用于治疗眼障碍的方法
【专利说明】用于治疗眼障碍的方法
[0001] 公开内容背景 Wnt基因家族编码一大类与Intl/Wntl原癌基因和果幡无翅（Drosophila wingless) ("Wg")(果幡 Wntl 同系物）（Cadigan 等人（1997)Genes & Development 11:3286-3305) 相关的分泌性蛋白质。fct在多种组织和器官中表达，并且是许多发育过程所需的，所述 发育过程包括果蝇的分段；秀丽隐杆线虫（C. elegans)的内胚层发育；以及哺乳动物的肢 极性建立、神经嵴分化、肾形态建成、性别决定和脑发育（Parr，等人（1994)Curr. Opinion Genetics & Devel. 4:523-528)。Wnt途径是在胚胎发生期间和在成熟生物两者的发育 的主要调节物（Eastman,等人（1999)Curr Opin Cell Biol 11: 233-240 ;Peifer,等人 (2000)Science 287: 1606-1609)。
[0002] Wnt信号通过七跨膜域受体的Frizzled(〃Fz〃）家族转导（Bhanot等人（1996) Nature 382:225-230)。Frizzled细胞表面受体（Fzd)在经典和非经典Wnt信号转导两者 中均发挥重要作用。在经典途径中，Fzd和LRP5/6(低密度脂蛋白受体相关蛋白质5和6) 通过fct蛋白质活化后生成信号，其阻止通过"β连环蛋白破坏复合物"的β连环蛋白 磷酸化和降解，允许稳定的β连环蛋白易位和在核中累积，并且因此允许fct信号转导。 (Perrimon(1994)Cell 76:781-784)(Miller, J. R. (2001)Genome Biology ；3 (I):1-15)〇 非经典Wnt信号转导途径较不充分确定：存在已提议的至少两种非经典Wnt信号转导途径， 包括平面细胞极性（PCP)途径，Wnt/Ca++途径和汇聚延伸途径。
[0003] 糖原合酶激酶3 (GSK3)、肿瘤抑制基因产物APC (腺瘤性结肠息肉病） (Gumbiner (1997) Curr. Biol. 7: R443-436)和支架蛋白Axin均为Wnt途径的负调节物，并 且一起形成"β连环蛋白破坏复合物"。在不存在fct配体的情况下，这些蛋白质形成复合 物且促进β连环蛋白的磷酸化和降解，而fct信号转导使复合物失活且阻止β连环蛋白 降解。稳定的β连环蛋白因此易位至核，在其中它结合TCF(T细胞因子）转录因子（也称 为淋巴样增强子结合因子-1〇^?1))，且充当^^/1^?诱导的转录的辅激活物?化似，等人 (2000)Cell 103: 311-320 ;Polakis，等人（2000)Genes Dev 14: 1837-1851)。
[0004] Wnt信号转导经由经典和非经典机制发生。在经典途径中，Fzd和LRP5/6通过Wnt 蛋白质活化后，稳定的β连环蛋白在核中累积且导致TCF靶基因活化（如上所述；Miller， J. R. (2001) Genome Biology ;3(1) :1-15)。非经典Wnt信号转导途径较不充分确定：已提 议至少两种非经典fct信号转导途径，包括平面细胞极性（PCP)途径和Wnt/Ca ++途径。
[0005] 视神经和视网膜的疾病和变性病症是全世界的失明主因。黄斑变性（MD)是负责 高敏锐度视力，称为黄斑的中央视网膜部分中的光感受器的丧失。年龄相关性黄斑变性 (AMD)描述为"干性"或"湿性"。湿性、渗出性、新生血管形式的AMD影响约10%的具有AMD 的人，并且特征在于生长穿过视网膜色素上皮（RPE)的异常血管，导致出血、渗出物、结瘢 或浆液性视网膜脱离。百分比九十的AMD患者具有干燥形式，特征在于视网膜色素上皮的 萎缩和黄斑光感受器的丧失。目前不存在任何形式的MD或AMD的治愈，尽管已用光动力疗 法在减弱方面获得一些成功。
[0006] 青光眼是起因于几种不同的眼疾病的病症，其通过对视神经的损害引起视力丧 失。由于眼排出不足够而升高的眼内压（IOP)是青光眼的最常见原因。青光眼通常随着眼 老化而发展，或它可以由于眼损伤、炎症、肿瘤或者在白内障或糖尿病的晚期病例中发生。 它还可以通过由用类固醇治疗引起的IOP的增加引起。证明在青光眼中有效的药物疗法通 过减少玻璃体液产生或通过促进眼排出而降低Ι0Ρ。此类试剂通常是血管扩张剂，并且像这 样作用于交感神经系统且包括肾上腺素能拮抗剂。
[0007] 存在用于眼障碍的新治疗的迫切需要，所述眼障碍例如黄斑变性（MD)、年龄相关 性黄斑变性（AMD)、青光眼、白内障、色素性视网膜炎（retinitis pigmentosa)、脉络膜新生 血管形成（choroidal neovascularization)、视网膜变性（retinal degeneration)和氧诱 导视网膜病变（oxygen-induced retinopathy)。
