[0105] 沙堡氏培养基（300mL):称取蛋白胨3g，葡萄糖1. 2g，琼脂0. 6g，加热溶解后调pH 至5. 6,116°C灭菌30min，冷却至50_55°C，无菌添加质量浓度分别为0、0. 01g/mL(实施例2 制备的中药组合物稀释10倍）、〇. 1 g/mL (实施例2制备的中药组合物）、0. 5g/mL (实施例1 制备的中药组合物）中药组合物，混合均匀后倾注平皿，制备成四组梯度带药平板，凝固后 冷减备用。
[0106] 1.2. 2病原菌准备
[0107] 接种环占取病原真菌sty点种于沙堡氏固体平板培养基中间，28°C培养5-7d，备 用。
[0108] 1.2. 3药敏试验方法
[0109]用直径为6mm的打孔器打取1. 2. 2制备的病原菌外缘带菌培养基块-菌饼，用接 种针分别挑至1. 2. 1制备的四组梯度带药平板中央。接种时，菌饼带菌丝的一面向下，并用 接种针轻轻压紧，倒置于28°C、相对湿度为80%的人工培养箱中培养。
[0110] 1.2. 4结果观察与数据处理
[0111] 空白对照菌落生长到接近培养皿边缘时，用十字交叉法测量菌落直径，用下列公 式计算菌丝生长抑制率。菌落扩展直径（mm)=菌落平均直径（mm) - 6mm(菌饼直径）；相 对抑制率（％) =[(阴性对照扩展菌落直径一处理菌落扩展直径阴性对照菌落扩展直 径]X100%〇
[0112] 2试验结果
[0113] 本发明的中药组合物对致病菌的抑制作用结果见表1和图5。
[0114] 表1中药组合物对致病菌的抑制作用
[0116] 结果表明：中药组合物的药物浓度为0. 5g/mL时，抑制率达到100%，药物浓度为 0. 01g/mL时，仍然具有微弱抑菌效果。
[0117] 3 结论
[0118] 通过药敏试验得出，本发明的中药组合物对病原真菌须癣毛癣菌的生长有抑制作 用，且随着药物浓度的升高，抑制作用也加强。当药物浓度为0. 5g/mL时可完全抑制须癣毛 癣菌生长。
[0119] 实施例8 :本发明的中药组合物的临床疗效评价
[0120] 1河北保定某发病獭兔场疗效试验
[0121] 1. 1试验动物选取河北保定爆发真菌性皮肤病的獭兔场患病獭兔60只。
[0122] 1. 2试验分组将患病獭兔随机分为对照组、试验组，每组30只。试验组外涂本发明 实施例1制备的中药组合物，每日一次，每次约2_3mL，使得外涂药物完全覆盖獭兔病变部 位；对照组用达克宁乳膏（硝酸咪康唑乳膏）每日涂抹一次，治疗半月后评价疗效。达克宁 乳膏，购于西安杨森制药有限公司。
[0123] 1.3疗效评价
[0124] 1.3. 1疗效标准
[0125] 痊愈：真菌、湿疹、脂溢性皮炎、脱毛、烂肉、擦伤、皮肤溃烂等症状完全消失。
[0126] 显效：真菌、湿疹、脂溢性皮炎、脱毛、烂肉、擦伤、皮肤溃烂等症状大部门消失。
[0127] 无效：真菌、湿疹、脂溢性皮炎、脱毛、烂肉、擦伤、皮肤溃烂等症状改善不明显。
[0128] 1. 3. 2临床疗效结果分析
[0129] 总有效率=[(显效数+有效数）+受试总数]X 100%
[0130] 有效率=(有效数+受试总数）X 100 %
[0131] 显效率=(显效数+受试总数）X 100%
[0132] 无效率=(无效数+受试总数）X 100%
[0133] 1.4试验结果
[0134] 治疗结果判断：见表2和图6a、图6b。
[0135] 表2本发明的中药组合物对患有真菌性皮肤病獭兔的治疗效果
[0137] 由表2可以看出，试验组总有效率为100 %，且在使用过程中，均未发现过獭兔有 任何不良及过敏反应。试验证明本发明的中药组合物，无毒副作用，且治疗效果显著。以上 獭兔养殖场经回访已有一年多，没有复发的迹象。
[0138] 由图6a可以看出，治疗前，獭兔皮毛稀少、结痂严重，面部、耳部、腿部、背部等脱 毛严重，真菌性皮肤病无疑。由图6b可以看出，采用本发明的中药组合物治疗后，观察发现 獭兔结痂变少，面部、耳部、腿部、背部等脱毛部位均长出新毛，且毛色鲜亮，真菌性皮肤病 得到了有效抑制。
[0139] 2威海文登某发病水貂场疗效试验
[0140] 2. 1试验动物选取威海文登某发病水貂场患皮肤病水貂40只。
[0141] 2. 2试验分组将患皮肤病水貂随机分为对照组、试验组，每组20只。试验组外涂本 发明实施例1制备的中药组合物，每日一次，每次2-3mL，使得外涂药物完全覆盖水貂患病 部位；对照组用达克宁乳膏（硝酸咪康唑乳膏）每日涂抹一次；治疗半月后评价疗效。达克 宁乳膏，购于西安杨森制药有限公司。
[0142] 2. 3疗效评价同河北保定某发病獭兔场疗效试验1. 3疗效评价。
[0143] 2. 4试验结果
