专利名称：：血脂康特制红曲有效成分的分离方法
技术领域：
：本发明涉及一种药物有效成分的分离方法，特别涉及血脂康特制红曲的有效成分的分离方法。技术背景血脂康特制红曲是按照ZL97103970.4号专利的方法制成的红曲药物制剂。血脂康胶囊是以特制红曲为原料的中药制剂，具有降血脂、抗动脉粥样硬化、抗癌、抗骨质疏松等临床疗效。循证医学临床研究证明，可明显减少冠心病事件发生率，降低总死亡率。文献报道，化合物3P-羟基-5a,8P_环二氧麦角甾-6，22-二烯对L-1210细胞株有极强的抗癌活性并能抑制MCF-7人乳腺癌以及Walder256肉瘤细胞株的生长，对人肝癌PLC/PRF5和KB细胞也有抑制作用，还能选择性地增强亚油酸(《10mmol/L)对DNA聚合酶e活性的抑制作用；此外，还具有抗炎、抗补体、免疫抑制和促进血小板凝聚等活性。化合物大豆苷元、黄豆黄素、染料木素具有抗癌、降脂、降糖、舒张血管、抗氧化、抑制平滑肌增殖等活性。化合物脱水莫纳可林K、莫纳可林K具有降脂活性。
发明内容本发明目的在于提供血脂康特制红曲有效成分及其分离方法。本发明目的是通过如下技术方案实现一种血脂康特制红曲的有效成分，含有如下化合物4-甲基-5-(2-甲基亚丙基)-1氢-吡咯-2(5氢)-酮、脱水莫纳可林K，豆甾-5，22-二烯-33-醇，莫纳可林K,3P-羟基-5ct，8P-环二氧麦角甾-6,22-二烯，氮-(1_(四氢-5-氧代呋喃-2)-乙基)乙酰唑胺、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素、赤藓醇，该有效成分由如下方法制备取血脂康原料药，依次以2-4倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分别超声提取3-5次，20-30min/次，合并提取液，回收溶剂，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取c部位上硅胶柱层析，以氯仿-甲醇梯度洗脱，得氯仿部分c-i、80-100:5氯仿-甲醇部分C-II、80-100:10氯仿-甲醇部分C-III、甲醇部分C-IV;取C-I部分继续硅胶柱层析，以95:5-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，80-100:5石油醚-乙酸乙酯洗脱部位弃去；80-100:10石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3，由第7-10流份得到化合物C-2，由第8-13流份得到化合物C-1;60-100:20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第6-8流份得到化合物C-5，经S印hadexLH-20进一步纯化，40-60:50氯仿-甲醇洗脱，得到纯化C-5，由第11-17流份得到化合物C-3;C-II部分以90:10-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，80-100:10石油醚-乙酸乙酯部分与上述C-I相同部分合并;60-100:20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第3-10流份得到化合物C-3;由第9-11流份得到化合物C-6，再上S印hadexLH-20柱，以40-60:50氯仿-甲醇洗脱，得到纯化合物C-6;C-m部分以90:10-50:50氯仿-甲醇梯度洗脱，其中90:10氯仿-甲醇洗脱部分经再次硅胶柱层析得到C-7、C-9、C-8;M部位经放置自然析晶，晶体以氯仿洗涤，得到化合物M-1。本发明血脂康特制红曲有效成分的具体分离方法如下取血脂康原料药，依次以2-4倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分别超声提取3-5次，20-30min/次，合并提取液，回收溶剂，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取C部位上硅胶柱层析，以氯仿-甲醇梯度洗脱，得氯仿部分C-I、80-100:5氯仿-甲醇部分C-n、80-100:IO氯仿-甲醇部分C-III、甲醇部分C-IV;取C-I部分继续硅胶柱层析，以95:5-0:IOO石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，80-100:5石油醚-乙酸乙酯洗脱部位弃去；80-100:10石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3，由第7-10流份得到化合物C-2，由第8-13流份得到化合物C-1;60-100:20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第6-8流份得到化合物C-5，经S印hadexLH-20迸一步纯化，40-60:50氯仿-甲醇洗脱，得到纯化C-5，由第11-17流份得到化合物C-3:C-1I部分以90:10-0:IOO石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，80-100:IO石油醚-乙酸乙酯部分与上述C-I相同部分合并；60-100:20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第3-10流份得到化合物C-3;由第9-11流份得到化合物C-6,再上S印hadexLH-20柱，以40-60:50氯仿-甲醇洗脱，得到纯化合物C-6;C-III部分以90:10-50:50氯仿-甲醇梯度洗脱，其中90:10氯仿-甲醇洗脱部分经再次硅胶柱层析得到C-7、C-9、C-8:M部位经放置自然析晶，晶体以氯仿洗涤，得到化合物M-1。