[0008] 公开内容概述 本公开内容一般涉及α螺旋模拟结构，且具体涉及为β连环蛋白抑制剂的α螺旋模 拟结构。公开内容还涉及在眼病症例如黄斑变性和青光眼治疗中的应用，以及包含此类α 螺旋模拟β连环蛋白抑制剂的药物组合物。
[0009] 附图简述 图I A-1D.在用化合物A处理后，分裂免疫细胞、神经胶质细胞、星形胶质细胞和米勒 细胞数目。化合物A是4- (((6S，9S，9aS) -1-(苄基氨基甲酰基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧 代-8-(喹啉-8-基甲基）八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-6-基）甲基）苯基二 氢磷酸酯。（A)，化合物A处理不影响免疫细胞应答。（B-D)，相对于对照媒介物水平，在视 网膜脱离后的增殖神经胶质细胞（A)、米勒细胞（B)和星形胶质细胞（D)数目的增加在用化 合物A处理的眼中减弱。
[0010] 图2A-2B.在用化合物A处理后，神经胶质瘢痕频率和大小的定量分析。（A)，神经 胶质瘢痕的频率在用化合物A处理后显著降低。（B)平均神经胶质长度在用化合物A处理 后显著降低。
[0011] 图3A-3D.免疫组织化学鉴定出作为延伸到视网膜下间隙内的波形蛋白标记的米 勒细胞突存在可见的视网膜下神经胶质增生（或结瘢）。0S，外层/视网膜下间隙；ONLjF 核层；GCL，神经节细胞层。（A-B)，媒介物处理的眼。在脱离后，波形蛋白表达在米勒细胞 中增加，并且米勒细胞突可见延伸进入视网膜下间隙内（箭头）。箭头指向分裂米勒细胞。 (C-D)，化合物A处理了的眼。未观察到生长进入视网膜下间隙内的米勒细胞。一个分裂细 胞（星形胶质细胞）存在于GCL中（箭头）。
[0012] 图4A-4B.在用化合物A或化合物C处理后的CNV损害大小。化合物C是 (6S，9S，9aS) -N-苄基-6- (4-羟基苄基）-2, 9-二甲基-4, 7-二氧代-8-(喹啉-8-基甲基） 八氢-IH-吡嗪并[2, 1-c] [1，2, 4]三嗪-1-甲酰胺。（A)，在第15天时的平均CNV损害大 小。（B)，在第22天时的平均CNV损害大小。
[0013] 公开内容详述 近来，已开发了非肽化合物，其模拟生物活性蛋白质或肽中发现的转角 (reverse-turn)的二级结构。例如，美国专利号5, 440, 013以及公开的PCT申请号 W094/03494、W001/00210A1和W001/16135A2,各自公开了构象约束的非肽化合物，其模拟 转角的三维结构。另外，美国专利号5, 929, 237及其部分继续申请美国专利号6, 013, 458 公开了构象约束的化合物，其模拟生物活性肽和蛋白质中的转角区域的二级结构。与转角 模拟物相关，已公开了构象约束的化合物，其模拟W02007/056513和W02007/056593中的生 物活性肽和蛋白质中的α螺旋区域的二级结构。
[0014] 本发明的α螺旋模拟β连环蛋白抑制剂的相关结构和化合物公开于WO 2010/044485、TO 2010/128685、TO 2009/148192 和 US 2011/0092459,其各自整体引入本 文作为参考。这些化合物目前已发现可用于治疗眼病症和障碍，例如黄斑变性和青光眼。 虽然不希望被束缚，但这些化合物在治疗这些病症中的有效性部分基于这些化合物抑制β 连环蛋白的能力，从而改变fct途径信号转导，已发现这改善多种眼疾病和病症。
[0015] 本发明的α螺旋模拟β连环蛋白抑制剂的优选结构具有下式（I):
其中 A 是 _CHR7_， 其中 R7是任选取代的芳基烷基、任选取代的杂芳基烷基、任选取代的环烷基烷基或任选取 代的杂环烷基烷基； G 是-NH-、-NR6-或-0-其中 R6是低级烷基或低级烯基； R1 是-Ra-R 10; 其中 Ra是任选取代的低级亚烷基，和 Rltl是任选取代的二环稠合芳基或任选取代的二环稠合杂芳基； R2是- (CO)-NH-Rb-R 20， 其中 Rb是键或任选取代的低级亚烷基；和 R2tl是任选取代的芳基或任选取代的杂芳基；和 R3是C η烷基。
[0016] 这些化合物尤其可用于预防和/或治疗眼病症，例如黄斑变性和青光眼。
[0017] 本发明的α螺旋模拟β连环蛋白抑制剂的更优选结构具有在上述式（I)中的下 述取代基： A 是 _CHR7_， 其中 R7是任选由羟基或C η烷基取代的芳基烷基； G 是-NH-、-NR6-或-0_ 其中 R6是C i_4烷基或C i_4烯基； R1 是-Ra-R 10; 其中 Ra是