专利名称：：一种新的老鹳草提取物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种新的老鹳草提取物及其制备方法，具体地涉及含有柯里拉京的老鹳草提取物，还涉及所述老鹳草提取物抑制胃酸分泌、降低胃液酸度的用途，以及治疗或预防胃酸过多症、消化性溃疡、慢性胃炎等疾病的用途。
背景技术：
：老鹳草是我国常用的药材，其种类繁多，包括牦牛儿苗科牦牛儿苗属植物牦牛儿苗(五rat/z'wmW印/wm'awww附〃aO和同科老鹳草属植物老鹳草((7eraw/www/^raz7Afox/附)，以及尼泊尔老鹳草(Gera"/i/wwe/a/erae5Veef.)、粗根老鹳草(Gt/a/mn'cw淤Z)C)、ff、掌老鹳草(Gw.6z.n.cwmZ.)、野老鹳草(Gcaro//w.zwwmZ.)、毛蕴老鹤草(Gen'aste,"F&c"x.Z)C)、绒背老鹤草(Geram'簡v/ossoW朋wm)、青岛老鹳草(Geram'wwto/wgtoweraeK/6e入大根老鹳草(Geraw'wmmacra^rWzwn)和童氏老鹳草(G沩""6^^75V&.e/Z"cc.)等。老鹳草中的化学成分众多，主要包括鞣质、类黄酮、有机酸和挥发油等。随着人们对老鹳草研究的不断深入，其越来越多的药理作用不断被发现，如抗炎、镇痛作用，抗菌作用，抗病毒作用，抗氧化作用，免疫作用，镇咳作用，止泻作用，保肝作用，抗肿瘤作用，降糖作用，止血作用等。然而还未见老鹳草抑制胃酸分泌、降低胃液酸度等方面活性的相关报道。发明人长期从事老鹳草的实验研究，发现老鹳草具有抑制胃酸分泌、降低胃液酸度的活性，在治疗或预防胃酸过多症、消化性溃疡、慢性胃炎等疾病方面有很好的效果。胃酸过多症是指胃液(包括盐酸和胃蛋白酶等成分)分泌过多，并使患者感到胃部不适，反酸水，烧心(胃烧灼感)。轻度的胃酸过多症主要表现为反复出现胃烧灼感、反酸，如果胃酸过多损害胃粘膜，还会引起胃痛、恶心、呕吐等症状，胃酸过多症还可能进一步发展成消化性溃疡，甚至出现溃疡穿孔。消化性溃疡是一种世界性的常见病和多发病，估计约10%的人群在一生中曾患过这种疾病。消化性溃疡主要系指胃溃疡和十二指肠溃疡，是一种多病因疾病，其发病与多种因素有关，如胃酸、胃蛋白酶、幽门螺旋杆菌感染、遗传、体质、环境、饮食、生活习惯、神经精神因素等，通过不同途径或机制，导致上述侵袭作用增强和或防护机制减弱，均可促发溃疡发生。随着人们对胃酸生成机制和胃粘膜防御功能认识的不断深入，对该疾病的治疗方法也在不断改进，目前主要的治疗方法有如下的方法(参见时宇，胃溃疡的治疗与胃酸分泌，生物学通报，1994，29(12)，14-15):抗酸药物疗法目前，公认胃内pH值维持在3.5—4.0以上是满意的溃疡愈合环境和必备的治疗条件。因此抑制胃酸分泌，提高胃内pH是消化性溃疡治疗的基础。抗酸药一般是碱性药物，如小苏打等，通过和盐酸发生中和反应来降低胃内酸度，但这种中和的效用只能暂时相安，不久胃酸又会分泌过多，若再用碱性药反复中和，更能引起胃酸大量分泌，无异火上浇油。这是因为这类药物只能中和已分泌入胃腔的胃酸，结果在短时间内胃腔pH值迅速升高，这反而减弱了胃酸的负反馈抑制胃酸分泌的作用，使壁细胞生成更多的胃酸，引起"反跳"，因此抗酸药目前只用作溃疡治疗的辅助用药。受体阻断剂疗法在体内，有三种物质可以直接作用于壁细胞，促进胃酸的生成和分泌，它们分别为乙酰胆碱、胃泌素、组织胺。