本发明血脂康原料药有效成分的优选分离方法如下取血脂康原料药，依次以3倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分别超声提取3-5次，20min/次，合并提取液，回收溶剂，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取C部位上硅胶柱层析，以氯仿-甲醇梯度洗脱，得氯仿部分C-I、95:5氯仿-甲醇部分C-II、90:IO氯仿-甲醇部分C-III、甲醇部分C-IV;取C-I部分继续硅胶柱层析，以95:5-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，95:5石油醚-乙酸乙酯洗脱部位弃去；90:10石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3,由第7-10流份得到化合物C-2，由第8-13流份得到化合物C-1;80:20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第6-8流份得到化合物C-5,经S印hadexLH-20进一步纯化，50:50氯仿-甲醇洗脱，得到C-5，由第11-17流份得到化合物C-3;C-n部分以90:10-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，90:IO石油醚-乙酸乙酯部分与上述C-I相同部分合并；80:20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第3-IO流份得到化合物C-3;由第9-11流份得到化合物C-6，再上S印hadexLH-20柱，以50:50氯仿-甲醇洗脱，得到纯化合物C-6;C-III部分以90:10-50:50氯仿-甲醇梯度洗脱，其中90:10氯仿-甲醇洗脱部分经再次硅胶柱层析得到C-7、C-9、C-8;M部位经放置自然析晶，晶体以氯仿洗涤，得到化合物M-1。本发明所用血脂康原料药按照ZL97103970.4号专利的方法制成的红曲或红曲粗提物。上述C-l、C-2、C-3、C-5、C-6、C-7、C—8、C一9、M-l、P-3化学式如下:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>下述实验和实施例用于进一步说明但不限于本发明。具体实施方式实验例1结构鉴定实验化合物C-1:白色针状结晶(CHCl:「MeOH)。EIMSm/z386(M+)与monacolinK(C-3)404(M+)比较少1个肌其余碎片相似。'HNMR低场区较monacolinK多一对芳质子，S4.0ppm5.0ppm少1个与氧相连的质子，高场区的饱和仲氢信号(2.65卯ra,2H，dd)消失，进一步提示为monacolinK的脱水结构。'tNMR低场区较monacolinK多两个烯碳，S90ppm50ppm少1个与氧相连的碳，DEPT提示S38.6ppn仲碳消失(C-2)。根据以上分析，鉴定该化合物为脱水莫纳可林K。EIMSm/z386(M+),284[M+-CH:!CH2CH(CH2)C00H]，199，198,159(100),143,57。'H腦R(CDC1》6.85(1H，m,H—3)，6.00(2H,m，H-15，H-2)，5.80(1H'dd,H—16)，5.53(1H，s,H—13),5,39(1H,s，H-10)，4.33(1H,m,H-5).'tNMR(CDC1:,)S:176.6(C-1')，164.3(C—1)，144.8(C—3)，133.0(C—16),131.6(C—14),129.7(C—13)，128.4(C—15),121.5(C—2)，77.3(C—5)，67.8(C—10)'41.5(C-2')'37.3(C-9)'36.7(C-12)'32.7(C-11),32.5(C-4)，30.7(C-17),29.6(C-6)，27..5(C-8)，26.9(C-3'),24.3(C-7)，22.9(C—19),16.3(C-5'),13.9(C-18)，11.7(C-4'),根据以上数据，推断其结构为脱水莫纳可林K。化合物C-2:白色针状结晶(CHC1:厂Me0H)，mp153-155。C,Liebernman-Burchard反应阳性。EIMSm/z412(M+)，396(100)，382,367,300,273,255，213，161，i45。'