一种吡利霉素胶束制剂及其制备方法
【专利摘要】一种吡利霉素胶束制剂，其活性成分为吡利霉素。制备方法为：1）先将部分吡利霉素与油混合，再向其中依次添加助表面活性剂、第一表面活性剂混合得体系A；2）将酒石酸加入水中溶解，溶解后加入剩余量的吡利霉素搅拌混合，混合后再加入第二表面活性剂混合得体系B；3）将体系B加入到体系A中，边加边搅拌，最后去离子水定容，即得。本发明具有药物粒径双范围分布的特点，使得药物具备了既速效又长效的特征，适用于兽医临床；且本发明制备工艺简单可行，便于大规模转化生产应用。
【专利说明】
一种吡利霉素胶束制剂及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及一种吡利霉素胶束制剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 吡利霉素(Pirlimycin)是美国普强公司原始创制的半合成林可胺类抗生素，从化 学结构上讲是林可霉素的衍生物。本类抗生素还包括兽医常用的林可霉素、克林霉素等。吡 利霉素于上世纪90年代批准在美国上市，并定商品名为Pisue，剂型为凝胶剂、溶液剂。吡利 霉素对包括金黄色葡萄球菌、链球菌有非常高的抗菌活性，因此，对奶牛乳腺炎、表皮感染 等疾病的疗效显著。同时药残检测表明，用药后弃乳时间短，只有36h，疗效还显著，因此已 经成为当下治疗奶牛乳腺炎的理想选择。
[0003] 吡利霉素药物本身不溶于水，熔点在210.5~212.5°C之间，但熔融的同时药物也 会分解。盐酸盐易溶于醇类等溶剂，但仍微溶于水，在空气中易吸湿，并形成单水化合物。吡 利霉素主要是通过结合病原菌的50s核糖体亚基，抑制转肽酶活性，阻止蛋白肽链形成，进 而杀死致病菌。
[0004] 吡利霉素在临床使用时，肌肉注射后药物很快达到治疗高峰，随即下降，有较好的 治疗作用，特别是对革兰氏阳性菌引起的菌血症，疗效非常显著。但普通注射剂型疗效维持 时间较短，需要至少一天注射一次，连用3~5天，这样对动物应激就比较大，群体给药也耗 费人力，多次给药也会让用药成本上升，经济效益下降。目前兽药上的缓释技术可以解决用 药次数多的问题，注射给药后药物缓慢释放，疗效长久，但往往有一个弊端就是对于急性病 治疗药物的达峰时间长，达峰浓度低，缓释的优势反而延误了病情。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种吡利霉素胶束制剂，同时提供其制备方法是本发明的 另一发明目的。
[0006] 基于上述目的，本发明采取如下技术方案:一种吡利霉素胶束制剂，其活性成分为 吡利霉素。
[0007] 每100mL胶束制剂中含吡利霉素0.01~10.0g。
[0008] 每100mL胶束制剂由以下组分组成:吡利霉素0.01~10.0g、油0.1~6.0 g、表面活 性剂17.0~35.0g、助表面活性剂3.0~10.0g，酒石酸0.5~2.0g，其余为去离子水。
[0009] 所述表面活性剂由第一表面活性剂和第二表面活性剂制成，所述第一表面活性剂 选自EL-40、RH-40、0P-10、吐温-85和吐温80中的一种或两种的混合物，所述第二表面活性 剂为平平加0。
[0010]每100ml胶束制剂中第一表面活性剂的含量为15.0~30.0g，第二表面活性剂的含 量为2.0~5.0g。
[0011]所述油选自药用大豆油、肉桂醛、油酸乙酯、丁酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯（IPM)、中 链三甘油酯(MCT)中的一种或两种的混合物。
