一种草莓专用微生物菌肥及其制备方法与流程

1.本发明属于微生物领域，尤其是涉及一种草莓专用微生物菌肥及其制备方法。


背景技术：

2.土壤微生物在各方面影响着植物的生长发育，其群落的组成与活性也与植物生产力有关。土壤是微生物生活和繁殖的栖息地，而微生物作为土壤中的生物体，对环境变化较为敏感，一般湿润温暖肥沃的中性土壤所含微生物的数量最多。土壤中存在大量微生物，在腐解残株的同时，其自身也产生代谢产物。微生物群落组成是土壤有机质矿化的决定因素，微生物群落组成的变化可能会影响土壤有机质分解及土壤呼吸速率。一些细菌，例如放线菌，参与降解多聚体化合物如纤维素的分解，而酵母和糖真菌也降解简单的化合物，如糖类。土壤中细菌主要参与简单、可溶性底物的降解，而真菌是固态、难分解底物的分解者。近年来，土壤微生物群落组成与多样性研究成为国际土壤微生物学、土壤生态学及全球变化生物学等领域研究的热点之一。
3.草莓是一种具有高营养、高经济价值的水果，随着设施农业的发展，设施草莓的栽培面积逐渐增加，导致了草莓的连作障碍，制约了草莓规模化生产，已有研究表明，连作会破坏土壤微生物群落结构，致使土壤优势菌落发生交替，土壤养分失衡，使土壤肥力降低。而微生物能够有效改善植物根系微生物群，促进土壤固定养分的释放，提高肥料利用率。
4.土壤微生物的变化主要受土壤环境及和管理措施的影响，就土壤环境来说，土壤的理化性质、季节、土壤质地、植被类型对微生物的变化产生影响，同时微生物的数量也会随土层深度的增加而减少。而在管理措施方面，肥料、农药、耕作方式对微生物的影响都是极其复杂的。有研究发现，土壤微生物促进程度为有机肥料＞有机无机肥料混合＞无机肥料。
5.微生物菌肥中有益微生物能够产生糖类物质，具有改良土壤团粒结构，释放植物活性因子，促进植物根系生长，增强作物抗病性，改善作物的产量与品质且不污染环境等优点，近年来被广泛应用于农业领域。目前微生物菌肥菌种单一、作用单纯、造价昂贵、用量大运输不便等问题，限制了普及推广。在专利文献中可见，多数生物菌肥只有一个菌种。有的菌肥菌种很多，但载体原料却很难得。


