专利名称：组合使用具有fkbp12亲和性的化合物和神经营养因子刺激轴突生长的方法和组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及刺激神经细胞中轴突生长的方法和药物组合物。该组合物包含神经营养量的化合物和神经营养因子，例如神经生长因子(NGF)。该方法包括用上述组合物或含有该化合物但不含神经营养因子的组合物处理神经细胞。本发明的方法可用于促进由于疾病或身体创伤导致的神经元损害的修复。
背景技术：
神经疾病与神经元细胞的死亡和损伤有关。黑质中多巴胺能神经元的损失是帕金森病的病因。虽然早老性痴呆中神经退化的分子学机理尚未确立，但脑部炎症、β-淀粉样蛋白和其它这类物质的沉积可抑制神经元的存活和减缓用于神经元间传达的轴突的生长是清楚的。在患脑局部缺血或脊髓损伤的患者中，观察到大量神经元细胞的死亡。目前，对这类疾病尚缺乏满意的治疗。
神经疾病的典型治疗包括使用可抑制神经元细胞死亡的药物。新近的一种方法包括通过促进轴突长出(outgrowth)而促进神经再生。
轴突长出对神经元的存活十分重要，其在体外由神经生长因子(NGF)刺激。例如胶质细胞系衍化的神经营养因子(GDNF)在体内和体外均表现出神经营养活性，目前正被研究用于治疗帕金森病。胰岛素和胰岛素样生长因子显示出刺激大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞中以及在培养的交感和感觉神经元中的轴突生长[Recio-Pinto等，神经科学杂志(J.Neurosci.)，6，第1211-1219页(1986)]。胰岛素和胰岛素样生长因子在体内和体外还刺激损伤运动神经的再生[Near等，PNAS，pp.89，11716-11720(1992)；和Edbladh等，大脑研究(Brain Res.)，641，pp.76-82(1994)]。同样，成纤维细胞生长因子(FGF)刺激神经增殖[D.Gospodarowicz等，细胞分化(Cell Differ.)，19，p.1(1986)]和生长[M.A.Walter等，淋巴因子和细胞因子研究(Lymphokine Cytokine Res.)，12，p.135(1993)]。
然而，使用神经生长因子治疗神经疾病存在某些缺陷。它们不易穿透血脑屏障。它们在血浆中不稳定。此外，它们还具有较差的药物释放特性。
最近显示，有些小分子在体内也刺激轴突长出。在患神经疾病的个体中，这种对轴突长出的刺激作用避免了神经元进一步退化并加速神经细胞的再生。例如雌激素显示出促进轴索和树突的生长，它们是在发育或受损的成人大脑中通过神经细胞发送的彼此传达的轴突[C.Dominque Toran-Allerand等，甾体生物化学和分子生物学杂志(J.Steroid Biochem.Mol.Biol.)，56，pp.169-78(1996)；和B.S.McEwen等，大脑研究进展(Brain Res.Dev.Brain.Res.)，87，pp.91-95(1995)]。在服用雌激素的妇女中，早老性痴呆的发展减慢了。设想雌激素可补充NGF和其它神经营养蛋白，因此有助于神经元的分化和存活。
藤霉素(Tacrolimus)，一种免疫抑制药，与NGF在刺激PC12细胞以及感觉神经节的轴突长出中表现出协同作用[Lyons等，PNAS，91，pp.3191-3195(1994)]。该化合物还对脑局部缺血病灶表现出神经保护作用[J.Sharkey和S.P.Butcher，自然(Nature)，371，pp.336-339(1994)]并提高损伤坐骨神经中轴索的再生速率[Gold等，神经科学杂志(J.Neurosci.)，15，pp.7509-16(1995)]。
虽然各种神经变性疾病可通过刺激轴突长出进行治疗，但已知仅有极少的药物具有这种性质。因此，仍十分需要具有刺激患者轴突长出能力的新型可药用化合物和组合物。
发明概述申请人通过发现先前由一个共同申请人发明的可用于逆转多种抗药性的化合物也惊奇和出人意料地具有向神经活性而解决了上述问题。这些氨基酸衍生物公开于美国专利5543423中。
在外源性或内源性NGF的存在下，这些化合物刺激轴突长出。本文公开的组合物包含一种上述的这类化合物和一种神经元生长因子。本文公开的刺激轴突长出的方法单独采用上述氨基酸衍生物或结合采用上述氨基酸衍生物与神经元生长因子。这些方法用于治疗由各种神经疾病和身体创伤引起的神经损害以及应用在离体神经的再生中。
发明详述本发明提供包含三种成分的药物组合物。第一种成分是式(I)化合物及其可药用衍生物
其中R1、B和D独立地选自氢、Ar、(C1-C6)-直链或支链烷基、(C2-C6)-直链或支链链烯基或炔基、(C5-C7)环烷基取代的(C1-C6)-直链或支链烷基、(C5-C7)环烷基取代的(C3-C6)-直链或支链链烯基或炔基、(C5-C7)环烯基取代的(C1-C6)-直链或支链烷基、(C5-C7)环烯基取代的(C3-C6)-直链或支链链烯基或炔基，Ar取代的(C1-C6)-直链或支链烷基或Ar取代的(C3-C6)直链或支链链烯基或炔基；条件是R1不是氢。
R1、B和D的烷基链中的任一个CH2基团可选择性地被选自O、S、SO、SO2和NR的杂原子置换；其中R选自氢、(C1-C6)-直链或支链烷基、(C3-C4)-直链或支链链烯基或炔基或(C1-C4)桥连烷基。该(C1-C4)桥连烷基与氮和所述含杂原子链的碳原子一起形成一个环。该环也可任意地与Ar基稠合。
优选地，B和D独立地选自H、3-Pyr-(CH2)3-、4-Pyr-(CH2)2-、3-Im-(CH2)2-和Ph-(CH2)2-。R1优选选自CH3-、PhCH2-、4-Cl-PhCH2-、4-F-PhCH2-、4-PyCH2-和1H-Im-CH2-。
各个Ar独立地选自苯基、1-萘基、2-萘基、茚基、甘菊环基、芴基和蒽基，2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、2-吡唑啉基、吡唑烷基、异噁唑基、异三唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，3-三唑基、1，3，4-噻二唑基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、1，3，5-三嗪基、1，3，5-三噻烷基、中氮茚基、吲哚基、异氮杂茚基、3H-吲哚基、二氢吲哚基、苯并[b]呋喃基、苯并[b]噻吩基、1H-吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、喹啉基、1，2，3，4-四氢喹啉基、异喹啉基、1，2，3，4-四氢异喹啉基、肉啉基、2，3-二氮杂萘基、喹唑啉基、喹喔啉基、1，8-二氮杂萘基、蝶啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基或吩噁嗪基。
