一种具有抗菌活性的汉麻韧皮纤维提取物、制备方法及其用途
【专利摘要】本发明涉及一种汉麻韧皮纤维提取物、制备方法及其用途。所述提取方法包括如下步骤：(1)将原料进行水洗；(2)干燥、剪碎；(3)有机溶剂提取；(4)减压浓缩，得初提物浸膏；(5)将初提物浸膏进行使用无机物溶液与有机溶剂的液液萃取，得到浸膏；(6)将浸膏装入硅胶层析柱中，有机溶剂洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，得到所述汉麻韧皮纤维提取物。该提取物具有优异的广谱抗菌效果，可作为天然的抗菌整理剂而应用于纺织品的抗菌整理等过程中。本发明的所述提取物、提取方法及其用途具有十分广泛的工业应用价值和市场前景。
【专利说明】—种具有抗菌活性的汉麻韧皮纤维提取物、制备方法及其用途
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种植物纤维活性成分的提取物、制备方法及其用途，更特别地涉及一种具有抗菌活性的汉麻韧皮纤维提取物、制备方法及其用途，属于汉麻综合利用技术和纺织品应用领域。
【背景技术】
[0002]工业大麻(Cannabis Sativa L.)是一种极具经济价值的麻类植物,人们通过对大麻的基因改良，降低了其毒性成分(四氢大麻酚THC含量低于0.3% )，得到了更加绿色安全的低毒大麻-汉麻。
[0003]我国是汉麻的主产国，种植区域遍及华北、西北、华东、中南等多个地区，产量占世界大麻产量的1/3左右，居世界第一位。丰富的资源储备为我国汉麻产业的开发提供了强有力的支持。
[0004]汉麻因其各方面优良的特性和功能，在当代纺织业中被广泛使用。近年来对汉麻植株中化学成分的研究主要从具有药用价值的汉麻叶以及具有食用价值的汉麻种子中的化学成分、化学成分合成途径以及化学成分活性等方面进行。部分文献也基于药用价值考虑对汉麻植株中的叶部分进行了混合的化学成分提取，并对其抑菌化学成分进行了跟踪、分离和筛选。
[0005]周永凯等人(“大麻纤维的坤俊兴及抗菌机制”，《纺织学报》，28卷第6期，2007年6月)对大麻纤维进行了研究，当将大麻韧皮纤维进行高温消毒、冷却后，仍对多种细菌具有良好的抗菌和抑制作用。
[0006]张岗等人(“正交试验法优选火麻仁油中大麻酚类化合物的提取工艺”，《中药材》，第28卷第5期，2005年5月)公开了提取大麻仁油中活性成分的方法，该方法通过使用甲醇超声提取大麻酌等物质，具有提取率闻、省时、节能等优点。
[0007]成亮等人(“工业大麻研究.1.甲醇提取物的石油醚萃取和正丁醇萃取部分的化学成分”，《中国医药工业杂志》，39 (I)、39 (2)，2008)通过对工业大麻进行甲醇提取，从其石油醚萃取部分分离鉴定了 14个化合物，从其乙酸乙酯萃取部分分离得到了 11个化合物。
[0008]W02004016277A公开了对来自植物的药学活性大麻类物质的提取方法:包括脱羧步骤、用液态二氧化碳提取和降低提取物中非目标物质比例的步骤。
[0009]GB0200620中公开了一种从大麻中提取药物活性成分的方法，包括将剁碎的大麻在足够温度下加热进行脱羧，然后使用CO2进行超临界提取，最后在低温下用乙醇沉淀并过滤除去蜡类物质。
[0010]如上所述，虽然对于大麻进行了大量研究，但主要集中在叶、种等活性成分含量较高的部位，而对于汉麻植株中具有纺织用价值的韧皮纤维中的活性物质的研究较少。
[0011] 但另一方面，提取分离制得汉麻韧皮纤维中的抗菌性类物质，可以对大麻纤维产品的功能保持、开发高档抗菌服装产品具有重要的指导意义，从而在工业上具有良好的应用前景和潜力，这也正是本发明得以完成的动力所在和基础所倚。
