黑柄炭角菌提取物在美白保湿化妆品中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于化妆品领域，特别设及一种黑柄炭角菌提取物在美白保湿化妆品中的 应用。
【背景技术】
[0002] 黑柄炭角菌狂nigripes化1.)Sacc.)系子囊菌纲球壳目炭棒菌科（又名 炭角菌科）炭棒菌属狂ylariasp.)(又名炭角菌属）真菌。在溫带、亚热带、热带地区皆有 分布，故有许多别名如乌灵参、鸡巧等、地炭棍等，在广东地方名鸡巧等、吊金钟，云南地方 名鸡±秋蛋、四川地方名雷震子等。其性味甘平，无毒，通常在死亡的或走向衰败的白蚁巢 穴中生长而被发现。黑柄炭角菌菌丝体生长到一定时期，部分密集纽结形成菌索，突出地面 形成子座，部分菌丝体密集形成菌核，并逐渐脱离菌丝体，悬于地下白蚁巢腔或菌圃上。菌 丝体、菌索、菌核都具有补气固肾、镇静安神等功效，具有很高的食用价值和药用价值。菌丝 体干燥粉十几年前已开发成药品乌灵胶囊（国药准字Z19990048)。
[0003] 研究表明，黑柄炭角菌（乌灵参）不同组织营养和药用成分主要有（1)氨基酸类： 含有约16种水解氨基酸，其中必需氨基酸7种，必需氨基酸占氨基酸总量巧/T) 39. 87%~ 57.60% ; (2)多糖类：乌灵菌粉含多糖为10%左右，其多糖主要由甘露醇、葡萄糖、果糖、鼠 李糖和乳糖等构成；(3)核巧类，如腺巧、尿巧等；(4)巧、儀、铁、锋、儘等十几种矿物质与 微量元素；(5)其他：如薬庆芳等人从发酵乌灵菌粉分离得到的1-化6-二径基苯）-3-径 基-下酬等。
[0004] 目前黑柄炭角菌研究已表明其具有抗自由基、抗氧化性、抗衰老作用，其应用也多 集中在药品、食品、保健品等行业，而在化妆品中，其提取物具有保湿、美白的活性功效未见 报道。
【发明内容】
[0005] 本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供黑柄炭角菌提取物在美 白保湿化妆品中的应用。
[0006] 本发明的另一目的在于提供一种美白保湿化妆品，是基于上述黑柄炭角菌提取物 在美白保湿化妆品中的应用设计得到，其含有黑柄炭角菌提取物。
[0007] 本发明的目的通过下述技术方案实现：黑柄炭角菌提取物在美白保湿化妆品中的 应用。运是基于经本发明人研究发现，黑柄炭角菌提取物具有较好的保湿功效，能有效抑制 体外酪氨酸酶的活性，具有肌肤美白功效，从而提出的发明创造。
[0008] 所述的黑柄炭角菌提取物是指通过任何适当方式从黑柄炭角菌，包含黑柄炭角菌 菌丝、菌索、菌核中的任何一种或几种中提取出的含有有效成分的提取物；优选为通过W下 方法提取得到：通过黑柄炭角菌发酵或W溶剂浸泡黑柄炭角菌，提取，过滤，滤液任选经过 纯化步骤，制成溶液或挥干溶剂制成干粉。
[0009] 所述的发酵为液态发酵、半固态发酵和固态发酵中的一种或至少两种组合发酵。
[0010] 所述的发酵中所用的培养基为适合黑柄炭角菌生长的培养基。
[0011]所述的液态发酵中所用的培养基的组成优选如下：葡萄糖90g/l、硫酸锭3g/L、S水憐酸氨二钟Ig/L、谷氨酸4g/L、巧樣酸Ξ锭2g/L、屯水硫酸亚铁5mg/l、硫酸锋4mg/l， pH5~5. 5。
[0012] 所述的溶剂为水和有机溶剂中的一种或两种。
[0013]所述的水包括蒸馈水、去离子水和自来水等。
[0014]所述的有机溶剂为醇和醋中的一种或两种。
[0015]所述的醇包括乙醇和多元醇等。
[0016]所述的醋包括乙酸乙醋等。
[0017]所述的提取的方法选自W下一种或至少两种组合得到的步骤：浸提、煎煮、超声提 取、膜过滤、离屯、过滤、回流和超临界。
[0018]所述的提取优选为如下的方式①或②：
[0019]①先超声提取，得到的提取液浓缩后，加入乙醇沉淀，过滤，滤液即是；
[0020]②先超声提取，过滤，得到滤液I和滤渣；再用水煎煮滤渣，过滤，得到滤液II，将 滤液I和滤液II合并得到。 阳02U所述的超声提取的条件优选为于50~90°C、100~500W提取60~120min;更优 选为 80°C、120W提取 90min。
[0022] 所述的乙醇的用量按加入乙醇后乙醇的终浓度为体积百分比60~70计，优选为 按65 %计。
[0023]所述的沉淀的条件优选为密封静置12小时。
[0024]所述的纯化的方法选自W下一种或至少两种组合得到的步骤：萃取、离屯、过滤、膜 分离和柱层析。
[00巧]所述的纯化的步骤优选如下：将提取液过大孔吸附树脂，用体积百分比50%的乙 醇溶液洗脱，收集洗脱液，去除乙醇即可。
[0026]所述的大孔吸附树脂优选为D101大孔吸附树脂。
[0027]所述的美白保湿化妆品的形式为膏霜剂、乳剂（水包油型乳液、油包水型乳液）、溶液剂、膜剂、悬浮剂、凝胶、粉状、气雾或喷雾。运些剂型可W通过本领域所熟知的任何常 用方法来制备。