HNMR(CDC1:,):5.35(1H,d，J=5.5Hz,H-6),5.15(2H，m，H—22，H-5)，5.02(1H，dd,J=8.5,15.0Hz,H-23)，3.52(1H,m,H-3)'3C臓(CDC1:,):140.8(C-5),138.4(C-23),129.3(C-22)，121.8(C-6)，71.8(C_3)，56.8(C-14)，56.1(C-17)，51.3(C-9),50.2(C—13)，42.3(C—24，04)，39.8(C-16),37.3(C—20),36.2(C—10)，31.9(C—7，C—8),31.7(C—27)，29.2(C—2),28.3(C—12),24.3(C—15)，23,1(C—25)，21.1(C—11),19.4(C—28)，19.1(C_19)，18.8(021)，13.9(C-1)，12.0(C-26),11.9(C-18).以上数据与文献['2]报道相同，推断其结构为豆甾-5，22-二烯-3P-醇。化合物C-3:白色针状结晶(CHC1:,-MeOH),mpl58-160°C。EIMSm/z404(M+)，386(M+—H20)，284，198,159(100),143.'HNMR(CDCl》5.99(IH,d，J=9.6Hz,H—15)，5.79(IH,dd,J=9.6,2.3Hz，H-16),5.52(IH,s，H-13)，5.38(1H，s'H-10),4.62(IH,m,H-5),4.37(IH，m，H—3)，2.65(2H,dd,H-2)."CNMR(CDCL,):176.9(C-l'),170.4(C-l),133.1(C—16)，131.6(C—14)，129.7(C—13)，128.3(C-15),76.8(C-5)，67.9(C—10),62.7(C-3),41.5(C-2'),38.6(C-2)，37.3(C-4,C-9)，36.6(C-12)'33.0(C-6)，32.7(C-11)，30.7(C-17),27.5(C—8),26.9(C-3'),24.3(C—7),22.9(C—19)，16.3(C-5')，13.9(C-18),11.8(C-4').以上数据与文献["]报道相同，推断其结构为莫纳可林K。化合物C-5:白色粉末(CHCL-MeOH)，mp168-173°C,Liebernman-Burchard反应阳性。EIMSm/z428(M+),410(M+-H20)，396(M+-0》，251[M+—02-(R+H)-H20],231(100).'HNMR(CDCL)S:6.50(1H，d,J=8.3Hz,H-7)，6.24(IH,d,J二8.3Hz，H-6),5.20(1H，dd,J=15.3,7.2Hz，H-22)，5.15(1H,dd，J=15.3，7.2Hz,H-23),3.96(IH,m,H-3)"CNMR(CDC1:,)S:135.4(C-7),135.2(C-23),132.3(C-22)，130.8(C-6)，82.2(C-8),79.5(C-5)，66.5(C-3)，56.2(C-17),51.7(C-9)，51.1(C-4)，44.6(C—13),42.8(C—24),39.8(C—20),39.4(C—1),37.0(C—10,14)，34.7(C—12),33.1(C-25)'30.1(C-2),28.7(C-15)，23.4(C-16)'20.9(C-27),20.7(C-l1),2O.O(C-26)，19.7(C-21),18.2(C-19),17.6(C-28),12.9(C-18).以上数据与文献报道相同，推断其结构为3P-羟基-Sa，8P-环二氧麦角甾-6，22-二烯。化合物C-6:无色针状结晶(CHCl:「MeOH)。EIMSm/z171(M+)，114,86(100),44,裂解途径如下。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>化合物C-6的MS主耍碎片离子(EI-MSofC-6)HNMR及':iCNMR归属见下表，HMBC如下。表1化合物C-6的NMR数据<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>化合物C-6的HMBC(HMBCofcompoundC-6)化合物C-7:白色无定形粉末(CHC1厂Me0H)，mp195-197°C。EIMSm/z254(M+),253，137，136，118，108。'HNMR(DMS0)S:8.13(1H，s，H-2)，8.05(1H,d，J二9.0Hz，H-5),7.37(2H,d,J二8.7Hz，H—2'，H-6')'136.93(1H,dd，0Hz,2.lHz，H-6),6.84(1H，d,J二2.lHz,H—8)，6.82(1H，d,J二8.7Hz，H-3'，H-5').以上数据与文献报道相同，推断其结构为大豆苷元。