氧基。自由基的实例包括甲醇、乙醇、丙醇、丁醇及其烷氧基。烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、异丙氧基和叔丁氧基。

72、如本文所用，术语“卤素”是指卤素基团中的元素，例如氟、氯、溴和碘。在本公开中，r7可优选为氯。

73、本发明的蕨素化合物或其衍生物是在蕨类中发现的倍半萜类，其特征在于它们是从蕨类提取物中纯化的。本公开内容的蕨素化合物或其衍生物的实例包括但不限于蕨素a、蕨素b、蕨素c、蕨素d、蕨素j、蕨素m、蕨素p、蕨素s、蕨素z、蕨素甙a、蕨甙a2、蕨甙b、蕨甙c、蕨甙d、蕨甙n、蕨甙p、蕨甙z和硫酸化蕨素c。

74、另外，本发明的蕨素化合物可以具有非芳香族双键和至少一个不对称中心，并且可以作为外消旋体或外消旋混合物、单一对映体、单独的非对映体、非对映体混合物或顺式异构体或反式异构体或所有异构体的形式，优选顺式或反式异构体。

75、例如，蕨素c可以是(2r，3s)-蕨素c，(2s，3s)-蕨素c，(2r，3r)-蕨素c和(2s，3r)-蕨素c的异构体之一。

76、蕨甙c可采取(2s，3r)-蕨素c或(2r，3r)-蕨素c的异构形式。

77、磺化蕨素c可以是(2r，3s)-磺化蕨素c或(2s，3s)-磺化蕨素c的形式。

78、根据本发明的蕨素化合物或其衍生物可以与天然资源分离，或者可以通过本领域已知的化学合成方法制备，用于新型化合物。

79、优选地，可以从天然植物中分离和纯化本公开的蕨素化合物或其衍生物。即，化合物或衍生物可以使用用于提取和分离物质的常规方法从整个植物或其一部分中获得。为了获得所需的提取物，茎，根或叶可以在水或合适的有机溶剂中适当地干燥和浸软。期望的提取物可以使用本领域技术人员已知的纯化方法来纯化。优选地，本发明的蕨素化合物或衍生物可以从蕨类中分离和纯化。

80、举例来说，蕨类可以是碗蕨科或凤尾蕨科的植物。所述植物的非限制性实例包括dennstaedtia scandens,histiopteris incisa,microlepia speluncae,pteridiumaquilinum var.latiusculum,pteridium revolutum,hypolepis punctata,ceratopteristhalictroides,pteris fauriei,pteris dimidiate,and pteris ensiformi。这些植物遍布世界各地，在乌来乡、台北县、大屯山和台北市尤其容易找到。

81、本发明的蕨素化合物及其衍生物可以通过包括以下步骤的方法分离和纯化：

82、(a)将蕨类植物浸泡在水或具有1-4个碳原子的有机溶剂的有机溶剂中以获得提取物；

83、(b)用乙酸乙酯或丁醇分馏步骤(a)的提取物；和

84、(c)通过浓度梯度色谱法分离并纯化乙酸乙酯分馏物或丁醇分馏物。

85、在步骤(a)中，蕨类植物可以整体使用或以干燥形式使用。可以通过将干燥的蕨类植物在研磨机中研磨来获得粉状的蕨类植物，进而提高蕨类植物提取率。对于干燥蕨类植物，可以使用在阳光下干燥，在阴凉处干燥，热风干燥，冻干和自然干燥的任何方法，优选热风干燥和冻干。

86、用于从蕨类植物中浸泡出提取液的具有1-4个碳原子的有机溶剂可以是甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、丙酮、醚，氯仿、乙酸乙酯、二氯甲烷、己烷、环己烷、二氯甲烷或石油醚。在本公开的一个实施方案中，蕨类植物浸泡在水中。