本发明优选的Ar基是苯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、咪唑基、吲哚基、异氮杂茚基、喹啉基、异喹啉基、1，2，3，4-四氢异喹啉基和1，2，3，4-四氢喹啉基。
Ar可任意地被一至三个独立地选自下述的取代基取代卤素、羟基、硝基、-SO3H、三氟甲基、三氟甲氧基、(C1-C6)-直链或支链烷基、O-((C1-C6)-直链或支链烷基)、0-苄基、0-苯基、1，2-亚甲二氧基、-NR5R6、羧基、N-((C1-C6)-直链或支链烷基、N-((C3-C5)直链或支链链烯基)羧酰胺、N，N-二-((C1-C6)-直链或支链烷基)、N，N-二-((C3-C5)-直链或支链链烯基)、羧酰胺、吗啉基、哌啶基、O-M、CH2-(CH2)q-M、O-(CH2)q-M、(CH2)q-O-M或CH＝CH-M。R5和R6独立地选自氢、(C1-C6)-直链或支链烷基、(C2-C6)-直链或支链链烯基或炔基或者苄基。或者R5和R6可一起形成5-7元杂环。M选自4-甲氧基苯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、pyrazyl、喹啉基、3，5-二甲基异噁唑基、2-甲基噻唑基、噻唑基、2-噻吩基、3-噻吩基、4-噻吩基或嘧啶基；q是0-2。
优选的Ar取代基是卤素、羟基、硝基、-SO3H、三氟甲基、(C1-C6)-直链或支链烷基、O-((C1-C6)-直链或支链烷基)和-NR5R6。
式(I)中的J选自(C1-C6)-直链或支链烷基、(C3-C6)直链或支链链烯基或炔基，Ar取代的(C1-C6)-直链或支链烷基或Ar取代的(C3-C6)直链或支链链烯基或炔基，或环己基甲基。优选J是甲基。
K选自(C1-C6)-直链或支链烷基、Ar取代的(C1-C6)-直链或支链烷基、(C2-C6)直链或支链链烯基或炔基或Ar取代的(C3-C6)直链或支链链烯基或炔基。优选K选自苯甲基、4-氯苯甲基和异丙基。
或者J和K与分别与它们相连的氮和碳原子一起形成5-7元杂环，该杂环可含有选自O、S、SO和SO2的杂原子；X选自Ar、-OR2或-NR3R4；其中R2与R1的定义相同；R3和R4独立地相同于B和D的定义。或者R3和R4可一起形成5-7元脂族或芳香族杂环。X优选是3，4，5-三甲氧基苯基。
m是0或1，优选为0。
本发明的化合物包括所有旋光异构体和外消旋异构体。
本文中采用的“可药用衍生物”是指本发明化合物或在对患者给药时能直接或间接提供本发明化合物的任何其它化合物的任何可药用盐、酯或这类酯的盐，或者它们的具有促进或增强轴突长出能力的代谢物或残留物。
按照一种优选实施方案，本发明的药物组合物包含式(II)化合物
和其可药用衍生物，其中J和K独立地选自(C1-C6)-直链或支链烷基或Ar取代的(C1-C6)-直链或支链烷基；并且w是1或2。
本发明另一种优选的药物组合物含有式(I)化合物，其中B和D中的至少一个由式-(CH2)r-Z-(CH2)s-Ar表示，其中各个Z独立地选自O、S、SO、SO2或NR；并且R选自氢、(C1-C4)直链或支链烷基、(C3-C4)直链或支链链烯基或炔基和(C1-C4)桥连烷基，其中桥是在氮和Ar基间形成的。
这些组合物的另一种优选实施方案包含式(III)化合物
和其可药用衍生物，其中J和K独立地选自(C1-C6)-直链或支链烷基或Ar取代的(C1-C6)-直链或支链烷基；并且w是1或2。
表I给出了本发明的优选化合物的实例。
表I
如果采用本发明化合物的可药用盐，那些盐优选由无机或有机酸和碱衍生。这类酸的盐包括下述乙酸盐、藻酸盐、己二酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐(glucoheptanoate)、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、果胶酯酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。碱盐包括铵盐、碱金属盐(如钠和钾盐)、碱土金属盐(如钙和镁盐)、与有机碱形成的盐(如二环己基胺盐、N-甲基-D-葡糖胺的盐)和与氨基酸(如精氨酸、赖氨酸等)形成的盐。此外，碱性含氮基团可用如下试剂季铵化，所述试剂是低级烷基卤化物，例如甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物或碘化物；二烷基硫酸酯，如二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸酯；长链卤化物，如癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基氯化物、溴化物和碘化物；芳烷基卤化物，如苄基和苯乙基溴化物和其它。由此可获得水溶性、油溶性或者水或油可分散性产物。
用于本发明组合物和方法的化合物也可通过增加适当的功能基而改性以提高选择性生物特性。这类改性是本领域已知的，包括增强向确定生物系统(如血液、淋巴系统、中枢神经系统)的生物渗透性、增强口服利用度、增强溶解性以便于注射给药、改变代谢和改变排泄速率。
上述各药物组合物中的第二种成分是神经营养因子。本文采用的术语“神经营养因子”是指能刺激神经组织生长或增殖的化合物。本申请中采用的术语“神经营养因子”不包括本文所述的化合物。
本领域中已鉴别出许多种神经营养因子，任何这类的因子均可用于本发明的组合物。这类神经营养因子包括，但不限于神经生长因子(NGF)、胰岛素生长因子(IGF-1)及其活性截断衍生物(如gIGF-1)、酸性和碱性的成纤维细胞生长因子(分别为aFGF和bFGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、脑衍生神经营养因子(BDNF)、睫状神经营养因子(CNTF)、神经胶质细胞系衍生的神经营养因子(GDNF)、神经营养蛋白-3(NT-3)和神经营养蛋白-4/5(NT-4/5)。本发明组合物中最优选的神经营养因子是NGF。
本发明的可药用组合物中的第三种成分是可药用载体。可用于这些药物组合物中的可药用载体包括，但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(如人血清白蛋白)、缓冲物质(如磷酸盐)、甘油、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、盐或电解质，如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、胶态二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素基的物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧化丙烯嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。
