一种治疗肝纤维化的药物及制备方法

本发明涉及肝纤维化，特别涉及一种治疗肝纤维化的药物及制备方法。

背景技术：

1、肝纤维化(hf)是指由化学毒物性损伤、慢性肝炎病毒感染、自身免疫性肝病、酗酒等因素引起的肝内结缔组织非正常增生为主要特征的病理生理过程，当肝纤维化进一步发展时，会引起肝脏的结构紊乱，肝细胞结节样再生，形成假小叶结构，即肝硬化，会严重危害患者的健康与生活。

2、关于肝纤维化，现有技术如文献：肝纤维化诊断及治疗共识(2019年).中华医学会肝病学分会.中华肝脏病杂志.2019；27(12):907-921.肝脏炎症坏死和纤维化程度的诊断与治疗.临床肝胆病杂志.2016；32(5)：904-910.中指出肝纤维化(hepatic brosis)或肝硬化(cirrhosis)在国际疾病分类-11(international classification of diseases,icd-11)为db93.0。肝纤维化是指肝脏细胞外基质(即胶原、糖蛋白和蛋白多糖等)的弥漫性过度沉积与异常分布，是肝脏对慢性损伤的病理性修复反应，是各种慢性肝病向肝硬化发展过程中的关键步骤和影响慢性肝病预后的重要环节。肝纤维化进步发展可引起肝小叶结构系乱，肝细胞结节性再生,形成假小叶结构即肝硬化,临床上出现肝功能减退和门静脉高压症表现。肝纤维化组织学上是可逆的,肝硬化逆转较为困难，但仍有少部分可逆转。

3、现有技术如专利号为：201310140809.x的一种预知子籽提取物在治疗原发性肝癌药物中的应用，所述的预知子籽提取物为预知子籽的乙醇提取物，所述的应用是以所述的预知子籽提取物作为唯一活性成分用于制备治疗原发性肝癌的药物制剂。而肝癌与肝纤维化不同，肝癌是一种发生在肝脏的恶性肿瘤，而肝纤维化则是一种慢性肝脏疾病，其特征是肝脏内纤维组织增生和沉积。肝癌可以由多种因素引起，包括病毒性肝炎、肝硬化、酗酒、遗传因素等。而肝纤维化则主要是由于慢性肝炎、酗酒、脂肪肝等疾病导致肝脏受损，进而引发纤维组织增生。肝癌的治疗方法包括手术切除、放疗、化疗等。而肝纤维化的治疗则主要是针对原发病因进行治疗，如控制炎症、戒酒、减肥等，同时使用抗纤维化药物来缓解病情进展。总之，肝癌和肝纤维化是两种不同的肝脏疾病，它们在定义、病因、症状、诊断和治疗等方面存在差异。其中关于肝癌的相关内容见原发性肝癌诊疗指南(2022年版)，具体见链接如下：

4、http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7659/202201/a01ceb75c62b486fa459e36ba0fdfdb c/files/e8b02c99ab2d4ebea07a4c636eace9c9.pdf；可知关于肝癌与肝纤维化之间的治疗药物之间并不存在联系。

5、预知子种子为该植物成熟后的种子，该部分中含脂肪油约为17％～18％，其中主要含油酸甘油酯、亚麻酸甘油酯等；预知子药材采用的为木通科植物木通[akebia quinata(thunb.decne.、三叶木通akebia trifoliata(thunb.)koidz.或白木通[akebiatrifoliata(thunb.koidz.var.australis(diels)rehd.]的近成熟果实：主要含糖及鞣质、皂苷等成分。相关文献见：高亚玲,张静,高秀玲等.预知子的化学成分、药理作用与临床应用研究[j].河北化工,2011,34(05):35-37+52.可知，预知子籽即预知子种子并不等同于预知子药用部位，而且预知子不同部位的主要成分存在显著差别。

