粉，白蒺藜，月季花，用乙醇加热提取2次，为组分3 ;
[0074] d、将上述三种组分，合并搅拌，调和蜂蜡制成面膜，紫外线杀菌。
[0075] 具体实施例2
[0076] 盛夏采摘新鲜丝瓜，将切碎的丝瓜5000g置于有盖不锈钢桶内，加80%乙醇液，质 量为粗粉的〇. 8-1倍，搅拌均匀，湿润密闭放置24小时以上，使充分膨胀；将渗漉筒底部滤 板用纱布袋包裹铺平后再将湿润膨胀后的药物样品拌松弄散，然后用不锈钢勺盛粉，均匀 的装入渗漉筒，装10-12厘米厚，用T型棒压匀，再按上述操作，一层一层的装入，适当加压， 药粉填装不得超过渗漉筒的2/3高处；药粉面上盖不锈钢孔板压牢，打开渗漉筒下面的放 料阀，并放一容器，然后缓缓加入80%乙醇液；待排出药粉粉粒之间的空气，并有乙醇流出 约20L左右，关闭放料阀，盖上漉筒、浸渍24小时，然后开放料阀进行渗漉，控制渗漉速度一 般为l〇〇〇g药材每分钟流出2~3ml，滤液放入贮液缸内，并将排空时的乙醇液倒入贮液缸； 将渗滤液合并静置，作为组分1。
[0077] 再将红景天1200g、白芷1100g、冰片1200g和白芨1100g用水蒸气法蒸馏，得到结 晶物，过100-120目细筛，作为组分2备用。
[0078] 再将上述蒸馏提取的药渣与剩余原料药当归1100g，玫瑰花1200g，川芎1200g， 王瓜根1100g，牡蛎1100g，白僵蚕1200g，益母草1200g，白蒺藜1200g，白蔹1200g，防风 1200g，白附子1200g，天花粉1200g，白蒺藜1100g，月季花1200g加占其质量10倍量的乙 醇，加热提取，每次1-2小时，合并提取液，静置后去上清液，然后100-120目滤过，再经截流 分子量为5000-10000的超滤柱超滤，超滤液减压浓缩相对密度为80°C时1. 32的浸膏，然 后放入减压浓缩罐内，减压回收乙醇，浓缩至药液浓度为0.lg生药/mL，抽滤至滤液的相对 密度为20°C时1. 06 ;上述滤液经体积为10L的大孔吸附树脂柱吸附后，用10倍树脂柱体积 的去离子水或蒸馏水洗脱，再用5倍树脂柱体积的95%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，去除溶 剂，成组分3。
[0079] 然后将上述步骤提取的三种组分混合，搅拌均匀，加热，调和基质，紫外线杀菌装 瓶冷藏。
[0080] 具体实施例3
[0081] 盛夏采摘新鲜丝瓜，将切碎的丝瓜3500g置于有盖不锈钢桶内，加80%乙醇液浸 泡加热提取2次，每次1-2小时，去上清液，合并提取液，80-120目滤过，再经截流分子量为 5000-10000的超滤柱超滤，超滤液减压浓缩相对密度为80°C时1. 36的浸膏，加热浓缩，30 分钟~45分钟，将浓缩液静置成浸膏状，药糊继续加热浓缩至浸膏状，静置备用，再将当归 1100g，玫瑰花1000g，川芎1000g，王瓜根1100g，牡蛎1100g，白僵蚕1000g，益母草1100g， 白漠藜ll〇〇g，白鼓ll〇〇g，防风l〇〇〇g，白附子ll〇〇g，天花粉l〇〇〇g，白漠藜ll〇〇g，月季花 llOOg取原料药加入5-10倍量的乙醇中浸泡1-2小时，加热提取2次，每次1-2小时，合并 提取液，静置后去上清液，然后100-120目滤过，再经截流分子量为5000-10000的超滤柱超 滤，超滤液减压浓缩相对密度为80°C时1. 36的浸膏，静置备用，然后将上述步骤提取的三 种组分混合，搅拌均匀，加热，调和基质，紫外线杀菌装瓶冷藏。
