布包绕，暴露右侧输尿管，在距离右肾下级15cm处，用 长2cm，宽Icm的聚乙烯片包绕，并在聚乙烯片上沿两端用10号手术线结扎，使右侧输尿管 完全梗阻，还纳肠攀，37°C，0. 9%生理盐水反复冲洗肠攀并用吸引器吸出盐水，腹腔注入青 霉素16万单位/kg，逐层缝合关闭腹腔；
[0031](三）再通手术：5天后按照上述操作步骤进行麻醉，待麻醉生效后将猪至于恒温 37°C手术台上，所有步骤遵循无菌操作，常规备皮、铺无菌洞巾，将原切口打开，逐层分离皮 肤直达脏层腹膜，打开腹腔，翻开肠攀，将肠攀用37°C生理盐水浸湿的纱布包绕，找到右侧 输尿管，充分暴露结扎处输尿管，此时可见结扎处输尿管较正常狭窄，将结扎输尿管的手术 线及聚乙烯管一并去除，用手轻轻按摩结扎处输尿管，可见狭窄、迂曲、发白的输尿管逐渐 恢复正常粗细，且血运丰富，梗阻的输尿管完全再通，留取双侧肾活检组织约200毫克，并 留取双侧分肾静脉血清标本，还纳肠攀，37°C，0. 9%生理盐水反复冲洗肠攀并用吸引器吸 出盐水，腹腔注入青霉素16万单位/kg，逐层缝合关闭腹腔；
[0032](四）继续将梗阻再通后的实验猪于动物室内行标准观察、饲养，再通7天、14天 及21天时分别再次行手术，打开腹腔留取肾组织及血清标本，动态观察肾脏功能及组织病 理学改变。
[0033] 实施例2
[0034] 包括下列步骤：
[0035](一）选择实验动物，所选实验猪为广西巴马香猪，月龄3个月，体重8-10公斤，饲 养符合标准动物饲养条件，18_25°C，12小时光/暗周期，每只猪每天喂养猪饲料2次，每次 250g；
[0036](二）造模手术，实验动物术前禁食水12小时，用地西泮、氯胺酮和速眠新II联合 麻醉法，麻醉具体操作过程：先给予氯胺酮20mg/kg肌肉注射，60秒后动物摇晃倒地，肌肉 松弛，再给予地西泮lmg/kg肌肉注射，速眠新0. 15ml/kg肌肉注射，120秒麻醉生效，将猪置 于37°C恒温手术台，所有手术步骤遵循无菌操作，常规备皮、铺无菌洞巾，戴无菌帽子、口罩 及手套，皮肤消毒后取腹部正中切口，l〇cm，逐层分离皮肤直达脏层腹膜，打开腹腔，翻开肠 攀，将肠攀用37°C生理盐水浸湿的纱布包绕，暴露右侧输尿管，在距离右肾下级15cm处，用 长2cm，宽Icm的聚乙烯片包绕，并在聚乙烯片上沿两端用10号手术线结扎，使右侧输尿管 完全梗阻，还纳肠攀，37°C，0. 9%生理盐水反复冲洗肠攀并用吸引器吸出盐水，腹腔注入青 霉素16万单位/kg，逐层缝合关闭腹腔；
[0037](三）再通手术：5天后按照上述操作步骤进行麻醉，待麻醉生效后将猪至于恒温 37°C手术台上，所有步骤遵循无菌操作，常规备皮、铺无菌洞巾，将原切口打开，逐层分离皮 肤直达脏层腹膜，打开腹腔，翻开肠攀，将肠攀用37°C生理盐水浸湿的纱布包绕，找到右侧 输尿管，充分暴露结扎处输尿管，此时可见结扎处输尿管较正常狭窄，将结扎输尿管的手术 线及聚乙烯管一并去除，用手轻轻按摩结扎处输尿管，可见狭窄、迂曲、发白的输尿管逐渐 恢复正常粗细，且血运丰富，梗阻的输尿管完全再通，留取双侧肾活检组织约200毫克，并 留取双侧分肾静脉血清标本，还纳肠攀，37°C，0. 9%生理盐水反复冲洗肠攀并用吸引器吸 出盐水，腹腔注入青霉素16万单位/kg，逐层缝合关闭腹腔；