技术实现要素：

6.有鉴于此，本发明旨在克服现有技术中的缺陷，提出一种草莓专用微生物菌肥及其制备方法。
7.为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：
8.一种草莓专用微生物菌肥，该微生物菌肥由包括如下重量份的原料制成：
9.草莓专用菌剂2
‑
4份，复合微生物菌剂2
‑
4份，纤维素酶3
‑
7份，半纤维素酶2
‑
4份，玉米秸秆粉50
‑
120份，腐植酸10
‑
25份，沸石粉2
‑
4份，磷矿粉5
‑
30份，钾矿粉1
‑
30份，水50
‑
120份。
10.进一步，所述的草莓专用菌剂为由草莓掉落腐烂后的土壤、草莓根际的土壤或草莓汁与草莓根际的土壤混合后得到的土壤中的至少一种富集并筛选得到的微生物。
11.进一步，所述的复合微生物菌剂包括：地衣芽孢杆菌30
‑
40份，活性干酵母30
‑
40份，布氏乳杆菌30
‑
40份，长崎杆菌30
‑
40份，凝结芽孢杆菌30
‑
40份，乳酸菌1
‑
4份，生物固氮菌1
‑
4份，枯草芽孢杆菌30
‑
40份，苏云金杆菌30
‑
40份。
12.所述的草莓专用微生物菌肥的制备方法，包括如下步骤：
13.(1)分别将草莓专用菌剂、复合微生物菌剂分别进行发酵，得到发酵液，将纤维素酶、半纤维素酶与发酵液混合，搅拌均匀制得菌剂；
14.(2)将玉米秸秆晒干后粉碎成玉米秸秆粉，向玉米秸秆粉中加入腐植酸、沸石粉、磷矿粉、钾矿粉和水，搅拌、静置后得到有机质；
15.(3)将有机质与菌剂混合均匀，低温干燥、造粒即得。
16.进一步，所述的步骤(2)中的玉米秸秆粉、腐植酸、沸石粉、磷矿粉、钾矿粉的粒径均为100
‑
500目。
17.进一步，所述的步骤(1)中的发酵液中菌种和酶的浓度均大于等于1
×
109个/ml。
18.进一步，所述的步骤(2)中的搅拌步骤的时间为10
‑
20分钟，转速为200
‑
800转/分钟；所述的步骤(2)中的静置步骤的时间为5
‑
10天。
19.进一步，所述的步骤(3)中的低温干燥步骤的温度为20
‑
40℃，造粒步骤的温度为小于等于25℃。
20.相对于现有技术，本发明具有以下优势：
21.本发明所述的一种草莓专用微生物菌肥有利于大棚内草莓的生长，提高了单果克重与单株产量，增加了果实的可溶性糖含量和vc含量，改善了草莓的口感。
具体实施方式
22.除有定义外，以下实施例中所用的技术术语具有与本发明所属领域技术人员普遍理解的相同含义。以下实施例中所用的试验试剂，如无特殊说明，均为常规生化试剂；所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
23.纤维素酶、半纤维素酶购自隆科特酶制剂有限公司，及相似市售产品的其他企业。
24.草莓专用菌剂微生物菌种的通用分离方法如下。
25.在草莓设施大棚中选取化肥施用量较少的区域，采集新鲜草莓装入无菌自封袋中并标注采集日期，带回实验室以后进行菌株的分离。取根系0.5g置于10ml(盛有已灭菌浓度为0.85％的生理盐水450μl)离心管中，离心2min(1000r/min，温度℃)，即稀释液为10
‑1。静置后用移液枪准确吸取50μl上清液，装入盛有450μl的浓度为0.85％生理盐水10ml离心管内，制得10
‑2稀释液，再从该离心管中吸取50μl加入另一个盛有450μl的无菌生理盐水的离心管中，制得10
‑3稀释液，依次制备成浓度为10
‑4、10
‑5稀释液，每个浓度稀释液均用旋涡振荡器充分混匀备用。分离菌株培养基的配方与组成如下：cacl2·
2h2o 0.02g；mgso4·
7h2o 0.2g；k2hpo
4 0.5g；namoo4·
2h2o 0.002g；nacl 0.1g；malicacid 5.0g或na
‑
malate 5.0g koh(如果用malic acid)4.5g；biotine 10μg；bromothymol blue(btb)(0.5％)5ml；agar 20g(固体培养基)或2g(半固体培养基)；总体积1000ml(蒸馏水补足)，ph 7.0。将样品接种到培养基中，置于25
‑
35℃的培养箱中5
‑
15天，选取培养基中生长较快、菌落形态较大的不
同单菌落，在超净工作台中用接种环挑取单个菌落采用平板划线法依次在另一个培养基中划线，最终获得不含杂菌的单一菌落。上述菌落保藏物用于为草莓专用菌剂c，专用复合菌剂c经分子鉴定包括地衣芽胞杆菌、活性干酵母、生物固氮菌、乳酸菌、枯草芽胞杆菌、苏云金牙胞杆菌。
26.采用上述方法依次制备得到如下草莓专用菌剂：
27.草莓专用菌剂r：草莓根际土壤富集筛选获得的微生物；其中专用复合菌剂r经分子鉴定包括地衣芽胞杆菌、活性干酵母、生物固氮菌、乳酸菌、枯草芽胞杆菌、苏云金牙胞杆菌。
28.草莓专用菌剂fc：草莓掉落腐烂后的土壤富集筛选获得的微生物；其中专用复合菌剂fc经分子鉴定包括地衣芽胞杆菌、活性干酵母、生物固氮菌、乳酸菌、枯草芽胞杆菌、苏云金牙胞杆菌。
29.草莓专用菌剂fr：将草莓埋入土壤中5
‑
10天后的土壤富集筛选获得的微生物。
30.下面结合实施例来详细说明本发明。
31.实施例1