本发明的组合物可口服、胃肠外、吸入喷雾、局部、直肠、鼻、颊、阴道给药或通过植入储库给药。术语“胃肠外”包括皮下、静脉内、肌内、关节内、滑膜内、胸骨内、鞘内、肝内、损害内、颅内注射或输注技术。所述组合物优选口服、经腹膜内或静脉内给药。
本发明组合物的无菌注射形式可以是水或油悬浮液。这些悬浮液可根据本领域已知的技术，用适宜的分散剂或润湿剂和悬浮剂配制。无菌注射剂也可以是在无毒性的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液或悬浮液，例如在1，3-丁二醇中的溶液。在可接受的载体和溶剂中，可采用的有水、Ringer’s溶液和等渗氯化钠溶液。此外，常采用无菌的固定油作为溶剂或悬浮介质。为此，包括合成的甘油单酯或甘油二酯在内的任何温和的固定油均可采用。脂肪酸，如油酸及其甘油酯衍生物和天然的可药用油，如橄榄油或蓖麻油，尤其是它们的聚氧乙基化物一样可用于注射剂中。这些油的溶液或悬浮液还可含有长链醇稀释剂或分散剂，如Ph.Helv或类似的醇。
本发明的药物组合物可以任何可口服的剂型口服给药，所述剂型包括，但不限于胶囊、片剂、水悬浮液或水溶液。在口服片剂的情况下，常用的载体包括乳糖和玉米淀粉。通常也加入润滑剂，如硬脂酸镁。以胶囊形式口服给药时，可用的稀释剂包括乳糖和干燥玉米淀粉。当需要口服水悬浮液时，将活性成分与乳化剂和悬浮剂混合。如果需要，还可加入某些甜味剂、调味剂或着色剂。
或者，本发明的药物组合物可以栓剂形式经直肠给药。栓剂可通过将药物与适宜的非刺激性赋形剂混合而制备，所述赋形剂在室温下为固体，但在直肠温度下为液体，因而可在直肠中熔化而释放药物。这类材料包括可可脂、蜂蜡和聚乙二醇。
本发明的药物组合物还可局部给药，尤其是当所治疗的靶位包括适于局部应用的患面或器官时，包括眼、皮肤或下部肠道的疾病。用于这些患面和器官的适合的局部制剂很容易制备。
可以直肠栓剂(见上)或以适合的灌肠剂局部应用于下部肠道。还可使用局部经皮贴剂。
局部给药的药物组合物可配制成含有悬浮或溶于一种或多种载体中的活性成分的合适软膏。将本发明化合物局部给药的载体包括，但不限于矿物油、液体石蜡、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物，乳化蜡和水。或者，本发明的药物组合物可配制成含有悬浮或溶于一种或多种可药用载体中的活性成分的合适洗剂或霜剂形式。适宜的载体包括，但不限于矿物油、脱水山梨醇一硬脂酸酯、多乙氧基醚60、鲸蜡酯蜡、鲸蜡基硬脂醇(cetearylalcohol)、2-辛基十二烷醇、苄醇和水。
对于眼科应用，药物组合物可配制成在等渗的调节过pH的无菌盐水中的微粉悬浮液或优选配制成在等渗的调节过pH的无菌盐水中的溶液，其中可含或不合防腐剂，如氯苄烷铵。或者可将眼科用药物组合物配制成软膏，如凡士林软膏。
本发明的药物组合物还可通过鼻用气雾剂或吸入给药。这类组合物可采用制药领域熟知的技术制备，可用苄醇或其它适宜的防腐剂、提高生物利用度的吸收促进剂、碳氟化合物和/或其它常规增溶剂或分散剂配制为盐水溶液。
可与载体材料结合生产单一剂型的化合物与神经营养因子二者的量根据所治疗的宿主、特定给药方式的不同而不同。本发明药物组合物的两种活性成分协同作用以刺激轴突长出。因此，神经营养因子在这类组合物中的量将低于仅使用该因子的单一治疗所需的量。对接受该类组合物的患者而言，组合物优选配制成的给药剂量为0.01-100mg人合物/kg体重/天和0.01-100μg神经营养因子/kg体重/天。
应该理解，对于特定患者的特定给药剂量和治疗方案将取决于多种因素，包括使用的特定化合物活性、年龄、体重、健康状况、性别、日常饮食、给药时间、排泄率、联合用药和治疗医师的判断以及所治疗疾病的严重程度。活性成分的量也取决于组合物中的具体化合物和神经营养因子。
根据另一种实施方案，本发明提供刺激轴突长出的方法。在该实施方案的一方面，所述方法用于刺激患者轴突长出，并通过向患者施用含有上述任何化合物和可药用载体的可药用组合物来实现。化合物在这些方法中的用量为约0.01-100mg/kg体重/天。
在该实施方案的另一方面中，所述方法用于刺激离体神经的生长。在此，可将上述化合物直接应用于培养物中的神经细胞。本发明的该方面可用于离体神经的再生。
根据另一种实施方案，刺激轴突长出的方法包括用神经营养因子，例如在上述的本发明药物组合物中包含的那些治疗患者或处理在培养物中的离体神经细胞的附加步骤。该方案包括当施用于患者时，所述化合物和神经营养剂可以单一剂量形式或独立的多次剂量形式给药。如果采用独立的剂量形式，它们可同时、顺次或在彼此低于约5小时的时间内给药。
本发明的方法和组合物可用于治疗由各种疾病或身体创伤引起的神经损害。这些包括，但不限于早老性痴呆、帕金森病、ALS、多发性硬化症、中风和与中风有关的局部缺血、neural paropathy、其它神经退化性疾病、运动性神经元疾病、坐骨神经痛(sciatic crush)、外周神经病、尤其是与糖尿病有关的神经病、脊髓损伤和面神经痛。
为便于充分理解本发明，给出下面的实施例。应该理解，这些实施例仅是说明性的，而不是以任何方式对本发明的范围构成限制。实施例通用方法在Bruker AMX 500上于500MHz记录质子核磁共振(1HNMR)光谱。报告的化学位移值以相对于四甲基硅烷(δ0.0)的百万分之一为单位表示(δ)。分析高效液相色谱在Waters600E或Hewlett Packard1050液相色谱仪上进行。
实施例11.5-二(吡啶-4-基)-戊-1，4-二烯-3-酮(化合物1)往1，3-丙酮二羧酸(21.0g，0.144mmol)在无水乙醇(200ml)中的溶液中滴加4-吡啶甲醛(30.8g，0.288mmol)。在加入的整个过程中有气体放出。在室温搅拌2小时后反应物用浓盐酸(100ml)处理并加热到80℃，此时有黄色沉淀缓慢地形成。加入另外500ml乙醇后，搅拌该悬浮液。于80℃搅拌1小时后，过滤收集沉淀，用乙醇洗涤并真空干燥，得到黄色固体状的目的产物。将所得的二盐酸盐在二氯甲烷中重结晶，得到纯净的化合物1。
实施例21，5-二(吡啶-4-基)-戊-3-酮(化合物2)往化合物1(21.3g，67.4mmol)在1，4-二噁烷(40ml)中的浆状物中加入三乙胺(48.1ml，0.346mol)、甲酸(6.54ml，0.145mol)和10％钯/碳(0.7g)，并将所得的混合物加热至回流。回流下搅拌1小时后，将反应物冷却到室温，过滤并真空浓缩。所得残余物经硅胶色谱分离(用5％甲醇/二氯甲烷洗脱)，得到目的产物。
