专利名称：中药抗癌粉针剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中药抗癌粉针剂，特别适用于治疗食管癌，胃癌、肝癌、白血病等多种肿瘤疾病。
癌症是威胁人类生命健康的两大顽疾之一。据资料统计我国每年有愈百万人死于癌症，发病和死亡人数呈上升趋势。由于目前癌症不能早期发现和确诊，使治疗很难达到良效。达到治愈结果，依现有的治疗药物和方法，就是在延长生存期，提高生存质量方面，效果亦不尽人意。手术疗法虽可切除肿瘤，但术后亦有转移的可能，而且不适用于食管癌，肝癌、白血病等肿瘤的治疗;放射疗法可杀伤肿瘤，但对正常组织造成相应的伤害，产生很大的副作用，化疗方法常用的环磷酰胺，5-氟脲嘧啶、赛替派和阿霉素等药物虽有确切的疗效，可起到缓解作用，但因其对白细胞的杀伤和对肌体产生的强大毒副作用，使一些体质尚好的癌患在较短时间内变得衰弱，甚至不得不中断化疗，而对一些体质欠佳的癌患开始就不敢问津。中药疗法近来以其低毒副作用的优点受到重视和欢迎，但在临床上缺少公认的安全有效的抗癌制剂。
本发明的目的在于提供一种适应于食管癌、胃癌、肝癌、白血病等癌患疗效佳，延长生存时间，提高生存质量，安全、低毒副作用的中药粉针剂。
本发明的技术解决方案是由蜈蚣、金银花两味中药组成，将1份蜈蚣与1.5～2份(重量)金银花经水提取，浓缩、醇沉、灭菌、配制、干燥而制成。
本发明的产品通过以下方法制造。
一、生药的处理与剂量蜈蚣去头足、金银花去杂质，分别称1份蜈蚣1.5～2份(重量)金银花。
二、蜈蚣、金银花的提取1、将称取的生药用水煎煮两次。第一次加14倍生药重量去离子水浸泡1小时，煎煮1.5小时，滤过;第二次用10倍量去离子水煎煮1小时，滤过。
2、合并两次滤液，浓缩至在50℃温度下相对密度为1.01～1.30，待冷至5-50℃，缓缓加入95%的乙醇边加边充分搅拌，使含醇量达到40～90%，静止24小时，取上清液，减压回收乙醇至无醇味，得到相对密度为1.01～1.30(60℃测)的浸膏。
3、浸膏中加入适量去离子水，用20%NaOH溶液调PH至5～8，充分搅拌，加热至沸，放置24小时，滤过，收集滤液浓缩至相对密度为1.01～1.40(80℃测)，待冷至5～40℃加入95%乙醇，使含醇量达50～90%，静止48小时，取上清液，减压回收乙醇，制成相对密度为1.10～1.40(85℃测)的蜈蚣，金银花提取物。
三、半成品药液的制备1、提取物中加入适量去离子水，用20%NaOH溶液调PH至5～9，充分搅拌，加入5‰活性炭，煮沸，并保持微沸5～90分钟，放冷，再打入冷藏罐，冷藏72小时，滤过，滤液0.1MPa灭菌10～90分钟，放冷，再打入冷藏罐，冷藏120小时，滤过，滤液0.1MPa灭菌10～90分钟，放冷至5～40℃，用20%NaOH溶液调PH至4.0～10，浓缩至相对密度为1.01～1.35(50～60℃测)，0.1MPa灭菌10～90分钟。
四、成品粉针剂的制备，半成品可用喷雾干燥和冷冻干燥两种方法制成成品粉针剂。
1、采用喷雾干燥法制备将与半成品药液接触的所有管路、容器、介质进行无菌处理。将半成品药液除菌滤过，经塔前罐进入喷塔，塔顶温度为30～300℃，塔底温度为20～250℃，药液流速为1～100升/小时，制成无菌粉末，分装，包装，得成品粉针剂。
2、本发明产品也可用冷冻干燥法制备，冻干时板温为0～-80℃，制品温度为0～-100℃，冷凝温度为0～-140℃。
本发明粉针剂急毒实验如下取昆明种小鼠50只，体重18±2g，雌雄各半，随机分组，分成五组，每组10只，按等比级数设计5个剂量组，采用静脉注射给药，相邻剂量比为1∶0.8，一次给药的容积为0.2ml/10g，染毒后观察7天内的变化，用寇压改良法计算急毒LD50为2510±43mg/kg，从此可看出本发明制剂是一中等毒性的药物，与化疗药环磷酰胺(LD50为300mg/kg，是高毒药物)相比毒性小，其毒性为环磷酰胺的 1/8.36 。
