专利名称：增智健脑药的制作方法
技术领域：
本发明是涉及增智健脑中药。
国内近年有关促智作用的药物研究的重点放在中草药上，尤以益智补养药研究最多，徐氏用清脑益智合剂治疗轻度脑功能障碍20例。清脑益智合剂药物组成鹿角粉6g、熟地20g、砂仁4.5g、生龙骨30g、炙龟板15g、菖蒲9g、炙远志3g、丹参15g、益智仁6g、枸杞子9g、水煎剂。每日1剂，内服2次，连服2个月。功能培补精血，调整阴阳，开窍益智。治疗结果，显效11人(55%)，进步6人(30%)，无效3人(15%)(见徐俊冕等儿童轻微脑功能失调综合征的中医治疗-20例报告，中西医结合杂志19822(1)22-24)。
张氏用醒脑康治疗小儿智力低下40例，醒脑康药物组成丹参、川芎、当归等加工制成醒脑康浓缩液，根据年龄增减药量，每日3次，疗程三个月。无对照组，方药功能活血代瘀(见张慧芬等醒脑康治疗小儿智力低下40例，中西医结合杂志1988(10)640)。
邹氏采用“益智灵”促进儿童智能发育，临床观察50例，其中治疗组17例，对照组34例。益智灵药物组成红参1.5g、白参1.5g、龙眼肉10g、五味子3g、山药15g、茯苓10g等。用上药制成颗粒冲剂，15-20g/次，2-3次/日，3个月为1个疗程。方药功能补心脾、开窃益智。治疗结果，服药组智商平均值有明显提高(见邹锡听等，益智灵促进儿童智能发育的临床观察，上海中医药杂志1988(1)10-12)。
总之，以上三种药物对增智有一定的疗效，但有效率仍然不高。
本发明就是针对上述问题，提供一种治愈率高的增智健脑药。
本发明的目的是这样实现的，本药主要采用以下药物组成何首乌325-425g柏子仁150-200g龙眼肉100-150g黄精325-425g女贞子325-425g桑椹325-425g莲子150-200g远志150-200g方中何首乌、柏子仁、龙眼肉、黄精四药为主。何首乌补肝肾精血;柏子仁养心安神，润肠通便;龙眼肉益心脾，补气血安神;黄精补脾益肾，润心脾，强筋骨，久服强魂魄，聪明。
女贞子、桑椹、莲子、远志四味为辅扶主药补益心肾，养血润肝。女贞子补肝肾，强腰膝，安五脏养精神;桑椹补肝益肾、安魂、利五脏;莲子养心益智，远志安神益智、安魂魄，强志倍力。
本发明的主要优点本药系由纯中药制成的改善智能的有效药物。经药效学、毒理学及稳定性实验和临床验证，具有明显的补益心肾、养血润肝、健脑聪慧、填髓强体，健脑益智之功效，可促进智能发育，提高智商，增强记忆，改善思维，能调节和促进脑功能恢复，经临床观察治疗MR总有效率82%，治疗MBD总有效率96%。
本药可按实际需要，即可制成丸剂，也可制成散剂或口服液的形式，当然这也都是常规的工艺处理方法。
实施例(一)治疗MR临床及实验研究(智力低下简称为MR)1.临床资料
MR70名均系1988-1990年间辽宁中医学院附属医院儿科门诊及沈阳市区育智、培智学校病例，男40例，女30例，随机分观察组50例和对照组20例。观察组平均年龄10岁，对照组平均年龄11岁。
2.诊断标准1)中医诊断标准精神萎顿、表情呆滞、面色无华、发育迟缓、智力不全。言语不清，好动，注意力不集中，记忆力差，学习成绩明显落后，舌质红或赤，少苔或无苔，脉沉细。
2)参照WHO1985智力低下标准修订标准(1)综合能力(语言、记忆、学习、生活、社会适应能力)低于同龄儿。
(2)14岁以前发病(3)智商指数(IQ)低于75者。需除外常染色体异常、先天免疫缺陷、各种颅脑疾患后遗症等脑部器质性病变所致智力低下者。智商测定采用韦克斯勒-辽宁1986修订量表。治疗前后各检测1次，并参照其他指标综合判定。
