一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法
【专利摘要】一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法，它涉及一种黄瓜籽的综合利用方法。本发明的目的是要解决现有技术不能同时提取和利用黄瓜籽中的多种成分，提取成本高和资源浪费的问题。步骤：一、采用水浸法提取黄瓜籽中的水溶性成分；二、将步骤一得到的黄瓜籽滤渣烘干后粉碎成粉末，再采用超临界CO2萃取法进行萃取，得到黄瓜籽脂肪油和残渣萃余物；三、采用酶解法对步骤二得到的残渣萃余物进行酶解，再进行灭活和过滤；最后使用超滤法分离酶解后的滤液中的黄瓜籽多糖和黄瓜籽多肽。本发明有效地提高了黄瓜籽药材的综合利用价值，为黄瓜籽水溶性成分和残渣的利用提供了一种新途径。本发明可获得一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法。
【专利说明】一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种黄瓜籽的综合利用方法，尤其涉及黄瓜籽中脂肪油、多糖、多肽、维生素和有机酸等多种成分的综合利用方法，属于黄瓜籽的提取和利用领域。
【背景技术】
[0002]黄瓜籽,异名哈利苏,是葫芦科甜瓜属植物黄瓜(Cucumis sativus L.)的干燥成熟种子，全国各地均有栽培，药源广，药用价值高。其在民间广泛用于接骨、壮骨和补钙，用药历史悠久，《中华本草》中记载黄瓜籽具有续筋接骨、祛风、消痰的功效。主治骨折筋伤、风湿痹痛、老年痰喘。现代研究证实，黄瓜籽脂肪油含量较高，其中含有大量人体必需的脂肪酸(油酸、亚油酸)、留醇类成分和Mg、Ca、Fe、P等微量元素。除此之外，黄瓜籽还含有多糖、多肽、有机酸和维生素等多种活性成分，对腰酸、背痛、手脚麻木、腿脚抽筋、风湿病、关节炎、颈椎病、骨折、骨裂等疾病有很好的恢复治疗和保健功能，同时能调节人体脏器间的互动，促进人体细胞的再生，调解经络，营养大脑、小脑，使人增强记忆力，调解人身体的协调与平衡，属药食兼用品种。但目前对黄瓜籽的利用主要是脂肪酸和微量元素，对多糖、多肽成分利用相对较少，而对维生素和有机酸等其他水溶性成分的利用少之又少，提取脂肪油后的黄瓜籽残渣一般作为废物丢弃，造成资源的严重浪费。因此如何综合开发利用黄瓜籽，提高资源的综合利用率，乃是目前亟待解决的问题之一。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是要解决现有技术不能同时提取和利用黄瓜籽中的多种成分，提取成本高和资源浪费的问题，而提供一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法。
[0004]一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法，包括:
[0005]一、采用水浸法提取黄瓜籽中的水溶性成分；
[0006]步骤一中所述的水浸法包括:将黄瓜籽粉碎，得到黄瓜籽粗粉；将黄瓜籽粗粉浸泡在水中12h~24h，再过滤，得到黄瓜籽滤渣和滤液，滤液中含有水溶性有效成分；所述的水溶性有效成分包括维生素和有机酸；
[0007]步骤一中所述的黄瓜籽粗粉与水的料液比为1: (5~10);
[0008]二、将步骤一得到的黄瓜籽滤渣烘干后粉碎成粉末，再采用超临界CO2萃取法进行萃取，得到黄瓜籽脂肪油和残渣萃余物；
[0009]步骤二中所述的超临界CO2萃取法，包括以下步骤:在萃取压力25MPa~35MPa、萃取温度35°C~55°C和CO2流量45L/min~60L/min条件下连续萃取Ih~2h，得到黄瓜籽脂肪油和残渣萃余物；
[0010]三、采用酶解法对步骤二得到的残渣萃余物进行酶解，再在80°C~100°C的温度下灭活IOmin~20min,向灭活后的酶解液中加入蒸懼水，以5000r/min~10000r/min的速度进行离心，取上清液进行过滤，得到酶解后的滤液；最后使用超滤法分离酶解后的滤液中的黄瓜籽多糖和黄瓜籽多肽；[0011]步骤三中所述的灭活后的酶解液与蒸馏水的体积比为1:1 ;