本发明粉针剂长期毒性实验如下一、实验方法取家兔80只(体重0.5～0.8kg)，雌雄各半，观察一周，无病兔和无异常兔。随机分成四组，每组20只，雌雄各半，分为大、中、小三个剂量组和空白照组，三个剂量组为1200mg/kg、600mg/kg、300mg/kg，对照组给予同体积生理盐水，连续给药十二周，给药后每日观察体症，外观、行为、食物消耗量，粪便情况、药前、药中、药后分别测体重、血常规、肝肾功能，药后病检十个重要脏器(心、肝、脾、肺、肾、脑、肠、肾上腺、性腺、胃)二、实验结果(一)一般情况给药二周后出现腹泄，三周后恢复正常，给药组与对照组家兔生长活动正常，毛色有光泽，且无脱毛现象。
(二)体重情况见表1表1、抗癌粉针剂长毒实验对家兔体重的影响组别动物数药前体重(kg)给药六周体重(kg)给药后体重(kg)开始结束 (X±SD) (X±SD) (X±SD)大剂量20180.64±0.191.15±0.271.62±0.41中剂量20200.72±0.181.20±0.301.59±0.38小剂量20200.64±0.151.08±0.291.52±0.31生理盐水20200.78±0.161.23±0.351.70±0.31注实验8周，10周时，各死亡1只(大剂量组内)由表1可见给药前后对照组与给药组间无显著性差异。(P＞0.05)。
(三)对家兔血常规的影响见表2
(X±SD)小剂量抗癌粉针生理盐水对照组药前用药六周药后药前用药六周药后5.8±0.45.3±0.35.2±0.45.3±0.55.2±0.35.7±0.5×1012×1012×1012×1012×1012×1012100.5±9.2110.6±8.7109.5±9.499.7±8.4105±9.4103±8.743.5±4.540.6±6.139.9±4.944.5±5.642.7±5.843.6±6.2×109×109×109×109×109×1099.2±0.59.8±0.410.1±0.69.4±0.710.1±0.59.3±0.8×109×109×109×109×109×10939.5±4.440.1±5.139.7±3.840.5±6.039.4±5.758.6±4.33.1±0.23.7±0.33.8±0.43.9±0.43.8±0.34.1±0.42.8±0.052.7±0.042.6±0.052.4±0.042.7±0.032.8±0.0555.7±6.456.4±3.959.1±5.159.7±6.153.6±7.455.3±6.82.8±0.42.6±0.32.7±0.42.8±0.33.1±0.33.0±0.2由表2可看出除红细胞(大剂量组)外其他各组血液指标，对照组与给药组间无显著性差异(P＞0.05)。抗癌粉针大剂量组(1200mg/kg)用药六周后红细胞下降，用药结束时降至正常值以下(4.0±0.2)×1012与对照组比有统计学差异(P＜0.05)。
(四)、抗癌粉针剂长毒实验对肝、肾功能的影响见表4表4抗癌粉针剂长毒对肝、肾功能的影响(n＝20)BUN(nmol/L)药前用药六周药后4.74±0.294.83±0.414.95±0.504.94±0.385.15±0.525.01±0.414.87±0.344.94±0.384.90±0.474.50±0.414.75±0.604.94±0.37实验结果表明给药组与对照组药前、药后肝肾功能无显著性差异(P＞0.05)注血常规检测，肝、肾功能测定采用全国临床检验操作规程和临床生化检验的方法进行，BUN用乙酰-肟显色法测定，测定单位为nmol/L，GPT、GOT采用比色法测定，测定单位为nmol/L。
抗癌粉针剂药效学实验一、实验材料(一)实验用药抗癌粉针剂哈尔滨中药二厂出品，批号920527;环磷酰胺上海第十二制药厂出品，批号910308;呋喃氟尿嘧啶济南制药厂出品，批号900621。
(二)动物615纯系小鼠由中国医科院血液研究所提供;巴比系小鼠由哈尔滨医科大学动物医学部提供;昆明种小鼠由哈尔滨工农动物养殖厂提供。
(三)瘤株白血病L615小鼠，艾氏腹水癌(EAC)小鼠，小鼠肉瘤S180依次分别由中国医学科学院血液研究所、天津肿瘤研究所、黑龙江中医学院中药研究所提供。
