本发明涉及生物医药领域，具体涉及靶向刺激免疫分子在制备治疗黄斑病变药物的用途。
背景技术：
1、据估测，我国60岁及以上老年人口将在2035年前后突破4亿，总人口占比将超过30％，进入重度老龄化阶段。随着人口老龄化程度不断加深，实现“健康老龄化(healthyaging)”已成为我国乃至世界迫切需要解决的重大社会和科学问题。
2、衰老细胞在组织中的积累会导致糖尿病，骨关节炎，肝和肺纤维化、癌症、阿尔茨海默病、慢性阻塞性肺疾病(copd)、肠道炎症和动脉粥样硬化等疾病。免疫清除衰老细胞可延缓衰老。多项研究表明，注入转基因或年轻的免疫细胞来清除衰老个体的衰老细胞是有好处的，这体现在生存率的提高和组织病理学的改善。这些发现凸显了采用免疫策略清除衰老细胞的可行性和潜力。然而，外源性免疫疗法存在细胞因子释放综合征和神经毒性的风险。2020年，nature杂志报道了一种嵌合抗原受体t细胞(car-t)免疫疗法用于选择性地清除小鼠中的衰老细胞。不过，研究人员也指出，使用car-t疗法的一个常见并发症为细胞因子释放综合征(也称为细胞因子风暴)。发生这种毒性作用时，强烈的t细胞响应会导致发烧，影响血压和呼吸。在这项新研究中，作者们观察到，高剂量的抗衰老car-t细胞的确会引发细胞因子释放综合征。因此，寻找激活内源性免疫细胞以逆转衰老的新方法值得深入研究。
3、在整个生命的多系统调节层次结构中，神经内分泌和免疫系统的相互作用和整合具有重要作用，这种相互作用可通过免疫系统中存在的神经递质(多巴胺、乙酰胆碱和γ-氨基丁酸)和代谢受体发生，从而介导免疫突触的信号。在一项研究中，研究人员比较了免疫部位附近淋巴结的代谢物与通过免疫暴露于外源蛋白质后小鼠身体另一侧淋巴结的代谢物。他们发现，免疫应答部位附近淋巴结中与谷氨酸通路激活相关的代谢物水平存在显著差异。谷氨酸、丙氨酸和天冬氨酸途径是区分静息和激活免疫位点的最强代谢特征。谷氨酸应被认为是神经和免疫系统中参与信号传递的神经递质和免疫递质，免疫细胞中代谢性谷氨酸受体的表达和激活可能影响免疫细胞的功能和寿命。随着个体年龄的增长，谷氨酸和谷氨酸水平下降，年龄与代谢特征(丝氨酸和谷氨酸)呈负相关且显著相关。针对免疫细胞谷氨酸受体可能成为调节衰老微环境中谷氨酸受体介导的免疫增敏的候选药物。因此，促进炎症微环境表面呈递新靶点的策略可能会增强免疫活性，从而提高衰老免疫治疗的疗效。
4、此外，黄斑病变是一种常见的眼科疾病，主要影响黄斑区，即视网膜中心负责精细视力的区域。目前，黄斑病变的确切病因尚不完全明确，现有研究根据其高危人群主要为50岁以上的老年人等情况判断很可能与细胞衰老有关。我们正着手解决这个问题，尝试明确靶向衰老细胞的免疫治疗是否能逆转黄斑病变情况。
技术实现思路
1、基于现有技术中的不足，本发明提供了靶向刺激免疫分子在制备治疗黄斑病变药物的用途。具体的，本发明制备了一种双配体多肽，它可以作为“媒人”和促进剂，介导衰老细胞和免疫细胞之间的相互作用，增强内源性免疫功能，达到有效治疗黄斑病变相关疾病的目标。
2、为实现本发明目的，本发明提供以下技术方案：
3、本发明提供了一种靶向刺激免疫分子在制备治疗黄斑病变药物方面的用途。
4、其中用于靶向衰老细胞刺激内源性免疫的分子，所述药物的分子至少含有两个基本单元，
5、其中一个基本单元为具有衰老细胞、衰老组织或衰老微环境靶向功能的单元，
6、另一个基本单元为用于刺激内源性免疫的单元；
7、或者所述药物的分子至少含有一个基本单元，所述基本单元为能够同时具有衰老细胞、衰老组织或衰老微环境靶向功能和用于刺激内源性免疫的单元。