【发明内容】
[0012]为了克服上述所指出的诸多缺陷，本发明人对此进行了深入研究，在付出了大量创造性劳动后，从而开发出一种具有抗菌活性的汉麻韧皮纤维提取物、制备方法及其用途，进而完成了本发明。
[0013]具体而言，本发明的技术方案和内容涉及一种具有抗菌活性的汉麻韧皮纤维提取物、制备方法及其用途。
[0014]第一个方面，本发明涉及一种汉麻韧皮纤维提取物的制备方法，所述方法包括如下步骤:
[0015](I)将原料进行水洗；
[0016](2)干燥、剪碎；
[0017](3)有机溶剂提取；
[0018](4)减压浓缩，得初提物浸膏；
[0019](5)将初提物浸膏进行使用无机物溶液与有机溶剂的液液萃取，得到浸膏；
[0020](6)将浸膏装入硅胶层析柱中，有机溶剂洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，得到所述汉麻韧皮纤维提取物。
[0021]在本发明的汉麻韧皮纤维提取物的制备方法中，所述步骤(I)中的原料是汉麻茎中的韧皮纤维(以下有时也称为“汉麻韧皮纤维”)，将其进行常温水洗，洗去表面杂物和/或污物，从而得到干净的汉麻韧皮纤维。
[0022]在本发明的汉麻韧皮纤维提取物的制备方法中，所述步骤(2)中，将干净的汉麻韧皮纤维在40-80°C下真空干燥或自然风干，然后将其剪碎，例如可剪碎成面积小于IcmX Icm,当然这只是示例性例举，也可将其剪碎成更小更细的小块。
[0023]在本发明的汉麻韧皮纤维提取物的制备方法中，所述步骤(3)具体操作如下:向剪碎后的汉麻韧皮纤维中，加入有机溶剂，在60-90°C下搅拌提取2-4小时，提取后过滤并收集滤液。
[0024]其中，所述有机溶剂为具有1-6个碳原子的低级醇，非限定性地例如可为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、正戊醇、正己醇中的任何一种或多种的混合物。
[0025]其中，以重量计，所述有机溶剂与剪碎后的汉麻韧皮纤维的比为10-20:1，例如可为 10:1,15:1 或 20:1。
[0026]其中，提取温度为60_90°C，非限定性地例如可为60°C、70°C、80°C或90°C。
[0027]其中，提取时间为2-4小时，非限定性地例如可为2小时、3小时或4小时。
[0028]需要注意的是，该有机溶剂提取过程可进行I次，或者重复进行2-4次。具体而言，例如可进行I次、2次、3次或4次。
[0029]在本发明的汉麻韧皮纤维提取物的制备方法中，所述步骤(4)具体操作为:将步骤(3)所得的滤液进行减压浓缩，除去溶剂，得初提物浸膏。
[0030]其中，减压浓缩的方式并无特别的限定，例如可使用旋转蒸发仪进行减压浓缩处理，从而将溶剂蒸发除去，得到初提物浸膏。
[0031]在本发明的汉麻韧皮纤维提取物的制备方法中，所述步骤(5)中的无机物溶液为NaCl水溶液，优选为饱和的NaCl水溶液。
[0032]在本发明的汉麻韧皮纤维提取物的制备方法中，所述步骤(5)中的有机溶剂为乙
酸乙酯。
[0033]更优选而言，所述步骤(5)具体操作如下:将初提物浸膏用饱和NaCl水溶液充分摇匀、溶解、抽滤，得到水相和未溶解固体；将未溶解固体用乙酸乙酯充分摇匀、溶解，得到乙酸乙酯相；将所述水相和乙酸乙酯相加入到分液漏斗中，充分摇匀、混合，静置分层，弃去水相，将乙酸乙酯相减压浓缩，得到乙酸乙酯相浸膏。