3.药物与工艺何首乌(制)375g柏子仁175g龙眼肉125g黄精375g女贞子375g桑椹375g莲子175g远志175g茯苓75g龙骨300g百合175g丹参250g尼泊金乙酯0.1g白糖100g尼泊金丙脂0.1g共制成1000ml。以上十二味，加水煎，煎三次，第一次加水7倍量，浸渍2小时，煎煮1.5小时，过滤。第二次加水5倍量，煎煮1小时，过滤。第三次加水3倍量，煎煮0.5小时，过滤。合并滤液，静置24小时以上，减压过滤。滤液减压浓缩至不多于925ml，加白糖尼泊金乙酯和丙酯搅拌使溶解，再补加蒸馏水至1000ml，检测药液PH值(为4.5-5.5)，相对密度(为1.10-1.16)合格后，再减压过滤。灌装、灭菌、即得。
4.观察方法观察组口服增智健脑药的口服液，每日2次，早晚服，10岁以下每次每岁1ml，10岁以上每次10ml，4个月为一疗程。对照组采用智能训练法。
5.疗效判定显效综合能力明显提高，IQ提高15个以上，中医诊见言语清楚，记忆增强，智能提高。
好转综合能力有所提高，或某种智能(语言、记忆、理解、操作)明显，IQ提高10以上;中医诊见言语较清楚，记忆较前有增强，智能有所提高。
有效综合能力有提高，IQ提高5个以上，中医诊见言语或记忆有改善，智能略有提高。
无效各项智能指标略有提高或无变化。
6.观察结果总有效率观察组82%，对照组15%，经统计学处理P＜0.005差异非常显著，详见表Ⅰ。
实验研究采用多种模型和方法，探讨了增智健脑药的口服液对动物学习记忆、行为的影响，同时从分子水平，亚细胞水平对其中枢药理作用机制进行了较为深入的研究。
智力低下观察组与对照组治疗前后疗效统计附表1总智商(IQ)操作智商(IQ)语言智商(IQ)治疗组对照组治疗组对照组治疗组对照组例数%例数%例数%例数%例数%例数%显效132611111711111119101111好转12241111111211111112211111有效16328150163151836525无效910170.51126170.515301575总有效418231517743151570525X231.5 22.4 14P<0.0050.0050.005材料与方法(一)实验动物1.昆明种健康小白鼠，体重9-11g，雌雄兼用，中国医科大学实验动物中心提供。
2.Wistar雄性大白鼠，体重150-200g，辽宁中医学院动物室提供。
(二)药品及方法增智健脑药由辽宁中医学院附属医院制剂室提供。
1.学习记忆行为实验(1)药物脑复康由沈阳药学院中药药理教研室惠憎;樟柳碱由中国医学科学院药物研究所惠憎，亚硝酸钠和乙醇均为市售试剂。
(2)实验分组取小鼠150只，随机分为空白对照组;病理模型组(分别给樟柳碱、亚硝酸钠、40%乙醇造成学习记忆获得、巩固和再现障碍的病理模型);增智健脑药的口服液Ⅰ组;增智健脑药的口服液Ⅱ组，脑复康组。
(3)仪器按张均田报道的一次性训练、回避性条件反射箱仿制而成。[1]跳台反射箱为20×20×30cm3木制箱，箱底为铜栅，通以40V电流、箱内置一高3.5cm，直径5cm的橡皮垫。作为动物回避电击的安全区。
避暗反射箱为40×15×15cm3的玻璃箱，分明暗两室，暗室底部为铜栅，通以40V电流，两室间有一直径3cm的小沿相通，明室为动物回避电击的安全区。
(4)方法按文献[1]报道方法。实验前空白对照组和病理模型组均给生理盐水灌服，与此同时增智健脑药的口服液Ⅰ、Ⅱ组和脑复康组分别给不同剂量的增智健脑药的口服液和脑复康灌服，每日二次(早、晚各一次)。连续10d。最后一次给生理盐水、增智健脑药的口服液和脑复康后进行训练，一次训练后24h正式进行测验。观察对学习记忆获得的影响时，将各组小鼠于训练前15min腹腔注射樟柳碱5mg/kg;观察对记忆巩固影响时，于训练后立即皮下注射亚硝酸钠120mg/kg;观察对记忆再现影响时，于训练后24h测验前10min灌服40%乙醇0.1ml/10g体重。
