一种从黑木耳子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及中药的活性成分提取领域，特别是一种从黑木耳子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法。
【背景技术】
[0002]黑木耳又名黑菜，桑耳、本菌、树鸡、木蛾、木茸等，因形似耳，加之其颜色黑褐色而得名，黑木耳原植物为真菌门担子菌亚门木耳科木耳属植物木耳Auricularia auricula(L.ex Hook.)Underwood。中医认为黑木耳，其性平味甘，人胃、大肠经。具有滋补、润燥、养血益胃、活血止血、润肺、润肠的作用。
[0003]黑木耳中含有的多糖种类较多，采用不同的提取分离手段，可得到不同种类的多糖。大量研究结果表明，黑木耳多糖具有降血脂、抗凝血、抗氧化、抗辐射、抑制肿瘤等多种生物活性功能，现已成为食品、医疗、保健等领域的研究热点。
[0004]随着黑木耳的应用越来越广泛，黑木耳的活性成分提取成为了一个比较热门的课题。黑木耳多糖是黑木耳的主要活性成分之一，对于黑木耳多糖的提取液已经有了一些报道，比如夏尔宁，陈琼华的黑木耳多糖的生物活性，中国药科大学学报，1989，韩春然，马永强，唐娟的黑木耳多糖的提取及降血糖作用，食品与生物技术学报，2006，等文献都对黑木耳多糖的提取进行了研究，提取方法也各不相同。
[0005]但是这些文献都只是在实验室条件下对黑木耳总多糖的提取精制，黑木耳多糖在黑木耳中以α和β两种构型共存，目前对于黑木耳总多糖的工艺研究的文献都没有提到这两种构型的分离，仅仅是从提取总多糖本身入手，后以实验室条件分离纯化黑木耳多糖，这些方法通常不适用工业生产。
[0006]多糖分子量从几千到几百万不等，分子量越大其水溶性越差，黑木耳多糖也不例夕卜。黑木耳多糖大分子量部分水溶性较差，在分离提取中用水做溶剂很难提取完全，即使使用碱液提取，虽然提取率高，但是干燥后得到多糖产品应用时仍然不溶解于水。人体对于此类水溶性差的大分子黑木耳多糖吸收不好。
【发明内容】
[0007]本发明的目的在于提供一种从黑木耳子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法，解决β葡聚糖的水溶性问题，更有利于黑木耳β葡聚糖的吸收利用和产品开发，提高了黑木耳多糖的收率，增加了水溶性，更有利于人体吸收。
[0008]本发明的目的通过以下技术方案来实现:
一种从黑木耳子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法，包括以下步骤:
步骤1、制备黑木耳粗多糖:
取黑木耳子实体，粉碎得到粉末，粉末加2?8wt%入活性炭，用碱液浸提，过滤除去残渣，滤液中加入乙醇，静置，过滤得到沉淀，得黑木耳粗多糖；
步骤2、制备黑木耳β葡聚糖: 取黑木耳粗多糖，干燥后加水搅拌，加入α淀粉酶水解，水解液过滤，弃去滤液，得到残渣，得黑木耳β葡聚糖；
步骤3、制备水溶性β葡聚糖:
取黑木耳β葡聚糖，加碱液搅拌提取，提取液调酸碱度至ΡΗ2.0—6.8，加热水解，水解液过滤，滤液中加入乙醇，静置，分离沉淀并干燥，得到水溶性β葡聚糖。
[0009]所述步骤1中，将黑木耳子实体粉碎后过60目的筛，得到粉末。
[0010]所述步骤1中，向粉末中加入25-40倍重量的碱液浸提取1-6小时，所用碱液的浓度优选是0.1-1.0摩尔/升。