当人们发现这三种生理性刺激因素均是作用于壁细胞膜上的受体而促进胃酸分泌后，便试图寻找相应的受体阻断剂，以阻断壁细胞膜上的受体，减少胃酸的生成。最早用于临床的是胆碱能受体阻断剂阿托品(atropine)。阿托品只能减少一部分胃酸的生成，对部分患者有效。但因阿托品也同时作用于机体其它部分的M受体，因而有口干、视觉模糊等副作用。近年来，特异性的M型受体阻断剂哌仑西平(pirenzepine)的发现，已替代了阿托品的使用，效果比阿托品更好。H型受体阻断剂主要有西咪替丁、雷尼替丁、法莫替丁、尼扎替丁、罗沙替丁等药物，它们通过阻断胃壁细胞H2受体而抑制胃酸分泌，具有疗效确切、不良反应少、经济实惠等特点。胃泌素受体虽经多年寻找，目前仍处于实验阶段，没有用于临床治疗。由于三种刺激因素通过各自受体独立发挥作用，因而，使用受体阻断剂进行治疗，只能在一定程度上或者仅对一部分患者有效。质子泵抑制剂(PPI)疗法由于质子泵是产生胃酸的最终步骤，因而，减少胃酸最有效的方法是抑制质子泵的活动。近年来研制的质子泵抑制剂如奥美拉唑(Omeprazole)可直接作用于质子泵，抑制其分泌胃酸的作用。奥美拉唑在国外已被广泛用于临床治疗，效果很好。但由于胃溃疡是一种慢性疾病，而且酸泵代谢很快，必须坚持长期服用奥美拉唑，这导致治疗成本昂贵，超出了许多患者的承受能力，因此，该药还不适合在国内大规模临床使用。根除/^的药物治疗对/fp阳性的患者应接受/^的根除治疗，主要疗法是联合使用抗生素与抗酸药。抗生素如克拉霉素、阿莫西林、替硝唑等，起到抑菌或杀菌作用，但这些抗生素均不耐酸，其药效依赖于pH值；抑酸剂如PPI，能提供一个适宜的pH环境，在此环境下许多不耐酸的抗生素将发挥最大效力。慢性胃炎也是一种常见病、多发病，其发病率在各种胃病中居于首位，约占门诊胃镜检查患者的90%，年龄越大，发病率越高，特别是中老年患者更为多见。慢性胃炎的一般治疗方法，通常是采用质子泵抑制剂治疗，减少胃酸对胃粘膜的刺激，减轻症状；或胶体铋剂类药物治疗，此类药物由于其胶体特性，可在酸性环境下与粘膜渗出的蛋白结合在一起，在胃粘膜上形成牢固的保护膜；或抗生素类药物或其它非药物辅助治疗等。(参见1、张彦，慢性胃炎的治疗现状，河北职工医学院学报第24巻第4期；2、郭守军，慢性胃炎的诊治，中华临床医学研究杂志，2007年1月第13巻第2期)。综上所述，胃酸过多症、消化性溃疡、慢性胃炎等疾病均为常见的多发病，它们的治疗大多都需要降低胃内酸度，继续寻找安全有效的广谱治疗药物仍是一个需要解决的问题。发明人经过多年实验研究，出人意料地发现一种老鹳草提取物具有很好的抑制胃酸分泌、降低胃液酸度的活性，在治疗或预防胃酸过多症、消化性溃疡、慢性胃炎等疾病方面有很好的效果，并基于以上发现完成本发明。
发明内容本发明一方面提供一种老鹳草提取物，所述老鹳草提取物中柯里拉京的含量为5%—40%，优选10%—30%,最优选20%-30%。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>本发明另一方面提供所述的含有柯里拉京的老鹳草提取物的制备方法，其特征在于取中药老鹳草若干，粉碎，加5-10倍量水，加热煎煮2-4次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，收集滤液，将上述滤液通过已处理好的大孔吸附树脂柱，进行动态吸附。