[0012]步骤三中所述的酶解法，包括以下步骤:向步骤二得到的残渣萃余物中加入蒸馏水，按照g/mL计，残渣萃余物与水的料液比为1:6~1:20，搅拌混匀，得到残渣萃余物/蒸馏水混合液；调节残渣萃余物/蒸馏水混合液的pH为5.0~8.0，再加入蛋白酶，在温度为50°C~65°C和搅拌速度为200r/min~300r/min的条件下搅拌酶解3h~8h ;所述的蛋白酶的加入总量为2500U/g~5500U/g ；
[0013]步骤三中所述的使用超滤法分离酶解后的滤液中的黄瓜籽多糖和黄瓜籽多肽的方法，包括以下步骤:
[0014]①将酶解后的滤液经过截留分子质量为IOKDa的超滤膜超滤，当超滤杯中酶解后的滤液剩余量为酶解后的滤液总体积的1/5时，收集滤过液，并向超滤杯中补充蒸馏水至酶解后的滤液的初始体积，再次超滤；
[0015]②重复步骤①3次~4次，停止超滤，收集每次滤过液和截留液；步骤②所述的每次滤过液为分子质量〈lOKDa的多肽液；步骤②中所述的截留液为分子质量>10KDa的粗多糖液；
[0016]③在温度为50°C~60°C的条件下将截留液减压浓缩至截留液原始体积的1/2~1/3，向浓缩后的截留液中加入乙醇，得到截留液/乙醇溶液；将截留液/乙醇溶液静置Sh~12h，抽滤，得到沉淀，依次使用无水乙醇、无水乙醚和丙酮洗涤沉淀，真空干燥或冷冻干燥，得到黄瓜籽多糖 粉末；步骤③中所述的截留液/乙醇溶液中乙醇的体积占截留液/乙醇溶液总体积的60 %~95 % ;
[0017]④将步骤③收集的分子质量〈lOKDa的多肽液依次经过截留分子量为IKDa和650Da的超滤膜超滤，分别收集截留液和滤过液，得到分子质量分别为IKDa~lOKDa、650Da~IKDa和<650Da的多肽溶液，分别将三种多肽溶液真空干燥或冷冻干燥，得到三种不同分子质量的黄瓜籽多肽粉末。
[0018]本发明的优点:一、本发明可同时提取和利用黄瓜籽中脂肪油、多糖、多肽、维生素和有机酸等多种化学成分，达到黄瓜籽的综合利用，节省了资源；
[0019]二、本发明提取工艺简单，提取条件温和，有利于保留其化学成分的生物活性，安全环保；
[0020]三、本发明得到的黄瓜籽水溶性成分和多糖可用于制备缓解体力疲劳的保健饮品或保健食品；不同分子质量的黄瓜籽多肽可用于制备预防和治疗骨质疏松症及促进骨折愈合的药物或保健食品，为黄瓜籽水溶性成分、多糖和多肽的利用提供了一条新途径；
[0021]四、本发明中黄瓜籽中维生素的得率为6.6%。~10.3%。，黄瓜籽中脂肪油的得率为8.1 %~26.2%，黄瓜籽中多糖的得率为3.5%~5.8%，黄瓜籽中多肽的得率为45.0%~54.8% ；
[0022]五、本发明的提取成本与现有方法的提取成本相比降低了 50%~60% ；
[0023]六、本发明有效的提高了黄瓜籽药材的综合利用价值，为黄瓜籽水溶性成分和残渣的利用提供了一种新途径。
[0024]本发明可获得一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法。
【专利附图】
【附图说明】[0025]图1为本发明一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法流程图。
【具体实施方式】
[0026]【具体实施方式】一:本实施方式是一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法，包括:
[0027]一、采用水浸法提取黄瓜籽中的水溶性成分；
[0028]步骤一中所述的水浸法包括:将黄瓜籽粉碎，得到黄瓜籽粗粉；将黄瓜籽粗粉浸泡在水中12h~24h，再过滤，得到黄瓜籽滤渣和滤液，滤液中含有水溶性有效成分；所述的水溶性有效成分包括维生素和有机酸；
[0029]步骤一中所述的黄瓜籽粗粉与水的料液比为1: (5~10);
[0030]二、将步骤一得到的黄瓜籽滤渣烘干后粉碎成粉末，再采用超临界CO2萃取法进行萃取，得到黄瓜籽脂肪油和残渣萃余物；[0031]步骤二中所述的超临界CO2萃取法，包括以下步骤:在萃取压力25MPa~35MPa、萃取温度35°C~55°C和CO2流量45L/min~60L/min条件下连续萃取Ih~2h，得到黄瓜籽脂肪油和残渣萃余物；
