¹⁸F-标记的叶酸的制作方法

专利名称：¹⁸F-标记的叶酸的制作方法
技术领域：
本发明涉及18F-标记的蝶酸(pteroate)或叶酸(folate)放射 性药物的新的合成方法，和通过该合成方法获得的"F-叶酸放射性药 物以及它们在癌症治疗和炎性疾病和自身免疫疾病的治疗的诊断和监 测中的用途，其中氟-18是通过经1S[F]氟化物的直接放射性标记而连 接到蝶酸(或叶酸)或其衍生物。
背景技术：
用于效应物部分例如诊断或治疗剂递送的细胞特异性粑向作用是 一个广泛研究的领域，并且已引起非侵入性诊断和/或治疗医学应用的 发展。特别是，在核医学操作和治疗的领域，其应用放射活性物质发 射电磁辐射如Y -射线或光子或粒子发射辐射，这些放射活性物质在耙 向的细胞或组织中的选择性定位是需要的，以实现用于特异性组织的 显像的高信号强度、评价疾病和/或监测治疗性疗法的作用，或者高辐 射剂量以用于给特定患病位置递送充足剂量的电离辊射，而在其它组 织例如健康组织中无辐射损伤的风险。因此具有重要利益的是确定和 评价细胞特异性结构，特别是肿瘤(即癌症)或者炎症和自身免疫性疾 病中存在的结构，例如受体、抗原、半抗原等，它们可能通过各自的 生物学载体而特异性地被靶向。
叶酸受体(FR)已被认为是这些结构中的一种。在正常组织和器官 中，FR-表达高度局限于少数器官(例如肾、肺、脉络丛和胎盘)。而 FR- cx通常在多种特定细胞类型中过表达，例如上皮肿瘤(例如卵巢、 颈脊、子宫内膜、乳房、结肠直肠、肾、肺、鼻咽)，并且FR-P通常 在白血病细胞中过表达(约70%的急性骨髓性白血病(AML)为FR-P阳 性)。因此两者均可用作有价值的肺瘤标记物以用于选择性肿瘤靶向作用(Elnakat and Rat謹，Adv. DrugDeliv. Rev. 2004; 56:1067-84)。 此外，近来发现被诊断为患有类风湿性关节炎的患者中的活化的(但不 是休眠的)滑液巨噬细胞具有功能上活化的 FR- P (Nakashima-Matsushita等人，Arthritis & Rheumatism, 1999， 42 (8): 1609-16)。因此，活化的巨噬细胞可以用叶酸辄合物选择性地靼向进 入关节炎患者关节中，这开创了类风湿性关节炎的诊断和治疗的可能 性(Paulos等人，Adv. Drug Deliv. Rev. 2004; 56:1205-17)。
各种叶酸衍生物和轭合物是已知的，并且已作临床或临床前评价。 特别是叶酸放射性药物在核医学领域已经越来越重要，并且可用于改 善癌症和炎性疾病和自身免疫疾病的治疗的有效性的诊断和评价，例 如评价和/或预测治疗反应并因此改善放射量测定。 一种适用于放射成 像的典型显像技术是PET。 PET使用的是具有短半衰期的同位素，该同 位素共价连接至它的栽体或经过螯合部分连接。合适的同位素包括例 如作为共价结合核素的UC (约20min)、 13N (约lOmin)、 150 (约2 min) 和"F (约llOmin)以及例如一般通过鳌合系统连接的68Ga (约68min)。
明显地，具有共价连接的同位素的叶酸放射性药物将是非常感兴 趣的。特别是"F-标记的叶酸放射性药物是最适合PET成像的，其原 因在于它的优异的成像特征将会满足所有上述考虑。与其它适宜的放 射性核素("C、 13N、 "0)相比，"F是非常有用的，因为它们半衰期长， 大约为110分钟，并且因为它通过发射具有最低正电子能的正电子而 衰减，从而可得到具有高分辩率PET的最清晰的影像。此外，"F的更 长的半衰期便于得到这样的合成法，即其更复杂并且伴随分配到PET 中央而无需放射化学设备。
然而，叶酸的结构本身不适用于直接用"F放射标记。迄今为止， 许多基于螯合物的叶酸放射性药物已被合成并且被成功地评价为用于 对叶酸受体-阳性肿瘤成像的诊断剂。最广泛研究的衍生物是用mIn 和，Tc标记的，其用于SPECT (Siegel等人，J. Nucl. Med. 2003， 44:700; Mii ller等人，J. Orga議et. Chem. 2004， 689:4712); 或者是用"Ga标记的，其用于PET (Mathias等人，Nucl. Med. Biol.2003， 30 (7): 725)。与之相比，仅有非常少的"F-标记的叶酸衍生物 报道于文献中(Bettio等人，J. Nucl. Med， 2006， 47(7)， 1153; W0 2006/071754)。通常，选择的中间体与放射性氟化合以获得"F-标记 的中间体，该中间体随后被活化和纯化以用于偶合至叶酸的官能团内， 例如在叶酸的谷氨酸根部分内的羧酸基团。明显地，这种多步骤的放 射合成是费时间的，并且仅得到低于5。/。的低放射化学产率(Bettio等 人，J. Nucl. Med,2006， 47(7)， 1153)。