(1)跳台试验训练时将小鼠放在反射箱内适应3min后，通电5min，记录从台上跳下触电次数(即错误次数);然后于24h后正式测验，记录3min内错误次数，分别作为对记忆获得、巩固和再现的观察指标。
(2)避暗试验;记录测验中动物钻入暗室的潜伏期(第一次钻入暗室前的时间)及5min内钻入暗室的次数作为观察指标。
上述两种试验均可以通过给不同环节的学习记忆阻断剂，来观察增智健脑药的口服液对学习记忆获得、巩固和再现能力的影响，均属被动回避性条件反射试验。
用双侧“t”检验法分析组间差异的显著性2.脑急性缺氧实验(1)药物脑复康由沈阳药学院中药药理教研室惠赠;亚硝酸钠系沈阳试剂一厂产品。
(2)分组及给药取小鼠120只，随机分为四组，实验前生理盐水组给生理盐水灌服，与此同时增智健脑药的口服液Ⅰ、Ⅱ组及脑复康组分别灌服增智健脑药的口服液12g生药/kg、36g生药/kg，脑复康300mg/kg，每日二次(早、晚各一次)，连续8天，末次给药1b后进行实验。
(3)方法(1)断头缺血法[2]剪下小鼠头部，立即用秒表记录断头小鼠的张口呼吸持续时程。
(2)亚硝酸钠引起的缺氧致死法[3]给小鼠皮下注射亚硝酸钠225mg/kg一次，记录注射后至呼吸停止的时间。
(3)常压缺氧法[4]将小鼠放入盛有10g钠石灰的250ml广口瓶内，瓶口涂以凡士林密闭，记录各组小鼠在常压缺氧状态下的存活时间。
用双侧“t”检验分析组间差异的显著性。
3.局灶性脑缺血大鼠脑胞超微结构观察取大鼠12只，随机分为三组，实验前，中药组采用自由饮水法给增智健脑药的口服液20g/kg;对照组与模型组同法给自来水，连续15天。实验时均用戊巴妥钠40mg%kg腹腔麻醉。
(1)结扎右侧颈总动脉大鼠麻醉后，按文献[5、8]方法分离出右侧颈总动脉。对照组4只大鼠手术暴露颈总动脉后不做结扎;模型组与中药组手术暴露右侧颈总动脉后，每组4只均做双重结扎，在结扎中点剪断。24小时后断头取脑，取大脑皮层顶叶组织固定于2.5%戊二醛中。
(2)病理检查鼠脑标本在2.5%戊二醛固定后，再经1%饿酸固定、乙醇丙酮逐级脱水、环氧树脂618包埋，超薄切片，枸椽酸铅和醋酸铀染色，H-600透身电镜观察。
4.小鼠脑内单胺类神经递质含量测定(1)分组取小鼠40只，随机分四组，每组10只，即空白对照组、病理组、治疗组、中药组。
(2)给药利血平注射液为广州桥光制药厂产品。空白对照组每日皮下注射生理盐水0.1ml/10g，同时灌服生理盐水0.2ml/10g;病理组每日皮下注射利血平一生理盐水0.25mg/kg，同时灌服生理盐水0.2ml/kg，同时灌服增智健脑药的口服液12%0.2ml/10g，中药组每日皮下注射生理盐水0.1ml/10g，同时灌服增智健脑药的口服液120%0.2ml/10g。以上各组均连续给药8天。
(3)方法高效液相色谱-电化学检测器(EPLC-ECD)单胺类神经递质测定法。
(1)试剂甲醇(AR)、柠檬酸(A、R)、二正丁胺(CR)、醋酸钠(AR)、EB2EDTA沈阳试剂一厂产品辛烷磺酸钠，Sigeb公司产品去甲肾上腺素(RE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-DIAA)3、4二羟基苯乙酸(DDPAC)、二羟苄胺(DHBA)系Sigxa公司和Kerck公司产品高氯酸(AR)沈阳试剂一厂产品(2)仪器Katers510恒流泵;460电化学检测器;玻碳电极;Resolve5μSphericalc16色谱柱，150×3.9mml/0;U6k进样器，740积分仪。