[0034]其中，饱和NaCl水溶液与初提物浸膏的体积质量比为10_20: lml/g，即每Ig初提取浸膏使用10-20ml饱和NaCl水溶液进行处理，例如可为10: lml/g、12: lml/g、14: lml/g、16:lml/g、18:lml/g 或 20:lml/g。
[0035]其中，乙酸乙酯与所述未溶解固体的体积质量比为5-10:lml/g，即每Ig未溶解固体使用 5-10ml 乙酸乙酯进行处理,例如可为 5: lml/g、6: lml/g、7: lml/g、8: lml/g、9: lml/g或 10:lml/g。
[0036]在本发明的汉麻韧皮纤维提取物的制备方法中，所述步骤(6)具体操作如下:将乙酸乙酯相浸膏用三氯甲烷充分溶解，并加入到粒度为200-300目的硅胶中，充分搅拌均匀，得到硅胶吸附样品；将所述硅胶吸附样品加入到装填好的硅胶层析柱上部，然后使用有机溶剂进行洗脱，待样品被溶剂冲洗至层析柱底部时开始收集洗脱液，收集相当于2-4个柱体积的洗脱液，将该洗脱液减压浓缩，得到所述汉麻韧皮纤维提取物。
[0037]其中，溶解所述乙酸乙酯相浸膏的三氯甲烷与乙酸乙酯相浸膏的质量比为1-2:1，例如可为5:1或2:1。
[0038]其中，进行洗脱的所述有机溶剂为氯仿和甲醇的混合物，其中氯仿和甲醇的体积比为 46-50:1，例如可为 46:1、47:1、48:1、49:1 或 50:1。
[0039]优选地，向上述洗脱的有机溶剂中加入丙酮，即优选的，进行洗脱的所述有机溶剂为氯仿、甲醇和丙酮的混合物，其中氯仿、甲醇、丙酮的体积比为46-50:1:2-4，例如可为46:1:2、47:1:2、48:1:2、49:1:2、50:1:2、46:1:3、47:1:3、48:1:3、49:1:3、50:1:3、46:1:4、47:1: 4、48:1: 4、49:1:4 或 50:1: 4，优选为 46-50:1: 3。
[0040]发明人发现，当加入丙酮时，得到的汉麻韧皮纤维提取物的抗菌性能进一步提高，具有更优异的效果。
[0041]其中，所述硅胶层析柱是按照如下方法装柱的:将200-300目的硅胶浸泡于三氯甲烷中，并充分溶胀，直至不再溶胀为止，然后装柱，并沉降一晚。
[0042]第二个方面，本发明涉及通过上述方法制备得到的汉麻韧皮纤维提取物。
[0043]本发明人通过研究发现，本发明的所述汉麻韧皮纤维提取物具有优异的广谱抗菌效果，可作为天然的抗菌整理剂而应用于纺织品的抗菌整理等过程中。
[0044]因此，第三个方面，本发明涉及所述汉麻韧皮纤维提取物在纺织品领域中的用途。
[0045]在本发明的所述用途中，所述用途为用作纺织品的抗菌整理剂。
[0046]与现有技术相比，本发明的有益效果为:
[0047]1、本发明方法通过选择合适的有机溶剂进行提取，从而可以有效地将抗菌成分提取出来。
[0048]2、本发明方法通过采用液液萃取，进一步富集了有效成分。[0049]3、本发明方法通过合适的柱层析工艺参数和洗脱溶剂的选择、合适硅胶的选择等手段，从而能够得到具有优异抗菌效果的汉麻韧皮纤维抗菌有效成分。
[0050]4、通过使用氯仿、甲醇和丙酮的混合洗脱溶剂体系，能够得到具有优异抗菌性能的韧皮纤维提取物。
【具体实施方式】
[0051]下面通过具体的实施例对本发明进行详细说明，但这些例举性实施方式的用途和目的仅用来例举本发明，并非对本发明的实际保护范围构成任何形式的任何限定，更非将本发明的保护范围局限于此。
[0052]制备例1:硅胶吸附柱装柱
[0053]将200-300目的硅胶浸泡于三氯甲烷中，并充分溶胀，直至不再溶胀为止，然后装柱，并沉降一晚，得到硅胶柱。
[0054]除另有规定外，在下面的所有实施例中所使用的硅胶柱，均为该制备例I中所装填得到的硅胶柱。