因此，仍存在对用于制备直接放射性标记的"F-叶酸或其衍生物 的有效且通用的方法的巨大需求，该方法解决了上述所讨论的一种或 多种缺陷。
申请人现已发现合成新的18F-标记的叶酸放射性药物的有效的和 通用的方法，该方法克服了常规标记方法的缺陷，其中氟-18通过经 18 [F]氟化物的直接放射性标记而连接到叶酸或其衍生物。
因此，本方法是省时的和方便的直接"F-标记的方法，其中不必 存在辅基且仅携带结合作为用于直接"F-标记部分的活化基团的酰胺
的合适的前体是容易得到的。
此外，本方法允许对oc-或Y-异构体进行位置选择的制备和标记 而无需进行公知的困难而耗时的分离。

发明内容
因此，本发明在第一方面涉及"F-标记的蝶酸(pteroate)或叶 酸放射性药物的新的合成方法(下文亦称本发明方法)，其中氟-18 是通过经过18[F]氟化物的直接放射性标记而连接到蝶酸(或叶酸)或 其衍生物。
在一个具体的实施方案中，提供了通式I的"F-标记的化合物的 合成方法<formula>formula see original document page 15</formula>其中P是蝶酸(pteroate)，且S,是间隔基， 包括步骤(a)提供式II前体，
叉
P N一S广Z H
II
其中Z是离去基团，且P和Si如本文上述所定义的，和(b)使所 述前体经历"[F]氟化物的直接放射性标记以获得式I化合物。
更具体地，本发明涉及具有式III的通式I的18F-标记的化合物 的合成方法
O
III
其中
X,至Xs彼此独立地是C或N,
R!， R2彼此独立地是H， Hal, -OR', -NHR'， C1-C12烷基，C1-C12 烷氧基，CI-C12烷酰基，C2-C12烯基，C2-C12炔基，(C1-C12烷氧 基)羰基，或(Cl-C12烷基氨基)羰基，其中R'是H或C1-C6烷基，
R3， R4彼此独立地是H，甲酰基，亚氨基甲基，亚硝基，Cl-C12烷 基，Cl-C12烷氧基，C1-C12烷酰基，鹵素取代的C1-C12烷酰基，
Rs是H, CN， Hal, N02， CI-C12烷基，C1-C12烷氧基，C1-C12烷 酰基，C2-C12烯基，C2-C12炔基，(CI-C12烷氧基)羰基，(C1-C12 烷基氨基)羰基，
St是直链或支链C1-C12烷基，其是未取代的或被至少一个CN， Hal或冊2取代，并且其中一个或多个非相邻的CH2基团可独立地被以 下代替-0-， -CO-， -CO-O-， -O-CO-， -NR'-， -N=， 一NR'-C0-， -CO-NR'-，-NR'-C0-0-， -0-C0-NR'-, -NR'-C0-NR'-， -CH-CH-， -C^C-, -S-， -S03R'-， -PR'-，或具有0、 1或2个杂原子的5-或6-元芳香环，该芳香环是未 取代的或被以下取代CN， Hal， N02， C0R'或C00R'，其中R'表示H或 Cl-C6烷基，或者其组合，
m 是0或1，
p 是G, 1或2，且
q 具有1至7的值，
包括步骤(a)提供式IV的前体，
IV
其中Z是离去基团，并且X,至Xs, K至Rs, S" p,和q如本文 上述所定义的，和b)使所述前体经历"[F]氟化物的直接放射性标记。
在优选的实施方案中，"F]氟化物在步骤(b)中通过相转移催化剂 例如碳酸四丁基铵或氨基聚醚类(例如Kryptof ix 2. 2. 2)联用碳酸钾 或草酸钾来活化。
优选地，Z是离去基团，例如Hal, N02，重氮盐，磺酸酯类，其 包括甲磺酸酯CH3S020-、甲苯磺酸酯CH3C6H4S020-、五氟苯甲酸酯、三 氟甲磺酸酯CF3S020-，碘锵盐-111'〃2， 二烷基/芳基硅烷类-Si0HR〃'2和 硅烷醇类-SiHR〃'2，其中R〃'独立地是直链或支链(Vw烷基或任选取 代的碳环和杂环基团，其包含五-、六-或十元环系统等。