实施例3(4-氟苄基)-(3-(吡啶-4-基)-1-(2-(吡啶-4-基)乙基)丙基)胺(化合物3)往安装有Dean-Stark阱的烧瓶中加入化合物2(12.46g，51.91mmol)、4-氟苄胺(5.93ml，51.91mmol)和苯(50ml)，并将所得混合物加热至回流。收集930μl水后，将反应混合物冷却并浓缩。将残余物溶于乙醇(50ml)中，再将该混合物加到硼氢化钠(2.96g，77.8mmol)在乙醇(50ml)中的浆状物中，将该混合物加热到80℃并搅拌1小时。将反应混合物冷却并浓缩。将残余物溶于水中，用6N盐酸酸化到pH3.0。水相用乙酸乙酯洗涤两次。水相用氢氧化钠碱化至pH10并用二氯甲烷萃取两次产物。将有机相合并，用盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。残余物经硅胶色谱分离(用5％甲醇/二氯甲烷洗脱)，得到化合物3。
实施例4(S)-N-(4-氟苄基)-2-(N-甲基-N-叔丁基氨基甲酰基)氨基-3-苯基-N-(3-(吡啶-4-基)-1-(2-(吡啶-4-基)乙基)丙基)丙酰胺(化合物4)往化合物3(550mg，1.66mmol)和(L)-BOC-N-甲基-苯丙氨酸(700mg，2.5mmol)在含二异丙基乙基胺(300μL，1.72mmol)的二氯甲烷(4.0ml)中的溶液中加入(3-二甲氨基丙基)-3-乙基-碳化二亚胺盐酸盐(480mg，2.5mmol)并使该反应物搅拌48小时。用乙酸乙酯和水稀释反应物。分离各层，水相用乙酸乙酯再萃取。将有机相合并，用饱和碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。残余物经硅胶色谱分离(用5％甲醇/二氯甲烷洗脱)，得到化合物4。
实施例5(S)-N-(4-氟苄基)-2-甲氨基-3-苯基-N-(3-(吡啶-4-基)-1-(2-(吡啶-4-基)-乙基)丙基)丙酰胺(化合物5)将化合物4溶于二氯甲烷(10ml)，用三氟乙酸(4.0ml)处理。在室温搅拌1.5小时后，将反应物真空浓缩。残余物用饱和碳酸钾中和并用乙酸乙酯萃取两次。将萃取液合并，用水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到化合物5。
实施例6(S)-N-(4-氟苄基)-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)-3-苯基-N-(3-(吡啶-4-基)-1-(2-(吡啶-4-基)-乙基)丙基)丙酰胺(化合物6)往化合物5(500mg，0.98mmol)和3，4，5-三甲氧基苯甲酰基甲酸(3，4，5-trimethoxybenzyolformic acid)(294mg，1.22mmol)在含N，N-二甲基甲酰胺(0.4ml)的二氯甲烷(4.0ml)中的溶液中加入(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(235mg，1.22mmol)，将反应物搅拌24小时。反应物用乙酸乙酯和水稀释。分离各层，水相用乙酸乙酯再萃取。将有机相合并，用饱和碳酸氢钠、水和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。残余物经硅胶色谱分离(用5％甲醇/二氯甲烷洗脱)，得到目的产物。旋转异构体(rotomers)混合物的1HNMR(500MHz，CDCl3)δ8.48-8.44(m)，8.38(dd)，7.3 6-7.33(m)，7.28-7.18(m)，7.13-7.02(m)，6.97-6.87(m)，6.58(d)，6.00(dt)，5.81(t)，4.97(br，s)，4.81(d)，4.23-4.1 6(m)，3.93(s)，3.90(s)，3.85(s)，3.76(s)，3.59(dd)，3.28(dd)，3.20(s)，3.15(s)，3.04-2.96(m)，3.02(s)，3.01(s)，2.94(dd)，2.63(dt)，2.53-2.37(m)，1.92-1.78(m)，1.72-1.62(m)，1.52-1.42(m).
实施例7(S)-N-苄基-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)-3-苯基-N-(3-(吡啶-4-基)-1-(2-(吡啶-4-基)-乙基)丙基)丙酰胺(化合物7)按照实施例3-6的方案，用苄胺代替4-氟苄胺制备化合物7。旋转异构体混合物的1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.48(dd)，8.53(dd)，8.43(dd)，8.35(dd)，7.38(d)，7.30-7.18(m)，7.17-7.02(m)，6.93(s)，6.89(d)，6.54(d)，6.03(dd)，5.86(t)，3.08(br，d)，4.88(d)，4.32-4.18(m)，3.95(s)，3.89(s)，3.86(s)，3.73(s)，3.63(dd)，3.23-3.19(m)，3.09(dd)，3.05(s)，3.03(s)，2.97(dd)，2.63(dt)，2.57-2.37(m)，2.24(dt)，2.06(m)，1.95-1.76(m)，1.74-1.63(m)，1.54-1.44(m).
实施例8(S)-N-(4-氯苄基)-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)-3-苯基-N-(3-(吡啶-4-基)-1-(2-(吡啶-4-基)-乙基)丙基)丙酰胺(化合物8)按照实施例3-6的方案，用4-氯苄胺代替4-氟苄胺制备化合物8。旋转异构体混合物的1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.49(dt)，8.45(dd)，8.40 (dd)，7.69(d)，7.31-7.14(m)，7.12(s)，7.08-7.03(m)，6.98(s)，6.94-6.91(m)，6.85(d)，6.02(dd)，5.79(t)，4.99(br d)，4.83(d)，4.22-4.16(m)，3.96(m)，3.91(s)，3.88(s)，3.87(s)，3.81(5)，3.78(s)，3.61(dd)，3.33(dd)，3.21(s)，3.17(s)，3.04(s)，3.03(s)，3.03-3.00(m)，2.95(dd)，2.65(dt)，2.56-2.40(m)，2.28(dt)，1.90-1.80(m)，1.75-1.66(m)，1.52-1.43(m).