上柱完成后，树脂柱用3-8倍树脂量的水冲洗，再用1-4倍树脂量70-95%任一浓度乙醇洗脱至洗脱液终点止，收集醇洗脱液。将醇洗脱液部分减压浓縮至干，再用适量95%乙醇沉淀过夜。过滤浓縮至干即得到含有柯里拉京的老鹳草提取物。其中大孔吸附树脂柱型号可以选自HPDIOO、HPD400、HPD600优选为HPD400。优选的提取方法为取中药老鹳草若干，粉碎，力口7倍量水，加热煎煮2次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，收集滤液，将上述样品液通过已处理好的HPD400大孔吸附树脂柱，进行动态吸附。上柱完成后，树脂柱用5倍树脂量的水冲洗，再用2倍树脂量95%乙醇洗脱至洗脱液终点止，分别收集醇洗脱液。将醇洗脱液部分减压浓縮至干，再用适量95%乙醇沉淀过夜。过滤浓縮至干即得含有柯里拉京的老鹳草提取物。本发明所有"倍量"均指质量的倍数关系。本发明再一方面提供所述含有柯里拉京的老鹳草提取物抑制胃酸分泌，降低胃液酸度的用途。本发明再一方面提供所述含有柯里拉京的老鹳草提取物治疗或预防胃酸过多症的用途。本发明再一方面提供所述含有柯里拉京的老鹳草提取物治疗或预防消化性溃疡的用途。所述的消化性溃疡包括胃溃疡和十二指肠溃疡。本发明再一方面提供所述含有柯里拉京的老鹳草提取物治疗或预防慢性胃炎的用途。本发明再一方面提供一种药物组合物，包括所述的含有柯里拉京的老鹳草提取物和一种或几种药学上合适的辅料。本发明中所述的老鹳草主要选自牦牛儿苗科牦牛儿苗属植物牦牛儿苗(五ra&MWWe;^aw&m/w附/W)和同科老鹳草属植物粗根老鹳草(Geram'wmca/zwn'cw附)、野老鹤草(Geraw/wwcaroZ/wz'zwwm)、毛'慈老鹤草(Geraw〖wwen.os&附ow)、续背老鹤草(Gen3"fwwv/owon'cww附)、青岛老鹤#"-(Gera"/wm/s/wgtowe/weK6e)、大t艮老鹤草(Geram'wwwocrorr/H'zM附)等一禾中或一禾中以上的植物。本发明提供的老鹳草提取物中柯里拉京的含量采用高效液相色谱法检测，具体条件及方法如下仪器高效液相色谱仪泵岛津LC-10ATvp检测器岛津SPD-10Avp工作站浙大NC2000流动相乙腈-1%磷酸溶液(13:87)波长X:268nm色谱柱ThermoHypersilBDSC18(4.6x250mm，5jim)流速1.0ml/min柱温30°C对照品柯里拉京(按照中国专利ZL97104154.7中的方法制得)，面积归一化法测定含量为95%计算方法对照品溶液浓度约20(ig/ml(C对)，配制待测溶液浓度约100ng/ml(C样)，进样量20W，记录对照品溶液峰面积(A对)，待测溶液峰面积(A样)C对xA样含量％=------------------xi00%A对xC样本发明提供的药物组合物可以是含有柯里拉京的老鹳草提取物与药学上可接受的辅料混合，按照常规的药物制剂工艺，制备成的任何一种适合临床上使用的药物制剂，例如胶囊剂、片剂、丸剂、颗粒剂、口服液体制剂等。药学上合适的辅料包括药学上可接受的填充剂、崩解剂、粘合剂和润滑剂、矫味剂等。合适的填充剂如乳糖、微晶纤维素、预胶化淀粉、淀粉、糊精、甘露醇、纤维素、蔗糖、葡萄糖、山梨醇、木糖醇等。合适的崩解剂如交联聚维酮、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、交联羟丙基甲基纤维素等。