[0012] 所述助表面活性剂选自无水乙醇、I，2-丙二醇、聚乙二醇200、异丙醇和丙三醇中 的一种或两种。
[0013] 所述水为去离子水。
[0014] 所述的吡利霉素胶束制剂的制备方法，包括以下步骤： 1) 先将部分吡利霉素与油混合，再向其中依次添加助表面活性剂、第一表面活性剂混 合得体系A; 2) 将酒石酸加入水中溶解，溶解后加入剩余量的吡利霉素搅拌混合，混合后再加入第 二表面活性剂混合得体系B; 3) 将体系B加入到体系A中，边加边搅拌，最后去离子水定容，即得。
[0015]步骤1)中的吡利霉素用量为吡利霉素总量的50~80%，步骤2)中，搅拌混合的温度 为于20~50°C。
[0016] 本发明制备的吡利霉素胶束制剂还可以继续加入去离子水，以得到较稀的胶束制 剂。
[0017] 本发明制得的胶束制剂具有药物粒径双范围分布的特点（图1和图2)，小范围粒径 分布在1~6nm，大范围粒径分布在1 200~7 OOOnm，双范围的粒径分布，使得药物具备了既 速效又长效的特征。
[0018] 与现有技术相比，本发明的技术方案具有如下优势： 1) 起效迅速、起效时间久:本发明所制得的胶束小范围药物粒径只有1~6nm，比表面积 非常大，由于小尺寸效应，又分布在外相，注射后迅速进入组织液、血液，药物浓度瞬间升 高，并随血液循环流入全身，快速见效;所制得大范围药物粒径在1 200~7 OOOnm，这个范 围的药物粒径，又在胶束内相，使得药物在局部缓慢释放，一直维持着有效血药浓度，让疗 效变得持久；因此，本发明将药物作用最大发挥，用药成本降低，疗效提升，动物应激降至最 小，有着广泛的应用前景； 2) 适用于兽医临床。因为大型规模的养殖场畜禽多，少则数千，多则数万，数十万。如果 每天打一针，连打三天，势必会造成动物应激过大，本来是治疗疾病，频繁打针注射反而更 有可能因为应激加重病情，操作人员频繁操作也会是一场非常大的体力劳动，耗时耗力。如 果使用本发明制备的胶束制剂，只需注射一针，三天内药物通过局部缓释作用慢慢释放，维 持有效的血药浓度，这样三针变成一针，动物应激小，操作人员也可省下很多体力和时间， 且一针的成本要比三针小的多，养殖户损失减小，还能起到同样的治疗效果； 3) 本发明配方可使得不溶于水的吡利霉素变得能溶于水，且可以根据临床需要和规格 要求无限稀释； 4) 本发明制备工艺简单可行，便于大规模转化生产应用。
【附图说明】
[0019] 图1本发明吡利霉素胶束的粒径分布图； 图2本发明的透射电子显微镜照片。
【具体实施方式】
[0020] 以下将通过实施例具体说明本发明，但这些具体实施方案不以任何方式限制本发 明的保护范围。
[0021] 实施例1-10 为使说明书简洁，下面以表的形式给出实施例1-10所述的吡利霉素胶束制剂的重量组 成，具体见表1所示。
[0022] 表1实施例1-10的重量组成
[0023] 实施例1-10所述的吡利霉素胶束制剂的制备方法，包括以下步骤： 1) 先将吡利霉素总量的60%与油混合，再向其中依次添加助表面活性剂、第一表面活性 剂混合得到体系A; 2) 将酒石酸加入水中溶解，溶解后加入剩余量的吡利霉素搅拌混合，混合后再加入第 二表面活性剂混合得体系B;步骤2)中，搅拌混合的温度为40°C ; 3) 将体系B加入到体系A中，边加边搅拌，去离子水定容，即得。
[0024] 在其他实施例中，步骤1)中吡利霉素的用量还可以是吡利霉素总量50%，80%，只 要在50%~80%之间均可;步骤2)中搅拌混合的温度还可以是30°C、50°C，只要满足在20~50 °c均可。
[0025] I、产品测试 以实施例1的样品为例，分别通过马尔文激光粒度分析仪和透射电子显微镜对本发明 制备的样品进行检测，图1是得到的粒径分布图，图2是扫描电镜图。