[0032]三、采用酶解法对步骤二得到的残渣萃余物进行酶解，再在80°C~100°C的温度下灭活IOmin~20min,向灭活后的酶解液中加入蒸懼水，以5000r/min~10000r/min的速度进行离心，取上清液进行过滤，得到酶解后的滤液；最后使用超滤法分离酶解后的滤液中的黄瓜籽多糖和黄瓜籽多肽；
[0033]步骤三中所述的灭活后的酶解液与蒸馏水的体积比为1:1;
[0034]步骤三中所述的酶解法，包括以下步骤:向步骤二得到的残渣萃余物中加入蒸馏水，按照g/mL计，残渣萃余物与水的料液比为1:6~1:20，搅拌混匀，得到残渣萃余物/蒸馏水混合液；调节残渣萃余物/蒸馏水混合液的pH为5.0~8.0，再加入蛋白酶，在温度为50°C~65°C和搅拌速度为200r/min~300r/min的条件下搅拌酶解3h~8h ;所述的蛋白酶的加入总量为2500U/g~5500U/g ；
[0035]步骤三中所述的使用超滤法分离酶解后的滤液中的黄瓜籽多糖和黄瓜籽多肽的方法，包括以下步骤:
[0036]①将酶解后的滤液经过截留分子质量为IOKDa的超滤膜超滤，当超滤杯中酶解后的滤液剩余量为酶解后的滤液总体积的1/5时，收集滤过液，并向超滤杯中补充蒸馏水至酶解后的滤液的初始体积，再次超滤；
[0037]②重复步骤①3次~4次，停止超滤，收集每次滤过液和截留液；步骤②所述的每次滤过液为分子质量〈lOKDa的多肽液；步骤②中所述的截留液为分子质量>10KDa的粗多糖液；
[0038]③在温度为50°C~60°C的条件下将截留液减压浓缩至截留液原始体积的1/2~1/3，向浓缩后的截留液中加入乙醇，得到截留液/乙醇溶液；将截留液/乙醇溶液静置Sh~12h，抽滤，得到沉淀，依次使用无水乙醇、无水乙醚和丙酮洗涤沉淀，真空干燥或冷冻干燥，得到黄瓜籽多糖粉末；步骤③中所述的截留液/乙醇溶液中乙醇的体积占截留液/乙醇溶液总体积的60 %~95 % ;
[0039]④将步骤③收集的分子质量〈lOKDa的多肽液依次经过截留分子量为IKDa和650Da的超滤膜超滤，分别收集截留液和滤过液，得到分子质量分别为IKDa~lOKDa、650Da~IKDa和<650Da的多肽溶液，分别将三种多肽溶液真空干燥或冷冻干燥，得到三种不同分子质量的黄瓜籽多肽粉末。
[0040]本实施方式的优点:一、本实施方式可同时提取和利用黄瓜籽中脂肪油、多糖、多肽、维生素和有机酸等多种化学成分，达到黄瓜籽的综合利用，节省了资源；
[0041]二、本实施方式提取工艺简单，提取条件温和，有利于保留其化学成分的生物活性，安全环保；
[0042]三、本实施方式得到的黄瓜籽水溶性成分和多糖可用于制备缓解体力疲劳的保健饮品或保健食品；不同分子质量的黄瓜籽多肽可用于制备预防和治疗骨质疏松症及促进骨折愈合的药物或保健食品，为黄瓜籽水溶性成分、多糖和多肽的利用提供了一条新途径；
[0043]四、本实施方式中黄瓜籽中维生素的得率为6.6%。~10.3%。，黄瓜籽中脂肪油的得率为8.1%~26.2%，黄瓜籽中多糖的得率为3.5%~5.8%，黄瓜籽中多肽的得率为
45.0%~54.8% ；
[0044]五、本实施方式的提取成本与现有方法的提取成本相比降低了 50%~60% ；
[0045]六、本实施方式有效的提高了黄瓜籽药材的综合利用价值，为黄瓜籽水溶性成分和残渣的利用提供了一种新途径。
[0046]本实施方式可获得一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法。
[0047]【具体实施方式】二:本实施方式与【具体实施方式】一不同点是:步骤三中所述的蛋白酶为碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、植物蛋白水解复合酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶中的一种、两种或三种按任意比例组成。其他步骤与【具体实施方式】一相同。