[0144] 使用产品半月后，得到如下试验结果，见表3和图7a、图7b。
[0145] 表3本发明的中药组合物对患皮肤病水貂的治疗效果
[0146]
[0147] 由表3可以看出，使用本发明的中药组合物后，患病水貂总有效率100%，且在使 用过程中，水貂未出现任何排斥或不良反应现象，说明本发明的中药组合物无毒副作用，与 对照组总有效率75%相比，疗效明显。回访3个月，病貂未出现复发的迹象。
[0148] 由图7a可以看出，治疗前，水貂背部、大腿外侧、腹部出现不同程度脱毛现象，真 菌性皮肤病无疑；由图7b可以看出，采用本发明的中药组合物治疗后，水貂背部、大腿外 侧、腹部皮肤开始长出光亮的毛发，且水貂精神状态良好。
[0149] 实施例9治疗动物真菌性皮肤病的酊剂制备
[0150] 取实施例1制备的中药组合物与常规辅料混合，按照常规方法制备得到酊剂。
[0151] 实施例10治疗动物真菌性皮肤病的洗剂制备
[0152] 取实施例2制备的中药组合物与常规辅料混合，按照常规方法制备得到洗剂。
[0153] 实施例11治疗动物真菌性皮肤病的软膏剂制备
[0154] 取实施例3制备的中药组合物与常规辅料混合，按照常规方法制备得到软膏剂。
[0155] 实施例12治疗动物真菌性皮肤病的气雾剂制备
[0156] 取实施例4制备的中药组合物与常规辅料混合，按照常规方法制备得到气雾剂。
【主权项】
1. 一种治疗动物真菌性皮肤病的中药组合物，其特征在于，由以下重量份的原料药制 成： 板蓝根15-20份，黄芪15-25份，苍术5-15份，陈皮5-15份，黄连20-25份，姜黄10-15 份，青蒿10-20份，马齿苋10-15份，乌梅5-10份，薄荷2-10份，冰片5-10份。2. 如权利要求1所述的治疗动物真菌性皮肤病的中药组合物，其特征在于，由以下重 量份的原料药制成： 板蓝根16份，黄芪20份，苍术10份，陈皮10份，黄连22份，姜黄12份，青蒿15份，马 齿苋12份，乌梅8份，薄荷5份，冰片8份。3. 权利要求1或2所述的中药组合物在制备治疗动物真菌性皮肤病的药物中的应用。4. 权利要求1或2所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，按重量份称取各原料 药，混合，加水煎煮2-4次，获得提取液，提取液浓缩至浓度为0. 1-lg/mL，即得。5. 如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，加水煎煮的次数为3次，加水煎煮3次 的具体操作步骤如下： 向混合后的原料药中加8-10倍体积的水，浸泡1-2h后，煎煮1-2h，过滤，得初滤液；药 渣中加入5-6倍体积的水进行复煎，煎煮40-60min，过滤，得二级滤液；药渣中再加入5-6 倍体积的水进行第三次复煎，煎煮30-40min，过滤，得三级滤液，合并二、三级滤液，先低温 浓缩后再与初滤液混合，最终浓缩为质量浓度为〇. 1-lg/mL的中药提取液。6. -种治疗动物真菌性皮肤病的中药制剂，其特征在于，由权利要求1或2所述的中药 组合物和药学上可接受的辅料组成。7. 如权利要求6所述的中药制剂，其特征在于，所述中药制剂的剂型为水浸剂、粉剂、 洗剂、酊剂、油剂、乳剂、软膏剂或气雾剂。8. 如权利要求7所述的中药制剂，其特征在于，所述中药制剂的剂型为酊剂、洗剂、软 膏剂或气雾剂。9. 如权利要求6所述的中药制剂，其特征在于，所述药学上可接受的辅料为增溶剂、助 溶剂、润滑剂、粘合剂或防腐剂。
【专利摘要】本发明公开了一种治疗动物真菌性皮肤病的中药组合物，由以下重量份的原料药制成：板蓝根15-20份，黄芪15-25份，苍术5-15份，陈皮5-15份，黄连20-25份，姜黄10-15份，青蒿10-20份，马齿苋10-15份，乌梅5-10份，薄荷2-10份，冰片5-10份。本发明还公开了该中药组合物的制备方法，按重量份称取各原料药，混合，加水煎煮2-4次，获得提取液，提取液浓缩至浓度为0.1-1g/mL，即得。本发明还公开了由该中药组合物和药学上可接受的辅料制成的中药制剂。本发明的中药组合物/制剂中各原料药间具有明显的增效作用，可有效治疗动物真菌性皮肤病，还能杀菌止痒，促进毛发再生，且无毒副作用，安全性高。
【IPC分类】A61P17/00, A61K36/9066, A61P31/10, A61K31/045
【公开号】CN105233144
【申请号】CN201510574726
【发明人】单宝龙, 陈雷, 谷巍, 王红, 孙明杰, 崔斌, 秦波, 王丽荣, 林显华, 王春凤
【申请人】山东宝来利来生物工程股份有限公司
【公开日】2016年1月13日
【申请日】2015年9月10日