[0026] 从图1中可以看出，其粒度呈双范围分布，一个小粒径范围在1~6nm，一个大粒径 范围在1 200~7 OOOnm。
[0027]从图2可以看出，吡利霉素药物微粒呈球形或椭球形，分散均匀，无粘连。
[0028] 2、稳定性实验 取实施例1-10的胶束产品分别进行经时试验、加速试验和抗冷冻稳定性试验，观察本 发明胶束的稳定性，确认是否有分层、浑浊或晶体析出等不稳定现象出现。
[0029] 2.1经时试验 取实施例1-10的胶束在室温自然变化条件下储藏6个月，考察胶束的性状及含量变化， 结果表明，药物外观如初，含量稳定，说明经时稳定性良好。
[0030] 2.2加速试验 将实施例1-10的胶束分装于几个玻璃瓶中，密封之后置于温度40°C，相对湿度70%的加 速箱中贮存30d，每隔IOd取样观察。结果表明，药物外观如初，含量稳定，说明热贮稳定性良 好。
[0031] 2.3抗冷冻稳定性 将实施例1-10的胶束在冰箱中-10 °c保存一月后，恢复至室温观察。结果表明，药物外 观如初，含量稳定，表明抗冷冻性良好。
[0032] 3、安全性试验和药效试验 以下通过药物安全性试验和药效试验来进一步阐述本发明所述药物对动物的安全性 及其药效。
[0033] 3.1安全性试验 以实施例1制得的吡利霉素胶束制剂为样品进行以下安全性试验。
[0034] 安全性试验:将40只2kg左右的家兔随机分为4组，每组10只，雌雄各半。第1组为生 理盐水对照组，每只注射2ml，第二组为药物高剂量组每只注射本发明的胶束制剂2ml，第三 组为药物中剂量组每只注射本发明的胶束制剂Iml，第三组为药物低剂量组每只注射本发 明的胶束制剂0.5ml。一次量注射，试验周期为一周。用药后观察家兔的行为表现，中毒情 况，精神情况和死亡情况，并记录。实验结束后，如有死亡的家兔，剖检观察，若无死亡则每 组随机选取两只，人工致死后剖检观察脏器的病变，并进行分析。
[0035] 结果均表明：和对照组相比，试验组高中低剂量的各组家兔活动情况和健康状态 均正常，剖检后各脏器也无异常病变和其他中毒性特征，各组之间无差异，表明本发明胶束 安全性良好。
[0036] 3.2药效试验 以实施例1制得的吡利霉素胶束制剂为样品进行以下药效试验。
[0037]药效试验:将100只2周龄艾维因白羽肉鸡随机分为5组，每组20只，第1~5组分别 标记为健康对照组、阳性对照组、5%林可霉素注射液用药组、5%普通吡利霉素注射液药物组 和本发明实施例1的胶束制剂组。实验前将链球菌液体培养扩增，再用生理盐水将浓度稀释 至1.0 X IO9个/ml，将稀释后的菌液除了健康对照组外，其余每组鸡每只胸部肌肉注射 1.0 ml，当50%的鸡出现昏睡，两翅下垂，双眼迷离，离群独卧，饮水采食明显降低时，开始用 药。第1组不攻毒不用药，第2组攻毒不用药，第3~5组分别注射对应的药物。为了验证胶束 制剂的速效长效效果，本实验周期为一周，第3、4组前三天每天注射一次，连用三天，第5组 即本发明胶束制剂只第一天注射一次后不再用药，而后对比效果。各组鸡用药量为1.0ml， 用法为胸部肌肉注射。
[0038] 评价标准： 死亡:指试验期间试验动物出现死亡，-1分； 无效:指用药后，试验动物虽未出现死亡，但症状表现和体征未有改善迹象，0分； 转归:指用药后，试验动物取得了一定效果，处于康复期，1分； 痊愈:指用药后，试验动物完全康复，与发病前的一切行为和体征无差别，2分； 总有效率:指用药后转归和痊愈的试验动物个数与本组试验动物总数的比值X100%; 保护率:指用药后的总有效率减去未用药的对照组的总有效率； 表2药效对比试验结果
