专利名称：：苦瓜叶提取物及其在化妆品中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及化妆品工业，特别涉及的是一种苦瓜叶提取物的制备及其在化妆品中的应用，具体地说是苦瓜叶经提取、纯化后得到苦瓜叶提取物并作为防腐抑菌剂应用于化妆品中，亦可作为祛痘或美白祛斑剂应用到化妆品中。
背景技术：
：化妆品是一种日用消费品，它包括护肤膏霜、护肤乳液、洁肤膏霜、洁肤乳液、化妆水、湿巾、面膜及洗发水等。这些化妆品的原料大同小异，原料大多数为石油加工的副产品，安全性和功效性有限。目前，人们为了保护和改善自己的皮肤和头发，提高产品的安全性，纷纷把具有保健作用的植物性原料添加到化妆品中，希望通过加入这些有效成分，挺高化妆品的安全性，并且在用化妆品清洁和护理的同时，起到更好的消炎抑菌、美白祛斑的功效。
发明内容苦瓜(Mo"/orafcac/2"ra"&a丄.)为葫戸科苦瓜属一年生蔓性草本植物，又名凉瓜、癞瓜、癞葡萄和锦蒸枝等，是一种药食同源植物，其叶大，肾状圆形，长宽各约5-12cm，通常5-7深裂，裂片卵状椭圆形，基部收縮，边缘具波状齿，两面近于光滑或有毛；叶柄长3-6cm。苦瓜叶可入药，《本草纲目》记载"叶晒干为末，治一切丹火毒气，金疮结毒、脂麻疔、大疔，痛不可忍、胃气疼、滚汤、目疼，灯草汤下子苦寒无毒，可益气壮阳"。经研究发现，经提取、纯化的苦瓜叶提取物具有防腐抑菌、祛痘和抑制黑色素生成的功效。因此，本发明提供了一种苦瓜叶提取物，先将苦瓜叶洗净去杂、干燥后进行机械研磨粉碎，制成苦瓜叶粉；再将苦瓜叶粉放入以水和乙醇制得的混合溶剂中加热萃取；溶剂萃取出的组分经色谱法或分馏法进一歩纯化、分离得到产品。所述苦瓜叶的粉碎粒度为1(Him—500^im;溶剂的配置比例为水乙醇1:l一l:19;苦瓜叶与溶剂的比例为1:5—1:40;萃取的温度保持在摄氏35i:—10(rC之间；时间掌握在8—24小时之间；纯化分离具体措施为喷雾干燥、冷冻干燥等。上述所述的苦瓜叶提取物在化妆品中的应用，将苦瓜叶提取物作为植物活性添加剂应用到化妆品中，苦瓜叶提取物的添加量为化妆品的0.1—30%。上述的苦瓜叶提取物是作为防腐抑菌剂应用到化妆品中的。上述的苦瓜叶提取物是作为祛痘物质应用到化妆品中的。上述的苦瓜叶提取物是作为美白祛斑剂应用到化妆品中的。上述所述的化妆品为护肤膏霜、护肤乳液、洁肤膏霜、洁肤乳液、化妆水、湿巾、面膜或洗发水其中之一。本发明通过将具有防腐抗菌、祛痘、美白祛斑功效的苦瓜叶中的有效物质提取出来，经分离纯化后添加到各种化妆品中。进一步提高化妆品的效果，并充分利用了苦瓜叶中的生物活性物质。具体实施例方式苦瓜叶有效物质的提取-将苦瓜叶5公斤清洗并晾干，5(TC烘干后粉碎，过40目筛，然后加入10公斤60%的乙醇，6(TC水浴回流提取三次，每次4小时，合并滤液，低于5(TC浓縮后，得苦瓜叶提取液1.0-1.5公斤，提取液可进行进一步纯化。本发明所述苦瓜叶提取物具有下述的功效试验一抑菌功效采用金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和粉刺丙酸杆菌作为代表菌，检测本药物组合物的抑菌作用。将滤纸制成(^5mm的纸片，高压灭菌后备用，用镊子将灭菌后的滤纸片放入含苦瓜叶提取物的溶液中，浸泡30分钟后取出晾干，用吸管吸取各种菌悬液0.1mL于无菌平皿中，然后倒入已冷却的灭菌培养基15mL，充分混匀后水平放置，因供试菌株的不同，所用培养基种类也不同，待培养基冷凝后，将含苦瓜叶提取物的纸片贴于平板上，以无菌水作为对照，放入培养箱中37'C下细菌培养24h、真菌培养48h。按时取出，用卡尺测定抑菌圈直径，以上操作均在超净工作台上完成，结果见表l。苦瓜叶提取液稀释度菌种-原液1:21:41:8金黄色葡萄球菌21181512大肠杆菌25242113粉刺丙酸杆菌29262320实验证明，苦瓜叶提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和粉刺丙酸杆菌均有很好的抑制作用，说明苦瓜叶提取物是一种抑菌效果明显的天然植物防腐剂。