一种检测猴体神经毒力试验的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种检测猴体神经毒力试验的方法。
【背景技术】
[0002] 许多减毒活疫苗均来源于对野生型病毒株进行的减毒改良，而野生型病毒株已知 具有神经毒性。为了确保减毒活疫苗在免疫人体的过程中不出现残留的神经毒性，候选减 毒活疫苗的毒种（包括主种子批或工作种子批）需要进行临床前神经毒力试验。由于减毒 活疫苗主要应用于人类，因此候选减毒活疫苗的临床前神经毒力试验主要选择猴作为试验 动物。
[0003] 在猴体神经毒力试验进行过程中，将受试药物准确的注射到相应的颅脑位置是整 个试验的关键所在。然而，传统颅脑给药方法仅仅依靠脑定位仪定位或依靠临床经验进行， 无法确定受试药物是否准确注射到相应的颅脑位置，很多时候只有在试验后期，解剖后才 发现药物的注射位置不准确，导致浪费大量人力物力。
【发明内容】
[0004] 本发明的技术方案是提供了一种检测猴体神经毒力试验的方法。
[0005] 本发明检测猴体神经毒力试验的方法，步骤如下：取给药后的猴体，在给药后第3 天、第6天和/或第9天，分别对猴脑的横断位、矢状位及冠状位进行磁共振扫描，阅读图 像，即可。
[0006] 优选地，所述磁共振扫描采用的仪器是BrukerBioSpec7.OTMR的磁共振扫描 仪。
[0007] 优选地，磁共振扫描的具体步骤是：选择定位扫描序列，扫描区域位置选择，得定 位扫描图像；再根据定位图像选择T2加权序列并扫描，得扫描图像；最后选择Tl序列并复 制T2加权序列位置再进行扫描，得扫描图像；最后保存所有上述扫描图像。
[0008] 本发明检测方法可以准确判断猴体神经毒力试验中，药物是否准确的注射到相应 的颅脑位置，能够在试验早期发现药物注射的准确性，便于后期试验，节约成本。
[0009] 以下通过【具体实施方式】对本发明作进一步的详细描述，但并不限制本发明，本领 域技术人员可以根据本发明作出各种改变和变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本 发明所附权利要求的范围。
【具体实施方式】
[0010] 1、材料
[0011] 1.1实验动物
[0012] 种属：恒河猴；
[0013] 等级：普通级；
[0014] 使用动物数量和性别：12只，雌雄各半；
[0015] 年龄：2~3岁；
[0016] 体重：购入时3. 10~4. 20kg，分组时3. 45~4. 55kg ;
[0017] 来源：成都格林豪斯生物科技有限公司，生产许可证号：SCXK(川）2011-013,实验 动物质量合格证编号：0022011 ;
[0018] 入室前检疫：筛选出风疹病毒抗体阴性的猴（风疹病毒抗体由委托方自行检测， 本机构提供血清样品），入室前一周内进行猴结核分支杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、体外寄生 虫、弓形体检查，合格后引入；
[0019] 适应期主要检查内容：动物一般状态；体温（肛温）、摄食量、血液学、血生化、II导 联心电图、尿液各检测2次；动物体重是否达到试验要求的体重范围，选取的12只猴均为健 康（雌性未孕）猴而纳入正式试验。
[0020] 1. 2主要试剂
[0021] 1.2.1 供试品
[0022] 名称或代号：风疹减毒活疫苗毒种RA27/3株主种子批，本机构代号W0037 ;
[0023] 来源：北京民海生物科技有限公司；
[0024] 性状：乳酪色疏松体；
[0025] 规格：复溶后0.5mL/瓶；
[0026] 病毒滴度：5.lLgCCID50/mL;
[0027] 批号：M22-201201 ;
[0028] 保存条件及注意事项：_70~_86°C ;
[0029] 有效期：复溶前长期有效，复溶后有效期1小时；
[0030] 保存地点：本机构供试品管理部。
[0031] 1.2. 2 对照品
[0032] 名称或代号：风疹减毒活疫苗毒种RA27/3株主种子批对照品，本机构代号W0037 对照；
[0033] 来源：北京民海生物科技有限公司；
[0034] 性状：乳酪色疏松体；
[0035] 规格：复溶后0.5mL/瓶；
[0036] 批号：201201 ;
[0037] 保存条件及注意事项：_70~_86°C ;
[0038] 有效期：复溶前长期有效，复溶后有效期1小时；
[0039] 保存地点：本机构供试品管理部。
[0040] 1. 2. 3其它主要试剂
[0041] 名称：戊巴比妥钠；
[0042]来源：Sigma 公司；
[0043] 性状：白色粉末；
[0044] 规格：25g/瓶；
[0045] 批号：93ET2904K ;
[0046] 保存条件：常温、密闭保存；
[0047] 有效期：至2015年08月；
[0048] 配制方法：临用前用0. 9%氯化钠注射液配制成所需浓度。配制后于2~25°C暂 存备用，有效期1个月；
[0049] 名称或代号：灭菌注射用水；
[0050] 来源：四川科伦药业股份有限公司；
[0051] 性状：无色澄明液体；
[0052] 规格：500mL/瓶；
[0053] 批号：H13040604 ;
[0054] 保存条件及注意事项：室温密闭保存；
[0055] 有效期：2015年03月；
[0056] 名称：盐酸利多卡因注射液
[0057] 来源：郑州卓峰药业有限公司
[0058] 性状：无色澄明液体
[0059]规格：2mL/支
[0060] 含量：0?lg/f5mL
[0061]批号：12030413
[0062] 保存条件：常温、密闭保存
[0063] 有效期：2014年02月
[0064] 配制方法：直接取用，当天有效
[0065] 名称：盐酸氯胺酮注射液
[0066] 来源：沈阳市兽药厂
[0067] 性状：无色澄明液体
[0068]规格：2mL :0? 3g/支
[0069] 含量：150mg/mL
[0070]批号：20110908;
[0071] 保存条件：常温、密闭保存；
[0072] 有效期：2013年08月
[0073] 配制方法：直接取用，当天有效。
[0074] 1. 3主要溶液的配制
[0075]I. 3. 1供试品配制
[0076] 配制方法：用灭菌注射用水0. 5mL复溶；
[0077] 配制后标识方法：供试品的装运盒以红色标签标识，并注明试验编号、试验物质名 称、体积、保存条件、有效期、责任人及配制日期；
[0078] 配制后暂存条件及效期：复溶后2_8°C保存，直接取用注射，在开瓶后1小时内使 用。
[0079]1.3. 2对照品配制
[0080] 配制方法：用灭菌注射用水0? 5mL复溶；
[0081 ] 配制后标识方法：对照品的装运盒以白色标签标识，并注明试验编号、试验物质名 称、体积、保存条件、有效期、责任人及配制日期；
[0082] 配制后暂存条件及效期：复溶后2_8°C保存，直接取用注射，在开瓶后1小时内使 用。
[0083] I. 4主要仪器
[0084]
[0085] 实施例1本发明检测方法
[0086] (1)分别于给药前和