二、实验方法与结果(一)抗癌粉针剂对小鼠S180的影响取小鼠(昆明种)，体重20±2g，雌雄兼用，按《全国抗肿瘤药物体内筛选规程》方法[1]接种，瘤源为接种九天，肿瘤生长良好的S180A，取出腹水，用灭菌生理盐水按1∶4比例稀释，制成肿瘤细胞混悬液，(5×106细胞/ml)分别以0.2ml/每只接种于小鼠右侧腋窝皮下，24h后随机分组，分组每天给药一次，腹腔注射给药途经，静脉注射给药途径，均为15天，停药后次日处死小鼠，取出瘤块称重，计算抑瘤率，结果见表1、表2。
表1 不同药物静注对小鼠S180的影响剂量动物数平均瘤重(g)抑瘤率P值组别 (mg/kg) (只) (X±SD) (%)抗癌粉针剂1200600.52±0.0855.93<0.01环磷酰胺50600.44±0.0662.71<0.01呋喃氟尿嘧啶240600.50±0.0757.63<0.01生理盐水同体积1051.18±0.11表2不同药物腹腔注射对S180小鼠的影响剂量动物数平均瘤重(g)抑瘤率P值组别 (mg/kg) (只) (X±SD) (%)抗癌粉针剂1800600.64±0.0745.00<0.05环磷酰胺75600.58±0.0652.07<0.01呋喃氟尿嘧啶300600.56±0.0853.72<0.01生理盐水同体积1051.21±0.13注表1各组小鼠药后体重下降14.8±2.1%，表2各组下降10.8±0.9%由表1、2可以看出，抗癌粉针剂无论腹腔注射给药，还是静注给药，都具有对抗小鼠S180的作用，并呈量效正相关。与对照组有显著性差异(P＜0.05)。(P＜0.01)。
(二)抗癌粉针剂对EAC小鼠的影响取巴比系小鼠，体重20±2g，雌雄兼用，按《全国抗肿瘤药物体内筛选规程》的方法接种，瘤源为接种7天肿瘤生长良好的EAC小鼠，取出腹水，用灭菌的生理盐水按1∶4比例稀释制成肿瘤细胞混悬液(5×106细胞/ml)，分别以0.2ml/只接种于小鼠腹腔内，24h后随机分组，给药同前，停药后次日处死小鼠，收集全部腹水，以TPCV法〔2〕，求出抑制率，结果见表3，表4。
表3不同药物静注对EAC小鼠的影响剂量动物数平均TPCV(ml)抑瘤率P值组别 (mg/kg) (只) (X±SD) (%)抗癌粉针剂1200601.58±0.4466.24<0.01环磷酰胺50601.31±0.4072.01<0.01呋喃氟尿嘧啶240601.49±0.5168.16<0.01生理盐水同体积1054.68±0.62注各组小鼠给药后体重下降6.8±0.31%表4不同药物腹注对EAC小鼠的影响剂量动物数平均TPCV(ml)抑瘤率P值组别 (mg/kg) (只) (X±SD) (%)抗癌粉针剂1800601.87±0.4967.14<0.01环磷酰胺75601.90±0.3866.61<0.01呋喃氟尿嘧啶300602.01±0.4163.09<0.01生理盐水同体积1055.69±0.74
注各组小鼠药后体重下降14.21±1.50%。
结果表明抗癌粉针剂腹注对EAC小鼠腹腔癌细胞的增殖有较强的抑制作用，其作用强度有大于静注的趋向。
(三)抗癌粉针剂对L615小鼠的影响取615系纯种小鼠，体重20±2g，雌雄兼用，按《全国抗肿瘤药物体内筛选规则》的方法接种，瘤源为接种5天生长良好的L615小鼠，在无菌条件下、取出脾脏，剪下50mg，用灭菌生理盐水匀浆，调整肿瘤细胞为5×105/ml，分别以0.2ml/只接种于小鼠腹腔内，24h后随机分组，连续给药7天，停药后观察小鼠存活时间并计算生命延长率，结果见表5、表6。
表5 不同药物静注L615小鼠的影响剂量动物数存活时间(天)生命延长率P值组别 (mg/kg) (只) (X±SD) (%)抗癌粉针剂12006010.98±0.8158.90<0.05环磷酰胺506011.94±0.7472.79<0.01呋喃氟尿嘧啶240607.41±0.647.24<0.05生理盐水同体积1056.91±0.75注各组小鼠用药后体重下降12.6±1.5%结果表明，抗癌粉针剂对白血病L615小鼠有延长生命作用。