[0055]制备例2:硅胶吸附柱装柱
[0056]将200-300目的硅胶直接装柱，并沉降一晚，得到硅胶柱，即未使用三氯甲烷进行充分溶胀。
[0057]实施例1
[0058](I)将汉麻韧皮纤维进行常温水洗，洗去表面杂物和/或污物，从而得到干净的汉麻韧皮纤维。
[0059](2)将干净的汉麻韧皮纤维在40°C下真空干燥，然后将其剪碎成面积小于IcmX Icm的小块。
[0060](3)向剪碎后的汉麻韧皮纤维中，加入为汉麻韧皮纤维重量10倍重量的乙醇，在60°C下搅拌提取4小时，该提取过程可进行I次或2-4次，提取后过滤并收集滤液(当进行多次时，将每次的滤液进行合并)。
[0061](4)使用旋转蒸发仪将步骤(3)所得的滤液进行减压浓缩，除去溶剂，得初提物浸膏。
[0062](5)将初提物浸膏用饱和NaCl水溶液充分摇匀、溶解、抽滤，得到水相和未溶解固体；将未溶解固体用乙酸乙酯充分摇匀、溶解，得到乙酸乙酯相；将所述水相和乙酸乙酯相加入到分液漏斗中，充分摇匀、混合，静置分层，弃去水相，将乙酸乙酯相减压浓缩，得到乙
酸乙酯相浸膏。
[0063]其中，饱和NaCl水溶液与初提物浸膏的体积质量比为10: lml/g ;乙酸乙酯与所述未溶解固体的体积质量比为5ml/g。
[0064](6)将乙酸乙酯相浸膏用三氯甲烷充分溶解，并加入到粒度为200-300目的硅胶中，充分搅拌均匀，得到硅胶吸附样品；将所述硅胶吸附样品加入到装填好的制备例I硅胶柱上部，然后使用氯仿和甲醇的混合有机溶剂进行洗脱，待样品被溶剂冲洗至层析柱底部时开始收集洗脱溶液，收集相当于2个柱体积的洗脱溶液，将该洗脱溶液减压浓缩，得到所述汉麻韧皮纤维提取物，命名为XWl。
[0065]其中，溶解所述乙酸乙酯相浸膏的三氯甲烷与乙酸乙酯相浸膏的质量比为1:1 ;进行洗脱的氯仿和甲醇的体积比为46:1。
[0066]实施例2
[0067](I)将汉麻韧皮纤维进行常温水洗，洗去表面杂物和/或污物，从而得到干净的汉麻韧皮纤维。
[0068](2)将干净的汉麻韧皮纤维在60°C下真空干燥，然后将其剪碎成面积小于IcmX Icm的小块。
[0069](3)向剪碎后的汉麻韧皮纤维中，加入为汉麻韧皮纤维重量15倍重量的乙醇，在70°C下搅拌提取3小时，该提取过程可进行I次或2-4次，提取后过滤并收集滤液(当进行多次时，将每次的滤液进行合并)。
[0070](4)使用旋转蒸发仪将步骤(3)所得的滤液进行减压浓缩，除去溶剂，得初提物浸膏。
[0071](5)将初提物浸膏用饱和NaCl水溶液充分摇匀、溶解、抽滤，得到水相和未溶解固体；将未溶解固体用乙酸乙酯充分摇匀、溶解，得到乙酸乙酯相；将所述水相和乙酸乙酯相加入到分液漏斗中，充分摇匀、混合，静置分层，弃去水相，将乙酸乙酯相减压浓缩，得到乙
酸乙酯相浸膏。
[0072]其中，饱和NaCl水溶液与初提物浸膏的体积质量比为14: lml/g ;乙酸乙酯与所述未溶解固体的体积质量比为7ml/g。
[0073](6)将乙酸乙酯相浸膏用三氯甲烷充分溶解，并加入到粒度为200-300目的硅胶中，充分搅拌均匀，得到硅胶吸附样品；将所述硅胶吸附样品加入到装填好的制备例I硅胶柱上部，然后使用氯仿和甲醇的混合有机溶剂进行洗脱，待样品被溶剂冲洗至层析柱底部时开始收集洗脱溶液，收集相当于3个柱体积的洗脱溶液，将该洗脱溶液减压浓缩，得到所述汉麻韧皮纤维提取物，命名为XW2。
[0074]其中，溶解所述乙酸乙酯相浸膏的三氯甲烷与乙酸乙酯相浸膏的质量比为1.5:1 ;进行洗脱的氯仿和甲醇的体积比为48:1。
[0075]实施例3