化合物C-8:无色针状结晶(CHCl:厂MeOH)，卿336-338°C，'關R(DMS0)S:10.60(1H,br，s,Ar—0H),9.51(1H,br,s,Ar-0H)，8.27(1H，s，H-2),7.42(1H,s,H-5)，7.37(2H，d，J=8.4Hz,H-2',H-6'),6.93(1H,s，H-8)，6.78(2H,d，J=8.4Hz，H-3',H-5')，3.86(3H，s，-0CH:,).以上数据与文献报道相同，推断其结构为黄豆黄素。化合物C-9:白色无定形粉末(CHC1:厂MeOH),mp265-267°C。EIMSm/z270(M+)，269，241，153，152，124，118。'HNMR(DMSO)S:12.95(1H，s，H-5),10.89(1H,s，H-7),9.58(1H's,H-4')，8.32(1H，s，H-2),7.36(2H,d，H-2',H-6),6.81(2H,d，H-3'，H-5'),6.38(1H,s,H-8)，6.21(1H,s,H-6).以上数据与文献^报道相同，推断其结构为染料木素。化合物M-l:无色方晶(CHC1:,-MeOH),mp77-78°C。ESI-MSm/z121(M+_1)。l3CNMR(DMS0)S:72.56(C-1,C-4)，63.34(C-2,C-3).以上数据与文献"6]报道相同，推断其结构为赤藓醇。化合物P-3:白色针状结晶(CHC1:,-MeOH)。EIMSm/z151(M+)，136(M+_CH3，100),108，93。'HNMR(CDCl:,)S:5.85(1H,s,H—3)，5.12(1H，d，J=9.9Hz,H—1')，2.72(1H,s，H-2')，2.04(3H,s，H-CH:i),1.08(3H，s，H-CH:,)，1.06(3H，s,H-CH/)."CNMR(CDCU5:172.7(C-2)，148.6(C-4)，137.6(C-5)，120.8(C-l')'120.6(C-3),27.4(C-2')，22.8(C-QVX2)'11.8(C-CH:,).下述实施例均能实现上述实验例的效果。具体实施方式实施例1:制备血脂康特制红曲的有效成分取血脂康原料药，依次以2-4倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分别超声提取3-5次，20-30min/次,合并提取液，回收溶剂，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;实施例2:制备血脂康特制红曲的有效成分取血脂康原料药，依次以2倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分别超声提取5次，20-30min/次，合并提取液，回收溶剂，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;实施例3:制备血脂康特制红曲的有效成分取血脂康原料药，依次以3倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分别超声提取3次，20-30min/次，合并提取液，回收溶剂，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;实施例4:制备血脂康特制红曲的有效成分取血脂康原料药，依次以4倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分别超声提取4次，20-30rain/次，合并提取液，回收溶剂，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;实施例5:制备血脂康特制红曲的有效成分取血脂康原料药，依次以2倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分别超声提取5次，20-30min/次,合并提取液，回收溶剂，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取C部位上硅胶柱层析，以氯仿-甲醇梯度洗脱，得氯仿部分C-I、80-100:5氯仿-甲醇部分C-II、80-100:10氯仿-甲醇部分C-III、甲醇部分C-IV;实施例6:制备血脂康特制红曲的有效成分取血脂康原料药，依次以3倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分别超声提取3次，20-30min/次，合并提取液，回收溶剂，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取M部位经放置自然析晶，晶体以氯仿洗涤，得到化合物M-1。