[0011]所述步骤1中，过滤采用滤布进行过滤，其中滤布孔径为0.5-5微米。
[0012]所述步骤1或步骤3中，向滤液中加入1-4倍体积的无水乙醇静置2小时。
[0013]所述步骤2中，黑木耳粗多糖干燥后加5-10倍重量的水搅拌，充分溶解。
[0014]所述步骤3中，碱液浓度是0.1-0.4摩尔/升；所述的加热水解优选为加热至80_100°C，水解时间为1-4小时。
[0015]本发明的有益效果:
1、解决了黑木耳子实体中提取β葡聚糖的工业化生产问题。现有技术提取通常提取的是总多糖，而本发明的方法提取得到了 β葡聚糖，并可应用于工业生产。
[0016]2、解决β葡聚糖的水溶性问题，更有利于黑木耳β葡聚糖的吸收利用和产品开发。分子量大的葡聚糖不溶于水本发明利用酸水解技术降低了大分子量黑木耳多糖的分子量。提高了黑木耳多糖的收率，增加了水溶性，更有利于人体吸收。
【具体实施方式】
[0017]实施例1
称取黑木耳子实体1公斤粉碎，过60目的筛，粉末混合50g的活性炭，加0.1摩尔/升的氢氧化钠溶液25升浸提1小时，0.5微米孔径滤布的板筐过滤除去残渣，得滤液6.2升。滤液加20升的无水乙醇，静置2小时后用0.5微米孔径布的板筐过滤得沉淀，沉淀干燥后称重共152克。沉淀加750毫升水室温搅拌10分钟，加入1克真菌α淀粉酶液(山东杰诺生物酶有限公司)，用0.1摩尔/升的盐酸调节pH值至5.5，50摄氏度保温24小时。而后用0.5微米孔径布的板筐过滤，弃去滤液，残渣加1.0摩尔/升氢氧化钠1.2升搅拌提取2小时，提取液调酸碱度至PH2.0，于90摄氏度加热密封水解1小时，水解液0.5微米孔径布的板筐过滤，滤液加5升无水乙醇，静置2小时后分离沉淀并干燥称重为103克红外光谱表明此产物为β葡聚糖，硫酸苯酚法测多糖含量为71%，高效液相凝胶色谱法测得平均分子量为5606道尔顿；经试验检测，所得到β葡聚糖具有良好的水溶性。
[0018]实施例2
称取黑木耳子实体1公斤粉碎，过60目的筛，粉末混合30g的活性炭，加0.7摩尔/升的氢氧化钠溶液30升浸提2小时，0.5微米孔径滤布的板筐过滤除去残渣，得滤液11.2升。滤液加35升的无水乙醇，静置2小时后用0.5微米孔径布的板筐过滤得沉淀，沉淀干燥后称重共122克。沉淀加1.4升水室温搅拌10分钟，加入0.6克真菌α淀粉酶液(购自无锡澄星生物科技有限公司)，用2摩尔/升的盐酸调节pH值至5.8，50摄氏度保温24小时。而后用0.5微米孔径布的板筐过滤，弃去滤液，残渣加1.0摩尔/升氢氧化钠0.8升搅拌提取2小时，提取液调酸碱度至pH6.8，于100摄氏度加热密封水解4小时，水解液0.5微米孔径布的板筐过滤，滤液加3.2升无水乙醇，静置2小时后分离沉淀并干燥称重为102克，即为本发明物。红外光谱表明此产物为β葡聚糖，硫酸苯酚法测多糖含量为68%，高效液相凝胶色谱法测得平均分子量为497506道尔顿；经试验检测，所得到β葡聚糖具有良好的水溶性。
[0019]实施例3
称取黑木耳子实体1公斤粉碎，过50目的筛，粉末混合40g的活性炭，加0.5摩尔/升的氢氧化钠溶液40升浸提3小时，0.2微米孔径滤布的板筐过滤除去残渣，得滤液22.1升。滤液加60升的无水乙醇，静置2小时后用2微米孔径布的板筐过滤得沉淀，沉淀干燥后称重共143克。沉淀加1升水室温搅拌10分钟，加入1克真菌α淀粉酶液(山东杰诺生物酶有限公司)，pH值至5.5，50摄氏度保温24小时。而后用4微米孔径布的板筐过滤，弃去滤液，残渣加0.6摩尔/升氢氧化钠0.8升搅拌提取2小时，提