[0048]【具体实施方式】三:本实施方式与【具体实施方式】一或二之一不同点是:步骤三④所述的乙醇为医用酒精或无水乙醇。其他步骤与【具体实施方式】一或二相同。
[0049]【具体实施方式】四:本实施方式与【具体实施方式】一至三之一不同点是:步骤一中将黄瓜籽粗粉浸泡在水中18h~24h，再过滤，得到黄瓜籽滤渣和滤液，滤液中含有水溶性有效成分。其他步骤与【具体实施方式】一至三相同。
[0050]【具体实施方式】五:本实施方式与【具体实施方式】一至四之一不同点是:步骤二中所述的超临界CO2萃取法，包括以下步骤:在萃取压力30MPa~35MPa、萃取温度45°C~55°C和CO2流量50L/min~60L/min条件下连续萃取Ih~2h，得到黄瓜籽脂肪油和残渣萃余物。其他步骤与【具体实施方式】一至四相同。
[0051]【具体实施方式】六:本实施方式与【具体实施方式】一至五之一不同点是:步骤三中采用酶解法对步骤二得到的残渣萃余物进行酶解，再在90°C~100°C的温度下灭活lOmin，向灭活后的酶解液中加入蒸馏水，以8000r/min~10000r/min的速度进行离心，取上清液进行过滤，得到酶解后的滤液。其他步骤与【具体实施方式】一至五相同。
[0052] 【具体实施方式】七:本实施方式与【具体实施方式】一至六之一不同点是:步骤三中所述的酶解法，包括以下步骤:向步骤二得到的残渣萃余物中加入蒸馏水，按照g/mL计，残渣萃余物与水的料液比为1:10~1:20，搅拌混匀，得到残渣萃余物/蒸馏水混合液；调节残渣萃余物/蒸馏水混合液的pH为7.0~8.0，再加入蛋白酶，在温度为55°C~65°C和搅拌速度为200r/min~300r/min的条件下搅拌酶解5h~8h。其他步骤与【具体实施方式】一至六相同。[0053]【具体实施方式】八:本实施方式与【具体实施方式】一至七之一不同点是:步骤三中所述的酶解法，包括以下步骤:向步骤二得到的残渣萃余物中加入蒸馏水，按照g/mL计，残渣萃余物与水的料液比为1:15~1:20，搅拌混匀，得到残渣萃余物/蒸馏水混合液；调节残渣萃余物/蒸馏水混合液的pH为5.0~6.0，再加入蛋白酶，在温度为50°C~55°C和搅拌速度为200r/min~300r/min的条件下搅拌酶解3h~5h。其他步骤与【具体实施方式】一至七相同。
[0054]【具体实施方式】九:本实施方式与【具体实施方式】一至八之一不同点是:步骤三③中在温度为55°C~60°C的条件下将截留液减压浓缩至截留液原始体积的1/2~1/3，IOh~12h，抽滤，得到沉淀，依次使用无水乙醇、无水乙醚和丙酮洗涤沉淀，真空干燥或冷冻干燥，得到黄瓜籽多糖粉末。其他步骤与【具体实施方式】一至八相同。
[0055]【具体实施方式】十:本实施方式与【具体实施方式】一至九之一不同点是:步骤三③中所述的截留液/乙醇溶液中乙醇的体积占截留液/乙醇溶液总体积的60%~95%。其他步骤与【具体实施方式】一至九相同。
[0056]采用以下试验验证本发明的有益效果:
[0057]试验一:一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法,包括:
[0058]一、采用水浸法提取黄瓜籽中的水溶性成分；
[0059]步骤一中所述的水浸法包括:将黄瓜籽粉碎，得到黄瓜籽粗粉；将黄瓜籽粗粉浸泡在水中24h，再过滤，得到黄瓜籽滤渣和滤液，滤液中含有水溶性有效成分；所述的水溶性有效成分包括维生素和有机酸；
[0060]步骤一中所述的黄瓜籽粗粉与水的料液比为1:10 ;
[0061]二、将步骤一得到的黄瓜籽滤渣烘干后粉碎成粉末，再采用超临界CO2萃取法进行萃取，得到黄瓜籽脂肪油和残渣萃余物；
[0062]步骤二中所述的超临界CO2萃取法，包括以下步骤:在萃取压力35MPa、萃取温度35°C和CO2流量45L/min条件下连续萃取2h，得到黄瓜籽脂肪油和残渣萃余物；
[0063]三、采用酶解法对步骤二得到的残渣萃余物进行酶解，再在100°C的温度下灭活IOmin,向灭活后的酶解液中加入蒸馏水，以10000r/min的速度进行离心，取上清液进行过滤，得到酶解后的滤液；最后使用超滤法分离酶解后的滤液中的黄瓜籽多糖和黄瓜籽多肽；