8、具体的，本发明提供的为一种诱导衰老细胞激活免疫的分子。肽的一端为衰老细胞细胞膜上广泛表达的尿激酶型纤溶酶原激活剂受体(urokinase-type plasminogenactivator receptor，upar)的配体，另一端与免疫细胞细胞膜上广泛表达的谷氨酸受体结合。通过在upar特异性配体片段的氨基末端添加聚谷氨酸合成由40个氨基酸组成的嵌合多肽。它可以靶向结合衰老细胞表面受体和谷氨酸受体，促进衰老细胞和免疫细胞之间的相互作用，通过谷氨酸标记衰老细胞，激活免疫细胞上的谷氨酸受体促进其与免疫细胞的黏附，从而有效清除衰老细胞。
9、本发明中靶向功能单元没有特别限制，只要能满足为衰老细胞/组织/微环境的靶向功能分子片段即可。
10、进一步地，所述具有衰老细胞、衰老组织或衰老微环境靶向功能的单元为靶向衰老细胞表面特异性抗原的抗体、靶向衰老细胞高表达受体的配体分子、靶向衰老细胞的多肽、靶向衰老细胞的核酸适配体、靶向衰老细胞的多糖、靶向衰老微环境的分子中的一种或多种。
11、本发明中具有特定衰老细胞靶向性的多肽可以是线性或环形形式。
12、进一步地，所述靶向衰老细胞表面特异性抗原的抗体为尿激酶型纤溶酶原激活剂受体(urokinase-type plasminogen activator receptor，upar)的抗体；
13、所述靶向衰老细胞高表达受体的配体分子为尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator，upa)；
14、所述靶向衰老细胞的多肽为尿激酶型纤溶酶原激活物结合域多肽。本发明中部分实施例选择先用小鼠进行动物实验，因此在用小鼠进行实验时，所述尿激酶型纤溶酶原激活物结合域多肽为cqnggvcvsykyfsrirrcscprk(如seq id no:1所示)，即鼠源序列。而人体的尿激酶型纤溶酶原激活物结合域多肽与之不同，因此在以人体为目标进行实验时，所述尿激酶型纤溶酶原激活物结合域多肽为lnggtcvsnkyfsnihwcncpkkf(如seq id no:2所示)，即人源序列。当然本发明中前面所述序列可以是全部序列或部分序列，如snkyfs(如seq id no:3所示)，vsnkyfsni(如seq id no:4所示)，vsnkyfsnihw(如seq id no:5所示)只要满足靶向功能即可。
15、多肽可以为线性分子或其环肽形式。
16、靶向衰老细胞的核酸适配体为具有特定衰老细胞靶向性的核酸适配体；
17、所述靶向衰老细胞的多糖为靶向衰老细胞标志物β-半乳糖苷酶的β-半乳糖。
18、靶向衰老微环境的分子为靶向衰老特定微环境的分子。
19、优选的，所述用于刺激内源性免疫的单元为能够激活代谢性谷氨酸受体的分子或能够刺激衰老组织或衰老微环境中的免疫细胞。
20、进一步地，所述能够激活代谢性谷氨酸受体的分子为多聚谷氨酸的重复单元、谷氨酸激动剂中一种或多种；
21、所述免疫细胞为自然杀伤细胞(nk细胞)、巨噬细胞、t细胞或树突状细胞。
22、进一步，所述用于靶向衰老细胞刺激内源性免疫的分子的靶向单元选择尿激酶型纤溶酶原激活物结合域多肽，用于刺激内源性免疫的单元选择多聚谷氨酸的重复单元，此时，用于靶向衰老细胞刺激内源性免疫的分子鼠源氨基酸序列为excqnggvcvsykyfsrirrcscprk，其中x为任意整数。
23、用于靶向衰老细胞刺激内源性免疫的分子，人源氨基酸序列为eylnggtcvsnkyfsnihwcncpkkf的全部序列或部分序列，其中y为任意整数。