试验二祛痘功效1.治疗方案将面部出现痘点，并反复出现，长期不愈者作为治疗对象，将苦瓜叶提取物与护肤霜基质混合，按照护肤霜的生产方法制成护肤霜，治疗对象每天涂抹加入苦瓜叶提取物1.010.0%的护肤霜早晚各一次。2.治疗评定标准(1)治愈痘点消失，痘点不再出现；(2)显效痘点基本消失；(3)有效痘点有不同程度的减少、减轻或减弱；(4)无效症状无任何改善，甚至有加重趋势。3.本发明治疗痘症106人，其中男56人，女50人，年龄为15—30岁，按上述方案敷用添加苦瓜叶提取物的护肤霜，每天早晚各一次，7天后统计疗效，如下<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>上表表明，本发明用于治疗青少年痘症疗效极佳，疗效高达98.11%，而且治疗时间短，使用方便。同时，在临床测试中，均未发现任何反应，使用用非常安全，性能稳定可靠。试验三抑制B16小鼠黑色素瘤细胞内酪氨酸酶活性实验方法:将培养的B16小鼠黑色素瘤细胞活化配制成单个细胞悬液后，以lxl()S个/ml细胞密度接种于6孔板，将6孔板放入C02培养箱，在37"C、5%C02及饱和湿度条件下，培养24小时后添加含苦瓜提取物的培养液2ml，72小时后收集细胞。用离心机以1000r/min转速离心5min，用磷酸缓冲液(pH6.8)洗2次，加入磷酸缓冲液(pH6.8)制成细胞悬液，计数细胞密度后，调整细胞密度为lxl(^个/ml，取lml细胞悬液离心后去上清液，加入l%TritonX-100(用pH7.4的磷酸缓冲液配制)lml，迅速放入-80。C冰箱冷冻，30min后取出在37。C溶解，加入5mM的L-3，4-二羟基苯丙氨酸(L-DOPA)2ml。调节紫外分光光度计的波长为A475，测定即时反应的吸光度值，再置于37-C条件下30min后测定吸光度值，用L-3，4-二羟基苯丙氨酸(L-DOPA)的自身氧化作参比，用曲酸作为阳性对照，实验重复3次。根据以下公式计算酶抑制率=[(A—B)_(C—D)]+(A—B)其中A:阴性对照组30min后475nm处吸光度值；B:阴性对照组即时475nm处吸光度值；C:受试物组30min后475nm处吸光度值；D:受试物组即时475nm处吸光度值。实验数据经统计后显示31.25250pg/ml的苦瓜提取物对活体B16小鼠黑色素瘤细胞酪氨酸酶活性和细胞内黑色素含量具有抑制作用，酪氨酸酶抑制率为9.85~83.74%，且对酪氨酸酶活性的抑制作用随浓度增加而增加，并呈剂量依赖性(P<0.05)。见表2。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>人的肤色是由皮肤内的黑色素密度和分布来决定的，现在化妆品中主要使用的美白机理为抑制酪氨酸酶活性机理，如熊果苷、曲酸就是这类美白剂。在黑素细胞内，酪氨酸在酪氨酸酶的作用下转化为多巴、多巴醌和多巴色素等，并最终转变为黑色素，再从黑素细胞分泌到邻近的角质形成细胞中，从而使肤色改变或形成色斑，而酪氨酸酶是黑色素形成的关键酶，通过抑制酪氨酸酶活性，阻断黑色素的合成反应链，降低黑色素的形成从而达到美白祛斑的效果，本发明所述的苦瓜叶提取物具有抑制酪氨酸酶活性和黑素生成的作用，因此苦瓜叶提取物可作为美白祛斑剂应用于化妆品中。试验四大鼠急性经皮毒性试验采用最大限量法。设5000mg/kg—个剂量组，20只SD大鼠，雌雄各半。备皮减去大鼠脊柱两侧的被毛，去毛面积4X4cm2。24小时后确认无皮肤损伤，以lml/100gbw将该剂量组苦瓜液提取物溶液滴于6层纱布上，贴敷于已去毛的皮肤上，覆盖称量纸，胶布固定。4h后取下纱布，洗去残留物，观察其中毒症状、体征，连续观察两周，判定其毒性分类。苦瓜叶提取物5g/kg*bw剂量经皮染毒后，两周内未见动物死亡，亦无明显的中毒症状和不良反应，结果见表3。两周实验结束后剖杀全部动物，内脏器官未见明显异常改变，即苦瓜叶提取物对雌、雄SD大鼠的急性经皮MTD大于5g/kgbw，属实际无毒类。