技术实现思路

1、发明的目的在于提供一种治疗肝纤维化的药物及制备方法，解决了现有技术中如何治疗肝纤维化的问题。

2、据《日华子本草》记载：预知子性味甘、寒，归肝、脾经，具有舒肝理气，活血止痛，除烦利尿的功效；是一种健脾理气，化瘀软坚，清热解毒的药物。

3、肝脏损伤，转化生长因子(tgf-β1)激活诱导造血干细胞(hsc)激活并形成肝纤维细胞，分泌大量细胞外基质(ecm)，肝脏降解不足，ecm堆积，形成肝纤维化；转化生长因子(tgf-β1)的生成与表达会促进hsc增殖；肝脏损伤，炎性细胞浸润，大量强促炎因子(tnf-α、il-6、tgf-1)加剧炎症，会加速肝纤维化的发展；而四氯化碳(ccl4)在肝脏氧化过程中会产生大量的自由基，使细胞膜脂质过氧化而出现损伤或坏死，导致肝纤维化。肝纤维化过程中常伴有肝细胞透明质酸酶(ha)、层粘连蛋白(ln)、血清ⅲ型前胶原(pc-ⅲ)、ⅳ型胶原(ⅳ-c)水平明显升高，检测血清中这四个成分可准确、灵敏地反映肝内纤维生成的情况，也是临床诊断肝纤维化的敏感指标。

4、本发明是这样实现的，一种治疗肝纤维化的药物，所述药物为预知子水提取物。

5、本发明中的预知子为预知子药材，预知子药材采用的为木通科植物木通[akebiaquinata(thunb.decne.、三叶木通akebia trifoliata(thunb.)koidz.或白木通[akebiatrifoliata(thunb.koidz.var.australis(diels)rehd.]的近成熟果实：主要含糖及鞣质、皂苷等成分。而预知子籽即预知子种子，并不等同于预知子药用部位，而且预知子不同部位的主要成分存在显著差别。

6、本发明中的预知子为预知子药材，提取预知子药材中的有效成分采用的水提法，在实验过程中发现预知子药材的水提取物对于治疗肝纤维化有一定的效果，通过实验证明预知子水提取物可有效降低肝纤维化模型小鼠血清中强促炎因子的水平含量，同时也会增加血清中甘油三酯(tg)的含量，达到抗肝纤维化的作用。而且水提物极性大，更容易被人体所代谢吸收，肝脏作为人体的主要代谢器官，针对肝脏疾病的治疗，更应注意减小服用药物本身对肝脏代谢功能的负担，本发明制备的到的药物对于肝纤维化的治疗负担小。实验证明预知子还可提高肝纤维化小鼠体内有益菌的丰度，降低有害菌的丰度，为肝纤维化小鼠提供了保护作用。

7、预知子在裸鼠体内发挥了抗肝纤维化效应，这可能与其肠道微生物的代谢有关。本发明证实了预知子确有治疗肝纤维化的能力以及改善肠道菌群结构的作用，如增加益生菌、减少有害菌，这也为现代化的科学论证提供了新的策略。

8、本发明还提供一种治疗肝纤维化的药物的制备方法，制备方法为将预知子粉末浸泡后，加入80℃-100℃水，2h-5h后过滤药渣，得到滤液a；对于药渣加入80℃-100℃水，1h-2.5h后过滤药渣，得滤液b，合并滤液a和滤液b，得到权利要求1所述的一种治疗肝纤维化的药物。

9、本发明的进一步技术方案是：将预知子粉末浸泡后加入80-100℃水浸提2-5h，过滤药渣，得到滤液a；对于药渣继续加80-100℃水浸提1-2.5h，得到滤液b；合并滤液a和b，浓缩或者冻干得到所述的一种治疗肝纤维化的药物。本发明采用超纯水对预知子粉末进行浸提，得到预知子提取物；通过建立肝纤维化模型，考察预知子提取物对小鼠肝纤维化的抑制作用，发现预知子提取物对ccl4诱导的肝纤维化小鼠有较好的保护作用。

10、预知子水提物的冻干粉更绿色、高效且生物安全性高；本发明中预知子水提物的浓缩药物或者冻干粉可明显改善肝纤维化，原因可能是肝脏在解剖学上同属于消化系统，肝与肠道联系紧密，肠道微生物与机体形成互利共生的稳态环境对于肝脏的健康有重要意义；由于肠道屏障受损导致的肠道菌群改变可导致慢性炎症，并影响肝脏疾病的进展，从而通过肠-肝轴促进hcc发生发展；肝脏在受外来刺激时氧化过程中会产生大量的自由基，使细胞膜脂质过度氧化而出现损坏或者坏死，加重肝纤维化的进程。而本发明基于肠道菌群的研究及阻断肝脏的氧化应激过程中炎症因子的释放来说明预知子有抑制纤维化的作用。