[0064]步骤三中所述的灭活后的酶解液与蒸馏水的体积比为1:1;
[0065]步骤三中所述的酶解法，包括以下步骤:向步骤二得到的残渣萃余物中加入蒸馏水，按照g/mL计，残渣萃余物与水的料液比为1: 8，搅拌混匀，得到残渣萃余物/蒸馏水混合液；调节残渣萃余物/蒸馏水混合液的PH为8.0，再加入蛋白酶，在温度为50°C和搅拌速度为200r/min的条件下搅拌酶解6.5h ;所述的蛋白酶为碱性蛋白酶和中性蛋白酶，碱性蛋白酶和中性蛋白酶的质量比为3:1 ;所述的蛋白酶的加入总量为4500U/g ；
[0066]步骤三中所述的使用超滤法分离酶解后的滤液中的黄瓜籽多糖和黄瓜籽多肽的方法，包括以下步骤:
[0067]①将酶解后的滤液经过截留分子质量为IOKDa的超滤膜超滤，当超滤杯中酶解后的滤液剩余量为酶解后的滤液总体积的1/5时，收集滤过液，并向超滤杯中补充蒸馏水至酶解后的滤液的初始体积，再次超滤；[0068]②重复步骤①3次，停止超滤，收集每次滤过液和截留液；步骤②所述的每次滤过液为分子质量〈lOKDa的多肽液；步骤②中所述的截留液为分子质量>10KDa的粗多糖液；
[0069]③在温度为55°C的条件下将截留液减压浓缩至截留液原始体积的1/3，向浓缩后的截留液中加入乙醇，得到截留液/乙醇溶液；将截留液/乙醇溶液静置12h，抽滤，得到沉淀，依次使用无水乙醇、无水乙醚和丙酮洗涤沉淀，真空干燥或冷冻干燥，得到黄瓜籽多糖粉末；步骤③中所述的截留液/乙醇溶液中乙醇的体积占截留液/乙醇溶液总体积的95% ；
[0070]④将步骤③收集的分子质量〈lOKDa的多肽液依次经过截留分子量为IKDa和650Da的超滤膜超滤，分别收集截留液和滤过液，得到分子质量分别为IKDa~lOKDa、650Da~IKDa和<650Da的多肽溶液，分别将三种多肽溶液真空干燥或冷冻干燥，得到三种不同分子质量的黄瓜籽多肽粉末。
[0071]本试验步骤三③中所述的乙醇为医用酒精；
[0072]本试验中黄瓜籽中维生素的得率为9.68%。，黄瓜籽中脂肪油的得率为25.65%,黄瓜籽中多糖的得率为5.24%，黄瓜籽中多肽的得率为53.6% ；
[0073]本试验的提取成本与现有方法的提取成本相比降低了 55%。
[0074]试验二:一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法，包括:
[0075]一、采用水 浸法提取黄瓜籽中的水溶性成分；
[0076]步骤一中所述的水浸法包括:将黄瓜籽粉碎，得到黄瓜籽粗粉；将黄瓜籽粗粉浸泡在水中18h，再过滤，得到黄瓜籽滤渣和滤液，滤液中含有水溶性有效成分；所述的水溶性有效成分包括维生素和有机酸；
[0077]步骤一中所述的黄瓜籽粗粉与水的料液比为1:8 ；
[0078]二、将步骤一得到的黄瓜籽滤渣烘干后粉碎成粉末，再采用超临界CO2萃取法进行萃取，得到黄瓜籽脂肪油和残渣萃余物；
[0079]步骤二中所述的超临界CO2萃取法，包括以下步骤:在萃取压力30MPa、萃取温度45°C和CO2流量45L/min条件下连续萃取2h，得到黄瓜籽脂肪油和残渣萃余物；
[0080]三、采用酶解法对步骤二得到的残渣萃余物进行酶解，再在90°C的温度下灭活IOmin,向灭活后的酶解液中加入蒸馏水，以5000r/min的速度进行离心，取上清液进行过滤，得到酶解后的滤液；最后使用超滤法分离酶解后的滤液中的黄瓜籽多糖和黄瓜籽多肽；
[0081]步骤三中所述的灭活后的酶解液与蒸馏水的体积比为1:1;
[0082]步骤三中所述的酶解法，包括以下步骤:向步骤二得到的残渣萃余物中加入蒸馏水，按照g/mL计，残渣萃余物与水的料液比为1:12，搅拌混匀，得到残渣萃余物/蒸馏水混合液；调节残渣萃余物/蒸馏水混合液的PH为7.0，再加入蛋白酶，在温度为50°C和搅拌速度为250r/min的条件下搅拌酶解5h ;所述的蛋白酶为植物蛋白水解复合酶和木瓜蛋白酶，植物蛋白水解复合酶和木瓜蛋白酶的质量比为1:1 ;所述的蛋白酶的加入总量为5000U/g ；