合适的粘合剂如聚维酮、羟丙基纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素等。合适的润滑剂如微粉硅胶、硬脂酸镁、硬脂酸锌、硬脂酸钙、硬脂酸、精制氢化植物油、棕榈酸、滑石粉、聚乙二醇、十二垸基硫酸钠、十二烷基硫酸镁等。合适的矫味剂如蔗糖、单糖浆、甘油、山梨醇、甘露醇、甜菊甙、糖精钠等。本发明通过结扎大鼠幽门，收集6个小时分泌的胃液量和酸度来评价所述含有柯里拉京的老鹳草提取物对胃酸分泌的影响，试验结果表明，所述含有柯酸分泌，降低胃液酸度。在评价对消化性溃疡的治疗效果时，采用以下三种实验动物模型幽门结扎型大鼠胃溃疡模型、水浸应激性大鼠胃溃疡模型、乙酸灼伤型大鼠胃溃疡模型。其中，幽门结扎法为Shay's传统经典大鼠胃溃疡模型法，结扎幽门后，胃液滞留胃中，胃壁防御能力减弱，导致胃溃疡形成。显微镜下观察见白细胞浸润和组织坏死，溃疡深达肌层。此模型与人类胃酸过多引起的胃溃疡相似。水浸应激性大鼠胃溃疡模型的造模机理为，动物受到应激刺激后，交感神经系统兴奋性升高，血管收縮，引起粘膜缺血缺氧，抵抗力下降。副交感神经-垂体-肾上腺系统兴奋升高，引起胃酸、胃蛋白酶和胃泌素分泌增加，从而引起应激性溃疡。乙酸法直接以乙酸烧灼胃浆膜形成溃疡，此法可靠、重复性好，溃疡深而大，与人类的慢性胃溃疡极为相似。其自然愈合需60天左右，也有个别动物在200天以上仍不愈合，因而适用于观察药物促进溃疡修复愈合的作用，可作为筛选治疗慢性胃溃疡药物的实验模型。动物试验结果显示本发明提供的含有柯里拉京的老鹳草提取物能够减少胃酸分泌，降低幽门结扎型和水浸应激性胃溃疡模型中大鼠的溃疡发生率与溃疡指数；并对乙酸烧伤型胃溃疡模型中大鼠胃溃疡的愈合有显著的促进作用，可增加溃疡愈合百分率，减少溃疡指数。本发明提供的含有柯里拉京的老鹳草提取物制备工艺简单，并可以减少胃酸分泌，降低胃液酸度，降低溃疡的发生率与溃疡指数，具有良好的治疗或预防胃酸过多症、消化性溃疡、慢性胃炎等疾病的作用。并可按照本领域的常规方法方便地制备成各类药物组合物以供临床使用。具体实施例方式下面以具体实施例来详细说明本发明的内容，以下实施例并不意味着对本发明的任何限制。实施例1制备含柯里拉京的老鹳草提取物取大根老鹤草(Geram'wmmac7wr/n'zwm)2000g，粉碎，力口7倍量水，力口热煎煮2次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，收集滤液，将上述样品液通过已处理好的HPD40050kg大孔吸附树脂柱，进行动态吸附。上柱完成后，树脂柱用5倍树脂量的水冲洗，再用2倍树脂量95%乙醇洗脱至洗脱液终点止，收集醇洗脱液。将醇洗脱液部分减压浓縮至干，再用适量95%乙醇沉淀过夜。过滤浓縮至干得到含有柯里拉京的老鹳草提取物44g，用高效液相色谱法检测其中柯里拉京的含量为37%。实施例2制备含柯里拉京的老鹳草提取物取粗根老鹳草(Gera"/w/w^7/mn'cwmiX:)2000g,粉碎，加8倍量水，加热煎煮3次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，收集滤液，将上述样品液通过已处理好的HPD40050kg大孔吸附树脂柱，进行动态吸附。上柱完成后，树脂柱用8倍树脂量的水冲洗，再用4倍树脂量90%乙醇洗脱至洗脱液终点止，收集醇洗脱液。将醇洗脱液部分减压浓縮至干，再用适量95%乙醇沉淀过夜。