[0082] 药理学毒性试验
[0083] 毒理学试验：
[0084] 试验例1:本发明急性毒性试验
[0085] -、试验材料：
[0086] 动物：昆明种小鼠，体重21_24g，雌雄各半，山东大学生物试验室育种。药物：本发 明美容霜。
[0087]二、方法：
[0088] 1、LD50计算：采用改良寇氏法，将小鼠随机分成5组，每组10只，雌雄各半，将洗 液剂溶解，配成最大浓度，按小鼠最大允许容量给药，所给剂量按生药量依次为18,14. 4， 11. 5,9. 2, 7. 4 (g.kg-Ι)，在动物禁食（不禁水）18小时后，一日内分两次给药（间隔半小 时），每次〇. 5ml，观察动物死亡情况。
[0089] 2、最大耐受剂量测定（MTD值）：取小鼠20只，雌雄各10只。将片剂加蒸馏水溶解， 配成最高浓度，按动物的最大耐受量，以注射灌喂器能抽动为准。在动物禁食（不禁水）18 小时后，一日内分两次给药（间隔半小时），每次〇. 5ml(每ml含生药0. 36g)，总药量为18g 生药/kg.d，相当临床成人50Kg体重用量的300倍。给药后连续观察7天。
[0090] 三、试验结果：
[0091]在LD50计算中当用最大允许浓度和最大允许容量给予小鼠时（18g/Kg.d)，未见 小鼠死亡，即未测出LD50,只可求最大耐受剂量，在7天观察期中，动物其食欲、活动、毛色、 精神状态等皆正常，发育正常，未见有死亡。即选用相当于临床剂量的300倍药量，并无不 良反应发生，表明急性毒性极小，MTD> 18g/Kg.d。
[0092] 试验例2 :本发明急性皮肤刺激试验报告
[0093] 1、实验目的：检测本发明对实验动物皮肤的刺激/腐蚀作用和强度
[0094] 2、材料和方法：
[0095] 2. 1.受试物名称：本发明美容霜（实施例方法2制得）
[0096] 2. 2.实验动物：壹级大耳白种家兔，10只，雌性，体重2. 1-2. 3kg;由青岛大学医学 院生物系实验动物中心提供；
[0097] 2. 3.试验方法：
[0098] 选用皮肤完好的健康家兔10只，于试验前24小时将其背部脊柱两侧被毛剪掉，去 毛面积左、右各约4cmX4cm。试验时取受试物0. 2ml涂于2. 5cmX2. 5cm的二层纱布上，敷 贴于一侧去毛皮肤表面，油纸覆盖，胶布固定。另一侧皮肤作为空白对照。封闭4小时后， 去除覆盖物，并用温水清洗去残留受试物，于去除受试物后的1、24和48小时观察涂抹部位 皮肤反应，并评分。
[0099] 3、实验结果：实验动物皮肤未出现任何红斑，红肿，发炎现象。
[0100] 4、小结：根据《消毒技术规范》（1999)中皮肤刺激反应评分标准判定，本发明软膏 剂对动物皮肤刺激强度属无刺激性。
[0101] 实施例3 :阴道粘膜刺激试验结果
[0102] 1.试验方法：
[0103] 实验动物检疫3天后，选用18只上述健康家兔，随机分为三组，每组各6只，分别 为：空白对照、赋形剂对照、本发明眼霜。分别用适当大小的灭菌棉条浸以灭菌生理盐水和 受试物置于赋形剂对照组和受试物组动物阴道内，与阴道粘膜接触6小时，24小时后处死 动物。取出局部阴道组织，观察病变情况。
[0104] 2、试验结果：阴道粘膜刺激试验结果
[0105]
[0106] 实施例4 :皮肤过敏试验结果
[0107] 用本发明美容霜，进行诱导和激发接触试验，在24小时和48小时后观察试验小 鼠，均不见皮肤有红斑及水肿等现象，与阴性对照组无差异。结果表明，该膏剂对皮肤反应 强度近于零，即无皮肤变态反应。