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[0039]试验结果见表2所示。由表2可知，攻毒后不使用任何药物，完全靠动物自身抵抗力 的情况下，有40%鸡存活;林可霉素注射液，转归率25%，痊愈率50%，总有效率75%，保护率为 35%;普通吡利霉素注射液对链球菌感染的转归率30%，痊愈率50%，总有效率为80%，保护率 为40%;本发明吡利霉素胶束制剂在比其他两组用药组少用两次药的情况下，转归率依然达 到了 30%，痊愈率60%，总有效率达到90%，保护率达到50%。可见，本发明的吡利霉素胶束制剂 具有即速效又长效的作用。
【主权项】
1. 一种吡利霉素胶束制剂，其活性成分为吡利霉素。2. 如权利要求1所述的吡利霉素胶束制剂，其特征在于，每100ml胶束制剂中含吡利霉 素0·01~10·0g。3. 如权利要求2所述的一种吡利霉素胶束制剂，其特征在于，每100ml胶束制剂由以下 组分组成：吡利霉素0.01~10.〇g、油0.1~6.0 g、表面活性剂17.0~35.0g、助表面活性剂 3.0~10.0g，酒石酸0.5~2.0g，其余为去离子水。4. 如权利要求3所述的一种吡利霉素胶束制剂，其特征在于，所述表面活性剂由第一表 面活性剂和第二表面活性剂制成，所述第一表面活性剂选自EL-40、RH-40、0P-10、吐温-85 和吐温80中的一种或两种的混合物，所述第二表面活性剂为平平加0。5. 如权利要求4所述的一种吡利霉素胶束制剂，其特征在于，每100ml胶束制剂中第一 表面活性剂的含量为15.0~30.0g，第二表面活性剂的含量为2.0~5.0g。6. 如权利要求3-5任一所述的一种吡利霉素胶束制剂，其特征在于，所述油选自药用大 豆油、肉桂醛、油酸乙酯、丁酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯（IPM)、中链三甘油酯(MCT冲的一种或 两种的混合物。7. 如权利要求3-5任一所述的一种吡利霉素胶束制剂，其特征在于，所述助表面活性剂 选自无水乙醇、1，2_丙二醇、聚乙二醇200、异丙醇和丙三醇中的一种或两种。8. 如权利要求3-5任一所述的一种吡利霉素胶束制剂，其特征在于，所述水为去离子 水。9. 权利要求4或5所述的吡利霉素胶束制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 1) 先将部分吡利霉素与油混合，再向其中依次添加助表面活性剂、第一表面活性剂混 合得体系A; 2) 将酒石酸加入水中溶解，溶解后加入剩余量的吡利霉素搅拌混合，混合后再加入第 二表面活性剂混合得体系B; 3) 将体系B加入到体系A中，边加边搅拌，最后去离子水定容，即得。10. 如权利要求9所述的吡利霉素胶束制剂的制备方法，其特征在于，步骤1)中的吡利 霉素用量为吡利霉素总量的50~80%，步骤2)中，搅拌混合的温度为20~50°C。
【文档编号】A61K47/14GK106074384SQ201610642421
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年8月8日 公开号201610642421.3, CN 106074384 A, CN 106074384A, CN 201610642421, CN-A-106074384, CN106074384 A, CN106074384A, CN201610642421, CN201610642421.3
【发明人】苗耀天, 胡冰, 董伟, 罗哲学, 刘添泰
【申请人】甘肃新天马制药股份有限公司