专利名称：一种制作阻塞型睡眠呼吸暂停综合征动物模型的方法
技术领域：
本发明涉及动物模型的制作方法，更具体地说，是涉及阻塞型睡眠呼吸暂停综合征动物模型的制作方法。
背景技术：
近年来越来越多的证据表明睡眠呼吸暂停综合征与心血管疾病有着密切的联系，未治疗的睡眠呼吸暂停综合征有较高的心血管病死亡率，因而它被看作为影响死亡率的重要原因。为了研究和验证睡眠呼吸暂停综合征与心血管病如冠状动脉粥样硬化心脏病的关系，需要使用阻塞型睡眠呼吸暂停综合征动物模型来进行实验论证，据此，从生物化学、分子生物学、组织学、病理、影像学等诸多方面进行研究。
目前，现有技术中已经报道了多种制作上述阻塞型睡眠呼吸暂停综合征动物模型的方法，例如将犬的颈部气管切开，内置一短管，当犬在呼气末时将短管完全堵塞，然后放开，重复进行从而造成人工的气道阻塞，以此来研究呼吸暂停对心脏血流动力学的影响；又例如在犬的口内放置一乳胶短管，在管的末端安置一个活瓣，用计算机控制活瓣的开与关，这种方法虽然在技术有了改进，但仍然是人工造成的呼吸暂停。这两个模型均绕过了上气道，直接在气管内造成阻塞，而上气道是人类阻塞型睡眠呼吸暂停最重要的部位，且模型对动物的损伤较大，技术要求较高，动物感染的可能性增加，不利于长期的观察或对睡眠呼吸障碍造成的并发症的研究。另外，还有人曾提出用封闭的面罩造成动物的周期性缺氧，很显然，这种方法的合作性较差，不易于较长时间应用(如整夜的观察)。
以上这些模型基本上都是急性实验的模型，或者对动物的损伤较大，与睡眠呼吸暂停的自然病理状态相差较远；或者模型的制作方法复杂、重复性差，不利于长期的观察与实验。因此，目前尚缺乏理想的、接近于临床病理状态的阻塞型睡眠呼吸暂停综合征动物模型。
发明内容
本发明的目的在于提供一种制作阻塞型睡眠呼吸暂停综合征动物模型的方法，它基本上克服了因现有技术的局限和缺点引起的问题，可以广泛应用于睡眠呼吸暂停综合征发病机制、病理生理及治疗学等领域的研究。
按照本发明，一种制作阻塞型睡眠呼吸暂停综合征动物模型的方法，其包括，根据动物的体重大小及多导睡眠图的监测结果将有效量的医用软组织填充剂以多点进针的方式注入动物口腔内的一个或多个部位，以使动物出现阻塞型睡眠呼吸暂停症状。
按照本发明，所述动物口腔内注入医用软组织填充剂的部位为对侧咽腭弓部位和/或舌根部。
按照本发明，所述的医用软组织填充剂为医用聚丙烯酰胺水凝胶。
按照本发明，所述的医用聚丙烯酰胺水凝胶用0.9％生理盐水青霉素液稀释后注入动物口腔内的相应部分。
按照本发明，所述的医用软组织填充剂为亲水性类人胶原蛋白。
按照本发明，所述的亲水性类人胶原蛋白用0.9％生理盐水青霉素液稀释后注入动物口腔内的相应部分。
按照本发明，所述注入动物口腔内的医用软组织填充剂的用量为5至10ml。
按照本发明，所述的医用软组织填充剂可以一次性或分多次注入动物口腔内的相应部位。
按照本发明，所述用于制作阻塞型睡眠呼吸暂停综合征动物模型的动物为体型中等的小型猪。
按照本发明，所述用于制作阻塞型睡眠呼吸暂停综合征动物模型的动物为体型中等的杂种狗。
本发明公开的阻塞型睡眠呼吸暂停综合征动物模型的制作方法，其操作简便，得到的动物模型的各项指标与人类重度的睡眠呼吸暂停综合征的表现类似，因此为深入研究睡眠呼吸暂停综合征提供了一个强有力的工具，该方法在未来具有广阔的应用前景。
以上是对本发明的一般性描述，下面将通过附图和具体实施方式
对本发明的权利要求作进一步解释。
本申请所包含的附图用于进一步理解本发明，其与说明书相结合并构成说明书的一部分，所述附图与说明书一起用于解释本发明的原理。附图中图1为实施例1中未经手术的小型猪的多导睡眠图；图2为实施例1中经手术后一周的实验猪的多导睡眠图；图3为实施例1中电子计算机断面扫描定位图；图4为实施例1中未经手术的小型猪的电子计算机断面扫描图；图5为实施例1中经手术两周后的实验猪的电子计算机断面扫描图；图6为实施例2中未经手术的小型猪的多导睡眠图；及图7为实施例2中经手术后一周的实验猪的多导睡眠图。
具体实施例方式
实施例1选用体重为22.8kg的中国小型猪(以下称实验猪)，基础饲料(配方见表1)按每天30g/kg(体重)分两次给予，自由饮水，并根据实验猪的体重变化调整饲料量。
