中药组方及其应用的制作方法

本发明涉及中医药领域，特别涉及中药组方及其应用。

背景技术：

1、脏器纤维化是由多种急、慢性病变引起的器官组织内纤维结缔组织增多和实质细胞减少的病理变化。肝、肾、心等实质脏器纤维化导致的脏器功能衰竭是患者致残、死亡的主要原因。

2、肝脏纤维化是各种慢性肝脏疾病进展过程中的重要病理阶段，是肝脏对各种慢性损伤后持续进行伤口修复、愈合反应的结果，是慢性肝病共有的病理改变，持续存在的肝损伤导致肝脏结构异常，肝实质被瘢痕组织取代，形成肝硬化，甚至发展成为肝癌、肝衰竭。肝星形细胞的活化是肝脏纤维化发生发展的核心环节，肝脏在受到持续的损伤后，肝星形细胞被激活并转化成为肌成纤维样细胞，同时分泌和释放大量的促纤维化细胞因子，如转化生长因子β1、toll样受体等，这些细胞因子进一步刺激了肝星形细胞的激活和增殖，合成并分泌大量ecm(extracellular matrix，ecm)，ecm的主要成分是胶原蛋白，纤维化发生时过度沉积的ecm中以ⅰ型胶原蛋白、iii型胶原蛋白为主。ecm的产生远远大于降解并在窦间隙沉积，导致肝窦内皮窗口消失，形成肝窦毛细血管化，肝细胞与血流之间的营养物质交换不能正常进行，肝细胞凋亡，肝小叶内炎性坏死，继而发生肝纤维化。以tgfb1、col1a1为代表的促纤维化基因介导肝脏纤维化的发生。

3、肾脏纤维化的本质是肾组织损伤后的“疤痕化”修复，以过量ecm在肾间质积聚、肾脏组织结构破坏及功能丧失为特征，是多种慢性肾脏疾病最终导致肾功能衰竭的主要病理改变和共同途径。纤维化微环境中的促纤维化细胞因子使肾脏中多种类型的细胞(如肾间质成纤维细胞、肾小管上皮细胞等)转化为肌成纤维细胞并促进其增殖。转化生长因子β1是典型的促进纤维化的关键细胞因子，在肌成纤维细胞活化和增殖中起着重要作用，同时转化生长因子β1还在转录水平上促进ⅰ型胶原蛋白的合成，进而促进ecm的产生，导致ecm大量沉积在肾小管间或者肾小管与毛细血管间，使肾小管与管周毛细血管距离增大，阻碍肾小管从毛细血管中获取营养物质和氧，加重肾小管的损伤。肾小管和毛细血管内皮细胞的损伤与肾脏纤维化相互促进，形成恶性循环，最终导致肾脏正常结构的破坏。以tgfb1、col1a1为代表的促纤维化基因介导肾脏纤维化的发生。

4、心肌纤维化是心肌成纤维细胞异常增殖并分泌大量胶原蛋白，病理性的ecm积聚，引起心肌胶原过量聚集且胶原比例失调，导致心肌僵硬，心肌舒张或者收缩功能下降，最终引起心力衰竭。心肌纤维化是失代偿性心肌肥厚和心力衰竭的重要标志，参与高血压、肥厚性心肌病、心力衰竭和心肌梗塞引起的心肌重构。转化生长因子β1是参与调节成纤维细胞的增殖、分化、迁移和ecm生成的致纤维化细胞因子。转化生长因子β1可作用于心肌中成纤维细胞，使之分化为心肌成纤维细胞，后者大量分泌胶原蛋白colⅰ、col iii等沉积于心肌间质，使心肌中胶原比例失调。当心肌胶原比例发生失调时，心室壁顺应性下降僵硬度增加，心室舒张期充盈受限，最终导致心力衰竭，这也是心肌纤维化主要病理基础。以tgfb1、col1a1为代表的促纤维化基因介导心肌纤维化的发生。

5、脏器纤维化不仅严重影响患者的生存质量和预后水平，同时加重了社会经济负担，是不可忽视的公共卫生问题。目前，西医学治疗脏器纤维化的治疗主要是针对原发病病因治疗和抗炎、保肝、益肾、强心治疗，尚无明确可用于临床的治疗脏器纤维化的化学或生物药物。研究表明，以tgfb1、col1a1为代表的促纤维化基因介导和参与多种脏器纤维化的发生过程，在肝脏纤维化、肾脏纤维化和心肌纤维化中显著上调。因此，开发具有抑制促纤维化因子的药物，对于多种脏器纤维化的治疗和临床应用具有重要意义。