87、在步骤(b)中，将在步骤(a)中获得的提取物分馏。在这方面，分配和提取用乙酸乙酯或丁醇进行。

88、使用浓度梯度色谱分离步骤(b)中获得的乙酸乙酯分馏物或丁醇分馏物。在色谱法的上下文中，具有各种合成树脂如硅胶，活性氧化铝等装入柱中的柱色谱法和高效液相色谱法(hplc)可以单独使用或一起使用。优选地，可以将步骤(b)中获得的乙酸乙酯分馏物或丁醇分馏物装入硅胶柱中，然后从硅胶柱中洗脱各种分馏物，同时通过调节洗脱液的组成逐渐增加洗脱液的极性。在上述方法中的分馏物中，可以对活性分馏物再次进行浓度梯度硅胶色谱，其中通过调节洗脱液的组成逐渐增加洗脱液的极性。然而，化合物的提取和分离不限于上述方法。

89、在步骤(c)中，通过浓度梯度色谱法对步骤(b)中获得的乙酸乙酯分馏物或丁醇分馏物进行分离和纯化通过浓度梯度色谱法。

90、在色谱法的上下文中，各种合成树脂如硅胶，活性氧化铝等装入柱中的柱色谱法和高效液相色谱法(hplc)可以单独使用或一起使用。优选地，可以使用高效液相色谱法分离或纯化新化合物。

91、可用于分离化合物的方法是本领域众所周知的。例如，可以参考[takahashi etal,phytother.res,2004,18,573,sheridan et al,planta med.,1999,65,271,nagao etal.,mutation research,1989,215,173,murakami et al.,chem.pharm.bull,1976,24,2241,and kuraishi et al.,chem.pharm.bull,1985,33,2305]。化合物也可以通过化学合成方法合成。非天然存在的蕨素类化合物可以从天然存在的化合物转化而来(例如，参见[banerji et al,tetrahedron letters,1974,15,1369,hayashi et al.,tetrahedronletters,1991,33,2509,and mcmorris et al.,j.org.chem.,1992,57,6876])，或者可以使用本领域已知的方法新合成。

92、可用于合成蕨素类化合物，用于合成化学转化和保护基团(保护和脱保护)的方法是本领域已知的。例如，可以参考[r.larock,comprehensive organic transformations,vch publishers(1989)；t.w.greene and p.g.m.wuts,protective groups in organicsynthesis,3rd ed.,john wiley and sons(1999)；l.fieser and m.fieser,fieser andfieser's reagents for organic synthesis,john wileyand sons(1994)；andl.paquette,ed.,encyclopedia of reagents for organic synthesis,john wiley andsons(1995)及其后续版本]。

93、在本公开的一个实施方案中，将200-500g蕨类浸泡在热水中，并将得到的水热提取物加入到乙酸乙酯(ea)中并与乙酸乙酯(ea)充分混合。然后，将乙酸乙酯分馏物溶解在dmso中，并在水中稀释，然后应用于柱色谱法，得到七个分馏物。通过hplc分析分馏物，以提取新型化合物和化学式1的化合物(参见实施例1和图1至3)。分开地，将水热提取物加入到丁醇中并与丁醇充分混合。将得到的丁醇分馏物溶解在dmso中，然后在水中稀释，然后应用于柱色谱法，得到九个分馏物。通过hplc分析这些分馏物以提取本公开的化合物(参见实施例1和图1至3)。

94、退行性脑疾病随着中枢神经系统神经元退行性变化的产生而引起各种症状。在大多数情况下，由于该疾病自发病以来就缓慢发展，因此患者自出生起就已经正常生活了很长一段时间，直到出现症状。另外，退行性脑病一旦发生，将在数年或数十年中逐渐发展直至患者死亡。在大多数情况下，患者有该疾病的家族病史。

95、本公开的退行性脑疾病的实例包括但不限于帕金森氏病、亨廷顿氏病、阿尔茨海默氏病、轻度认知障碍、老年性痴呆和肌萎缩性侧索硬化、脊髓小脑萎缩、图雷特氏综合征、弗里德里希氏共济失调、马查多-约瑟夫氏疾病、路易体痴呆、肌张力障碍、进行性核上性麻痹和额颞叶痴呆。