过滤浓縮至干得到含有柯里拉京的老鹳草提取物38g，用高效液相色谱法检测其中柯里拉京的含量为23%。实施例3制备含柯里拉京的老鹳草提取物取野老鹳草(Gera"/wmcara//"/zm/m)粉碎，加10倍量水，加热煎煮3次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，收集滤液，将上述滤液通过己处理好的HPD40050kg大孔吸附树脂柱，进行动态吸附。上柱完成后，树脂柱用6倍树脂量的水冲洗，再用2倍树脂量70%乙醇洗脱至洗脱液终点止，收集醇洗脱液。将醇洗脱液部分减压浓縮至干，再用适量95%乙醇沉淀过夜。过滤浓縮至干既得到含有柯里拉京的老鹳草提取物40g，用高效液相色谱法检测其中柯里拉京的含量为29%。实施例4制备含柯里拉京的老鹳草提取物取毛蕊老鹳草(Gera"/www/o^emow)2000g，粉碎，力B5倍量水，加热煎煮2次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，收集滤液，将上述滤液通过己处理好的HPD40050kg大孔吸附树脂柱，进行动态吸附。上柱完成后，树脂柱用5倍树脂量的水冲洗，再用4倍树脂量95%乙醇洗脱至洗脱液终点止，收集醇洗脱液。将醇洗脱液部分减压浓縮至干，再用适量95%乙醇沉淀过夜。过滤浓縮至干既得到含有柯里拉京的老鹳草提取物43g，用高效液相色谱法检测其中柯里拉京的含量为14%。实施例5制备含柯里拉京的老鹳草提取物取绒背老鹳草(Geraw'wmv/owov/朋wm)2000g，粉碎，加5倍量水，加热煎煮2次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，收集滤液，将上述滤液通过已处理好的HPD40050kg大孔吸附树脂柱，进行动态吸附。上柱完成后，树脂柱用8倍树脂量的水冲洗，再用1倍树脂量70%乙醇洗脱至洗脱液终点止，收集醇洗脱液。将醇洗脱液部分减压浓縮至干，再用适量95%乙醇沉淀过夜。过滤浓縮至干既得到含有柯里拉京的老鹳草提取物33g，用高效液相色谱法检测其中柯里拉京的含量为8%。实施例6含柯里拉京的老鹳草提取物对大鼠胃酸分泌的影响l材料U试剂老鹳草提取物，按照实施例2的方法制得盐酸雷尼替丁江汇仁药业有限公司奥美拉唑阿斯利康制药有限公司羧甲基纤维素钠(CMC-Na)国药集团化学试剂有限公司注射用青霉素钠华北制药股份有限公司水合氯醛国药集团化学试剂有限公司氢氧化钠南京化学试剂一厂酚酞上海精析化工科技有限公司1.2动物清洁级SD大鼠，雄性，体重180-200g，上海斯莱克实验动物有限责任公司。1.3仪器SartoriusBS110S电子天平北京赛多利斯天平有限公司LDZ5-2离心机北京医用离心机厂1.4组别及药物剂量设置模型组雷尼替丁组奥美拉唑组老鹳草提取物老鹳草提取物CMC-Na(0.5%)100mg/kg13.6mg/kg200mg/kg100mg/kg1.5药物配制及给药途径药物以CMC-Na(0.5。/。)混悬，灌胃给药，10ml/kg。2方法2.1造模方法各组大鼠灌胃给药，1次/d，连续5d。实验前禁食48h。实验时将大鼠用水合氯醛(0.30g/kg)麻醉，进行幽门结扎术，并十二指肠给药1次，术后禁食禁水，6h后处死动物，收集胃液于刻度离心管。以3000r/min，离心15min，取上清液。2.2观察指标2.2.1胃液量造模6h后，处死大鼠，收集胃液于刻度离心管。