24、进一步的，用于靶向衰老细胞刺激内源性免疫的分子为eysnkyfs，eyvsnkyfsni，eyvsnkyfsnihw中的一种。
25、靶向多肽分子中如果含有的谷氨酸数目大于或等于1，则可能自身同时满足双重靶向及刺激内源性免疫两种功能，独立完成本发明目的。然而靶向多肽分子通常受不同谷氨酸亲疏水影响，可能会影响靶向多肽的靶向亲和性。
26、多肽分子中靶向部分负责结合衰老细胞膜表面高表达的膜蛋白，防止脱靶，因此限于本发明篇幅，未能穷尽列举，但是即使本发明未阐述的其他靶向分子也可发挥相同的作用。刺激免疫功能端可以是含有多聚谷氨酸的重复单元(en，n≥1)，也可以是谷氨酸受体激活剂，刺激免疫功能部分负责激活内源性免疫细胞，其他本发明未详细阐述的能激活i类代谢性谷氨酸受体也可发挥相同作用。
27、进一步的，我们在实验中发现，以上seq id no:1所示的鼠源的多肽分子溶解度较低，而增加谷氨酸数量可增加其溶解度，然而谷氨酸数量与分子的靶向性负相关，因此综合考虑，8≤x≤24。
28、而以上公开的人源的多肽分子溶解度相对较好，因此无需过多考虑增加谷氨酸来提升其溶解度，而专注考虑分子的靶向特异性和刺激免疫的效果，综合考虑，1≤y≤24。
29、本发明中，所述靶向衰老细胞刺激内源性免疫的两个功能区域(靶向+免疫增敏)既可以通过两个不同的分子单元实现(靶向功能域+免疫增敏功能域)，比如upa-聚谷氨酸交联分子；也可以是合二为一的，即一个功能单元同时具有这两个方面的功能(靶向+免疫增敏)，比如hupa。
30、具体的，我们进一步研究发现，鼠源序列upa目前实验结果难以同时实现靶向和刺激功能。而人源序列hupa则在实验中显现出可以同时实现靶向衰老细胞刺激内源性免疫。
31、因此，进一步的靶向衰老细胞刺激内源性免疫分子可以仅含有一个基本单元，所述基本单元为多肽分子，其氨基酸序列为lnggtcvsnkyfsnihwcncpkkf的全部或部分序列。
32、进一步，所多肽分子的氨基酸序列可以为lnggtcvsnkyfsnihwcncpkkf，snkyfs，vsnkyfsni，vsnkyfsnihw中的一种。
33、应用时，给药方式为静脉给药、组织病灶介入给药、口服给药、鼻腔吸入给药或腹腔注射给药。
34、本发明提供的靶向衰老细胞刺激免疫的分子通过实验验证，可特异性靶向衰老细胞，刺激包括nk在内的免疫细胞，清除衰老细胞。因此本发明的靶向衰老细胞刺激免疫的分子从原理来讲可以用于制备治疗适所有纤维化和衰老相关疾病的药物，本发明主要针对黄斑病变相关疾病。
35、本发明还提供一种治疗黄斑病变的药物，所述药物中包含上述的靶向衰老细胞刺激免疫的分子。
36、所述治疗黄斑病变药物中除了包含本发明的靶向衰老细胞刺激免疫的分子，还包含必要的辅料，也可以包含其他治疗药物。
37、进一步，所述治疗黄斑病变可以将所述的靶向衰老细胞刺激免疫的分子通过口服、静脉给药、病灶内介入给药、腹腔注射给药。
38、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
39、本发明提供了一类靶向衰老细胞刺激免疫的功能分子的用途，该分子一端靶向衰老细胞膜分子，并将谷氨酸标记在衰老细胞表面，介导内源性免疫细胞和衰老细胞之间的“偶联”，促进免疫细胞对衰老细胞的黏附清除。该分子能调节衰老组织的免疫微环境，有效减少衰老相关-β-半乳糖苷酶阳性衰老细胞的数量，同时逆转纤维化，对治疗视网膜黄斑病变有明显效果。