96、预防，治疗或减轻退行性脑疾病的目的是预防，治疗或减轻疾病的症状。这些症状包括：

97、a)行为症状，例如睡眠障碍、精神错乱(包括精神波动)、攻击性和躁动；

98、b)心理症状，如幻觉、妄想、焦虑和沮丧；

99、c)运动症状，这意味着尽管运动功能保持完整，但运动能力却受损；以及

100、d)学习和认知障碍，例如，学习新信息或回忆先前学习的信息的能力受损(例如，社会记忆力受损)等。

101、可以将根据本公开内容的包含蕨素化合物或其衍生物的药物组合物单独或与药学上可接受的载体组合配制为合适的形式，并且可以进一步包含赋形剂或稀释剂。如本文所用，术语“药学上可接受的”是指属于生理上可接受的并且是无毒的，从而在向人施用与其相关的成分时不引起过敏反应，例如胃部不适、头晕和类似反应。

102、药学上可接受的载体可以用于口服或肠胃外给药。口服载体的实例包括乳糖、淀粉、纤维素衍生物、硬脂酸镁和硬脂酸。另外，在本公开中可用于肽剂的药物递送中的各种口服物质。作为肠胃外给药的载体，可以使用水、合适的油、盐溶液、葡萄糖水溶液和乙二醇。在本公开中可以另外使用稳定剂和防腐剂。抗氧化剂，例如亚硫酸氢钠、亚硫酸钠和抗坏血酸，可以合适地用作稳定剂。苯扎氯铵、对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯和氯丁醇都属于合适的防腐剂范围。除了上述成分以外，本公开的药物组合物还可包含润滑剂、保湿剂、甜味剂、调味剂、乳化剂、助悬剂等。对于其他药学上可接受的载体和制剂，可参考remington's pharmaceutical sciences,19th ed.,mack publishing company,easton,pa.,1995。

103、本公开的组合物可以以任何方式施用于包括人在内的哺乳动物。例如，该组合物可以口服或肠胃外给药。肠胃外给药的实例包括但不限于通过静脉内、肌内、动脉内、髓内、鞘内、心内、透皮、皮下、腹膜内、鼻内、肠内、外用、舌下和直肠内途径给药。

104、本公开的药物组合物可以配置成根据如上所述的给药途径来口服或肠胃外给药的制剂。

105、对于口服剂型，使用本领域已知的方法，将本发明的组合物制备成粉剂、颗粒剂、片剂、丸剂、糖衣片剂、胶囊剂、溶液剂、凝胶剂、糖浆剂、浆剂、混悬剂等。例如，可以通过将活性成分与固体赋形剂混合，然后粉碎，混合，添加合适的助剂，然后将混合物加工成粒状混合物、制成片剂或糖衣片剂，来获得口服制剂。合适的赋形剂的实例包括：糖类，例如：乳糖、右旋糖，蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、赤藓糖醇和麦芽糖醇，等等；淀粉，例如：玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素，例如：纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和羟丙基甲基纤维素；填充剂，例如，明胶、聚乙烯吡咯烷酮等。任选地、可以添加交联的聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、藻酸或藻酸钠作为崩解剂。此外，本公开的药物组合物可以进一步包含抗凝剂、润滑剂、保湿剂、调味剂、乳化剂和防腐剂。

106、对于肠胃外剂型，可以将组合物配制成注射剂、乳膏、洗剂、外用软膏、油、保湿剂，凝胶、气雾剂和鼻吸入剂。至于所有剂型，可参考药物化学领域众所周知的文件，例如remington's pharmaceutical science,19th ed.,mack publishing company,easton,pa,1995。

107、根据本发明的组合物的总有效量可以用分次治疗方案以单剂量或多剂量长期给予患者。根据疾病的严重程度，本发明的药物组合物可以包含可变量的有效成分。本公开内容的药物组合物中有效成分的总量通常为约0.01至10,000mg/kg体重/天，或者在一些实施方案中为0.1至500mg/kg体重/天。然而，可以通过考虑各种因素来适当地确定药物组合物的剂量，所述因素例如年龄、体重、健康状况、性别、疾病严重程度、饮食和需要治疗的受试者的排泄，以及给药频率和剂量。管理途径。当考虑那些因素时，本领域技术人员可以确定本公开的组合物的合适剂量。药物组合物就制剂类型，给药途径和给药方法而言不受限制，只要其具有根据本发明的效力即可。

