一种提高母牛繁殖性能的中药续断提取物的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种提高母牛繁殖性能的中药续断提取物，该续断提取物通过如下方法制备：（a）将干燥的续断和雪里见混合，粉碎，用70~80%乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；（b）将步骤（a）所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c）正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用D101型大孔树脂富集活性成分，先用5~15%乙醇冲洗6~10个柱体积除去大极性成分，再用70~80%乙醇洗脱8~12个柱体积，收集70~80%乙醇洗脱液，减压浓缩；其中，雪里见占续断与雪里见总重的5%~15%。
【专利说明】
一种提高母牛繁殖性能的中药续断提取物
技术领域
[0001 ]本发明属于畜牧业，涉及兽药，具体涉及一种提高母牛繁殖性能的中药续断提取 物，该提取物可明显提高母牛的繁殖性能。
【背景技术】
[0002] 在繁殖母牛饲养过程当中，繁殖母牛饲料中蛋白质、维生素和矿物质等营养物质 缺乏或者营养不均衡，造成母牛子宫壁变薄、子宫收缩减弱、卵巢变小并呈静止状态、不发 情。通过饲喂中药提取物可以提高母牛的营养水平和发情、排卵。
[0003] 中药续断为川续断的根。8~10月采挖，洗净泥沙，除去根头、尾梢及细根，阴干或炕 干。原植物川续断为多年生草本，高60~90厘米。根长锥形，主根明显，或数条并生，外皮黄褐 色，具细长须根。茎直立，多分枝，具棱和浅槽，生细柔毛，棱上疏生刺毛。叶对生;基生叶有 长柄，叶片羽状深裂，先端裂片较大，叶端惭尖，边缘有粗锯齿;茎生叶多为3裂，中央裂片最 大，椭圆形至卵状披针形，长11~13厘米，宽4~6厘米，两侧裂片较小，边缘有粗锯齿，两面被 白色贴伏柔毛;茎梢的叶3裂或全缘，具短柄，毛较少。花小，多数，成球形头状花序;总苞片 数枚，狭披针形，每花外有一苞片，阔倒卵形;副萼具4钝齿，密生柔毛;萼浅盘状具4齿，略呈 卵状三角形;花冠白色或浅黄色，具4枚较深的裂片，花冠管基部渐狭，外侧密被下向的长柔 毛;雄蕊4,着生于花冠管之上部，花丝细长，伸出花冠外;雌蕊1，柱头短杆状而扁。瘦果椭圆 楔形，通常外被萼片，有明显4棱，淡褐色。花期8~9月。果期9~10月。野生于山野及路旁。主要 分布于四川、湖北、湖南、云南、西藏等地。
[0004] 雪里见为天南星科植物雪里见的块茎。初春采收。原植物雪里见为多年生草本，高 20~40厘米。块茎长圆形，周围有肉芽，有多数须状根。块茎顶部生1叶，有长叶鞘;叶柄肉质， 有紫斑;叶片为鸟趾状，5小叶，初为3小叶，小叶片长椭圆形或卵状披针形，长12~14厘米，宽 6~6.5厘米，先端锐尖，基部圆形或阔楔形，下面有紫斑。花单性，雌雄异株；肉穗花序;具佛 焰苞，雄花细小多数;雌花密集序上，子房1室。结浆果。生于深山岩洞口。分布贵州等地。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种提高母牛繁殖性能的中药续断提取物，该提取物可明显 提高母牛的繁殖性能。
[0006] 上述目的是通过如下技术方案得以实现的： 一种提高母牛繁殖性能的中药续断提取物，通过如下方法制备：（a)将干燥的续断和雪 里见混合，粉碎，用70~80%乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取 浓缩液；（b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的 正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁 醇萃取物用水溶解，过滤，用DlOl型大孔树脂富集活性成分，先用5~15%乙醇冲洗6~10个柱 体积除去大极性成分，再用70~80%乙醇洗脱8~12个柱体积，收集70~80%乙醇洗脱液，减压浓 缩;其中，雪里见占续断与雪里见总重的5%~15%。
[0007] 进一步地，所述的中药续断提取物通过如下方法制备：（a)将干燥的续断和雪里见 混合，粉碎，用75%乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液； (b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇 萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（C)正丁醇萃取 物用水溶解，过滤，用DlOl型大孔树脂富集活性成分，先用10%乙醇冲洗8个柱体积除去大极 性成分，再用75%乙醇洗脱10个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩;其中，雪里见占续断 与雪里见总重的10%。
[0008] 进一步地，所述的中药续断提取物通过如下方法制备：（a)将干燥的续断和雪里见 混合，粉碎，用70%乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液； (b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇 萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（C)正丁醇萃取 物用水溶解，过滤，用DlOl型大孔树脂富集活性成分，先用5%乙醇冲洗10个柱体积除去大极 性成分，再用70%乙醇洗脱12个柱体积，收集70%乙醇洗脱液，减压浓缩;其中，雪里见占续断 与雪里见总重的5%。