[0076](I)将汉麻韧皮纤维进行常温水洗，洗去表面杂物和/或污物，从而得到干净的汉麻韧皮纤维。
[0077](2)将干净的汉麻韧皮纤维在80°C下真空干燥，然后将其剪碎成面积小于IcmX Icm的小块。
[0078](3)向剪碎后的汉麻韧皮纤维中，加入为汉麻韧皮纤维重量20倍重量的乙醇，在80°C下搅拌提取2小时，该提取过程可进行I次或2-4次，提取后过滤并收集滤液(当进行多次时，将每次的滤液进行合并)。
[0079](4)使用旋转蒸发仪将步骤(3)所得的滤液进行减压浓缩，除去溶剂，得初提物浸膏。
[0080](5)将初提物浸膏用饱和NaCl水溶液充分摇匀、溶解、抽滤，得到水相和未溶解固体；将未溶解固体用乙酸乙酯充分摇匀、溶解，得到乙酸乙酯相；将所述水相和乙酸乙酯相加入到分液漏斗中，充分摇匀、混合，静置分层，弃去水相，将乙酸乙酯相减压浓缩，得到乙
酸乙酯相浸膏。
[0081]其中，饱和NaCl水溶液与初提物浸膏的体积质量比为17: lml/g ;乙酸乙酯与所述未溶解固体的体积质量比为8ml/g。
[0082](6)将乙酸乙酯相浸膏用三氯甲烷充分溶解，并加入到粒度为200-300目的硅胶中，充分搅拌均匀，得到硅胶吸附样品；将所述硅胶吸附样品加入到装填好的制备例I硅胶柱上部，然后使用氯仿和甲醇的混合有机溶剂进行洗脱，待样品被溶剂冲洗至层析柱底部时开始收集洗脱溶液，收集相当于4个柱体积的洗脱溶液，将该洗脱溶液减压浓缩，得到所述汉麻韧皮纤维提取物，命名为XW3。
[0083]其中，溶解所述乙酸乙酯相浸膏的三氯甲烷与乙酸乙酯相浸膏的质量比为2:1 ;进行洗脱的氯仿和甲醇的体积比为50:1。
[0084]实施例4
[0085](I)将汉麻韧皮纤维进行常温水洗，洗去表面杂物和/或污物，从而得到干净的汉麻韧皮纤维。
[0086](2)将干净的汉麻韧皮纤维在50°C下真空干燥，然后将其剪碎成面积小于IcmX Icm的小块。
[0087](3)向剪碎后的汉麻韧皮纤维中，加入为汉麻韧皮纤维重量13倍重量的乙醇，在90°C下搅拌提取3小时，该提取过程可进行I次或2-4次，提取后过滤并收集滤液(当进行多次时，将每次的滤液进行合并)。
[0088](4)使用旋转 蒸发仪将步骤(3)所得的滤液进行减压浓缩，除去溶剂，得初提物浸膏。
[0089](5)将初提物浸膏用饱和NaCl水溶液充分摇匀、溶解、抽滤，得到水相和未溶解固体；将未溶解固体用乙酸乙酯充分摇匀、溶解，得到乙酸乙酯相；将所述水相和乙酸乙酯相加入到分液漏斗中，充分摇匀、混合，静置分层，弃去水相，将乙酸乙酯相减压浓缩，得到乙
酸乙酯相浸膏。
[0090]其中，饱和NaCl水溶液与初提物浸膏的体积质量比为20: lml/g ;乙酸乙酯与所述未溶解固体的体积质量比为10ml/g。
[0091](6)将乙酸乙酯相浸膏用三氯甲烷充分溶解，并加入到粒度为200-300目的硅胶中，充分搅拌均匀，得到硅胶吸附样品；将所述硅胶吸附样品加入到装填好的制备例I硅胶柱上部，然后使用氯仿和甲醇的混合有机溶剂进行洗脱，待样品被溶剂冲洗至层析柱底部时开始收集洗脱溶液，收集相当于3个柱体积的洗脱溶液，将该洗脱溶液减压浓缩，得到所述汉麻韧皮纤维提取物，命名为XW4。
[0092]其中，溶解所述乙酸乙酯相浸膏的三氯甲烷与乙酸乙酯相浸膏的质量比为1.5:1 ;进行洗脱的氯仿和甲醇的体积比为47:1。
[0093]实施例5-8
[0094]除将步骤(6)中的氯仿、甲醇混合洗脱溶剂替换为如下的氯仿、甲醇、丙酮的混合溶剂作为洗脱溶剂外，分别以与实施例1-4的相同方式进行了实施例5-8，得到所述汉麻韧皮纤维提取物依次命名为XW5-XW8，其对应关系、混合溶剂体积比见下表1所示:
