一种具有降血脂作用的栀子提取物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药领域，具体涉及一种栀子提取物及含有该提取物的药物制剂，该 栀子提取物可以用来制备降血脂的药物。
【背景技术】
[0002] 栀子（Gardeniajasminoides Ellis.)是茜草科（Rubiaceae)栀子属常绿灌木，又 名山栀子、黄栀子、黄枝子等，主产于浙江、福建、江西、湖南、广东。栀子的干燥成熟果实入 药称栀子，中国历版药典和本草均有记载，为常用中药。其性寒味苦，无毒，主归心、肺、三焦 经，具有泻火除烦、清热利尿、凉血解毒等功效。临床广泛用于热病心烦、黄疸尿赤、血淋涩 痛、血热吐衄、目赤肿痛、火毒疮疡等证；其根功能清热、凉血、解毒，民间主要用于黄疸性肝 炎、肾炎水肿、感冒高热、出血吐血、跌打损伤、疮疡肿毒等病症的治疗；叶可消肿止痛，治疗 跌打损伤；花可清肺热凉血降脂，治疗肺热咳嗽、鼻衄。
[0003] 栀子属植物化学成分的研究始于20世纪20年代，具有特征性的化合物主要包括 环烯醚萜类、有机酸类和黄酮类。栀子中含有大量的环烯醚萜类化合物，有4种主要类型： 环烯醚萜烷类、环烯醚萜苷类、环烯醚萜二缩醛酯类和裂环烯醚萜苷类。环烯醚萜基本骨架 经环氧化、羟基化及由莽草酸途径得到的芳香酸酯化，导致了该类化合物的多样性，同时也 导致其药理活性的多样性。
[0004] 桅子是常用中药，备受国内外学者的重视，研究工作较多。现代药理实验表明，栀 子中的环烯醚萜类成分有明显的抗炎镇痛、保肝利胆、抗血栓等活性；有机酸类中的藏红花 苷类成分具抗炎、抗血栓、调血脂、抗心肌缺血等活性。随着科学技术的不断进步，对其研究 也有了许多创新和突破，尤其对其中的环烯醚萜类成分的研究，新的化合物和药理作用不 断被发现，药理作用机制也得到了深入的研究。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种栀子提取物，该提取物的制备方法和液相分析方法， 含有该提取物的药物制剂及利用该提取物制备降血脂的药物的用途。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] -种栀子提取物，该提取物由以下方法制备：
[0008] (a)将干燥的栀子成熟果实粉碎；(b)用70 %乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩 至无醇味得到浓缩液；（C)对步骤（b)浓缩液依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇 萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（d)正丁醇萃取物用大孔 树脂富集，先用10%乙醇冲洗8个柱体积除去多糖，再用65%乙醇洗脱10个柱体积，收集 65 %洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥。
[0009] 进一步地，步骤（d)中所述大孔树脂为AB-8型大孔树脂。
[0010] 为了能够通过建立HPLC指纹图谱的方法控制不同产地、批次药材制备的栀子提 取物批间差异，所述提取物的液相分析方法为：
[0011] 色谱柱：Agilent ZORBAX SB C18 柱（4. 6mmX250mm，5 μL?);
[0012] 流动相：A为乙腈，B为0.1 %磷酸水溶液；
[0013] 梯度洗脱程序：0.01~15111丨11，厶25%~35%;15~25111丨11，厶35%~50% ;25~ 32min，A 50% ;32 ~35min，A 50%~25% ;35 ~40min，A25% ;
[0014] 流动相流速：1. OmL · min S检测波长：252nm ;柱温：30°C ;进样量：10 yL。
[0015] 药物制剂，含有治疗有效量的所述栀子提取物和药学上可接受的载体。
[0016] 所述的栀子提取物在制备降血脂的药物中的应用。
[0017] 所述的药物制剂在制备降血脂的药物中的应用。
[0018] 本发明提取物用作药物时，可以直接使用，或者以药物制剂的形式使用。
[0019] 所述药物制剂含有治疗有效量的本发明栀子提取物，其余为药物学上可接受的、 对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0020] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物制剂以单位体重服用量的形式使用。本发明提取物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
[0021] 本发明的优点：本发明通过对栀子药材进行提取、除杂、富集处理，能得到具有降 血脂作用的提取物；本发明提供的液相分析方法可以用于建立该提取物的指纹图谱，用于 控制不同产地、批次药材制备的提取物的批间差异。
【附图说明】
[0022] 图1为栀子提取物HPLC液相图谱。
【具体实施方式】
[0023] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0024] 实施例1 :栀子提取物制备
[0025] 主要试剂和材料：栀子药材购自安徽亳州中药材市场；食品级乙醇购自上海凌峰 化学试剂有限公司；医药级AB-8大孔树脂购自天津波鸿树脂有限公司；乙腈为HPLC级，购 于TEDIA ;85%磷酸为HPLC级，购于TEDIA ;色谱用纯净水为哇哈哈纯净水。
[0026] 制备方法：将IOkg干燥的栀子成熟果实粉碎，用70 %乙醇热回流提取（25LX 3 次），合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液（6L);对浓缩液依次用石油醚（6LX3次）、乙 酸乙酯（6LX3次）和水饱和的正丁醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯 萃取物和正丁醇萃取物305g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大孔树脂（2kg，柱 体积I. 5L)富集，先用10%乙醇冲洗8个柱体积（12L)除去多糖，再用65%乙醇洗脱10个 柱体积（15L)，收集65 %洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得栀子提取物浸膏粉185g。
[0027] 实施例2 :液相色谱分析
[0028] 供试品溶液配制：取实施例1方法制得的提取物浸膏粉5mg至50mL棕色容量瓶 中，加30mL 20 %乙腈水溶液超声溶解，冷却至室温后，继续加20 %乙腈水溶液定容。
[0029] 分析方法：
[0030] 液相色谱仪：Agilent 1260,二元栗；
[0031] 色谱柱：Agilent ZORBAX SB C18 柱（4. 6mmX250mm，5 μπι);
[0032] 流动相：Α为乙腈，B为0.1 %磷酸水溶液；
[0033] 梯度洗脱程序：0.01~15111丨11，厶25%~35%;15~25111丨11，厶35%~50% ;25~ 32min，A 50% ;32 ~35min，A 50%~25% ;35 ~40min，A25% ;
[0034] 流动相流速：1. OmL · min S检测波长：252nm ;柱温：30°C ;进样量：10 μ L。
[0035] 对用10批不同产地、批次栀子制备的提取物进行分析，建立指纹图谱进行匹配， 结果1~11号峰在10批样品色谱图中均出现。因此标定11个峰为共有指纹峰，据此建立 该提取物的HPLC指纹图谱，结果见图1。
[0036] 实施例3 :栀子提取物药理试验
[0037] 一、材料
[0038] 1、实验动物：Wistar大鼠，ICR小鼠，均由北京维通利华实验动物技术有限公司提 供，合格证号：SCXK (京）2002-0003。
[0039] 2、试剂：高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C)测试盒（批号050919)，低密度脂蛋白胆固 醇（LDL-C)测试盒（批号050707)，总胆固醇（TC)测试盒（批号050523)，甘油三酯（TG) 测试盒（批号050914)等，以上均由北京北化康泰临床试剂有限公司提供。
[0040] 3、仪器：ZS-3型半自动生化测定仪，北京中生生物工程技术公司。
[0041 ] 4、药品：栀子提取物按实施例1方法制备。
[0042] 5、统计学处理：实验数据经单因素方差分析并进行多组t检验。
[0043] 二、方法
[0044] 1、栀子提取物