一种鱼蛋白发酵液和应用的制作方法

本技术涉及发酵，尤其涉及一种鱼蛋白发酵液和应用。

背景技术：

1、我国是一个渔业大国，水产品品种丰富，产量据世界首位。但目前随着物种资源的衰退，海洋捕捞中低值鱼占比逐渐增多，上升到了总渔获量的60％-70％，海洋渔业水产品产量日趋枯竭。低值鱼与鱼类下脚料因可利用途径少、成分复杂等原因导致其加工利用率较低，但从物质成分来看，低值鱼与鱼类下脚料均含有丰富的营养物质，具有极高的潜在价值。据报道：青鳞鱼下脚料粗蛋白可达58.7%，是鱼肉粗蛋白的76%，烤鳗下脚料粗蛋白含量为22.6%；鱼头含有20%左右具有补脑功能的脑磷脂，鱼油中富含长链不饱和脂肪酸，尤其是被誉为“脑黄金”的二十二碳六烯酸(dha)和二十碳五烯酸(epa)。黄金枪鱼鱼油中dhaepa百分含量比为26.5/5.1，沙丁鱼为10.2/16.8；还有富含钙质的鱼骨(人体对淡水鱼中钙吸收率高达65%以上)；富含胶质、蛋白质、多种矿物质、钙、磷的鱼鳞等等。由此可见，低值鱼及鱼类下脚料的利用率仍有待增加，利用途径仍有待拓展。

2、低值鱼类及鱼类下脚料在农业应用方面已初露锋芒。人们最初把变质的和食用价值小的鱼类堆置发酵或者沤制成浆液直接施与农作物。该方法虽然操作简单但利用率低，并且易引起作物病害。目前常采用低值鱼或鱼肉废弃物与秸秆混合堆放发酵，该方法制备的鱼蛋白肥料富含多种氨基酸和微量元素，能够广泛适用于多种植物中。但仍存在加工周期过长和加工过程臭味过大，容易造成空气污染的问题。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种有效成分含量高、稳定性好的鱼蛋白发酵液及其制备方法和应用。

2、一方面，本技术提供了一种鱼蛋白发酵液，所述鱼蛋白发酵液以鱼为发酵底物，由复合酶制剂和菌制剂混合发酵获得；所述复合酶制剂由质量比为1：（1-5）：（1-5）的菠萝蛋白酶、脂肪酶、尿酸氧化酶组成，以质量百分比计，所述复合酶制剂的加入量为1％-5％；所述菌制剂为布式乳杆菌种子液，所述布式乳杆菌为布式乳杆菌（ lactobacillus buchneri）cicc 6050，所述布式乳杆菌种子液的od600值为3-4，所述菌制剂的接种量为1%-5%。

3、优选的，本技术提供了一种富含氮磷钾的鱼蛋白发酵液，所述鱼蛋白发酵液中氮含量为26.2％、磷（五氧化二磷）含量为26.6％、钾（氧化钾）含量为26.8％且发酵过程无臭味。

4、进一步的，所述鱼蛋白发酵液的制备方法包括如下步骤：

5、步骤一、将鱼切块，进行渗透除盐处理，脱盐清洗；

6、步骤二、将脱盐清洗后的鱼取出，粉碎、干燥，得鱼粉；

7、步骤三、所述鱼粉与水混合，搅拌均质得鱼蛋白浊液，向所述鱼蛋白浊液中加入所述复合酶制剂和所述菌制剂，混合发酵。

8、优选的，所述复合酶制剂由质量比为1：2：2的菠萝蛋白酶、脂肪酶、尿酸氧化酶组成。

9、优选的，所述复合酶制剂的加入量为鱼蛋白浊液的1％。

10、在一种优选的实施方式中，所述复合酶制剂是酶活为3千-3万u/g的液体酶制剂。

11、优选的，所述布式乳杆菌种子液的od600值为4，活菌数为2×108cfu-6×108cfu。

12、od600指的是布式乳杆菌种子液在600 nm波长处的吸光值。

13、优选的，所述菌制剂的接种量为4%。

14、接种量是指移入种子液的体积占接种后培养液体积的百分比。

15、在一种优选的实施方式中，所述鱼为低值鱼和/或鱼类下脚料。

16、进一步的，所述混合发酵的条件为温度为25℃-40℃、ph值为6-7、转速为100-300rpm、发酵时间为1-1.5 h。

17、优选的，所述混合发酵的条件为温度为35℃、ph值为6、转速为200 rpm、发酵时间为1 h。

18、进一步的，所述步骤三中，鱼粉与水的体积比为1：（5-8）。

19、优选的，鱼粉与水的体积比为1：6。

20、进一步的，所述渗透除盐处理包括：将鱼与水以体积比为1：（1-3）混合置于1%-5％的氯化钠溶液，渗透除盐处理1-1.5 h。

21、优选的，所述渗透除盐处理包括：将鱼与水以体积比为1：1混合置于2％的氯化钠溶液，渗透除盐处理1.2 h。

22、更优选的，2％的氯化钠溶液为氯化钠浓度为2％的水溶液。

23、进一步的，所述干燥为红外线干燥。

24、在一种优选的实施方式中，所述步骤一中鱼洗净除杂后分切成1 cm3左右的鱼块。将鱼切分为鱼块能够增加渗透除盐的接触面积进而提高除盐效率，能够最大限度除去鱼内部的无机盐，以防止无机盐对后续的发酵产生不良影响。