[0038](四）继续将梗阻再通后的实验猪于动物室内行标准观察、饲养，再通7天、14天 及21天时分别再次行手术，打开腹腔留取肾组织及血清标本，动态观察肾脏功能及组织病 理学改变。
[0039] 实施例3
[0040] 包括下列步骤：
[0041](一）选择实验动物，所选实验猪为广西巴马香猪，月龄3个月，体重8-10公斤，饲 养符合标准动物饲养条件，18_25°C，12小时光/暗周期，每只猪每天喂养猪饲料2次，每次 250g；
[0042](二）造模手术，实验动物术前禁食水12小时，用地西泮、氯胺酮和速眠新II联合 麻醉法，麻醉具体操作过程：先给予氯胺酮20mg/kg肌肉注射，70秒后动物摇晃倒地，肌肉 松弛，再给予地西泮lmg/kg肌肉注射，速眠新0. 15ml/kg肌肉注射，130秒麻醉生效，将猪置 于37°C恒温手术台，所有手术步骤遵循无菌操作，常规备皮、铺无菌洞巾，戴无菌帽子、口罩 及手套，皮肤消毒后取腹部正中切口，11cm，逐层分离皮肤直达脏层腹膜，打开腹腔，翻开肠 攀，将肠攀用37°C生理盐水浸湿的纱布包绕，暴露右侧输尿管，在距离右肾下级15cm处，用 长2cm，宽Icm的聚乙烯片包绕，并在聚乙烯片上沿两端用10号手术线结扎，使右侧输尿管 完全梗阻，还纳肠攀，37°C，0. 9%生理盐水反复冲洗肠攀并用吸引器吸出盐水，腹腔注入青 霉素16万单位/kg，逐层缝合关闭腹腔；
[0043](三）再通手术：5天后按照上述操作步骤进行麻醉，待麻醉生效后将猪至于恒温 37°C手术台上，所有步骤遵循无菌操作，常规备皮、铺无菌洞巾，将原切口打开，逐层分离皮 肤直达脏层腹膜，打开腹腔，翻开肠攀，将肠攀用37°C生理盐水浸湿的纱布包绕，找到右侧 输尿管，充分暴露结扎处输尿管，此时可见结扎处输尿管较正常狭窄，将结扎输尿管的手术 线及聚乙烯管一并去除，用手轻轻按摩结扎处输尿管，可见狭窄、迂曲、发白的输尿管逐渐 恢复正常粗细，且血运丰富，梗阻的输尿管完全再通，留取双侧肾活检组织约200毫克，并 留取双侧分肾静脉血清标本，还纳肠攀，37°C，0. 9%生理盐水反复冲洗肠攀并用吸引器吸 出盐水，腹腔注入青霉素16万单位/kg，逐层缝合关闭腹腔；
[0044](四）继续将梗阻再通后的实验猪于动物室内行标准观察、饲养，再通7天、14天 及21天时分别再次行手术，打开腹腔留取肾组织及血清标本，动态观察肾脏功能及组织病 理学改变。
[0045] 参见图4,可以看到梗阻2周及3周时肾脏病变明显，甚至出现纤维化改变，说明梗 阻模型成功。
[0046] 参见图5,梗阻时血肌酐显著增高，再通后肌酐明显下降，模型成功。
[0047] 参见图6,梗阻时肾间质出现明显病变，再通至21天时肾脏病理基本恢复至正常， 此动态变化均在同一只模型猪上观察到。
[0048] 下面通过实验例进一步说明本发明的效果。
[0049] 实验例1动物麻醉比较
[0050] 以往资料显示波器，大多数实验猪的麻醉，在单独应用一种麻醉药物的情况下麻 醉效果均欠佳，而本发明联合麻醉能达到较好的麻醉效果，本发明采用的麻醉药物为速眠 新II，0. 15ml/kg肌肉注射、地西泮lmg/kg肌肉注射，及氯胺酮20mg/kg肌肉注射，为了观 察不同麻醉药物的麻醉效果，进行了如下实验：将实验小型猪随机分为A、B、C三组，每组6 头猪，麻醉药物剂量及麻醉方法同上。A组为速眠新II联合地西泮复合麻醉，B组为氯胺酮 联合速眠新II复合麻醉，C组为氯胺酮、速眠新II、地西泮三种药物不同复合麻醉，观察诱 导期、维持期和苏醒期时间，监测动物体温、呼吸频率和心率。结果表明，氯胺酮、速眠新II 及地西泮三种药物联合麻醉的效果明显优于两种药物联合应用，如表1所示。