[0009] 进一步地，所述的中药续断提取物通过如下方法制备：（a)将干燥的续断和雪里见 混合，粉碎，用80%乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液； (b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇 萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（C)正丁醇萃取 物用水溶解，过滤，用DlOl型大孔树脂富集活性成分，先用15%乙醇冲洗6个柱体积除去大极 性成分，再用80%乙醇洗脱8个柱体积，收集80%乙醇洗脱液，减压浓缩;其中，雪里见占续断 与雪里见总重的15%。
[0010] 上述中药续断提取物在提高母牛繁殖性能方面的应用。
[0011] 本发明的优点： 本发明提供的提高母牛繁殖性能的中药续断提取物制备方法简单，可工业化生产;该 提取物可明显提尚母牛的繁殖性能。
【具体实施方式】
[0012] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0013] 实施例1:续断提取物的制备 (a)将5kg干燥的续断和雪里见（占总重10%)混合，粉碎，用75%乙醇溶液热回流提取 (20LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；（b)将步骤(a)所得乙醇提取 浓缩液用水稀释(3L)，依次用石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次)和水饱和的正丁醇萃 取(3LX 3次），减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正 丁醇萃取物用水溶解，过滤，用DlOl型大孔树脂富集活性成分，先用10%乙醇冲洗8个柱体积 除去大极性成分，再用75%乙醇洗脱10个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩即得。
[0014] 实施例2:续断提取物的制备 (a)将5kg干燥的续断和雪里见（占总重5%)混合，粉碎，用70%乙醇溶液热回流提取(20L X3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液;（b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩 液用水稀释(3L)，依次用石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯(3L X 3次)和水饱和的正丁醇萃取(3L X3次），减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃 取物用水溶解，过滤，用DlOl型大孔树脂富集活性成分，先用5%乙醇冲洗10个柱体积除去大 极性成分，再用70%乙醇洗脱12个柱体积，收集70%乙醇洗脱液，减压浓缩即得。
[0015] 实施例3:续断提取物的制备 (a)将5kg干燥的续断和雪里见（占总重15%)混合，粉碎，用80%乙醇溶液热回流提取，合 并提取液(20LX3次），浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；（b)将步骤(a)所得乙醇提取浓 缩液用水稀释(3L)，依次用石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯(3L X 3次)和水饱和的正丁醇(3L X 3次)萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇 萃取物用水溶解，过滤，用DlOl型大孔树脂富集活性成分，先用15%乙醇冲洗6个柱体积除去 大极性成分，再用80%乙醇洗脱8个柱体积，收集80%乙醇洗脱液，减压浓缩即得。
[0016] 实施例4:实施例1的对比，不添加雪里见 (a)将5kg干燥的续断粉碎，用75%乙醇溶液热回流提取(20LX 3次），合并提取液，浓缩 至无醇味得到乙醇提取浓缩液；（b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释(3L)，依次用 石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次)和水饱和的正丁醇萃取(3L X 3次），减压浓缩，分别 得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用 DlOl型大孔树脂富集活性成分，先用10%乙醇冲洗8个柱体积除去大极性成分，再用75%乙醇 洗脱10个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩即得。
[0017] 实施例5:实施例1的对比，雪里见占总重的20% (a)将5kg干燥的续断和雪里见（占总重20%)混合，粉碎，用75%乙醇溶液热回流提取 (20LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；（b)将步骤(a)所得乙醇提取 浓缩液用水稀释(3L)，依次用石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次)和水饱和的正丁醇萃 取(3LX 3次），减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正 丁醇萃取物用水溶解，过滤，用DlOl型大孔树脂富集活性成分，先用10%乙醇冲洗8个柱体积 除去大极性成分，再用75%乙醇洗脱10个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩即得。