25、在一种优选的实施方式中，一种鱼蛋白发酵液的制备方法包括如下步骤：

26、步骤一、将鱼进行分切获得鱼块后，将鱼块和水以体积比为1：（1-3）混合得到混合物，将混合物置于浓度为1%-5％的氯化钠溶液，渗透除盐处理1-1.5 h，脱盐清洗；

27、步骤二、将脱盐清洗后的鱼块取出，粉碎，红外线干燥得到鱼粉；

28、步骤三、所述鱼粉与水以体积比为1：（5-8）混合，搅拌均质得到鱼蛋白浊液，加入复合酶制剂和菌制剂，混合均匀，复合酶制剂的加入量为鱼蛋白浊液的1％-5％，菌制剂的接种量为1%-5%，ph值为6-7，温度为25℃-40℃，转速为100-300 rpm的条件下发酵1-1.5 h，获得鱼蛋白发酵液。

29、复合酶制剂由质量比为1：（1-5）：（1-5）的菠萝蛋白酶、脂肪酶、尿酸氧化酶组成。

30、菌制剂为布式乳杆菌（ lactobacillus buchneri）cicc 6050种子液。

31、布式乳杆菌种子液的培养方法包括：将布式乳杆菌接种于mrs培养基中，温度为25℃-40℃、转速为100-300 rpm、ph值为6-7、培养12-36 h，培养至od600为3-4。

32、在一种优选的实施方式中，一种鱼蛋白发酵液的制备方法包括如下步骤：

33、步骤一、将鱼进行分切获得鱼块后，将鱼块和水以体积比为1：1混合得到混合物，将混合物置于浓度为2％的氯化钠溶液，渗透除盐处理1.2 h，脱盐清洗；

34、步骤二、将脱盐清洗后的鱼块取出，粉碎，红外线干燥至质量不再发生变化，得到鱼粉；

35、步骤三、所述鱼粉与水以体积比为1：6混合，搅拌均质得到鱼蛋白浊液，加入复合酶制剂和菌制剂，混合均匀，复合酶制剂的加入量为鱼蛋白浊液的1％，菌制剂的接种量为4%，ph值为6，温度为35℃，转速为200 rpm的条件下发酵1 h，获得鱼蛋白发酵液。

36、复合酶制剂由质量比为1：2：2的菠萝蛋白酶、脂肪酶、尿酸氧化酶组成。

37、菌制剂为布式乳杆菌（ lactobacillus buchneri）cicc 6050种子液。

38、布式乳杆菌种子液的培养方法包括：将布式乳杆菌接种于mrs培养基中，温度为30℃、转速为200 rpm、ph值为6.8、培养24 h，培养至od600为4。

39、另一方面，本技术还提供了一种包含上述鱼蛋白发酵液的肥料产品。

40、优选的，所述肥料为叶面肥。

41、另一方面，本技术还提供了如上述的鱼蛋白发酵液或如上述的肥料产品在促进植物产量和/或防治植物畸形果中的应用。

42、进一步的，所述植物为根茎类植物。

43、进一步的，所述植物为马铃薯。

44、在一种优选的实施方式中，所述马铃薯品种为东农303。

45、本发明具有如下有益效果：

46、1、本技术中首次采用益生菌布式乳杆菌cicc 6050对低值鱼及鱼类下脚料材料进行发酵，最大限度避免了在发酵过程中因采用有害菌种造成的环境污染也进一步提高了食品安全；

47、2、本技术中还证明了采用特定的复合酶联合布式乳杆菌cicc 6050共同进行发酵能够提升鱼蛋白发酵液中的有效物质含量，进而提高发酵效率；

48、3、采用本技术中的除盐方式能够最大限度除去鱼块中的无机盐，配合红外线干燥及控制料液比等一系列方法，严格控制发酵过程条件，减少鱼块中的无机盐，避免过多的无机盐影响酶菌联合发酵效果的问题和使用无机盐含量过高的肥料容易造成土壤盐碱化加重的问题，并且提高了产品在室温、高温及高低温循环等多种环境下的体系稳定性；

49、4、本技术提供的方法制备的鱼蛋白发酵液作为叶面肥喷施于马铃薯叶面，能够有助于马铃薯的产量提高，还对马铃薯的畸形率的降低有明显作用。