实施例7:制备血脂康特制红曲的有效成分取血脂康原料药，依次以4倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分别超声提取4次，20-30min/次,合并提取液，回收溶剂，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取C部位上硅胶柱层析，以氯仿-甲醇梯度洗脱，得氯仿部分c-i、80-100:5氯仿-甲醇部分C-II、80-100:10氯仿-甲醇部分C-III、甲醇部取C-I部分继续硅胶柱层析，以95:5-0:IOO石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，其中80-100:5石油醚-乙酸乙酯洗脱部位弃去;80-100:10石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3，由第7-10流份得到化合物C-2，由第8-13流份得到化合物C-l;60-100:20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第6-8流份得到化合物C-5，经S印hadexLH-20进一步纯化，40-60:50氯仿-甲醇洗脱，得到纯化C-5,由第11-17流份得到化合物C-3;C-1I部分以90:10-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，80-100:10石油醚-乙酸乙酯部分与上述C-I相同部分合并；60-100:20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第3-10流份得到化合物C-3;由第9-11流份得到含有化合物C-6的物质，再上S印hadexLH-20柱，以40-60:50氯仿-甲醇洗脱，得到纯化合物C-6;C-III部分以90:10-50:50氯仿-甲醇梯度洗脱，其中90:10氯仿-甲醇洗脱部分经再次硅胶柱层析得到C-7、C-9、C-8。实施例8:取血脂康原料药2kg，依次以3倍量石油醚、氯仿、甲醇超声分别4次，20min/次。合并提取液，回收溶剂,得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取C部位250g上硅胶柱层析，以氯仿-甲醇梯度洗脱，得氯仿部分C-I、95:5氯仿-甲醇部分C-II、90:IO氯仿-甲醇部分C-III、甲醇部分C-IV;取C-I部分继续硅胶柱层析，以95:5-0:IOO石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，95:5石油醚-乙酸乙酯洗脱部位弃去；90:10石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3为10mg，由第7-10流份得到化合物C-2为300mg，由第8-13流份得到化合物C-l为245mg;80:20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份；由第6-8流份得到化合物C-5，经S印hadexLH-20进一步纯化，50:50氯仿-甲醇洗脱，得到8mg;由第11-17流份得到化合物C-3为120mg。由纯乙酸乙酯洗脱部位得到化合物C-3为100mg;C-1I部分以90:10-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，90:10石油醚-乙酸乙酯部分与上述C-I相同部分合并；80:20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第3-10流份得到化合物C-3为300mg;由第9-11流份得到化合物C-6，再上S印hadexLH-20柱，以50:50氯仿-甲醇洗脱，得到7mg;C-III部分以90:10-50:50氯仿-甲醇梯度洗脱，其中90:10氯仿-甲醇洗脱部分经反复硅胶柱层析得到C-7为45mg、C-9为35mg、C-8为12mg;M部位经放置自然析晶，晶体以氯仿洗涤，得到化合物M-1为25mg。实施例9:取血脂康原料药2.5kg,依次以2倍量石油醚、氯仿、甲醇超声分别5次，25min/次；合并提取液，回收溶剂，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取C部位250g上硅胶柱层析，以氯仿-甲醇梯度洗脱，得氯仿部分C-I、80:5氯仿-甲醇部分C-II、100:10氯仿-甲醇部分C-III、甲醇部分C-IV;取C-I部分继续硅胶柱层析，以95:5-0:IOO石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，100:5石油醚-乙酸乙酯洗脱部位弃去；80:10石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3为10mg,由第7-10流份得到化合物C-2为320mg，由第8-13流份得到化合物C-1为260mg;100:20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第6-8流份得到化合物C-5，经S印hadexLH-20进一步纯化，45:50氯仿-甲醇洗脱，得到10mg;由第11-17流份得到化合物C-3为130rng。