实施例9(S)-N-苄基-3-(4-氯苯基)-2-(甲基-(2-氧代)2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)-N-(3-(吡啶-4-基)-1-(2-(吡啶-4-基)-乙基)丙基)丙酰胺(化合物9)按照实施例3-6的方案，用苄胺代替4-氟苄胺且用(L)-BOC-N-甲基-4-氯苯丙氨酸代替(L)-BOC-N-甲基苯丙氨酸制备化合物9。旋转异构体混合物的1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.48(dd)，8.45(dt)，8.38(dd)，7.32-6.87(m)，6.58(d)，5.94(dd)，5.78(t)，5.05(brd)，4..83(d)，4.26(dd)，4.15(m)，3.97(s)，3.89(s)，3.86(s)，3.75(s)，3.57(dd)，3.20(s)，3.15(s)，3.15-3.09(m)，3.05-2.96(m)，3.01(s)，3.00(s)，2.91(dd)，2.65-2.38(m)，2.26(dt)，1.94-1.47(m).
实施例10(S)-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)-3-苯基-N-(4-苯丁基)-N-[(吡啶-4-基)-甲基]丙酰胺(化合物10)按照实施例3-6的方案，用4-苯丁胺代替4-氟苄胺且用4-吡啶甲醛代替化合物2制备化合物10。旋转异构体混合物的1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.46(dd)，8.42(dd)，7.30-7.23(m)，7.18-7.11(m)，7.11(s)，7.10(s)，6.90(d)，6.77(d)，5.88(t)，5.60(dd)，4.85(d)，4.50(d)，4.28(d)，3.93(s)，3.83(s)，3.81(s)，3.80(s)，3.65-3.50(m)，3.37(m)，3.20-3.15(m)，3.08-3.06(m)，3.06(s)，3.05(s)，2.92(dd)，2.60(m)，2.54(m)，1.60-1.48(m)，1.38-1.28(m).
实施例111，7-二(吡啶-4-基)-庚-4-酮(化合物11)在0℃下，往1，7-二(吡啶-4-基)-庚-4-醇(4.1g，15.2mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中加入溴化钾(180mg)和2，2，6，6-四甲基-1-哌啶氧游离基(71mg)。往所得混合物中滴加碳酸氢钠(510mg)在次氯酸钠(65ml)中的溶液。添加完毕后，将反应混合物温热到室温并搅拌30分钟。该混合物用乙酸乙酯和水稀释。分离各层，水层用乙酸乙酯再萃取。将有机相合并，用水和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。残余物经硅胶色谱分离(用5％甲醇/二氯甲烷洗脱)，得到化合物11。
实施例12(S)-N-苄基-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)-3-苯基-N-(3-(吡啶-4-基)-1-(2-(吡啶-4-基)-丙基)丁基)丙酰胺(化合物12)按照实施例3-6的方案，用苄胺代替4-氟苄胺且用化合物11代替化合物2制备化合物12。旋转异构体混合物的1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.43-8.38(m)，8.30(m)，8.16(m)，7.53-7.45(m)7.34(m)，7.32(m)，7.2 6-7.22(m)，7.19-7.07(m)，7.00-6.83(m)，5.89(dd)，5.72(t)，4.90(d)，4.72(d)，4.10(d)，4.00(d)，3.93(s)，3.91(s)，3.85(s)，3.74(s)，3.52(dd)，3.16-3.10(m)，3.04(s)，2.99(dd)，2.93(s)，2.8 4(dd)，2.67-2.38(m)，2.30(m)，2.22(m)，1.63-1.12(m)，0.94(m).
实施例13甲基-(3-(吡啶-4-基)-1-(2-(吡啶-4-基)-乙基)丙基)胺(化合物13)往甲胺盐酸盐(1.7g，25.4mmol)和乙酸钠(2.5g，30.48mmol)在甲醇(20ml)中的浆状物中加入化合物2(1.21g，5.08mmol)的甲醇(5ml)溶液。所得混合物用氰基硼氢化钠(370mg，6.09mmol)的甲醇(5ml)溶液处理并加热到80℃。于80℃加热1小时后，将反应物冷却到室温并真空浓缩。残余物溶于二氯甲烷和2N氢氧化钠中。分离各层，有机相用盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到化合物13。
实施例14(S)-N-甲基-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)-3-苯基-N-(3-(吡啶-4-基)-1-(2-(吡啶-4-基)-乙基)丙基)丙酰胺(化合物14)按照实施例4-6的方案，用化合物13代替化合物3制备化合物14。旋转异构体混合物的1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.50-8.46(m)，8.37(d)，7.32-7.26(m)，7.21-7.16(m)，7.10-7.06(m)，6.97(dd)，6.93(d)，5.93(d)，5.5 4(t)，4.72(br，s)，4.17(m)，3.94(s)，3.92(s)，3.84(s)，3.82(s)，3.51(dd)，3.38(dd)，3.29(s)，3.11(dd)，3.06(s)，3.00(s)，2.97(dd)，2.86(s)，2.82(s)，2.49(m)，2.37-2.23(m)，2.17-1.98(m)，1.85-1.55(m).
实施例15(S)-N-甲基-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)-3-苯基-N-(3-(吡啶-4-基)-1-(2-(吡啶-4-基)-丙基)丁基)丙酰胺(化合物15)按照实施例13和14的方案，用化合物11代替化合物2制备化合物15。旋转异构体混合物的1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.44-8.38 (m)，8.37-8.30(m)，7.50-7.43(m)，7.38-7.08(m)，7.04(s)，7.03-6.98(m)，6.90-6.86(m)，5.83(dd)，5.74(t)4.75(t)，4.65(m)，3.94-3.93(m)，3.92(s)，3.90(s)，3.84(s)，3.83(s)，3.44(dd)，3.32(dd)，3.20(s)，3.01(dd)，2.95(s)，2.91(s)，2.87(dd)，2.59(s)，2.58-2.37(m)，1.68-1.00(m).