表1 小型猪基础饲料配方饲料组成 ％玉米 64.0豆饼 14.5麸皮 12.0鱼粉 5.0骨粉 2.0石粉 2.0食盐 0.5代谢能 2969大卡/公斤其中每1000kg饲料含禽用多维45g，亚硒酸钠0.15g，碘化钾1.0g，硫酸锌200g手术当天早晨禁食、禁水，测定实验猪的体重，麻醉采用456mg戊巴比妥钠耳静脉注射。
麻醉后将实验猪呈仰卧位，四肢固定。取5ml医用聚丙烯酰胺水凝胶用0.9％生理盐水青霉素2ml液稀释后混匀，抽取在带螺口的20ml金属注射器中，用开口器使口腔大开，拉出舌头，并使其偏向一侧，在对侧咽腭弓部位及舌根部多点进针，缓慢注入凝胶，另一侧同样操作。术中密切观察实验猪的状态，防止其窒息。
手术完毕后，用多导睡眠仪检测口鼻气流、胸式呼吸、腹式呼吸、血氧饱和度和鼾声，监测两小时，醒后送回笼中。一周后复查多导睡眠图，检测前肌注456mg安定，检测指标同上，监测两小时后送回笼中。图2是手术后一周实验猪的多导睡眠图。
手术后两周再次用戊巴比妥钠静脉麻醉，行电子计算机断层扫描，部位为咽腭弓平面上下5cm处。图5是手术两周后实验猪的电子计算机断面扫描图。
比较图1和图2可以看出，经手术后实验猪的呼吸明显紊乱，出现了典型的睡眠呼吸暂停现象。
比较图4和图5可以看出，经手术后实验猪的咽腔内出现不规则的环状阴影，而且咽腔结构变形，呈明显的狭窄状。
实施例2手术的操作方法和步骤与实施例1基本相同，所不同的是将10ml亲水性类人胶原蛋白用0.9％生理盐水青霉素液稀释后注入实施猪的口腔内。
手术完毕后，同样用多导睡眠仪监测两小时，检测指标与实施例1相同，醒后送回笼中。一周后复查，监测两小时后送回笼中。图7是手术后一周实验猪的多导睡眠图。
比较图6和图7可以看出，经手术后实验猪的呼吸明显紊乱，出现了典型的睡眠呼吸暂停现象。
权利要求
1.一种制作阻塞型睡眠呼吸暂停综合征动物模型的方法，其包括，根据动物的体重大小及多导睡眠图的监测结果将有效量的医用软组织填充剂以多点进针的方式注入动物口腔内的一个或多个部位，以使动物出现阻塞型睡眠呼吸暂停症状。
2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于，所述动物口腔内注入医用软组织填充剂的部位为对侧咽腭弓部位和/或舌根部。
3.按照权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的医用软组织填充剂为医用聚丙烯酰胺水凝胶。
4.按照权利要求权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的医用聚丙烯酰胺水凝胶用0.9％生理盐水青霉素液稀释后注入动物口腔内的相应部分。
5.按照权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的医用软组织填充剂为亲水性类人胶原蛋白。
6.按照权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的亲水性类人胶原蛋白用0.9％生理盐水青霉素液稀释后注入动物口腔内的相应部分。
7.按照权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述注入动物口腔内的医用软组织填充剂的用量为5至10ml。
8.按照权利要求7所述的方法，其特征在于，所述的医用软组织填充剂可以一次性或分多次注入动物口腔内的相应部位。
9.按照权利要求1所述的方法，其特征在于，所述用于制作阻塞型睡眠呼吸暂停综合征动物模型的动物为体型中等的小型猪。
10.按照权利要求1所述的方法，其特征在于，所述用于制作阻塞型睡眠呼吸暂停综合征动物模型的动物为体型中等的杂种狗。
全文摘要
本发明公开了一种制作阻塞型睡眠呼吸暂停综合征动物模型的方法，其包括，根据动物的体重大小及多导睡眠图的监测结果将有效量的医用软组织填充剂以多点进针的方式注入动物口腔内的一个或多个部位，以使动物出现阻塞型睡眠呼吸暂停症状。该方法操作简便，得到的动物模型出现了典型的阻塞型睡眠呼吸暂停现象，可以广泛应用于睡眠呼吸暂停综合征发病机制、病理生理及治疗学等领域的研究。
文档编号G09B23/00GK1570995SQ031466
公开日2005年1月26日 申请日期2003年7月11日 优先权日2003年7月11日
发明者王士雯, 张文莉 申请人:中国人民解放军总医院