由纯乙酸乙酯洗脱部位得到化合物C-3为110mg;C-II部分以90:10-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，100:10石油醚-乙酸乙酯部分与上述C-I相同部分合并；80:20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第3-10流份得到化合物C-3为320mg;由第9-11流份得到化合物C-6，再上S印hadexLH-20柱，以60:50氯仿-甲醇洗脱，得到9mg;C-III部分以90:10-50:50氯仿-甲醇梯度洗脱，其中100:IO氯仿-甲醇洗脱部分经反复硅胶柱层析得到C-7为55mg、C-9为50mg、C-8为20mg;M部位经放置自然析晶，晶体以氯仿洗涤，得到化合物M-l为35mg。权利要求1、一种血脂康特制红曲的有效成分，含有如下化合物4-甲基-5-(2-甲基亚丙基)-1氢-吡咯-2(5氢)-酮、脱水莫纳可林K，豆甾-5，22-二烯-3β-醇，莫纳可林K，3β-羟基-5α，8β-环二氧麦角甾-6，22-二烯，氮-(1-(四氢-5-氧代呋喃-2)-乙基)乙酰唑胺、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素、赤藓醇，其特征在于该有效成分由如下方法制备取血脂康原料药，依次以2-4倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分别超声提取3-5次，20-30min/次，合并提取液，回收溶剂，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M；取C部位上硅胶柱层析，以氯仿-甲醇梯度洗脱，得氯仿部分C-I、80-100∶5氯仿-甲醇部分C-II、80-100∶10氯仿-甲醇部分C-III、甲醇部分C-IV；取C-I部分继续硅胶柱层析，以95∶5-0∶100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，其中80-100∶5石油醚-乙酸乙酯洗脱部位弃去；80-100∶10石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3，由第7-10流份得到化合物C-2，由第8-13流份得到化合物C-1；60-100∶20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第6-8流份得到化合物C-5，经SephadexLH-20进一步纯化，40-60∶50氯仿-甲醇洗脱，得到纯化C-5，由第11-17流份得到化合物C-3；C-II部分以90∶10-0∶100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，80-100∶10石油醚-乙酸乙酯部分与上述C-I相同部分合并；60-100∶20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第3-10流份得到化合物C-3；由第9-11流份得到化合物C-6，再上SephadexLH-20柱，以40-60∶50氯仿-甲醇洗脱，得到纯化合物C-6；C-III部分以90∶10-50∶50氯仿-甲醇梯度洗脱，其中90∶10氯仿-甲醇洗脱部分经再次硅胶柱层析得到C-7、C-9、C-8；M部位经放置自然析晶，晶体以氯仿洗涤，得到化合物M-1。2、如权利要求l所述的血脂康特制红曲的有效成分，其特征在于该有效成分由如下方法制备取血脂康原料药，依次以3倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分别超声提取3-5次，20min/次,合并提取液，回收溶剂，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取C部位上硅胶柱层析，以氯仿-甲醇梯度洗脱，得氯仿部分C-1、95:5氯仿-甲醇部分c-n、90:io氯仿-甲醇部分c-ni、甲醇部分c-iv;取C-I部分继续硅胶柱层析，以95:5-0:IOO石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，95:5石油醚-乙酸乙酯洗脱部位弃去；90:10石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3,由第7-10流份得到化合物C-2,由第8-13流份得到化合物C-1;80:20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，，由第6-8流份得到化合物C-5,经S印hadexLH-20进一步纯化，50:50氯仿-甲醇洗脱，得到C-5，由第11-17流份得到化合物C-3;C-1I部分以90:10-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，90:IO石油醚-乙酸乙酯部分与上述C-I相同部分合并；80:20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第3-10流份得到化合物C-3;由第9-11流份得到化合物C-6，再上S印hadexLH-20柱，以50:50氯仿-甲醇洗脱，得到纯化合物C-6;C-III部分以90:10-50:50氯仿-甲醇梯度洗脱，其中90:10氯仿-甲醇洗脱部分经再次硅胶柱层析得到C-7、C-9、C-8;M部位经放置自然析晶，晶体以氯仿洗涤，得到化合物M-1。