以3000r/min，离心15min，取上清液，精确称量胃液体积。2.2.2总酸度造模6h后，处死大鼠，收集胃液于刻度离心管。以3000r/min，离心15min，取上清液，以0.01mol/LNaOH通过酸碱中和滴定(酚酞为指示剂)测定总酸度，并根据胃液分泌量计算总酸排出量。2.3统计学处理数据用I士SD表示，以SPSS11.0进行统计学处理，各组间两两比较用最小显著差异法。3.实验结果表l.老鹳草提取物对幽门结扎大鼠胃液分泌的影响(i士SD)组别剂量(mg/kg)动物数(n)胃液量(ml)总酸度(mol/L)总酸排出量(mmol)空白对照—85.11±0.780.096±0.0260.49±0.18雷尼替丁10083.88士0.68'0.067士0.019'0.26士0.09'奥美拉唑13.684.07士0.76'0.065士0.013'0.26士0.06"20084.44±1.190.070±0.020*0.29士0.05'老鹳草提取物0.33±0.09*10084.39±0.920.074±0.017注与空白对照组比较，P<0.05,尸O.Ol。4结论老鹳草提取物能降低大鼠胃液总酸度及总酸排出量，提示老鹳草提取物具有抑制胃酸分泌的作用，可以用于治疗胃酸过多症、慢性胃炎。实施例7含有柯里拉京的老鹳草提取物的抗胃溃疡动物实验1实验材料U动物SD大鼠，雄性，180-220g，由扬州大学实验中心提供1.2药物及试剂含柯里拉京的老鹳草提取物按照实施例2的方法制得阳性药盐酸雷尼替丁胶囊，由中诺药业有限公司提供乙酸上海凌风化学试剂有限公司提供戊巴比妥钠中国医药上海化学试剂公司提供1.3器材大鼠固定板，手术剪，手术刀，镊子，持针器，微量注射器，天平1.4实验条件实验大鼠分笼饲养，喂饲全价颗粒词料，自由饮水，室温20士2。C，湿度50-70%2.幽门结扎型大鼠胃溃疡模型2.1实验方法大鼠按体重随机分为4组，每组10只空白对照组，雷尼替丁组(135mg/kg)，含柯里拉京的老鹳草提取物高剂量组(150mg/kg)，含柯里拉京的老鹳草提取物低剂量组(75mg/kg)。给药组大鼠分别按照10ml/kg连续灌胃给药5天，空白对照组给予等量蒸馏水。第1次给药后大鼠开始禁食不禁水，末次给药2小时后将大鼠用0.7ml/只1%的戊巴比妥钠浅麻，自胸骨剑突下沿腹中线切开腹壁，切口约2-3cm。在左侧肋缘部位，用指轻轻往上一推，使胃暴露于切口。在胃幽门下穿一线(勿伤及血管)将幽门结扎(不要将邻近的其他血管结扎)，缝合腹壁切口，用生理盐水清洗，碘酒消毒，用纱布包扎切口。禁食禁水18h后处死动物，打开腹腔，结扎贲门后将胃取出。收集胃液，计算体积。沿胃大弯剪开胃，用生理盐水洗去胃内容物，平铺于白纸上，观察腺胃部溃疡发生的情况，记录每组产生溃疡的鼠数、溃疡数、溃疡程度、溃疡面积及病变情况，计算溃疡指数。溃疡指数评定方法没有出现胃穿孔的大鼠以小溃疡数及溃疡面积来计算溃疡指数。计算所有最大直径超过lmm的溃疡的面积总和，每个溃疡的面积按照S二7uxnxr2计算，n和r2分别为直径和宽径；直径和宽径均小于lmm的溃疡按照小溃疡计数，以小溃疡数和溃疡总面积作为综合评定指数。评定标准见下表<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>与空白对照组比较*代表P<0.05，**代表PO.01;以上结果表明本次实验中大鼠幽门结扎后形成明显的溃疡，显示造模成功。阳性对照药物雷尼替丁能减少胃酸分泌，降低溃疡的发生率与溃疡指数。