108、根据本公开，可以以食品组合物的形式提供由化学式1定义的蕨素化合物或其衍生物，所述食品组合物用于预防或减轻退行性脑病或用于增强认知功能。

109、蕨素化合物和退行性脑疾病如上所述。

110、如本文所使用的，术语“认知”是指大脑接受和存储信息并检索和利用所存储的信息的所有过程，包括在日常生活中进行的思考、说话、记住、判断和行动过程。术语“认知功能”是指大脑获取和存储信息以及检索和使用存储的信息的能力，包括记忆，思维，判断和执行能力。这些认知功能可以大致分为注意力、语言、时间和空间，记忆和执行(或管理)功能。本公开的认知功能包括学习，记忆或专注。

111、根据本公开内容的包含蕨素化合物或其衍生物的食品组合物可以是任何形式，包括功能性食物、营养补品、保健食品和食品添加剂。可以根据本领域已知的常规方法将食品组合物制备成各种形式。

112、例如，本公开的食品组合物可以被制成茶、果汁或饮料，或者制成颗粒、胶囊或粉末作为保健食品。另外，本公开的食品组合物可以与已知具有降低体脂、降低胆固醇水平或高血压的作用的物质或活性成分混合。

113、对于功能性食品，本公开内容的食品组合物也可以添加至饮料(包括酒精饮料)、水果及其加工产品(例如罐装水果、瓶装水果、果酱、果酱)、鱼、肉及其加工产品(例如火腿、香肠、咸牛肉)、糖果和面条(例如乌冬面、荞麦面、拉面、意大利面，通心粉)、果汁、饮料、饼干、韩国太妃糖、乳制品(例如黄油、奶酪)、蔬菜油、人造黄油、植物蛋白、干馏食品、冷冻食品、调味料(例如大豆酱、酱油、调味酱)等。

114、根据本公开的食品组合物优选包含最终生产的食物的总重量的0.01％-50％，但不限于此。为了用作食品添加剂，可以将本公开的食品组合物制备成粉末或浓缩液体的形式。

115、另外，像普通饮料一样，本发明的食品组合物可以包含各种风味，天然碳水化合物等作为附加成分。碳水化合物是单糖，例如葡萄糖、果糖等；二糖，如麦芽糖和蔗糖；多糖，如糊精和环糊精；糖醇，例如木糖醇，山梨糖醇，赤藓糖醇等。可以使用甜味剂，包括天然甜味剂，例如，可以使用牛磺酸马丁，甜菊提取物等，以及糖精，阿斯巴甜等合成甜味剂。天然碳水化合物的比例通常为每100ml，本发明组合物约0.01-0.04g，优选约0.02-0.03g，但不限于此。

116、诸如赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、美味酸、香料等的术语的定义在本领域已知的文献中进行了描述，并且包括具有相同或相似功能的那些术语(korean pharmacopoeia,explanation,moonsung pub.,korea college of pharmacy conference,5th ed.,p 33-48,1989)。

117、另外，本公开提供了由化学式1定义的化合物或其药学上可接受的盐在制备退行性脑疾病的治疗剂中的用途。

118、此外，本公开提供了一种用于治疗受试者的退行性脑疾病的方法，该方法包括向有需要的受试者施用有效量的组合物，该组合物包含作为有效成分的由化学式1定义的化合物或其药学上可接受的盐。

119、而且，本公开提供了由化学式1定义的化合物或其药学上可接受的盐在制备认知功能增强剂中的用途。

120、另外，本公开提供了一种用于增强受试者的认知功能的方法，该方法包括向有需要的受试者施用有效量的组合物，该组合物包含作为有效成分的由化学式1定义的化合物或其药学上可接受的盐的组合物，

121、如本文所用，术语“有效量”是指当施用于受试者时允许改善认知功能或减轻、治疗、预防、检测或诊断退行性脑病的量。术语“受试者”是指动物，优选地，为哺乳动物，尤其是包括人类的动物，并且可以是源自动物的细胞、组织和器官等。受试者可以是需要这种效果的患者。