[0095]表1_氣仿、曱醇、丙酮体积比对应实施例提取物
实施例546:1:3实施例1XW5
[0096]实施例6 48:1:3 实施例2 XW6
实施例7 50:1:3 实施例3 XW7
实施例8_47:1:3_实施例4_XW8
[0097]对比例1-12
[0098]除步骤(3)中分别使用甲醇代替乙醇外，分别以与实施例1-4的相同方式实施了对比例1-4，得到的所述汉麻韧皮纤维提取物依次命名为D1-D4。
[0099]除步骤(3)中分别使用正丙醇醇代替乙醇外，分别以与实施例1-4的相同方式实施了对比例1-4，得到的所述汉麻韧皮纤维提取物依次命名为D5-D8。
[0100]除步 骤(3)中分别使用正丁醇醇代替乙醇外，分别以与实施例1-4的相同方式实施了对比例1-4，得到的所述汉麻韧皮纤维提取物依次命名为D9-D12。
[0101]对比例13-16
[0102]除步骤(5)中未使用饱和NaCl水溶液进行充分摇匀、溶解、抽滤，得到水相外，分别以与实施例1-4的相同方式进行了对比例13-16，即直接使用乙酸乙酯进行处理而得到乙酸乙酯相浸膏。得到的所述汉麻韧皮纤维提取物依次命名为D13-D16。
[0103]对比例17-20
[0104]除使用制备例2的硅胶柱代替制备例I的硅胶柱外，分别以与实施例1-4的相同方式进行了对比例17-20，得到的所述汉麻韧皮纤维提取物依次命名为D17-D20。
[0105]对比例21-28
[0106]除步骤(6)中单独使用氯仿代替氯仿与甲醇的混合溶剂作为洗脱溶剂外，分别以与实施例1-4的相同方式进行了对比例21-24，得到所述汉麻韧皮纤维提取物依次命名为D21-D24。
[0107]除步骤(6)中单独使用甲醇代替氯仿与甲醇的混合溶剂作为洗脱溶剂外，分别以与实施例1-4的相同方式进行了对比例25-28，得到的所述汉麻韧皮纤维提取物依次命名为 D25-28。
[0108]活性测试
[0109]供试菌种
[0110]本实验方法所用金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus, CMCC (B) 26003)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa, ATCC27835)和白色念珠菌(Candidasalbicans, CMCC(F) 98001)，均购于广州广东环凯生物科技有限公司。
[0111]抑菌试验
[0112]1、将金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌分别用可商购得到的营养琼脂培养基活化，将白色念珠菌用可商购得到的马铃薯葡萄糖琼脂培养基活化。
[0113]将活化后菌液用灭菌生理盐水稀释至107CFU/mL，然后与IOOmL可商购得到的营养琼脂培养基混合，摇匀，制得浓度为105CFU/mL的菌液培养基。
[0114]2、供试样品准备:将本发明制得的汉麻韧皮纤维提取物用体积浓度为20%的二甲基亚砜(DMSO)水溶液溶解，配制成质量体积浓度为10mg/mL的溶液，加入吐温80进行助溶，吐温80的加入量应小于助溶后所得体系总体积的10%。
[0115]3、牛津杯法测定抑菌圈直径:待可商购得到的营养琼脂培养基融化后，取10毫升至培养皿中，待其冷却凝固后，取5毫升上述步骤I中的菌液培养基至培养皿中，轻轻摇晃，使其均匀地分布在平板表面，待其冷却，在平板上放入牛津杯，分别加入步骤2中得到的200 μ L供试样品。