实施例16(S)-4-甲基-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)戊酸苄基(3-(吡啶-4-基)-1-(2-(吡啶-4-基)-乙基)丙基)酰胺(化合物16)按照实施例3-6的方案，用苄胺代替4-氟苄胺且用(S)-BOC-N-甲基亮氨酸代替(L)-BOC-N-甲基苯丙氨酸制备化合物16。
实施例17(S)-4-甲基-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)戊酸4-氟苄基(3-(吡啶-4-基)-1-(2-(吡啶-4-基)-乙基)丙基)酰胺(化合物17)按照实施例4-6的方案，用(S)-BOC-N-甲基亮氨酸代替(L)-BOC-N-甲基苯丙氨酸制备化合物17。旋转异构体混合物的1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.48(m)，8.45(d)，7.32(m)，7.18(s)，7.12(s)，7.09-6.92(m)，6.84(d)，5.72(dd)，5.48(dd)，4.99(brd)，4.68(d)，4.42(d)，4.36(d)，4.29(m)，3.94(s)，3.91(s)，3.87(s)，3.83(s)，2.96(s)，2.92(s)，2.69(dt)，2.62-2.55(m)，2.52-2.44(m)，2.12-1.73(m)，1.63-1.57(m)，1.48-1.39(m)，1.23(m)，1.03(t)，0.90(d)，0.69(d).
实施例18(S)-4-甲基-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)戊酸4-氯苄基(3-(吡啶-4-基)-1-(2-(吡啶-4-基)-乙基)丙基)酰胺(化合物18)按照实施例3-6的方案，用4-氯苄胺代替4-氟苄胺且用(S)-BOC-N-甲基亮氨酸代替(L)-BOC-N-甲基苯丙氨酸制备化合物18。旋转异构体混合物的1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.50(m)，8.47(d)，7.38(d)，7.30-7.26(m)，7.19(s)，7.13(s)，7.10(d)，7.04(d)，6.98(d)，6.84(d)，5.73(dd)，5.47(dd)，5.03(br d)，4.69(d)，4.42(d)，4.36(d)，4.31(m)，3.95(s)，3.93(s)，3.8 8(s)，3.84(s)，2.97(s)，2.94(s)，2.70(dt)，2.63-2.43(m)，2.12-1.56(m)，1.48-1.40(m)，1.25(m)，1.04(t)，0.91(d)，0.70(d).
实施例19(S)-N-(4-氟苄基)-3-(4-氯苯基)-2-(甲基-(2-氧代-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)-N-(3-(吡啶-4-基)-1-(2-(吡啶-4-基)-乙基)丙基)丙酰胺(化合物19)按照实施例4-6的方案，用(L)-BOC-N-甲基-4-氯苯丙氨酸代替(L)-BOC-N-甲基苯丙氨酸制备化合物19。旋转异构体混合物的1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.49-8.41(m)，7.34(s)，7.28-7.20(m)，7.10-6.90(m)，6.64(d)，5.92(dd)，5.74(t)，4.95(brd)，4.74(d)，4.24-4.13(m)，3.94(s)，3.90(s)，3.86(s)，3.77(s)，3.54(dd)，3.23-3.17(m)，2.99(s)，2.98(s)，2.90(d)，2.63(dt)，2.59-2.37(m)，2.28(dt)，1.94-1.70(m)，1.57-1.47(m).
实施例20(4-氯苄基)-(3-咪唑-1-基-丙基)胺(化合物20)在0℃下，往1-(3-氨基丙基)咪唑(2.1g，16.8mmol)、二异丙基乙基胺(3.5ml，20.0mmol)和4-N，N-二甲基氨基吡啶(200mg，1.7mmol)在二氯甲烷(15ml)中的溶液中滴加4-氯苯甲酰氯(2.1ml，16.8mmol)。然后使反应物温热到室温。5小时后，反应物用二氯甲烷稀释，用1N氢氧化钠、盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到白色固体。该物质用乙醚洗涤，得到N-(3-咪唑-1-基-丙基)-4-氯苯甲酰胺。往上述酰胺(1.58g，6.0mmol)在四氢呋喃(30ml)中的浆状物中缓慢加入氢化铝锂(456mg，12.0mmol)，此期间该反应放热。将该混合物加热到80℃，搅拌1小时，冷却到0℃并加入水(0.5ml)、15％氢氧化钠(0.5ml)和另外1.5ml水来使反应停止。该反应物用乙酸乙酯稀释，经无水硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到化合物20。
实施例21(S)-N-(4-氯苄基)-N-(3-咪唑-1-基-丙基)-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-乙酰基)-氨基)-3-苯基丙酰胺(化合物21)按照实施例4-6的方案，用化合物20代替化合物3制备化合物21。旋转异构体混合物的1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.48(m)，7.44(brs)，7.37(br s)，7.30-7.16(m)，7.10-7.02(m)，6.95(d)，6.83(m)，5.78(t)，5.72(t)，4.77(d)，4.57(d)，4.26(dd)，3.94(s)，3.93(s)，3.88-3.77(m)，3.80(s)，3.48(dt)，3.42-3.33(m)，3.19-3.14(m)，3.13(s)，3.12(s)，3.13-2.97(m)，2.89(t)，2.80(m)，2.74(t)，2.65(m)，2.08-1.98(m)，1.90(m)，1.80-1.60(m).
实施例22N-(1H-咪唑-2-基-甲基)-N-(1-苯乙基-3-苯基丙基)胺(化合物22)往1，5-二苯基戊烷-3-酮(5.26g，22.1mmol)、乙酸铵(8.52g，110.5mmol)和乙酸钠(9.06g，110.5mmol)在甲醇(80ml)的溶液中加入氰基硼氢化钠(1.67g，26.52mmol)的甲醇(20ml)溶液，然后将反应物加热至回流。回流下搅拌30分钟后，将反应物冷却并浓缩至干。将残余物分配于二氯甲烷和2N氢氧化钠之间。分离有机相，用盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。残余物经硅胶色谱分离(用2-5％甲醇/二氯甲烷洗脱)，得到N-(1-苯乙基-3-苯基-丙基)胺。往上述胺(2.1g，8.82mmol)在乙醇(50ml)的溶液中加入2-咪唑甲醛(813mg，8.47mmol)并将反应物加热到50℃。搅拌2小时后，所得的均匀溶液用硼氢化钠(400mg，10.58mmol)处理并搅拌过夜。将反应物浓缩至干，残余物分配于二氯甲烷和2N氢氧化钠之间。分离有机相，用盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。残余物经硅胶色谱分离(用5％甲醇/二氯甲烷洗脱)，得到化合物22。
实施例23(S)-N-(1H-咪唑-2-基-甲基)-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)-N-(1-苯乙基-3-苯基-丙基)-3-苯基丙酰胺(化合物23)按照实施例4-6的方法，用化合物22代替化合物3，制备化合物23。旋转异构体化合物的1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.40-7.00(m)，6.95-6.87(m)，5.95(t)，5.69(t)，4.66(d)，4.46(d)，4.12(m)，3.94(s)，3.92(s)，3.82(s)，3.81(s)，3.80(s)，3.47(s)，3.43(dd)，3.34(dd)，3.22(s)，3.15(s)，3.03(dd)，3.00(s)，2.60(dt)，2.45-2.22(m)，1.80-1.78(m).
