MCP-1重组蛋白在制备治疗红内期疟原虫感染疾病药物中的应用

本发明属于疟疾治疗，涉及mcp-1重组蛋白在制备治疗红内期疟原虫感染疾病药物中的应用。

背景技术：

1、疟疾是一种由疟原虫引起的传染病，其与结核、艾滋病并称世界三大传染病。据统计，2021年全球84个疟疾流行国家共发生了2.47亿例疟疾病例，死亡61.9万，全球40％的人口生命安全受到威胁。为此，科学工作者们大力开发能够有效对抗疟原虫的治疗方法。

2、疟原虫在人体内的感染时期分为肝期和红内期，其中红内期是引起患者发病并出现死亡的关键时期，针对红内期研发的治疗药物对于控制患者的发病率及死亡率具有重要意义。然而，疟原虫耐药情况逐年严峻，甚至对青蒿素及其衍生物等临床一线药物耐药的虫株也开始在疟疾流行区出现并蔓延。因此，开发新的抗疟原虫治疗手段迫在眉睫。

3、免疫治疗作为新型治疗手段，其在肿瘤等临床疾病治疗中发挥越来越重要作用。同样，针对疟疾感染的免疫治疗也日益受到密切关注。目前已知在红内期疟原虫感染进程中，宿主主要通过cd4+th1细胞与nk、nkt细胞分泌ifn-γ发挥细胞免疫效应，ifn-γ可促进巨噬细胞对感染疟原虫的红细胞(parasitized red blood cells，prbcs)进行杀伤。另外，宿主还可通过cd4+生发中心滤泡辅助性t细胞(germinal center t follicular helper，gc-tfh)促进生发中心b细胞(germinal center b cells，gc b)分泌特异性抗体，进而发挥对疟原虫的体液免疫效应。然而，疟原虫感染往往通过其免疫逃避和抑制机制导致宿主难以产生上述高效免疫应答。因此深入挖掘新型免疫治疗手段，进而通过增强宿主抗红内期疟原虫免疫应答，提高宿主免疫保护，这对于抗疟疾感染的临床治疗具有重要意义，也可为疟疾红内期免疫逃避和抑制机制的发现提供有意义的借鉴。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供mcp-1重组蛋白在制备治疗红内期疟原虫感染疾病药物中的应用。该mcp-1重组蛋白来源于免疫系统中天然存在的一种细胞因子，即单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1，mcp-1)，后者主要由单核-巨噬细胞分泌，广泛参与宿主应对感染、炎症和肿瘤等免疫机制；而mcp-1重组蛋白是一种由同源重组工程所生产的人工蛋白质，可发挥与mcp-1相同的生理功能，且易于购买获得，可以作为红内期疟原虫感染的免疫治疗手段。

2、为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、1.mcp-1重组蛋白在制备治疗红内期疟原虫感染疾病药物中的应用，所述mcp-1重组蛋白的氨基酸序列为qpdavnapltccysftskmipmsrlesykritssrcpkeavvfvtklkrevcadpkkewvqtyiknldrnqmrsepttlfktasalrssaplnvkltrkseanasttfstttsstsvgvtsvtvn。

4、优选的，所述mcp-1重组蛋白在使用前经过溶解和稀释处理，所述溶解和稀释的具体步骤如下：采用无菌超纯水对所述mcp-1重组蛋白进行溶解，形成浓度为1μg/μl的mcp-1重组蛋白母液；对0.1％的bsa溶液进行细菌过滤处理获得无菌bsa溶液；将所述mcp-1重组蛋白母液置于所述无菌bsa溶液中形成浓度50ng/μl的mcp-1重组蛋白稀释液，然后将所述稀释液储存于-80℃；

5、所述无菌bsa溶液的溶剂为1×pbs。

6、优选的，所述mcp-1重组蛋白的给药方式为静脉注射。

7、优选的，所述疟原虫包括约氏疟原虫。

8、本发明的有益效果在于：本发明提供了mcp-1重组蛋白在制备治疗红内期疟原虫感染疾病药物中的应用。通过静脉注射mcp-1重组蛋白能够显著抑制红内期疟原虫体内增殖。且mcp-1重组蛋白静脉注射治疗可增强细胞免疫应答中疟原虫特异性th1细胞与nk细胞分泌ifn-γ，而对体液免疫应答中gc-tfh细胞无明显影响，提示mcp-1重组蛋白可能通过th1与nk细胞增强宿主抗红内期疟原虫免疫保护。因此，本发明提供的mcp-1重组蛋白可作为免疫治疗手段，对于抗疟疾感染的治疗具有潜在临床应用价值。

9、本发明的其他优点、目标和特征在某种程度上将在随后的说明书中进行阐述，并且在某种程度上，基于对下文的考察研究对本领域技术人员而言将是显而易见的，或者可以从本发明的实践中得到教导。本发明的目标和其他优点可以通过下面的说明书来实现和获得。

技术特征：

1.mcp-1重组蛋白在制备治疗红内期疟原虫感染疾病药物中的应用，其特征在于：所述mcp-1重组蛋白的氨基酸序列为qpdavnapltccysftskmipmsrlesykritssrcpkeavvfvtklkrevcadpkkewvq tyiknldrnqmrsepttlfktasalrssaplnvkltrkseanasttfstttsstsvgvtsvtvn。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述mcp-1重组蛋白在使用前经过溶解和稀释处理，所述溶解和稀释的具体步骤如下：采用无菌超纯水对所述mcp-1重组蛋白进行溶解，形成浓度为1μg/μl的mcp-1重组蛋白母液；对0.1％的bsa溶液进行细菌过滤处理获得无菌bsa溶液；将所述mcp-1重组蛋白母液置于所述无菌bsa溶液中形成浓度50ng/μl的mcp-1重组蛋白稀释液，然后将所述稀释液储存于-80℃；

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述mcp-1重组蛋白的给药方式为静脉注射。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述疟原虫包括约氏疟原虫。

技术总结
本发明涉及MCP‑1重组蛋白在制备治疗红内期疟原虫感染疾病药物中的应用，属于疟疾治疗技术领域。本发明以鼠疟感染模型为平台，发现在红内期疟原虫感染后，宿主血清MCP‑1浓度显著升高。腹腔注射MCP‑1中和抗体可促进红内期疟原虫在宿主体内增殖，静脉注射MCP‑1重组蛋白则抑制红内期疟原虫体内增殖。进一步研究发现，MCP‑1重组蛋白静脉注射治疗可增强细胞免疫应答中疟原虫特异性Th1细胞与NK细胞分泌IFN‑γ，而对体液免疫应答中GC‑Tfh细胞无明显影响，提示其可能通过Th1与NK细胞增强宿主抗红内期疟原虫免疫保护。因此，MCP‑1重组蛋白可作为免疫治疗手段，对抗疟疾感染的治疗具有潜在临床应用价值。

技术研发人员：刘太平,徐文岳,高源利
受保护的技术使用者：中国人民解放军陆军军医大学
技术研发日：
技术公布日：2024/3/27