[0116]将金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌在37°C培养24小时后测量抑菌圈直径，而白色念珠菌在28°C培养4天后用十字交叉法测量并记录测量抑菌圈大小。采用体积浓度为20 %的DMSO水溶液与吐温80的混合溶液(两者体积比为1:1)作为对照样品，每皿4个牛津杯(牛津杯直径8mm)等距放置，每菌三个平行样，对照样品采用相同的培养方法后测量抑菌圈大小，结果取三次试验的平均值，得到本发明的汉麻韧皮纤维提取物对不同供试菌株的抑菌效果，通过抑菌圈大小来判断抑菌作用。以上操作均在无菌条件下进行。
[0117]结果与分析
[0118]抑菌作用结果如下表2所示:
[0119]表2
[0120]
【权利要求】
1.一种汉麻韧皮纤维提取物的制备方法，所述方法包括如下步骤: (1)将原料进行水洗； (2)干燥、剪碎； (3)有机溶剂提取； (4)减压浓缩，得初提物浸膏； (5)将初提物浸膏进行使用无机物溶液与有机溶剂的液液萃取，得到浸膏； (6)将浸膏装入硅胶层析柱中，有机溶剂洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，得到所述汉麻韧皮纤维提取物。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于:所述步骤(3)中的有机溶剂为具有1-6个碳原子的低级醇。
3.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于:所述步骤(5)中的无机物溶液为NaCl水溶液，优选为饱和的NaCl水溶液；所述步骤(5)中的有机溶剂为乙酸乙酯。
4.如权利要求1-3任一项中所述的制备方法，其特征在于:所述步骤(5)具体操作如下:将初提物浸膏用饱和NaCl水溶液充分摇匀、溶解、抽滤，得到水相和未溶解固体；将未溶解固体用乙酸乙酯充分摇匀、溶解，得到乙酸乙酯相；将所述水相和乙酸乙酯相加入到分液漏斗中，充分摇 匀、混合，静置分层，弃去水相，将乙酸乙酯相减压浓缩，得到乙酸乙酯相浸膏。
5.如权利要求1-4任一项中所述的制备方法，其特征在于:所述步骤(6)具体操作如下:将乙酸乙酯相浸膏用三氯甲烷充分溶解，并加入到粒度为200-300目的硅胶中，充分搅拌均匀，得到硅胶吸附样品；将所述硅胶吸附样品加入到装填好的硅胶层析柱上部，然后使用混合有机溶剂进行洗脱，待样品被溶剂冲洗至层析柱底部时开始收集洗脱溶液，收集相当于2-4个柱体积的洗脱溶液，将该洗脱溶液减压浓缩，得到所述汉麻韧皮纤维提取物。
6.如权利要求1-5任一项所述的制备方法，其特征在于:所述硅胶层析柱是按照如下方法装柱的:将200-300目的硅胶浸泡于三氯甲烷中，并充分溶胀，直至不再溶胀为止，然后装柱，并沉降一晚。
7.如权利要求1-6任一项所述的制备方法，其特征在于:进行洗脱的所述有机溶剂为氯仿和甲醇的混合物，其中氯仿和甲醇的体积比为46-50:1。
8.如权利要求1-6任一项所述的制备方法，其特征在于:进行洗脱的所述有机溶剂为氯仿、甲醇和丙酮的混合物，其中氯仿、甲醇、丙酮的体积比为46-50:1:2-4，优选为46-50:1:3。
9.根据权利要求1-8任一项所述方法制备得到的汉麻韧皮纤维提取物。
10.如权利要求9的所述汉麻韧皮纤维提取物在纺织品领域中的用途。
【文档编号】D06M13/00GK104018343SQ201410249611
【公开日】2014年9月3日 申请日期:2014年6月6日 优先权日:2014年6月6日
【发明者】保琦蓓, 刘汉伟, 傅科杰, 张驰, 王春, 冯云, 杨力生, 劳华均, 任清庆 申请人:保琦蓓