(3)色谱条件泵流速1.0ml/min，工作电压+0.70v，氧化法。检测灵敏度10nA;纸速30cm/b;室温20±2℃。
流动相组成50mmol/L醋酸钠、20mmol/L柠檬酸、1mmol/L辛烷磺酸钠、1mmol/L二正丁胺、0.2mmol/L、Rb2EDTA、2-4%甲醇。用去离子重蒸水配制，柠檬酸调PH为4，混匀过滤超声除气。
(4)标准品及样品制备标准品制备将标准品NE、DA、5-HT、5-HIAA、DDFAC及内标DHBA溶解在0.1mol/L，ECLD4溶液中，配制成10ng/ml浓度，置冰箱中低温保存，临用前用相应的溶剂稀释至一系列适当浓度。
样品制备将小鼠断头后迅速取脑，去小脑称重即置-40℃冰箱冷冻后，加入2mg/LDHBA50ml，冷0.1mol/L高氯酸2ml制成匀浆(均为冷操作)，然后倒入离心管中于4℃18000转/分，离心30min，取上清20μl直接进样。
(5)结果计算样品中每种物质峰高与DHBA峰高之比值同标准品中的比值作比较，推算样品中每克湿组织单胺类递质的含量。参见
图1、2。
用双侧“t”检验分析组间差异的显著性结果与分析(一)学习记忆行为实验1.增智健脑药的口服液对樟柳碱所致学习记忆获得不良的影响模型组(给樟柳碱)与空白对照组比较，跳台法实验错误次数明显增加，避暗法测验潜伏期明显缩短(P＜0.01);增智健脑药的口服液Ⅰ、Ⅱ组与模型组比较，跳台法错误次数显著减少(P＜0.05，P＜0.01)，Ⅱ组避暗法潜伏期显著延长(P＜0.05)，与模型组比较，跳台法实验错误次数显著减少(P＜0.05)。见表1。
2.增智健脑药的口服液对亚硝酸钠所致记忆巩固不良的影响病理模型组(给亚硝酸钠)与空白对照组比较，跳台实验错误次数显著增加，避暗实验潜伏期明显缩短(P＜0.01);增智健脑药的口服液Ⅰ、Ⅱ组与病理模型组比较，跳台与避暗实验错误次数均显著减少(P＜0.01、P＜0.05)测验潜伏期明显算长(P＜0.01)。脑复康与模型组比较，跳台与避暗实验错误次数也显著减少(P＜0.05)，测验潜伏期明显算长(P＜0.05)。见表2。
3.增智健脑药的口服液对40%乙醇所致记忆再现不良的影响病理模型组(给40%乙醇)与空白对照组比较，跳台实验错误次数明显增加，避暗法潜伏期明显缩短(P＜0.01);增智健脑药的口服液Ⅰ、Ⅱ组与病理对照组比较，跳台实验错误次数显著减少(P＜0.01)，避暗法潜伏期显著延长(P＜0.05)。脑复康组与模型组比较，跳台实验错误次数明显减少，(P＜0.05)。见表3。
(二)增智健脑药的口服液对发育期小鼠急性脑缺氧状态的影响断头缺血法中，增智健脑药的口服液Ⅰ、Ⅱ组小鼠平均张口呼吸时间均较对照组时间显著算长(P＜0.01)，亚硝酸钠缺氧法，脑复康与增智健脑药的口服液Ⅱ组死亡时间均较对照组显著算长(P＜0.05、P＜0.01)。在常压耐缺氧实验中，脑复康组与增智健脑药的口服液Ⅱ组均可延长其生存时间(P＜0.05、P＜0.01)。见表4。
(三)增智健脑药的口服液对局灶性脑缺血大鼠脑细胞超微结构的作用1.对照组线粒体数量较多，呈圆形或细长形，嵴为板状或管状，基南内颗粒较少。内质网常紧贴在质膜下集聚多层。高尔基复合体较发达。(见图3)。
2.模型组线粒体肿胀，嵴消失呈空化，内质网和高尔基复合体等细胞结构呈不同程度改变，胞浆基质电子密度增高(见图4、5)。