实施例24为直接测定本发明中描述的化合物的神经营养活性，用如Lyons等(1994)描述的嗜铬细胞瘤PC12细胞进行轴突长出分析。
将PC12细胞在37℃和和5％CO2下在Dulbecco改进的Eagle培养基(DMEM)中保持，所述培养基中补加有10％加热灭活的马血清、5％加热灭活的胎牛血清(FBS)和1％谷氨酸盐。然后将细胞以每孔105个细胞的密度置于涂有5μg/cm2大鼠尾胶原的96孔板上并放置过夜。然后用DMEM、2％加热灭活的马血清、1％甘氨酸盐、1-5ng/ml NGF(Sigma)和不同浓度的化合物(0.1nM-10nM)替换培养基。将不加化合物的105ng/ml NGF单独加到背景对照培养液中。将高浓度的NGF(50ng/ml)加到阳性对照培养基中。
与背景对照培养液相比，本发明中描述的化合物可明显增强轴突长出。
虽然我们在上文中提供了许多本发明的实施方案，但显然可以改变基本结构，从而提供利用本发明方法的其它实施方案。因此，应该清楚本发明的范围由附加的权利要求书限定，而非由上文以实施例提供的具体实施方案限定。
权利要求
1.一种可药用组合物，包含a)神经营养量的式(I)化合物及其可药用衍生物
其中R1、B和D独立地为氢、Ar、(C1-C6)-直链或支链烷基、(C2-C6)-直链或支链链烯基或炔基、(C5-C7)环烷基取代的(C1-C6)-直链或支链烷基、(C5-C7)环烷基取代的(C3-C6)-直链或支链链烯基或炔基、(C5-C7)环烯基取代的(C1-C6)-直链或支链烷基、(C5-C7)环烯基取代的(C3-C6)-直链或支链链烯基或炔基，Ar取代的(C1-C6)-直链或支链烷基或Ar取代的(C3-C6)直链或支链链烯基或炔基；条件是R1不是氢；其中R1、B和D中所述烷基链的任一个CH2基团可选择性地被O、S、SO、SO2或NR置换；其中R为氢、(C1-C6)-直链或支链烷基、(C3-C4)-直链或支链链烯基或炔基或(C1-C4)桥连烷基，其中在氮和所述烷基链的碳原子之间形成桥而形成一个环，且其中所述环可任意地与Ar稠合；其中Ar各自独立地选自苯基、1-萘基、2-萘基、茚基、甘菊环基、芴基，蒽基，2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、2-吡唑啉基、吡唑烷基、异噁唑基、异三唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，3-三唑基、1，3，4-噻二唑基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、1，3，5-三嗪基、1，3，5-三噻烷基、中氮茚基、吲哚基、异氮杂茚基、3H-吲哚基、二氢吲哚基、苯并[b]呋喃基、苯并[b]噻吩基、1H-吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、喹啉基、1，2，3，4-四氢喹啉基、异喹啉基、1，2，3，4-四氢异喹啉基、肉啉基、2，3-二氮杂萘基、喹唑啉基、喹喔啉基、1，8-二氮杂萘基、蝶啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基或吩噁嗪基；以及其中各个Ar可任意和独立地被一至三个独立地选自下述的取代基取代氢、卤素、羟基、硝基、-SO3H、三氟甲基、三氟甲氧基、(C1-C6)-直链或支链烷基、O-((C1-C6)-直链或支链烷基)、O-苄基、O-苯基、1，2-亚甲二氧基、-NR5R6、羧基、N-(C1-C6-直链或支链烷基或C3-C5直链或支链链烯基)羧酰胺、N，N-二-((C1-C6)-直链或支链烷基或(C3-C5)-直链或支链链烯基)、羧酰胺、吗啉基、哌啶基、O-M、CH2-(CH2)q-M、O-(CH2)q-M、(CH2)q-O-M或CH＝CH-M；其中R5和R6独立地选自氢、(C1-C6)-直链或支链烷基、(C2-C6)-直链或支链链烯基或炔基、苄基，或者R5和R6可一起形成5-7元杂环；M选自4-甲氧基苯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、pyrazyl、喹啉基、3，5-二甲基异噁唑基、2-甲基噻唑基、噻唑基、2-噻吩基、3-噻吩基、4-噻吩基或嘧啶基；并且q是0-2；J选自(C1-C6)-直链或支链烷基、(C3-C6)-直链或支链链烯基或炔基、Ar取代的(C1-C6)-直链或支链烷基或Ar取代的(C3-C6)直链或支链链烯基或炔基，和环己基甲基；K选自(C1-C6)-直链或支链烷基、Ar取代的(C1-C6)-直链或支链烷基、(C2-C6)-直链或支链链烯基或炔基或Ar取代的(C3-C6)直链或支链链烯基或炔基；或者J和K与分别与它们相连的氮和碳原子一起形成5-7元杂环，该杂环可含有选自O、S、SO和SO2的杂原子；X选自Ar、-OR2或-NR3R4；其中R2与R1具有相同含义；R3和R4独立地相同于B和D的定义；或者R3和R4可一起形成5-7元脂族或芳香族杂环；并且m是0或1；b)神经营养因子；和c)可药用载体。
2.权利要求1的可药用组合物，其中所述化合物具有式(II)结构
其中J和K独立地为(C1-C6)-直链或支链烷基或Ar取代的(C1-C6)-直链或支链烷基；并且w是1或2。
3.权利要求1的可药用组合物，其中B和D中的至少一个独立地由式-(CH2)r-Z-(CH2)s-Ar表示，其中r是1-4；s是0-1；并且各个Z独立地选自O、S、SO、SO2或NR；其中R选自氢、(C1-C4)直链或支链烷基、(C3-C4)直链或支链链烯基或炔基和(C1-C4)桥连烷基，其中桥是在氮和Ar基间形成的。
4.权利要求3的可药用组合物，其中所述化合物具有式(III)结构
其中J和K独立地为(C1-C6)-直链或支链烷基或Ar取代的(C1-C6)-直链或支链烷基；并且w是1或2。
5.权利要求1的可药用组合物，其中各个Ar基独立地选自苯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、咪唑基、吲哚基、异氮杂茚基、喹啉基、异喹啉基、1，2，3，4-四氢异喹啉基和1，2，3，4-四氢喹啉基；并且各个Ar可任意且独立地包含一至三个独立地选自下述的取代基羟基、硝基、三氟甲基、(C1-C6)直链或支链烷基、O-((C1-C6)直链或支链烷基)、卤素、SO3H或-NR3R4。
6.权利要求2的可药用组合物，其中所述化合物选自表I中所定义的化合物6-10、12、14-19、21或23。