[0083]步骤三中所述的使用超滤法分离酶解后的滤液中的黄瓜籽多糖和黄瓜籽多肽的方法，包括以下步骤:
[0084]①将酶解后的滤液经过截留分子质量为IOKDa的超滤膜超滤，当超滤杯中酶解后的滤液剩余量为酶解后的滤液总体积的1/5时，收集滤过液，并向超滤杯中补充蒸馏水至酶解后的滤液的初始体积，再次超滤；
[0085]②重复步骤①4次，停止超滤，收集每次滤过液和截留液；步骤②所述的每次滤过液为分子质量〈lOKDa的多肽液；步骤②中所述的截留液为分子质量>10KDa的粗多糖液；
[0086]③在温度为60°C的条件下将截留液减压浓缩至截留液原始体积的1/2，向浓缩后的截留液中加入乙醇，得到截留液/乙醇溶液；将截留液/乙醇溶液静置10h，抽滤，得到沉淀，依次使用无水乙醇、无水乙醚和丙酮洗涤沉淀，真空干燥或冷冻干燥，得到黄瓜籽多糖粉末；步骤③中所述的截留液/乙醇溶液中乙醇的体积占截留液/乙醇溶液总体积的85% ；
[0087]④将步骤③收集的分子质量〈lOKDa的多肽液依次经过截留分子量为IKDa和650Da的超滤膜超滤，分别收集截留液和滤过液，得到分子质量分别为IKDa~lOKDa、650Da~IKDa和<650Da的多肽溶液，分别将三种多肽溶液真空干燥或冷冻干燥，得到三种不同分子质量的黄瓜籽多肽粉末。[0088]本试验步骤三③中所述的乙醇为无水乙醇；
[0089]本试验中黄瓜籽中维生素的得率为8.54%。，黄瓜籽中脂肪油的得率为20.38%,黄瓜籽中多糖的得率为5.76%，黄瓜籽中多肽的得率为49.72% ；
[0090]本试验的提取成本与现有方法的提取成本相比降低了 58%。
[0091]试验三:一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法，包括:
[0092]一、采用水浸法提取黄瓜籽中的水溶性成分；
[0093]步骤一中所述的水浸法包括:将黄瓜籽粉碎，得到黄瓜籽粗粉；将黄瓜籽粗粉浸泡在水中12h，再过滤，得到黄瓜籽滤渣和滤液，滤液中含有水溶性有效成分；所述的水溶性有效成分包括维生素和有机酸；
[0094]步骤一中所述的黄瓜籽粗粉与水的料液比为1:6 ；
[0095]二、将步骤一得到的黄瓜籽滤渣烘干后粉碎成粉末，再采用超临界CO2萃取法进行萃取，得到黄瓜籽脂肪油和残渣萃余物；
[0096]步骤二中所述的超临界CO2萃取法，包括以下步骤:在萃取压力25MPa、萃取温度55°C和CO2流量65L/min条件下连续萃取2h，得到黄瓜籽脂肪油和残渣萃余物；
[0097]三、采用酶解法对步骤二得到的残渣萃余物进行酶解，再在85°C的温度下灭活IOmin,向灭活后的酶解液中加入蒸馏水，以8000r/min的速度进行离心，取上清液进行过滤，得到酶解后的滤液；最后使用超滤法分离酶解后的滤液中的黄瓜籽多糖和黄瓜籽多肽；
[0098]步骤三中所述的灭活后的酶解液与蒸馏水的体积比为1:1;
[0099]步骤三中所述的酶解法，包括以下步骤:向步骤二得到的残渣萃余物中加入蒸馏水，按照g/mL计，残渣萃余物与水的料液比为1:16，搅拌混匀，得到残渣萃余物/蒸馏水混合液；调节残渣萃余物/蒸馏水混合液的PH为7.5，再加入蛋白酶，在温度为50°C和搅拌速度为300r/min的条件下搅拌酶解7h ;所述的蛋白酶为木瓜蛋白酶和中性蛋白酶，木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的质量比为2:1 ;所述的蛋白酶的加入总量为5500U/g ；
[0100]步骤三中所述的使用超滤法分离酶解后的滤液中的黄瓜籽多糖和黄瓜籽多肽的方法，包括以下步骤:
[0101]①将酶解后的滤液经过截留分子质量为IOKDa的超滤膜超滤，当超滤杯中酶解后的滤液剩余量为酶解后的滤液总体积的1/5时，收集滤过液，并向超滤杯中补充蒸馏水至酶解后的滤液的初始体积，再次超滤；
[0102]②重复步骤①3次，停止超滤，收集每次滤过液和截留液；步骤②所述的每次滤过液为分子质量〈lOKDa的多肽液；步骤②中所述的截留液为分子质量>10KDa的粗多糖液；