3.中药组线粒体轻度肿胀，嵴存在，嵴数量近于正常，胞浆基质电子密度尚可，其他细胞器无明显改变(见图6、7)。
(四)增智健脑药的口服液对发育期小鼠脑内单胺类神经递质的影响1.RE浓度病理组(给利血平)与空白对照组比较，RE浓度显著降低(P＜0.01);治疗组与病理组比较，RE浓度明显增高(P＜0.01);中药组与空白对照组比较，RE浓度亦增高(P＜0.05)。
2.DA、DDPAC浓度病理组(给利血平)与空白对照组比较，DA浓度显著降低。DDPAC浓度为0(P＜0.01);治疗组与病理组比较，DA浓度明显增高(P＜0.01);中药组与空白对照组比较，DA浓度亦增高(P＜0.05)。
3.5-HT与5-HIAA浓度病理组(给利血平)与空白对照组比较，5-HT浓度显著降低(P＜0.01)，5-HIAA浓度虽下降，但无显著差异;治疗组与病理组比较，5-HT浓度明显降低(P＜0.01)，5-HIAA浓度虽降低，但差异无显著性;中药组与空白对照比较，无显著差异。
结论(一)增智健脑药的口服液对学习记忆功能具有易化作用。
(二)增智健脑药的口服液抗急性脑缺氧作用与其记忆改善作用密切相关。
(三)增智健脑药的口服液对大脑皮层细胞的保护作用可能是其增进智能、延缓智力损伤的机制。
(四)增智健脑药的口服液促进学习记忆的作用与脑内单胺类神经递质有关，NE、DA浓度增高，5-HT浓度下降可能是其益智作用的药理学机制。
(二)治疗MBD80例报告(轻度脑功能障碍综合症，简称MBD)1.临床资料MBD80例均系1988-1991年间科院儿科门诊病例，男52名，女28名，平均年龄9.3岁，随机分观察组50名，对照组30名。
2.诊断标准(1)智商指数居中下水平(低于均值一个标准差)。
(2)理解、记忆能力落后，活动过多，注意力不集中，有不同程度学习困难(各种疾病所致者除外)。
3.药物增智健脑药的口服液何首乌325g、柏子仁150g、龙眼肉100g、黄精325g、女贞子325g、桑椹325g、莲子150g、远志150g、龙骨250g、百合150g、丹参225g、茯苓50g。
工艺水煎-浓缩法(由辽宁中医学院制剂室提供)。
4.观察方法观察组口服增智健脑药的口服液，每日2次，早晚服，10岁以下每次每岁1ml，10岁以上每次10ml，4个月为一疗程。对照组口服脑复康，每次0.1，每日3次。
5.疗效判定显效学习成绩明显提高，活动过多明显减少，记忆力注意力增强;智商指数明显提高。
好转学习成绩、记忆力有一定幅度提高，活动过多减少，智商指数有提高。
无效治疗前后无变化。
6.治疗结果观察组总有效率96%，对照组总有效率53%，经统计学处理P＜0.05，差异非常显著。详见表Ⅱ。
表ⅡMBD观察组与对照组系数比较项目观察组对照组P例(%)例(%)显效24(50)5(16)<0.005好转23(46)11(39)无效2(4)14(47)总有效48(96)16(53)
(三)治疗MR10例报告1.临床资料MR10例系沈阳市中医研究所儿科门诊病例，男8例，女2例，平均年龄6.5岁。
2.诊断标准。同实施例(一)，疗效判定标准同实施例(一)。
3.药物与工艺何首乌375g柏子仁175g龙眼肉100g黄精350g女贞子375g桑椹325g莲子175g远志175g工艺水煎-浓缩法。
3.观察方法增智健脑药的口服液，每次每岁1ml，每日2次，早晚口服，总疗程4个月。
治疗结果显效3人，好转3人，有效3人，无效1人。总有效率90%。
(四)治疗神经衰弱、老年性痴呆，30例报告1.临床资料全部备例均系1989-1992年间我院内科门诊备例，其中男18例，女12例，平均年龄52岁。
2.诊断与疗效判定标准参照实用内科学标准。