表6 不同药物腹注对L615小鼠的影响剂量动物数存活时间(天)生命延长率P值组别 (mg/kg) (只) (X±SD) (%)抗癌粉针剂18006010.21±0.6454.93<0.05环磷酰胺756011.08±0.7068.13<0.01呋喃氟尿嘧啶300607.00±0.446.22<0.05生理盐水同体积1056.59±0.58结果显示，抗癌粉针剂对小鼠移植性肿瘤S180、EAC均有抑制作用，并可延长L615小鼠的生命，其抑制效果和延长生命作用均有量效线性关系，是一个作用较强的中药抗癌抑制剂。
注[1]全国抗肿瘤药物体内筛选规程第374页。日本上村稔-药学杂志105(27)188，1983本中药抗癌粉针剂经药理实验表明，采用静脉滴注给药，对小鼠S180的抑瘤率为55.93%，同组环磷酰胺为62.71%，呋喃氟尿嘧啶为57.63%;对EAC(艾氏腹水癌)的抑瘤率为66.24%，环磷酰胺为72.01%，呋喃氟尿嘧啶为68.16%;对L615小鼠的生命延长率为58.90%，环磷酰胺为72.79%，呋喃氟尿嘧定为7.24。可见本发明的产品疗效接近临床首选的环磷酰胺，呋喃氟尿嘧啶，而且安全，低毒副作用，可提高晚期癌患者的生存质量，延长生存时间。
对21例经病理诊断，影象学诊断确诊的癌症患者，多属无治疗意义的晚期病人，使用本发明药品，每人4～6支(2-3克)用5%葡萄糖250-500毫升稀释，静脉点滴，每日一次，14天为一个疗程，用药1-3疗程，每疗程间可休药7-10天。多数病例使用本药后，精神状态改善，食欲食量增加，疼痛及其它自觉症状明显减轻，减少了病人的痛苦，生存质量有很大的提高，个别病例肿块缩小。典型病例如下病人候××，65岁，男，诊断原发性肝细胞瘤，双锁骨上淋巴结转移，双肺转移瘤，腹腔淋巴结转移。CT检查肝左右叶各一处占位性病变，B超测量各为5.5×5.6cm及7.8×7.1cm。病人进行性消瘦，贫血外观，巩膜无黄染，两肺及心脏无著明阳性理学症，肝肋下6cm，剑突下11cm，表面不平滑，较硬，边缘饨，脐左上方触及8×6cm大小的肿物，较硬，无痛，无腹水症。一个疗程本发明药品治疗(14天，计27.5克)后腹部肿物明显减小为5.5×4.5cm，休药十天后进行第二疗程用药(14天，计42克)肿部肿物又稍缩小。用药期无任何不良反应，自觉良好及体力都有改善。
结合实施例进一步说明本发明的技术解决方案。
称取去头足干蜈蚣500克及去杂质金银花750克，用19000ml去离子水浸泡1小时，煎煮1.5小时，滤过，药渣用14000ml去离子水煎煮1小时，滤过。合并两次滤液，浓缩至在50℃温度下相对密度为1.15，冷却至10℃，缓缓加入95%乙醇，边加边充分搅拌，使含醇量达到75%，静止24小时，取上清液，减压回收乙醇至无醇味，得到相对密度为1.20(50℃)的浸膏。加适量去离子水，用20%NaOH调PH至6.80，充分搅拌，加热至沸，放置24小时，滤过，收集滤液，浓缩至相对密度为1.13(80℃测)，待冷至10℃。缓缓加入95%乙醇，边加边充分搅拌，使含醇量达到85%，静止48小时，取上清液，减压回收乙醇至无醇味，制成相对密度为1.18(85℃测)的浸膏。加适量去离子水，用20%NaOH调PH至7.0，加3克活性碳，搅匀，加热煮沸，并保持微沸20分钟，冷藏72小时，滤过，0.1MPa灭菌45分钟，冷藏120小时，滤过，滤液在0.1MPa灭菌30分钟，放冷至10℃，用20可NaOH调PH至7.6，浓缩至相对密度为1.10(85℃测)，0.1MPa灭菌30分钟，得半成品待用。与药液接触的所有管路、容器、介质经无菌处理，将半成品进入塔前罐。系统升温，使塔底温度达到100℃，并恒温1小时，开始喷粉，得无菌粉末83.6克，分装得146支粉针。
权利要求
1.一种中药抗癌粉针剂的制备方法，经水提取，浓缩，醇沉，灭菌，配剂，干燥等工序而制成，其特征在于用1份蜈蚣与1.5～2份金银花(重量)。
全文摘要
本发明涉及一种中药抗癌粉针剂的制备方法，将1份蜈蚣与1.5～2份金银花经水提取，浓缩，醇沉，灭菌，配剂，干燥而制成，供临床静脉点滴用。本药物对食管癌、胃癌、肝癌、白血病等多种癌患疗效佳，治愈率高，延长生存时间，提高生存质量，安全，无痛苦，低毒副作用。
文档编号A61K9/14GK1092680SQ9311800
公开日1994年9月28日 申请日期1993年9月22日 优先权日1993年9月22日
发明者郎伟君, 李晓冬 申请人:哈尔滨中药二厂