[0103]③在温度为60°C的条件下将截留液减压浓缩至截留液原始体积的1/3，向浓缩后的截留液中加入乙醇，得到截留液/乙醇溶液；将截留液/乙醇溶液静置8h，抽滤，得到沉淀，依次使用无水乙醇、无水乙醚和丙酮洗涤沉淀，真空干燥或冷冻干燥，得到黄瓜籽多糖粉末；步骤③中所述的截留液/乙醇溶液中乙醇的体积占截留液/乙醇溶液总体积的80% ；
[0104]④将步骤③收集的分子质量〈lOKDa的多肽液依次经过截留分子量为IKDa和650Da的超滤膜超滤，分别收集截留液和滤过液，得到分子质量分别为IKDa~lOKDa、650Da~IKDa和<650Da的多肽溶液，分别将三种多肽溶液真空干燥或冷冻干燥，得到三种不同分子质量的黄瓜籽多肽粉末。
[0105]本试验步骤三③中所述的乙醇为医用酒精；
[0106]本试验中黄瓜籽中维生素的得率为7.73%。，黄瓜籽中脂肪油的得率为9.72%，黄瓜籽中多糖的得率为4.75%，黄瓜籽中多肽的得率为52.38% ；
[0107] 本试验的提取成本与现有方法的提取成本相比降低了 56%。
【权利要求】
1.一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法，其特征在于一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法，包括: 一、采用水浸法提取黄瓜籽中的水溶性成分； 步骤一中所述的水浸法包括:将黄瓜籽粉碎，得到黄瓜籽粗粉；将黄瓜籽粗粉浸泡在水中12h~24h，再过滤，得到黄瓜籽滤渣和滤液，滤液中含有水溶性有效成分；所述的水溶性有效成分包括维生素和有机酸； 步骤一中所述的黄瓜籽粗粉与水的料液比为1: (5~10); 二、将步骤一得到的黄瓜籽滤渣烘干后粉碎成粉末，再采用超临界CO2萃取法进行萃取，得到黄瓜籽脂肪油和残渣萃余物 ； 步骤二中所述的超临界CO2萃取法，包括以下步骤:在萃取压力25MPa~35MPa、萃取温度35°C~55°C和CO2流量45L/min~60L/min条件下连续萃取Ih~2h，得到黄瓜籽脂肪油和残渣萃余物； 三、采用酶解法对步骤二得到的残渣萃余物进行酶解，再在80°C~100°C的温度下灭活IOmin~20min,向灭活后的酶解液中加入蒸懼水，以5000r/min~10000r/min的速度进行离心，取上清液进行过滤，得到酶解后的滤液；最后使用超滤法分离酶解后的滤液中的黄瓜籽多糖和黄瓜籽多肽； 步骤三中所述的灭活后的酶解液与蒸馏水的体积比为1:1 ; 步骤三中所述的酶解法，包括以下步骤:向步骤二得到的残渣萃余物中加入蒸馏水，按照g/mL计，残渣萃余物与水的料液比为1:6~1:20，搅拌混匀，得到残渣萃余物/蒸馏水混合液；调节残渣萃余物/蒸馏水混合液的pH为5.0~8.0，再加入蛋白酶，在温度为50°C~65°C和搅拌速度为200r/min~300r/min的条件下搅拌酶解3h~8h ;所述的蛋白酶的加入总量为2500U/g~5500U/g ； 步骤三中所述的使用超滤法分离酶解后的滤液中的黄瓜籽多糖和黄瓜籽多肽的方法，包括以下步骤: ①将酶解后的滤液经过截留分子质量为IOKDa的超滤膜超滤，当超滤杯中酶解后的滤液剩余量为酶解后的滤液总体积的1/5时，收集滤过液，并向超滤杯中补充蒸馏水至酶解后的滤液的初始体积，再次超滤； ②重复步骤①3次~4次，停止超滤，收集每次滤过液和截留液；步骤②所述的每次滤过液为分子质量〈lOKDa的多肽液；步骤②中所述的截留液为分子质量>10KDa的粗多糖液； ③在温度为50°C~60°C的条件下将截留液减压浓缩至截留液原始体积的1/2~1/3，向浓缩后的截留液中加入乙醇，得到截留液/乙醇溶液；将截留液/乙醇溶液静置8h~12h，抽滤，得到沉淀，依次使用无水乙醇、无水乙醚和丙酮洗涤沉淀，真空干燥或冷冻干燥，得到黄瓜籽多糖粉末；步骤③中所述的截留液/乙醇溶液中乙醇的体积占截留液/乙醇溶液总体积的60%~95% ； ④将步骤③收集的分子质量〈lOKDa的多肽液依次经过截留分子量为IKDa和650Da的超滤膜超滤，分别收集截留液和滤过液，得到分子质量分别为IKDa~10KDa、650Da~IKDa和<650Da的多肽溶液，分别将三种多肽溶液真空干燥或冷冻干燥，得到三种不同分子质量的黄瓜籽多肽粉末。