含有柯里拉京的老鹳草提取物的高、低剂量都能减少胃酸分泌，降低溃疡的发生率与溃疡指数。含柯里拉京的老鹳草提取物在高剂量时减少胃酸分泌，降低溃疡的发生率和溃疡指数等效果优于雷尼替丁组。3水浸应激性大鼠胃溃疡模型3.1实验方法大鼠按体重随机分为4组，每组10只空白对照组、雷尼替丁组(135mg/kg)、含柯里拉京的老鹳草提取物高剂量组(150mg/kg)、含柯里拉京的老鹳草提取物低剂量组(75mg/kg)。大鼠按10ml/kg连续灌胃给药5天，空白对照组给予等量蒸馏水，末次给药前24小时大鼠禁食，给药后1小时将大鼠的四肢绑扎固定于木板上，浸于20'C左右的水槽中，液面保持在胸骨剑突水平。20小时后处死大鼠，打开腹腔，结扎贲门与幽门后将胃取出，由幽门向胃内注入1%甲醛溶液10ml，并将胃浸入1%甲醛溶液中IO分钟，固定内外层。沿胃大弯剪开胃，用生理盐水洗去胃内容物，平铺于白纸上，观察腺胃部溃疡发生的情况。溃疡的程度以溃疡指数表示，并计算溃疡抑制百分率与溃疡的发生率来评价药物的作用。溃疡指数溃疡的长径大于lmm者，直接测量长度，每lmm为1分；若宽径大于lmm者则计分加倍，对于长径和宽径都小于lmm者，按溃疡数目计分，每个溃疡计0.5分。每只动物的累计总分即为该动物的溃疡指数。溃疡抑制百分率％=(空白对照组溃疡指数-用药组溃疡指数)/空白对照组溃疡指数><100%溃疡发生率溃疡发生的动物数占试验动物数的百分比。3.2实验结果老鹳草提取物对水浸应激性胃溃疡模型的影响(又士s)组别剂量(mg/kg)动物数溃疡指数溃疡抑制百分率％溃疡发生率％空白对照—1011.9±5.40100雷尼替丁135102.7士2.6**77.380老鹳草提取物150102.4±1.9**79.88075106.8±3.1*42.9画与空白对照组比较f代表P0.05，"代表PO.01;实验结果表明本次实验中大鼠水浸后形成了明显的胃溃疡，显示造模成功。阳性对照药物雷尼替丁对溃疡形成具有明显的抑制作用，并能够显著减少溃疡指数。含柯里拉京的老鹳草提取物高剂量时与雷尼替丁的作用效果相近，对应激性大鼠胃溃疡模型的溃疡形成有抑制作用，且量效关系明显，高剂量组效果优于低剂量组。4乙酸灼伤型大鼠胃溃疡模型4.1实验方法大鼠按体重随机分为4组，每组10只空白对照组、雷尼替丁组(135mg/kg)、含柯里拉京的老鹳草提取物高剂量组(150mg/kg)、含柯里拉京的老鹳草提取物低剂量组(75mg/kg)。将大鼠禁食24小时后，用5mg/100g体重戊巴比妥钠进行腹腔注射麻醉，然后将其仰卧位固定于手术台上。剪掉腹壁毛，用酒精常规消毒，自剑突下向下沿腹中线剪口约2cm，将胃移出腹腔，在胃的腹侧面，胃体部与幽门窦交界处，将微量注射器平刺入浆膜下0.4-0.5mm，注入50^10%的乙酸，形成丘疹。将胃轻轻送回，缝合腹壁肌层，然后缝合皮肤。用碘酒、酒精消毒，常规饲养。从手术次日起，各组每日按10ml/kg灌胃给药，连续给药7曰，空白对照组给等量蒸馏水。第7天将动物全部处死。开腹结扎幽门和贲门，取胃浸于1%甲醛溶液中，固定io分钟。沿胃大弯剪开，将胃外翻，倒掉内容物，再用乳头吸管轻轻冲掉食物残渣。溃疡呈圆形或椭圆形，中心凹陷，四周微微隆起，密布毛细血管。已愈合的溃疡，周围稍有隆起，表面红润，可见有放射状细纹。用溃疡的最长径和最短径的均值表示溃疡指数，进行统计学处理计算溃疡愈合百分率，评定药物对溃疡愈合的促进作用。