[0018] 实施例6:对母牛繁殖性能的影响 一、材料与方法 1、试验样品:分别按照实施例1~5制备提取物1~5。
[0019] 2、方法 2.1试验动物、分组及饲养方法 选择虽无生殖系统疾病、无生殖系统畸形但却因营养不良导致卵巢呈静止状态、不发 情的中国西门塔尔母牛72头，随机分成6组，对照组12头，试验组1~5每组12头。对照组饲喂 基础草料，试验组1~5分别在基础草料的基础上分别添加250g/t的提取物1~5。
[0020] 试验为期1个月。
[0021] 2.2统计指标 统计试验期限内各组母牛发情数量和发情受配量，计算各组母牛发情率和发情受配 率。
[0022]二、结果 由表1可以看出，试验组1~3与对照组相比，母牛发情率和发情受配率均显著提高，差异 显著（P<0.05);试验组4和5与对照组相比，母牛发情率和发情受配率无显著性差异(P> 〇.05)。具体见表1。
[0023]表1提取物对母牛发情率和发情受配率的影响
结果表明，本发明提供的提取物可以显著提高母牛发情率和发情受配率。
[0024] 本发明提取物的上述作用与是否添加雪里见以及雪里见的加入量有关。
[0025] 上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明的保护 范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换， 而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。
【主权项】
1. 一种提高母牛繁殖性能的中药续断提取物，其特征在于，通过如下方法制备：（a)将 干燥的续断和雪里见混合，粉碎，用70~80%乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇 味得到乙醇提取浓缩液;（b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸 乙酯和水饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇 萃取物；（c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用DlOl型大孔树脂富集活性成分，先用5~15%乙 醇冲洗6~10个柱体积除去大极性成分，再用70~80%乙醇洗脱8~12个柱体积，收集70~80%乙 醇洗脱液，减压浓缩;其中，雪里见占续断与雪里见总重的5%~15%。2. 根据权利要求1所述的中药续断提取物，其特征在于，通过如下方法制备：（a)将干燥 的续断和雪里见混合，粉碎，用75%乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙 醇提取浓缩液；（b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙酯和水 饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物； (c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用DlOl型大孔树脂富集活性成分，先用10%乙醇冲洗8个 柱体积除去大极性成分，再用75%乙醇洗脱10个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩;其 中，雪里见占续断与雪里见总重的10%。3. 根据权利要求1所述的中药续断提取物，其特征在于，通过如下方法制备：（a)将干燥 的续断和雪里见混合，粉碎，用70%乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙 醇提取浓缩液；（b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙酯和水 饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物； (c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用DlOl型大孔树脂富集活性成分，先用5%乙醇冲洗10个 柱体积除去大极性成分，再用70%乙醇洗脱12个柱体积，收集70%乙醇洗脱液，减压浓缩;其 中，雪里见占续断与雪里见总重的5%。4. 根据权利要求1所述的中药续断提取物，其特征在于，通过如下方法制备：（a)将干燥 的续断和雪里见混合，粉碎，用80%乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙 醇提取浓缩液；（b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙酯和水 饱和的正丁醇萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物； (c)正丁醇萃取物用水溶解，过滤，用DlOl型大孔树脂富集活性成分，先用15%乙醇冲洗6个 柱体积除去大极性成分，再用80%乙醇洗脱8个柱体积，收集80%乙醇洗脱液，减压浓缩；其 中，雪里见占续断与雪里见总重的15%。5. 权利要求1~4任一所述中药续断提取物在提高母牛繁殖性能方面的应用。
【文档编号】A61P15/08GK105943761SQ201610320538
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年5月16日
【发明人】徐珍
【申请人】苏州毕诺佳医药技术有限公司