2.根据权利要求1所述的一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法，其特征在于步骤三中所述的蛋白酶为碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、植物蛋白水解复合酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶中的一种、两种或三种按任意比例组成。
3.根据权利要求1所述的一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法，其特征在于步骤三④所述的乙醇为医用酒精或无水乙醇。
4.根据权利要求1所述的一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法，其特征在于步骤一中将黄瓜籽粗粉浸泡在水中18h~24h，再过滤，得到黄瓜籽滤渣和滤液，滤液中含有水溶性有效成分。
5.根据权利要求1所述的一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法，其特征在于步骤二中所述的超临界CO2萃取法，包括以下步骤:在萃取压力30MPa~35MPa、萃取温度45°C~55°C和CO2流量50L/min~60L/min条件下连续萃取Ih~2h，得到黄瓜籽脂肪油和残渣萃余物。
6.根据权利要求1所述的一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法，其特征在于步骤三中采用酶解法对步骤二得到的残渣萃余物进行酶解，再在90°C~100°C的温度下灭活IOmin,向灭活后的酶解 液中加入蒸懼水，以8000r/min~10000r/min的速度进行离心,取上清液进行过滤，得到酶解后的滤液。
7.根据权利要求1所述的一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法，其特征在于步骤三中所述的酶解法，包括以下步骤:向步骤二得到的残渣萃余物中加入蒸馏水，按照g/mL计，残渣萃余物与水的料液比为1:10~1:20，搅拌混匀，得到残渣萃余物/蒸馏水混合液；调节残渣萃余物/蒸馏水混合液的pH为7.0~8.0，再加入蛋白酶，在温度为55°C~65°C和搅拌速度为200r/min~300r/min的条件下搅拌酶解5h~8h。
8.根据权利要求1所述的一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法，其特征在于步骤三中所述的酶解法，包括以下步骤:向步骤二得到的残渣萃余物中加入蒸馏水，按照g/mL计，残渣萃余物与水的料液比为1:15~1:20，搅拌混匀，得到残渣萃余物/蒸馏水混合液；调节残渣萃余物/蒸馏水混合液的pH为5.0~6.0，再加入蛋白酶，在温度为50°C~55°C和搅拌速度为200r/min~300r/min的条件下搅拌酶解3h~5h。
9.根据权利要求1所述的一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法，其特征在于步骤三③中在温度为55°C~60°C的条件下将截留液减压浓缩至截留液原始体积的1/2~1/3，向浓缩后的截留液中加入乙醇，得到截留液/乙醇溶液；将截留液/乙醇溶液静置IOh~12h，抽滤，得到沉淀，依次使用无水乙醇、无水乙醚和丙酮洗涤沉淀，真空干燥或冷冻干燥，得到黄瓜籽多糖粉末。
10.根据权利要求1所述的一种提高黄瓜籽药材价值的综合利用方法，其特征在于步骤三③中所述的截留液/乙醇溶液中乙醇的体积占截留液/乙醇溶液总体积的60%~95%。
【文档编号】C11B1/10GK103951713SQ201410211320
【公开日】2014年7月30日 申请日期:2014年5月19日 优先权日:2014年5月19日
【发明者】王伟明, 孟庆杰, 陈丽艳, 张树明, 潘五九, 孙妍 申请人:黑龙江省中医药科学院