32.一种微生物菌肥，该微生物菌肥由包括如下重量份的原料制成：草莓专用菌剂fc 2份，复合微生物菌剂2份，纤维素酶4份，半纤维素酶2份，玉米秸秆粉100份，腐植酸20份，沸石粉2份，磷矿粉25份，钾矿粉25份，水100份。
33.所述的草莓专用微生物菌肥的制备方法，包括如下步骤：
34.(1)将草莓专用菌剂、复合微生物菌剂进行发酵，得到发酵液，发酵液中菌种和酶的浓度均≥1
×
109个/ml，将纤维素酶、半纤维素酶与发酵液混合，搅拌均匀制得菌剂；
35.(2)将玉米秸秆晒干后粉碎成200目的玉米秸秆粉，向玉米秸秆粉中加入腐植酸、沸石粉、磷矿粉、钾矿粉和水，转速为500转/分钟搅拌15分钟、静置7天后得到有机质；
36.(3)将有机质与菌剂混合均匀，低温干燥、造粒(小于等于25℃)即得。
37.实施例2
38.一种微生物菌肥，该微生物菌肥由包括如下重量份的原料制成：草莓专用菌剂r 2份，复合微生物菌剂2份，纤维素酶4份，半纤维素酶2份，玉米秸秆粉100份，腐植酸20份，沸石粉2份，磷矿粉25份，钾矿粉25份，水100份。
39.所述的复合微生物菌剂包括：地衣芽孢杆菌30份，活性干酵母40份，布氏乳杆菌30份，长崎杆菌32份，凝结芽孢杆菌35份，乳酸菌2份，生物固氮菌1份，枯草芽孢杆菌32份，苏云金杆菌35份。
40.所述的草莓专用微生物菌肥的制备方法，包括如下步骤：
41.(1)将草莓专用菌剂、复合微生物菌剂进行发酵，得到发酵液，发酵液中菌种和酶的浓度均≥1
×
109个/ml，将纤维素酶、半纤维素酶与发酵液混合，搅拌均匀制得菌剂；
42.(2)将玉米秸秆晒干后粉碎成200目的玉米秸秆粉，向玉米秸秆粉中加入腐植酸、沸石粉、磷矿粉、钾矿粉和水，转速为500转/分钟搅拌15分钟、静置7天后得到有机质；
43.(3)将有机质与菌剂混合均匀，低温干燥、造粒(小于等于25℃)即得。
44.实施例3
45.一种微生物菌肥，该微生物菌肥由包括如下重量份的原料制成：草莓专用菌剂fr 2份，复合微生物菌剂2份，纤维素酶4份，半纤维素酶2份，玉米秸秆粉100份，腐植酸20份，沸
石粉2份，磷矿粉25份，钾矿粉25份，水100份。
46.所述的复合微生物菌剂包括：地衣芽孢杆菌30份，活性干酵母40份，布氏乳杆菌30份，长崎杆菌32份，凝结芽孢杆菌35份，乳酸菌2份，生物固氮菌1份，枯草芽孢杆菌32份，苏云金杆菌35份。
47.所述的草莓专用微生物菌肥的制备方法，包括如下步骤：
48.(1)将草莓专用菌剂、复合微生物菌剂进行发酵，得到发酵液，发酵液中菌种和酶的浓度均≥1
×
109个/ml，将纤维素酶、半纤维素酶与发酵液混合，搅拌均匀制得菌剂；
49.(2)将玉米秸秆晒干后粉碎成200目的玉米秸秆粉，向玉米秸秆粉中加入腐植酸、沸石粉、磷矿粉、钾矿粉和水，转速为500转/分钟搅拌15分钟、静置7天后得到有机质；
50.(3)将有机质与菌剂混合均匀，低温干燥、造粒(小于等于25℃)即得。
51.对比例1
52.一种草莓专用微生物菌肥，其特征在于：该微生物菌肥由包括如下重量份的原料制成：草莓专用菌剂c 2份，纤维素酶4份，半纤维素酶2份，玉米秸秆粉100份，腐植酸20份，沸石粉2份，磷矿粉25份，钾矿粉25份，水100份。
53.所述的草莓专用微生物菌肥的制备方法，包括如下步骤：
54.(1)将草莓专用菌剂进行发酵，得到发酵液，发酵液中菌种和酶的浓度均≥1
×
109个/ml，将纤维素酶、半纤维素酶与发酵液混合，搅拌均匀制得菌剂；
55.(2)将玉米秸秆晒干后粉碎成200目的玉米秸秆粉，向玉米秸秆粉中加入腐植酸、沸石粉、磷矿粉、钾矿粉和水，转速为500转/分钟搅拌15分钟、静置7天后得到有机质；
56.(3)将有机质与菌剂混合均匀，低温干燥、造粒(小于等于25℃)即得。
57.对比例2
58.一种草莓专用微生物菌肥，其特征在于：该微生物菌肥由包括如下重量份的原料制成：复合微生物菌剂2份，纤维素酶4份，半纤维素酶2份，玉米秸秆粉100份，腐植酸20份，沸石粉2份，磷矿粉25份，钾矿粉25份，水100份。
59.所述的草莓专用微生物菌肥的制备方法，包括如下步骤：
60.(1)将复合微生物菌剂进行发酵，得到发酵液，发酵液中菌种和酶的浓度均≥1
×
109个/ml，将纤维素酶、半纤维素酶与发酵液混合，搅拌均匀制得菌剂；
61.(2)将玉米秸秆晒干后粉碎成200目的玉米秸秆粉，向玉米秸秆粉中加入腐植酸、沸石粉、磷矿粉、钾矿粉和水，转速为500转/分钟搅拌15分钟、静置7天后得到有机质；
62.(3)将有机质与菌剂混合均匀，低温干燥、造粒(小于等于25℃)即得。
63.本发明实施例1
‑
5制备的有机肥对设施大棚内草莓的生长和根际微生物的影响。供试草莓品种为红颜，以市场常用的粪肥作为对照，本发明用量为100kg/亩，普通粪肥施用量为200kg/亩，均作为基肥在定植前施入。试验期间，所有处理均不使用任何杀菌剂和其他基肥。结果如表1所示。
64.表1有机肥对设施大棚内草莓的生长和根际微生物的影响结果
65.[0066][0067]
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。