3.药物及工艺何首乌425g柏子仁200g龙眼肉150g黄精425g女贞子425g桑椹425g莲子200g远志200g茯苓100g龙骨350g百合200g丹参275g
工艺水煎-浓缩法，由辽宁中医学院制剂室提供。
观察方法增智健脑药的口服液，每次20ml，每日2次，早晚服，1-3个月为一疗程。
治疗结果显效12例(40%)，好转10例(33.3%)，有效6例(20%)，无效2例(6.7%)，总有效率93.3%。
增智健脑药效学研究证实有抗急性脑缺氧作用，对大脑皮层细胞有保护作用，可延缓智力创伤，故于用儿成人神经衰弱、老年性痴呆，治疗结果，总有效率达93.3%，说明本口服液有延缓衰老，保护脑细胞功能。
(五)增智健脑药的口服液急、慢毒性实验及药物稳定性实验1.急毒试验结论灌胃给予小鼠增智健脑药的口服液175g生药/kg，相当于临床儿童用量的175倍，小鼠无明显的中毒表现，揭示本药临床一次用药安全。
2.长期毒性试验结论连续12周给大鼠经口灌服增智健脑药的口服液19.6-79.2(生药)1kg，相当于10岁以上儿童一日用量的10-40倍，除高剂量大鼠体重增长缓慢外，对血液系统、肝肾功能及病理检查等均无明显的影响，提示长期服用该剂无明显的蓄积中毒反应。
3.药物稳定性试验结论增智健脑药的口服液经留样观察18个月，其性状，PH值，相对密度，检查结果均符合要求。鉴别项检查出何首乌、桑椹。卫生学检查，杂菌数、霉菌数、酵母菌数均符合《部颁标准》1986年版。未经出大肠杆菌、活螨。因此，认定本品稳定、合格。
权利要求
1.增智健脑药的组分如下何首乌325-425g、柏子仁150-200g、龙眼肉100-150g、黄精325-425g、女贞子325-425g、桑椹325-425g、莲子150-200g、远志150-200g。
2.根据权利要求1所述的增智健脑药，其特征在于何首乌375g、柏子仁175g、龙眼肉125g、黄精375g、女贞子375g、桑椹375g、莲子175g、远志175g、茯苓75g、龙骨300g、百合175g、丹参250g、尼泊金乙酯0.1g、白糖100g、尼泊金丙酯0.1g共制成1000ml。
3.根据权利要求1所述的增智健脑药，其特征在于何首乌325g、柏子仁150g、龙眼肉100g、黄精325g、女贞子325g、桑椹325g、莲子150g、远志150g、龙骨250g、百合150g、丹参225g、茯苓50g。
4.根据权利要求1所述的增智健脑药，其特征在于何首乌375g、柏子仁175g、龙眼肉100g、黄精350g、女贞子375g、桑椹325g、莲子175g、远志175g。
5.根据权利要求1所述的增智健脑药，其特征在于何首乌425g、柏子仁200g、龙眼肉150g、黄精425g、女贞子425g、桑椹425g、莲子200g、远志200g、茯苓100g、龙骨350g、百合200g、丹参275g。
全文摘要
增智健脑药是涉及增智健脑中药。本发明药物的主要组分是何首乌325-425g、柏子仁150-200g、龙眼肉100-150g、黄精325-425g、女贞子325-425g、桑椹325-425g、莲子150-200g、远志150-200g。本发明经药效学、毒理学及稳定性实验、临床验证是具有明显的补益心肾、养血调肝、健脑益智之功效，经临床观察治疗MR总有效率82％，治疗MBD总有效率96％。
文档编号A61K35/32GK1091023SQ9311008
公开日1994年8月24日 申请日期1993年2月12日 优先权日1993年2月12日
发明者刘焯, 郭振武, 张君, 赵历君 申请人:辽宁中医学院附属医院