[0108] 实施例5 :长期毒性实验资料
[0109] 1、实验方法
[0110] 将豚鼠随机份成4组，每组15只。在豚鼠背部脊柱两侧将脱毛剂均匀涂上，使其 脱毛范围约40平方厘米。洗净脱毛剂，观察24小时后每组豚鼠分别涂本发明眼霜0. 2、0. 4 和0. 8ml，分别含生药92、184和368mg，另一组涂溶媒0. 8ml每日二次，连续30天，观察豚 鼠的一般情况，实验结束后处死动物进行血液学、血液生化及病理学检查。
[0111] 2、结果
[0112] 上述三组用药豚鼠躯干去毛区，未见局部皮肤有水肿、充血、红斑、出血点及溃疡。 用药组与对照组动物毛发色泽、摄食、四肢活动等对照组无明显差异，血液生化检查，用药 组与对照组均在正常范围。病理组织学检查，实验各组心、肝、肾及局部皮肤均未见明显病 变。提示，本发明中药面霜长期用药对局部皮肤及全身重要脏器均未见明显的毒性作用。
[0113] 药理学实验
[0114] 1 材料
[0115] 1. 1动物：健康3月龄纯系昆明种雌性小鼠60只，体重25~35g，山东大学实验动 物学部提供。动物饲养条件：每组小鼠按组别分笼饲养。在自然条件相同的情况下，常规饲 食饮水，保持自然光照，无不良因素影响，饲养1周适应实验环境后开始进行实验，
[0116] 1. 2实验药品：本发明面膜，按实施例3方法制作，浓度：0. 12mg/ml，本院药剂科生 产。3%氢醌霜：武汉市中医医院药剂科生产，批号20050905。黄体酮注射液：浙江仙琚制 药股份有限公司，批号=20050115。
[0117] 1. 3试剂：硫化钠（NaS):海凌峰化学试剂有限公可，批号：20020118,临用前配成 10%水溶液。超氧化物歧化酶（S0D)、丙二醛（MDA)试剂盒：南京建成生物工程研究所，批 号：20059116。
[0118] 1. 4主要仪器：DY89-II型电动玻璃匀浆机：宁波新兰生物科技股份有限公司。系 统生物显微镜：〇LYMPUS;BX50F4北航病理图像分析系统。
[0119] 2实验方法
[0120] 2. 1模型制作：参照黄褐斑实验动物模型复制方法。小鼠2. 5%戊巴比妥钠麻醉 后，以0. 4%的黄体酮注射液按0. 02g/kg剂量小鼠后肢肌肉注射，每周6次，连续4周。正 常组按0. 02g/kg肌肉注射灭菌注射用水。
[0121] 2. 2动物分组及给药：取健康雌性小鼠60只，3个剂量组，随机分为6组，每组10 只。正常组、模型组、本发明胶囊剂3个剂量组（0. 15、0. 3、0. 6mg/ml)、3%氢醌阳性对照组 (0. 6mg/ml)。本发明3个剂量治疗组分别在小鼠造模当日用药，每日2次，每周6次，连续 用药30天。正常组和模型组于相应时间给予蒸馏水；3%氢醌阳性药对照组于造模当日开 始局部用药，时间和疗程同祛斑美容口服液治疗组。
[0122] 2. 3观察指标及检测：用药30天后，颈椎脱臼处死小鼠，背部去毛，迅速取肝组织 及涂药部位的皮肤组织各2块，其中一块用冰冷的生理盐水冲洗，除去血液，滤纸吸干，切 取肝脏及皮肤各0. 5g，分别放入2. 0ml预冷生理盐水的烧杯中，剪碎组织，再倒入试管中， 以高速分散器l〇r/min匀浆两次，每次10秒；再以3500r/min转速离心15分钟，取上清液。 采用黄嘌呤氧化酶法，按试剂盒检测说明书方法测定S0D;采用硫代巴比妥酸法，按试剂盒 检测说明书方法测定MDA值。同时，分离小鼠背