11、本发明中的预知子为预知子药材，提取预知子药材中的有效成分采用的水提法，因为水提物所含有的成分极性大，更容易被人体所代谢吸收，肝脏作为人体的主要代谢器官，针对肝脏疾病的治疗，更应注意减小服用药物本身对肝脏代谢功能的负担，本发明制备得到的药物对于肝纤维化的治疗较醇提物的负担更小。实验证明预知子还可提高肝纤维化小鼠体内有益菌的丰度，降低有害菌的丰度，为肝纤维化小鼠提供了保护作用。

12、在实验过程中发现预知子药材的水提取物对于治疗肝纤维化有一定的效果，通过实验证明预知子提取物可有效降低肝纤维化模型小鼠血清中tnf-α(肿瘤坏死因子-α)、il-6(白细胞介素-6)、tgf-1(转化生长因子-β1)、alt(谷丙转氨酶)和ast(谷草转氨酶、t-bil(总胆红素)的水平含量，同时也会增加血清中甘油三酯(tg)的含量，达到抗肝纤维化的作用。实验证明预知子还可提高肝纤维化小鼠肠道菌群物种多样性和丰度，增加疣微菌门(verrucomicrobiota)、阿克曼氏菌属(akkermansia)、乳杆菌属(lactobacillus)等菌群的丰度，并且降低蓝细菌门(cyanobacteria)、变形菌门(proteobacteria)等菌群的丰度。因此为肝纤维化小鼠提供了保护作用。

13、本发明的进一步技术方案是：所述预知子粉末的质量(g)与水的体积(ml)比为1：(8-12)。

14、本发明的进一步技术方案是：所述预知子粉末浸泡时间为10-12小时。

15、本发明的进一步技术方案是：所述水采用超纯水。

16、本发明的有益效果：本发明中预知子水提物的浓缩药物或者冻干粉可明显改善肝纤维化，原因可能是肝脏在解剖学上同属于消化系统，肝与肠道联系紧密，肠道微生物与机体形成互利共生的稳态环境对于肝脏的健康有重要意义；由于肠道屏障受损导致的肠道菌群改变可导致慢性炎症，并影响肝脏疾病的进展，从而通过肠-肝轴促进hcc发生发展；肝脏在受外来刺激时氧化过程中会产生大量的自由基，使细胞膜脂质过度氧化而出现损坏或者坏死，加重肝纤维化的进程。而本发明基于肠道菌群的研究及阻断肝脏的氧化应激过程中炎症因子的释放来说明预知子有抑制纤维化的作用。

17、本发明中的预知子为预知子药材，提取预知子药材中的有效成分采用的水提法，在实验过程中发现预知子药材的水提取物对于治疗肝纤维化有一定的效果，通过实验证明预知子水提取物可有效降低肝纤维化模型小鼠血清中tnf-α(肿瘤坏死因子-α)、il-6(白细胞介素-6)、tgf-1(转化生长因子-β1)、alt(谷丙转氨酶)和ast(谷草转氨酶、t-bil(总胆红素)的水平含量，同时也会增加血清中甘油三酯(tg)的含量，达到抗肝纤维化的作用。实验证明预知子还可提高肝纤维化小鼠肠道菌群物种多样性和丰度，增加疣微菌门(verrucomicrobiota)、阿克曼氏菌属(akkermansia)、乳杆菌属(lactobacillus)等菌群的丰度，并且降低蓝细菌门(cyanobacteria)、变形菌门(proteobacteria)等菌群的丰度。因此为肝纤维化小鼠提供了保护作用。而且水提物极性大，更容易被人体所代谢吸收，肝脏作为人体的主要代谢器官，针对肝脏疾病的治疗，更应注意减小服用药物本身对肝脏代谢功能的负担，本发明制备的到的药物对于肝纤维化的治疗负担小。实验证明预知子还可提高肝纤维化小鼠体内有益菌的丰度，降低有害菌的丰度，为肝纤维化小鼠提供了保护作用。