6、现有中药抗脏器纤维化的研究方剂虽较多，但方剂作用研究机制阐述不够清晰，且研究往往针对于某单一脏器纤维化、针对于某单味药，存在一定局限性，整体研究不够系统与深入。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明提供了中药组方及其应用，新发现的中药组方提取物抑制促纤维化因子tgfb1、col1a1的基因表达；新发现的中药组方提取物具有潜在抗多脏器纤维化(肝脏纤维化、肾脏纤维化、心肌纤维化)的功效。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

3、本发明提供了中药组合物，包括苏木、椿皮、红花龙胆、焦栀子、橘核和蜂胶。

4、在本发明的一些具体实施方案中，上述中药组合物，以质量份计，包括：

5、苏木3～9份；

6、椿皮6～9份；

7、红花龙胆9～15份；

8、焦栀子6～9份；

9、橘核3～9份；

10、蜂胶0.2～9份。

11、本发明还提供了上述中药组合物的制备方法，取苏木3～9份、椿皮6～9份、红花龙胆9～15份、焦栀子6～9份、橘核3～9份和蜂胶0.2～9份粉碎后用乙醇提取，获得所述中药组合物。

12、在本发明的一些具体实施方案中，上述制备方法还包括对所述提取的提取产物进行浓缩和/或进行冻干的步骤。

13、在本发明的一些具体实施方案中，上述制备方法中所述提取的方法为标准索氏提取法；和/或

14、所述浓缩为鼓风干燥浓缩；和/或

15、所述粉碎的目数为80～100目；和/或

16、所述乙醇为90％乙醇水溶液；和/或

17、所述乙醇与所述粉碎的产物的体积比为15:1；和/或

18、所述提取的时间为3h；和/或

19、所述浓缩的温度为45℃；和/或

20、所述浓缩的浓缩比为15:1。

21、本发明还提供了药物或制剂，包括上述中药组合物或上述制备方法制得的中药组合物，以及可接受的辅料或助剂。

22、在本发明的一些具体实施方案中，上述药物或制剂的剂型包括：经胃肠道剂型或非胃肠道剂型；

23、所述经胃肠道剂型包括：散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、乳剂或混悬剂；

24、所述非胃肠道剂型包括注射剂、喷雾剂、滴剂、贴剂或软膏剂。

25、在本发明的一些具体实施方案中，上述药物或制剂的剂型还包括：液体剂型、固体剂型、半固体剂型或气体剂型；

26、所述液体剂型包括溶液剂、洗剂或搽剂；

27、所述固体剂型包括丸剂或膜剂；

28、所述半固体剂型包括凝胶剂、栓剂或糊剂；

29、所述气体剂型包括气雾剂。

30、在本发明的一些具体实施方案中，上述辅料和/或助剂包括但不限于黏合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、等渗调节剂、增溶剂、助溶剂、防腐剂、着色剂、助悬剂、润湿剂、乳化剂和/或表面活性剂。

31、本发明还提供了上述中药组合物或上述制备方法制得的中药组合物在制备下调tgfb1和/或col1a1基因表达的药物或制剂中的应用。

32、在本发明的一些具体实施方案中，上述应用中所述tgfb1和/或col1a1基因为人肝星形细胞、人肾小管上皮细胞和/或人心肌成纤维细胞中的所述tgfb1和/或col1a1基因基因。

33、在本发明的一些具体实施方案中，上述应用中所述tgfb1和/或col1a1基因为lx2细胞、hk2细胞和/或hcf细胞中的所述tgfb1和/或col1a1基因。

34、本发明还提供了上述中药组合物或上述制备方法制得的中药组合物在制备抑制肝星形细胞、肾小管上皮细胞和/或心肌成纤维细胞的活化并减少细胞外基质的生成的药物或制剂中的应用。

35、本发明还提供了上述中药组合物或上述制备方法制得的中药组合物在制备治疗脏器纤维化的药物或制剂中的应用。

36、在本发明的一些具体实施方案中，上述应用中所述脏器纤维化包括肝脏纤维化、肾脏纤维化或心肌纤维化中的一种或多种。

37、在本发明还提供了中药组合物在制备治疗肝脏疾病、肾脏疾病、心脏疾病的药物或制剂中的应用；

38、所述肝脏疾病包括但不限于肝硬化、肝癌或肝衰竭；

39、所述肾脏疾病包括但不限于肾损伤；

40、所述心脏疾病包括但不限于失代偿性心肌肥厚或心力衰竭。

41、本发明的中药组方有如下效果：

42、抗脏器纤维化功能的中药组方由如下药物组成：苏木3～9份、椿皮6～9份、红花龙胆9～15份、焦栀子6～9份、橘核3～9份、蜂胶0.2～9份，不同配比的中药组方均具有抗纤维化作用，获得了优选的抗脏器纤维化中药组方。实验表明，本发明优选的中药组合物均能显著下调lx2、hk2、hcf细胞中的tgfb1、col1a1基因的表达。