表3苦瓜叶提取物对SD大鼠的急性经皮毒性实验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>根据上述试验结果可以得出如下结论，苦瓜叶提取物作为防腐抗菌剂使用时添加比例掌握在0.15.0%范围内；作为祛痘剂使用时添加比例掌握在1.0~10.0%范围内；作为祛斑美白剂使用时添加比例掌握在1.0~30.0%范围内。下面举例对本发明产品做更详细的描述实施例1-按1.0%的添加量，将苦瓜叶提取物与洗涤用品基质混合，按照洗涤用品的生产方法制成洗涤用品，即得具有祛痘、美白祛斑功效的洗涤用品，这些洗涤用品可以是洁面乳液、洁面膏霜。实施例2:按5.0%的添加量，将苦瓜叶提取物与化妆水基质混合，按照化妆水的生产方法制成化妆水，即得具有祛痘、美白祛斑功效的化妆水。实施例3:按10.0。/。的添加量，将苦瓜提取液加入湿巾中，即得具有祛痘、美白祛斑功效的湿巾。实施例4:按20.0%的添加量，将苦瓜叶提取物与面膜基质混合，按照面膜的生产方法制成面膜，即得具有祛痘、美白祛斑功效的面膜。实施例5:按30.0%的添加量，将苦瓜叶提取物与护肤品基质混合，按照护肤品的生产方法制成护肤品，即得具有祛痘、美白祛斑功效的护肤品，这些护肤品包括护肤膏霜、护肤乳液。实施例6:按0.3%的添加量，将苦瓜叶提取物与洗涤用品基质混合，按照洗涤用品的生产方法制成洗涤用品，即得具有一定保质期的洗涤用品，这些洗涤用品可以是洗手液、沐浴液、洁面乳液、洁面膏霜。实施例7:按0.4%的添加量，将苦瓜叶提取物与化妆水基质混合，按照化妆水的生产方法制成化妆水，即得具有一定保质期的化妆水。实施例8:按0.6%的添加量，将苦瓜提取液加入湿巾中，即得具有一定保质期的湿巾。实施例9:按0.8%的添加量，将苦瓜叶提取物与面膜基质混合，按照面膜的生产方法制成面膜，即得具有一定保质期的面膜。实施例10:按1.0%的添加量，将苦瓜叶提取物与护肤品基质混合，按照护肤品的生产方法制成护肤品，即得具有一定保质期的护肤品，这些护肤品包括护肤膏霜、护肤乳液。权利要求1.一种苦瓜叶提取物，其特征在于先将苦瓜叶洗净去杂、干燥后进行机械研磨粉碎，制成苦瓜叶粉；再将苦瓜叶粉放入以水和乙醇制得的混合溶剂中加热萃取；溶剂萃取出的组分经色谱法或分馏法进一步纯化、分离得到产品。2.根据权利要求1所述的苦瓜叶提取物，其特征在于所述苦瓜叶的粉碎粒度为10nm—500^im;溶剂的配置比例为水乙醇1:19;苦瓜叶与溶剂的比例为l:5—1:40;萃取的温度保持在摄氏35t:—10(TC之间；时间掌握在8—24小时之间；纯化分离具体措施为喷雾干燥或冷冻干燥。3.—种如权利要求1或2所述的苦瓜叶提取物在化妆品中的应用，其特征在于所述的苦瓜叶提取物作为植物活性添加剂应用到化妆品中，苦瓜叶提取物的添加量为化妆品的0.1—30%。4.根据权利要求3所述的苦瓜叶提取物在化妆品中的应用，其特征在于苦瓜叶提取物作为防腐抑菌剂应用到化妆品中。5.根据权利要求3所述的苦瓜叶提取物在化妆品中的应用，其特征在于苦瓜叶提取物作为祛痘物质应用到化妆品中。6.根据权利要求3所述的苦瓜叶提取物在化妆品中的应用，其特征在于苦瓜叶提取物作为美白祛斑剂应用到化妆品中。7.根据权利要求3所述的苦瓜叶提取物在化妆品中的应用，其特征在于所述化妆品为护肤膏霜、护肤乳液、洁肤膏霜、洁肤乳液、化妆水、湿巾、面膜或洗发水其中之一。全文摘要本发明公开了一种苦瓜叶提取物，先将苦瓜叶洗净去杂、干燥后进行机械研磨粉碎，制成苦瓜叶粉；再将苦瓜叶粉放入以水和乙醇制得的混合溶剂中加热萃取；溶剂萃取出的组分经色谱法或分馏法进一步纯化、分离得到产品。所述的苦瓜叶提取物在化妆品中的应用是将所述的苦瓜叶提取物作为植物活性添加剂应用到化妆品中，苦瓜叶提取物的添加量为化妆品的0.1-30％，可以作为防腐抑菌剂、祛痘物质或美白祛斑剂应用到化妆品中。文档编号A61Q19/06GK101336880SQ20081014731公开日2009年1月7日申请日期2008年8月7日优先权日2008年8月7日发明者竹温,征闫,黄正梅申请人:北京昂立达技术有限责任公司