122、如本文所用，术语“治疗”或“治”全面地指减轻与退行性脑疾病或与退行性脑疾病相关的疾病或与退行性脑疾病或与退行性脑疾病相关的疾病的症状，并且旨在涵盖实质上的治愈，预防或减轻疾病的状况。该术语包括减轻、治愈或预防由退行性脑疾病或与退行性脑疾病相关的疾病引起的一种或大多数症状，但不限于此。

123、如本文所用，与认知功能相关的术语“增强”全面地指增强认知功能，并且旨在涵盖认知功能相关能力的改善，优选地学习，记忆或专注。该术语的含义包括减轻，治愈或逆转诸如退行性脑病引起的虚弱和认知功能下降的症状，但不限于此。

124、另外，本公开提供了由以下化学式2定义的新型化合物：

125、[化学式2]

126、

127、化学式2所示的新型化合物首先由本发明人鉴定，这在说明书的实施例部分中有很好的解释。

128、新型化合物是3-[2-(1-乙酰基环丙基)-1-丙烯基]-5-甲基-2-环戊烯-1-酮(3-[2-(1-乙酰基环丙基)-1-丙烯基]-5-甲基-2-环戊烯-1-酮)的分子量为218.30。

129、该新型化合物可以具有非芳族双键和至少一个不对称中心，并且可以以外消旋体或外消旋混合物、单一对映异构体、单个非对映异构体、非对映异构体混合物或顺式或反式异构体或所有异构体的形式存在。所有这些异构体都在本公开中考虑。

130、在本公开内容中还考虑了由化学式2所定义的新型化合物的水合物或其衍生物，例如具有缀合至其侧链的化合物例如葡萄糖的糖苷。

131、根据本发明的新型化合物可以与自然资源分离，或者可以通过本领域已知的化学合成方法制备用于新型化合物。

132、优选地，可以从天然植物中分离和纯化本公开的新型化合物。即，可以使用用于提取和分离物质的常规方法从整个植物或其部分中获得该化合物。为了获得所需的提取物，茎，根或叶可以在水或合适的有机溶剂中适当地干燥和浸软。期望的提取物可以使用本领域技术人员已知的纯化方法来纯化。优选地，可以从蕨类中分离和纯化本发明的新型化合物。

133、举例来说，蕨类可以是碗蕨科或凤尾蕨科的植物。所述植物的非限制性实例包括dennstaedtia scandens、histiopteris incisa、microlepia speluncae、pteridiumaquilinum var.latiusculum、pteridium revolutum、hypolepis punctata、ceratopteristhalictroides,pteris fauriei、pteris dimidiate和pteris ensiformi。这些植物遍布世界各地，在乌来乡、台北县、大屯山和台北市尤其容易找到。

134、本公开的新颖化合物可以通过包括以下步骤的方法分离和纯化：

135、(a)将蕨类植物浸泡在水或具有1-4个碳原子的有机溶剂的有机溶剂中以获得提取物；

136、(b)将步骤(a)的提取物用乙酸乙酯分馏；以及

137、(c)通过浓度梯度色谱法分离和纯化乙酸乙酯分馏物。

138、在步骤(a)中，蕨类植物可以整体使用或以干燥形式使用。可以通过将干燥的蕨类植物在研磨机中研磨来获得粉状的蕨类植物，进而提高蕨类植物提取率。对于干燥蕨类植物，可以使用在阳光下干燥，在阴凉处干燥，热风干燥，冻干和自然干燥的任何方法，优选热风干燥和冻干。

139、用于从蕨类植物中浸泡出提取液的具有1-4个碳原子的有机溶剂可以是甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、丙酮、醚、氯仿、乙酸乙酯、二氯甲烷、己烷、环己烷、二氯甲烷或石油醚。在本公开的一个实施方案中，蕨类植物浸泡在水中。