7.权利要求6的可药用组合物，选自(S)-N-甲基-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)-3-苯基-N-(3-吡啶-4-基-1-(2-吡啶-4-基-乙基)丙基)丙酰胺(化合物7)；(S)-N-甲基-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)-3-苯基-N-(3-(吡啶-3-基)-1-(2-(吡啶-3-基)-丙基)丁基)丙酰胺(化合物8)；(S)-N-甲基-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)-3-(4-氯苯基)-N-(3-吡啶-4-基-1-(2-吡啶-4-基)-乙基)丙基)丙酰胺；或(S)-N-甲基-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)-3-(4-氯苯基)-N-(3-(吡啶-3-基)-1-(2-(吡啶-3-基)-丙基)丁基)丙酰胺。
8.权利要求1的可药用组合物，其中所述神经营养因子选自神经生长因子(NGF)、胰岛素生长因子(IGF)及其活性截断衍生物、酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、脑衍生神经营养因子(BDNF)、睫状神经营养因子(CNTF)、神经胶质细胞衍生的神经营养因子(GDNF)、神经营养蛋白-3(NT-3)和神经营养蛋白-4/5(NT-4/5)。
9.权利要求8的可药用组合物，其中所述神经营养因子是神经生长因子(NGF)。
10.一种刺激患者或离体神经细胞的轴突生长的方法，包括向所述患者或所述神经施用神经营养量的式(I)化合物及其可药用衍生物的步骤
其中R1、B、D、J、K、X和m如权利要求1中所定义。
11.权利要求10的方法，其中所述化合物具有式(II)结构
其中J、K和w如权利要求2所定义。
12.权利要求10的方法，其中B或D中的至少一个独立地由式-(CH2)r-Z-(CH2)s-Ar表示，其中r、s和Z如权利要求3所定义。
13.权利要求12的方法，其中所述化合物具有式(III)结构
其中J、K和w如权利要求4所定义。
14.权利要求10的方法，其中各个Ar基独立地选自苯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、咪唑基、吲哚基、异氮杂茚基、喹啉基、异喹啉基、1，2，3，4-四氢异喹啉基或1，2，3，4-四氢喹啉基；并且各个Ar可任意且独立地包含一至三个独立选自下述的取代基羟基、硝基、三氟甲基、(C1-C6)直链或支链烷基、O-((C1-C6)直链或支链烷基)、卤素、SO3H或-NR3R4。
15.权利要求11的方法，其中所述化合物选自表I中所定义的化合物6-10、12、14-19、21或23。
16.权利要求15的方法，其中所述化合物选自(S)-N-甲基-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)-3-苯基-N-(3-吡啶-4-基-1-(2-吡啶-4-基-乙基)丙基)丙酰胺(化合物7)；(S)-N-甲基-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)-3-苯基-N-(3-(吡啶-3-基)-1-(2-(吡啶-3-基)-丙基)丁基)丙酰胺(化合物8)；(S)-N-甲基-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)-3-(4-氯苯基)-N-(3-吡啶-4-基-1-(2-吡啶-4-基)-乙基)丙基)丙酰胺；或(S)-N-甲基-2-(甲基-(2-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙酰基)氨基)-3-(4-氯苯基)-N-(3-(吡啶-3-基)-1-(2-(吡啶-3-基)-丙基)丁基)丙酰胺。
17.根据权利要求10-16任一项的方法，其中将所述化合物与可药用载体一起配制成可药用组合物对患者给药。
18.权利要求17的方法，其中所述方法用于治疗患有早老性痴呆、帕金森病、ALS、多发性硬化症、中风和与中风有关的局部缺血、neural paropathy、其它神经退化性疾病、运动性神经元疾病、坐骨神经痛、外周神经病、糖尿病神经病、脊髓损伤或面神经痛的患者。
19.权利要求18的方法，包括向所述患者施用作为与所述化合物组成的多次剂量形式的一部分或作为单独的剂量形式的神经营养因子的附加步骤。
20.权利要求19的方法，其中所述的神经营养因子选自神经生长因子(NGF)、胰岛素生长因子(IGF)及其活性截断衍生物、酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、脑衍生神经营养因子(BDNF)、睫状神经营养因子(CNTF)、神经胶质细胞衍生的神经营养因子(GDNF)、神经营养蛋白-3(NT-3)和神经营养蛋白-4/5(NT-4/5)。
21.权利要求20的方法，其中所述神经营养因子是神经生长因子(NGF)。
22.权利要求18-21任一项的方法，其中所述患者患有与糖尿病有关的外周神经病。
28.权利要求10-16任一项的方法，其中所述方法用于刺激离体神经的再生。
24.权利要求23的方法，包括将所述神经细胞与神经营养因子接触的附加步骤。
25.权利要求24的方法，其中所述的神经营养因子选自神经生长因子(NGF)、胰岛素生长因子(IGF)及其活性截断衍生物、酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、脑衍生神经营养因子(BDNF)、睫状神经营养因子(CNTF)、神经胶质细胞衍生的神经营养因子(GDNF)、神经营养蛋白-3(NT-3)和神经营养蛋白-4/5(NT-4/5)。
26.权利要求25的方法，其中所述神经营养因子是神经生长因子(NGF)。
全文摘要
本发明涉及刺激神经细胞中轴突生长的方法和药物组合物。该组合物包含神经营养量的化合物和神经营养因子，例如神经生长因子(NGF)。该方法包括用上述组合物或含有该化合物但不含神经营养因子的组合物处理神经细胞。本发明的方法可用于促进由于疾病或身体创伤导致的神经元损害的修复。
文档编号A61P25/28GK1239433SQ97180246
公开日1999年12月22日 申请日期1997年11月13日 优先权日1996年11月13日
发明者R·E·采勒, M·苏 申请人:沃泰克斯药物股份有限公司