[0028]所述的美白保湿化妆品可W包含其他能够提高所述组合物主要效果且不影响主 要效果的成分。具体的，所述的美白保湿化妆品中还包括除黑柄炭角菌提取物之外的保湿 剂、美白剂、抗氧化剂、维生素、多肤、氨基酸、润肤剂、表面活性剂、紫外吸收剂、防腐剂、消 毒剂、抑调节剂、有机和/或无机颜料、调味剂、冷却剂、止汗剂等。
[0029]所述的黑柄炭角菌提取物占所述化妆品总质量的0~100%，不含端点值0和 100%;优选0. 01 %~50%，更优选1 %~20%。
[0030]一种美白保湿化妆品，是基于上述黑柄炭角菌提取物在美白保湿化妆品中的应用 设计得到，其含有黑柄炭角菌提取物和化妆品领域可接受的辅料。
[0031]所述化妆品领域可接受的辅料可W选自：溶剂、增溶剂、防腐剂、抗氧剂、抑调节 剂、促渗剂、脂质体、保湿剂、增稠剂、馨合剂、肤感调节剂、表面活性剂、乳化剂、推进/抛射 剂、香精、色素，W及其他功效添加剂。
[0032] 本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
[0033] 本发明人首次发现，黑柄炭角菌提取物具有较好的保湿功效，能有效抑制体外酪 氨酸酶的活性，具有肌肤美白功效。运一研究发现，拓宽了黑柄炭角菌的应用领域，提高了 黑柄炭角菌的经济使用价值。
【具体实施方式】
[0034] 下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
[0035] 实施例1-4中所使用的黑柄炭角菌采自广东。 阳〇36] 实施例1
[0037] 黑柄炭角菌菌核用无菌水冲洗干净，再用体积百分比75%的酒精表面灭菌，超净 台上切块成约2mmX2mm大小块状，接种到改良PDA斜面培养基（在PDA基础培养基中添加 酵母浸膏0. 45%，憐酸二氨钟0. 5%，皆为质量比）上，于25°C~30°C常规培养扩大后进入 发酵罐中进行发酵，接种量在体积百分比10%左右，发酵时间2-3天，发酵工艺参数为抑值 为5. 0~7. 0,揽拌速度为120~25化pm，通气量为1~4VVM，发酵溫度为25°C~30°C，罐 压0. 03~0. 05MPa，发酵培养基组成为每升含葡萄糖90g、硫酸锭3g、S水憐酸氨二钟Ig、 谷氨酸4g、巧樣酸Ξ锭2g、屯水硫酸亚铁5mg、硫酸锋4mg，调抑5-5. 5。发酵结束后，离屯、分 离收集菌丝及发酵滤液。发酵滤液经超滤膜（安徽普朗膜技术有限公司，型号化-G8-1000 管式超滤膜）过滤后，收集的滤液为黑柄炭角菌提取物。 阳0測实施例2
[0039]适量黑柄炭角菌菌丝（实施例1制备得到）粉碎，过80目筛，加入相当于菌丝30 倍质量的饮用水，加热至80°C，于此溫度下用超声波（功率为120W)提取90分钟，过滤，得 滤液，浓缩至密度为1. 02,得到黑柄炭角菌提取物。 W40] 实施例3
[0041] 适量黑柄炭角菌菌核粉碎，过80目筛，加入相当于菌核20倍质量的饮用水，加热 至80°C，于此溫度下用超声波（功率为120W)提取90分钟，过滤，得滤液，浓缩至适量，放置 冷却，在揽拌状态下缓慢加入体积百分比95%的乙醇，使最终得到的混合液中乙醇浓度为 体积百分比65%，密封12小时，使沉淀完全，取上清液，减压回收乙醇，浓缩，再用0. 45μm 微孔滤膜过滤，得到黑柄炭角菌提取物。
[0042] 实验例4
[0043] 适量黑柄炭角菌菌索粉碎，过80目筛，加入相当于菌索20倍质量的去离子水，加 热至80°C，于此溫度下用超声波（功率为120W)提取60分钟，过滤。滤渣加入20倍质量的 去离子水加热煮沸，保持微沸1小时，过滤，得滤液。合并2次滤液浓缩至适量，放置冷却， 离屯、后取上清液。加入到预处理好的D101大孔吸附树脂，用3倍树脂柱体积的浓度为体 积百分比50%的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩回收乙醇，收集残液得到黑柄炭角菌提取 物。也可进一步真空干燥或冷冻干燥保存，使用前用去离子水稀释后配置待用。
[0044] 效果实施例
[0045] (1)保湿效果的检测：皮肤角质层水合率试验：测试原理是W电容器为仪器探头， 由于水是皮肤上介质常数最大的物质，当皮肤水分含量发生变化时，皮肤的电容值也发生 变化，所W可W通过测定皮肤电容值，分析皮肤表面水分含量。常用的仪器是Corneometer CM825。通过测量使用产品前后皮肤角质层电容值的变化来衡量角质层含水量的变化，从而 来评价化妆品的保湿功效此种方法对皮肤角质层的水分含量进行定量化，能够灵敏地反应 皮肤水分含量的变化，且重现性好，是目前保湿化妆品功效评价常用的方法之一。
[0046] 实验方法：在应试者左右前臂屈侧划出3X3cm2大小的正方形实验区域，W左臂作 为保湿品的测试区域，右臂相应的对称区域为空白对照，然后用CorneometerCM825测试检 测每个试验部位的水分含量，分别重复5次，得出平均值。
[0047] 保湿效果的检测结果如表1所示：
[0048] 表 1
[0049]
阳0如]注：不同小写字母表示数值