溃疡愈合百分率(％)=(空白对照组溃疡直径均值总和-用药组溃疡直径均值总和)/空白对照组溃疡直径均值总和x100%4.2实验结果对大鼠乙酸灼伤型胃溃疡的影响(又士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>与空白对照组比较M戈表P0.05，"代表PO.01;含柯里拉京的老鹳草提取物高剂量时对大鼠胃溃疡的愈合有显著的促进作用，可增加溃疡愈合百分率，减少溃疡指数，降低溃疡的发生率和溃疡指数等效果均与雷尼替丁组接近。低剂量时对溃疡愈合和溃疡指数的影响不大。5结论通过三种溃疡实验，结果提示本发明提供的含柯里拉京的老鹳草提取物能用于治疗消化性溃疡。权利要求1.一种老鹳草提取物，其特征在于该提取物中，式I的柯里拉京占提取物总质量的百分比为5％-40％。id="icf0001"file="A2008101227390002C1.tif"wi="68"he="47"top="50"left="64"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>式I2.权利要求1的老鹳草提取物，其中柯里拉京占提取物总质量的百分比为3.权利要求1的老鹳草提取物，其中柯里拉京占提取物总质量的百分比为20o/o-30%。4.权利要求1-3任一所述的老鹳草提取物的提取方法，包括如下步骤取中药老鹳草若干，粉碎，加5-10倍量水，加热煎煮2-4次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，收集滤液，将上述滤液通过己处理好的大孔吸附树脂柱，进行动态吸附。上柱完成后，树脂柱用3-8倍树脂量的水冲洗，再用1-4倍树脂量70-95%任一浓度乙醇洗脱至洗脱液终点止，收集醇洗脱液。将醇洗脱液部分减压浓縮至干，再用适量95%乙醇沉淀过夜。过滤浓縮至干既得到含有柯里拉京的老鹳草提取物。5.权利要求4所述的提取方法，其中大孔吸附树脂柱的型号可以选自HPDIOO、HPD400、HPD600。6.权利要求5所述的提取方法，其中大孔吸附树脂柱的型号为HPD400。7.权利要求1-3任一所述的老鹳草提取物的提取方法，包括如下步骤取中药10%-300/0。老鹳草若干，粉碎，加7倍量水，加热煎煮2次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，收集滤液，将上述滤液通过已处理好的HPD400大孔吸附树脂柱，进行动态吸附。上柱完成后，树脂柱用5倍树脂量的水冲洗，再用2倍树脂量95%乙醇洗脱至洗脱液终点止，收集醇洗脱液。将醇洗脱液部分减压浓縮至干，再用适量95%乙醇溶解过夜。过滤浓縮至干既得含有柯里拉京的老鹳草提取物。8.权利要求l、2或3所述的老鹳草提取物在制备抑制胃酸分泌，降低胃液酸度的药物中的用途。9.权利要求l、2或3所述的老鹳草提取物在制备治疗或预防胃酸过多症、消化性溃疡、慢性胃炎的药物中的用途。全文摘要本发明涉及一种新的老鹳草提取物及其制备方法，具体地涉及含有柯里拉京的老鹳草提取物，还涉及所述老鹳草提取物治疗或预防胃酸分泌过多相关疾病的药物中的用途。文档编号C07H13/08GK101613382SQ200810122739公开日2009年12月30日申请日期2008年6月26日优先权日2008年6月26日发明者伟宋,张喜全,徐宏江,洋李,李新祝,杨永安,鸯王申请人:江苏正大天晴药业股份有限公司