[0051] 表1各组麻醉各个时期监测结果（min)
[0052]
【主权项】
1. 一种猪单侧输尿管梗阻再通模型的建立方法，其特征在于包括下列步骤： (一） 选择实验动物，所选实验猪为广西巴马香猪，月龄3个月，体重8-10公斤，饲养 符合标准动物饲养条件，18_25°C，12小时光/暗周期，每只猪每天喂养猪饲料2次，每次 250g； (二） 造模手术，实验动物术前禁食水12小时，用地西泮、氯胺酮和速眠新II联合麻 醉法，麻醉具体操作过程：先给予氯胺酮20mg/kg肌肉注射，50~70秒后动物摇晃倒地，肌 肉松弛，再给予地西泮lmg/kg肌肉注射，速眠新0. 15ml/kg肌肉注射，110~130秒麻醉生 效，将猪置于37 °C恒温手术台，所有手术步骤遵循无菌操作，常规备皮、铺无菌洞巾，戴无菌 帽子、口罩及手套，皮肤消毒后取腹部正中切口，9~11cm，逐层分离皮肤直达脏层腹膜，打 开腹腔，翻开肠攀，将肠攀用37°C生理盐水浸湿的纱布包绕，暴露右侧输尿管，在距离右肾 下级15cm处，用长2cm，宽Icm的聚乙烯片包绕，并在聚乙烯片上沿两端用10号手术线结 扎，使右侧输尿管完全梗阻，还纳肠攀，37°C，0. 9%生理盐水反复冲洗肠攀并用吸引器吸出 盐水，腹腔注入青霉素16万单位/kg，逐层缝合关闭腹腔； (三） 再通手术：5天后按照上述操作步骤进行麻醉，待麻醉生效后将猪至于恒温37°C 手术台上，所有步骤遵循无菌操作，常规备皮、铺无菌洞巾，将原切口打开，逐层分离皮肤直 达脏层腹膜，打开腹腔，翻开肠攀，将肠攀用37°C生理盐水浸湿的纱布包绕，找到右侧输尿 管，充分暴露结扎处输尿管，此时可见结扎处输尿管较正常狭窄，将结扎输尿管的手术线及 聚乙烯管一并去除，用手轻轻按摩结扎处输尿管，可见狭窄、迂曲、发白的输尿管逐渐恢复 正常粗细，且血运丰富，梗阻的输尿管完全再通，留取双侧肾活检组织约200毫克，并留取 双侧分肾静脉血清标本，还纳肠攀，37°C，0. 9%生理盐水反复冲洗肠攀并用吸引器吸出盐 水，腹腔注入青霉素16万单位/kg，逐层缝合关闭腹腔； (四） 继续将梗阻再通后的实验猪于动物室内行标准观察、饲养，再通7天、14天及21 天时分别再次行手术，打开腹腔留取肾组织及血清标本，动态观察肾脏功能及组织病理学 改变。
【专利摘要】本发明涉及一种猪单侧输尿管梗阻再通模型的建立方法，属于一种动物模型的建立方法。选择巴马香猪，采取联合麻醉，将聚乙烯片卷曲成为聚乙烯管，包绕在肾输尿管上，两端用10号手术线结扎，使右侧输尿管完全梗阻。优点是成功建立了大动物猪的单侧输尿管梗阻再通模型，为研究肾间质纤维化提供了很好的实验平台，同时此模型也为药物实验提供了很好的工具，通过对梗阻及再通各个时间点血清标志物及病理的分析，有助于发现梗阻不同时间点再通后肾脏在大体、病理及生理功能上发生的不同程度的变化。
【IPC分类】A61D1-00
【公开号】CN104720917
【申请号】CN201510158663
【发明人】孙晶, 刘盈盈, 纪磊, 刘树军, 李兵, 罗曼宇, 王杨威, 董文鹏, 苗里宁
【申请人】吉林大学
【公开日】2015年6月24日
【申请日】2015年4月7日