140、在步骤(b)中，将在步骤(a)中获得的提取物分馏。在这方面，分配和提取用乙酸乙酯进行。使用浓度梯度色谱分离步骤(b)中获得的乙酸乙酯分馏物。在色谱法的上下文中，各种合成树脂如硅胶，活性氧化铝等装入柱中的柱色谱法和高效液相色谱法(hplc)可以单独使用或一起使用。优选地，可以将步骤(b)中获得的乙酸乙酯分馏物或丁醇分馏物转入硅胶柱中，然后从硅胶柱中洗脱各种分馏物，同时通过调节洗脱液的组成逐渐增加洗脱液的极性。在上述方法中的分馏物中，可以对活性分馏物再次进行浓度梯度硅胶色谱，其中通过调节洗脱液的组成逐渐增加洗脱液的极性。然而，化合物的提取和分离不限于上述方法。

141、在步骤(c)中，通过浓度梯度色谱法分离和纯化在步骤(b)中获得的乙酸乙酯分馏物。

142、在色谱法的上下文中，各种合成树脂如硅胶，活性氧化铝等装入柱中的柱色谱法和高效液相色谱法(hplc)可以单独使用或一起使用。优选地，可以使用高效液相色谱法分离或纯化新型化合物。

143、提供根据本公开的由化学式2定义的新型化合物，用于预防或减轻退行性脑疾病或用于增强认知功能。

144、另外，本公开提供了由化学式2定义的新型化合物在制备退行性脑疾病的治疗剂中的用途。

145、此外，本公开提供了用于治疗退行性脑疾病的方法，该方法包括向需要其的受试者施用有效量的组合物，所述组合物包含作为有效成分的由化学式2定义的化合物或其药学上可接受的盐。

146、而且，本公开提供了由化学式2定义的化合物或其中药学上可接受的盐在制备认知功能增强剂中的用途。

147、另外，本公开提供了增强认知功能的方法，该方法包括向有需要的受试者施用有效量的的组合物，该组合物包含作为有效成分的由化学式2定义的化合物或其药学上可接受的盐。

148、由化学式2定义的新型化合物，退行性脑疾病和认知功能，如上所述。

149、如本文所用，术语“有效量”是指当施用于受试者时允许改善认知功能或减轻、治疗，预防，检测或诊断退行性脑病的量。术语“受试者”是指动物，优选地，哺乳动物，尤其是包括人类的动物，并且可以是源自动物的细胞、组织和器官等。受试者可以是需要这种效果的患者。

150、如本文所用，术语“治疗”全面地指减轻退行性脑疾病或退行性脑疾病或退行性脑疾病或退行性脑疾病的症状，并且旨在涵盖实质上治愈、预防或减少该疾病的状况。该术语包括减轻、治愈或预防由退行性脑疾病或与退行性脑疾病相关的疾病引起的一种或大多数症状，但不限于此。

151、如本文所用，与认知功能相关的术语“增强”全面地指认知功能的改善，并且旨在涵盖认知功能相关能力的改善，优选地学习，记忆或专注。该术语的含义包括减轻，治愈或逆转诸如退行性脑病引起的虚弱和认知功能下降的症状，但不限于此。

152、在本公开的一个实施方案中，将正常的nih3t3细胞和癌性b16f10细胞分别接种到96孔板中，并在化学式2的化合物存在下孵育。mtt处理后，使用酶标仪在550nm处读取吸光度。根据测量结果，计算ld50值。结果，化学式2所示的化合物被鉴定为对正常细胞无毒，但对癌细胞有轻微毒性。

153、在另一个实施方案中，检查了化学式2所示的化合物对bace1活性的影响。在这方面，将该化合物应用于bace1酶，并借助于bace1试剂盒测量ic 50值。观察到每种化合物以剂量依赖性方式抑制bace1的活性(参见表3和图7)。

154、在本公开的另一个实施方案中，通过用化合物处理乙酰胆碱酯酶(ache)和丁酰胆碱酯酶(bche)并测量ache和bche的活性以确定ic50值来检查化学式2所示的化合物对胆碱酯酶活性的影响。鉴定出该化合物抑制ache和bche的活性(参见表4)。

155、有利效果

156、因此，本公开提供了一种用于预防，减轻或治疗退行性脑病的包含蕨素化合物及其衍生物的组合物。通过本发明的方法，从蕨类或其衍生物中提取的蕨素类化合物可以有利地用于提供预防或治疗退行性脑病的治疗剂或减轻退行性脑病或增强认知功能的功能性食品。