3、如权利要求1所述的血脂康特制红曲的有效成分的分离方法，其特征在于该方法为取血脂康原料药，依次以2-4倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分别超声提取3-5次，20-30min/次，合并提取液，回收溶剂，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取C部位上硅胶柱层析，以氯仿-甲醇梯度洗脱，得氯仿部分C-I、80-100:5氯仿-甲醇部分C-II、80-100:10氯仿-甲醇部分C-III、甲醇部分C-IV;取C-I部分继续硅胶柱层析，以95:5-0:IOO石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，其中80-100:5石油醚-乙酸乙酯洗脱部位弃去；80-100:10石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3，由第7-10流份得到化合物C-2，由第8-13流份得到化合物C-1;60-100:20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第6-8流份得到化合物C-5，经S印hadexLH-20进一步纯化，40-60:50氯仿-甲醇洗脱，得到纯化C-5，由第11-17流份得到化合物C-3;C-II部分以90:10-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，80-100:10石油醚-乙酸乙酯部分与上述C-I相同部分合并；60-100:20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第3-10流份得到化合物C-3;由第9-11流份得到化合物C-6，再上S印hadexLH-20柱，以40-60:50氯仿-甲醇洗脱，得到纯化合物C-6;C-III部分以90:10-50:50氯仿-甲醇梯度洗脱，其中90:IO氯仿-甲醇洗脱部分经再次硅胶柱层析得到C-7、C-9、C-8;M部位经放置自然析晶，晶体以氯仿洗涤，得到化合物M-1。4、如权利要求3所述的分离方法，其特征在于该方法为取血脂康原料药，依次以3倍重量的石油醚、氯仿、甲醇分别超声提取3-5次，20min/次，合并提取液，回收溶剂，得石油醚部位P、氯仿部位C、甲醇部位M;取C部位上硅胶柱层析，以氯仿-甲醇梯度洗脱，得氯仿部分C-1、95:5氯仿-甲醇部分c-n、90:io氯仿-甲醇部分c-m、甲醇部分C-IV;取C-I部分继续硅胶柱层析，以95:5-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，95:5石油醚-乙酸乙酯洗脱部位弃去；90:10石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第4-6流份得到化合物P-3,由第7-10流份得到化合物C-2，由第8-13流份得到化合物C-1;80:20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，，由第6-8流份得到化合物C-5,经S印hadexLH-20进一步纯化，50:50氯仿-甲醇洗脱，得到C-5，由第11-17流份得到化合物C-3;C-1I部分以90:10-0:100石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，90:IO石油醚-乙酸乙酯部分与上述C-I相同部分合并；80:20石油醚-乙酸乙酯洗脱部位经硅胶柱层析，合并相似流份，由第3-IO流份得到化合物C-3;由第9-11流份得到化合物C-6，再上S印hadexLH-20柱，以50:50氯仿-甲醇洗脱，得到纯化合物C-6;C-III部分以90:10-50:50氯仿_甲醇梯度洗脱，其中90:10氯仿-甲醇洗脱部分经再次硅胶柱层析得到C-7、C-9、C-8;M部位经放置自然析晶，晶体以氯仿洗涤，得到化合物M-1。全文摘要本发明公开了血脂康特制红曲的有效成分及其分离方法。循证医学临床研究证明，血脂康特制红曲可明显减少冠心病事件发生率，降低总死亡率。对血脂康的化学成分进行了研究，从中分离并鉴定了10个化合物，分别为4-甲基-5-(2-甲基亚丙基)-1氢-吡咯-2(5氢)-酮(P-3)、脱水莫纳可林K(C-1)，豆甾-5，22-二烯-3β-醇(C-2)，莫纳可林K(C-3)，3β-羟基-5α，8β-环二氧麦角甾-6，22-二烯(C-5)，氮-(1-(四氢-5-氧代呋喃-2)-乙基)乙酰唑胺(C-6)、大豆苷元(C-7)、黄豆黄素(C-8)、染料木素(C-9)、赤藓醇(M-1)。文档编号C07D309/30GK101113146SQ20061010381公开日2008年1月30日申请日期2006年7月27日优先权日2006年7月27日发明者段震文,郭树仁,马学敏申请人:北京北大维信生物科技有限公司