优选地，Si是直链或支链C1-C12烷基，其是未取代的或被以下 至少一个取代CN， Hal或N02，并且其中一个或多个非相邻的012基团可独立地被以下代替-0-， -C0-， -CO-O-， -O-CO-， -NR'-， -N=， -NR'-C0-, -CO-NR'-， -NR'-CO-0-， -O-CO-NR'-， -NR'-CO-NR'-，-CH-CH-， -C = C-， -S-， -S03R'-， -PR'-，或具有0、 1或2个杂原子的5-或6-元芳香环，该芳香环是未取代的或被以下取代CN， Hal， N02， COR'或 COOR',其中R'表示H或C1-C6烷基，或者其组合。
在进一步具体的实施方案中，本发明预期一种合成方法，其中所 得到的通式I的化合物具有V式
V
其中
X6, X7彼此独立地是N或0,
R6， R7彼此独立地是基团R5或基团-S广"F，其中S2是直链或支 链C1-C12烷基，其是未取代的或被至少一个CN， Hal或冊2取代，并 且其中一个或多个非相邻的012基团可独立地被以下代替-0-， -C0-， -CO-O-， -O-CO-， -NR'-, -N=， -NR'-CO-， -CO-NR'-， -NR'-CO-O-， -O-CO-NR'-， -NR'-CO-NR'-，-CH=CH-， -C^C_， -S-， -S03R'-， -PR'-， 或具有0、 1或2个杂原子的5-或6-元芳香环，该芳香环是未取代的或 被以下取代CN， Hah N02， COR'或C00R',其中R'表示H或Cl-C6烷 基，或者其组合，
条件是R6和l中的一个是基团-S「"F，并且 X!至Xs， Ri至R" m， p和q,如本文上述所定义的。
在另一方面，本发明涉及新"F-叶酸放射性药物(下文亦称本发
18明化合物)，例如通过本发明的直接放射性氟化的新方法所获得的式I
至V以及药物组合物及其用途，特别是在体外或体内的癌症治疗和炎
性疾病和自身免疫疾病的治疗的诊断和监测中的用途。
在一个具体的实施方案中，本发明涉及本发明的化合物用于表达 叶酸受体的细胞或细胞群的诊断成像的用途。
更具体地，本发明包括用于表达叶酸-受体的细胞或细胞群的诊断 成像的方法，所述方法包括例如组织样品中的表达叶酸受体的细胞(例 如肺瘤细胞)的体外检测方法。该方法还可在体内进行。
因此，在另一个实施方案中，本发明涉及本发明化合物方便和有 效的施用于需要癌症治疗和炎性疾病和自身免疫疾病的治疗的诊断成 像和/或监测的受试者的用途。本发明的方法的受试者优选是哺乳动
物，例如动物或人，优选人。
此方法可以与癌症和炎性疾病和自身免疫疾病的诊断或治疗的任 何其它方法组合来进行，所述其它方法包括使用其它已开发的诊断剂
和/或治疗剂的方法，以及利用x-射线计算机断层成像(CT)、磁共振 成像(MRI)、功能性磁共振成像(fMRI)、单光子发射计算机断层摄影 (SPECT)、光学成像和超声的方法。
本发明的其它特征和优点根据以下详细说明和权利要求而变得明显。
具体实施例方式
本发明第 一方面涉及新的18F-标记的蝶酸或叶酸放射性药物(下 文亦称本发明化合物)的合成方法，其中氟-18是通过经"[F]氟化物 (下文亦缩写为"18F")的直接放射性标记连接。
在一个具体的实施方案中，提供了通式I的"F-标记的化合物的合
成方法<formula>formula see original document page 20</formula>
其中P是蝶酸且s,是间隔基，
包括步骤(a)提供了式II的前体，<formula>formula see original document page 20</formula>
其中Z是离去基团，并且P和Si如本文上述所定义的，和(b)使所 述前体经历18F直接放射性标记以获得式I的化合物。
如在本文中所使用的术语"蝶酸"，包括基于稠合的嘧啶杂环的 化合物，该杂环与氨基苯曱酰基部分连接，然后在对位与如本文下迷 定义的共价连接的S广基团进一步衍生化。如在本文中所使用的"稠 合的嘧啶杂环"包括与其它的5-或6-元杂环稠合的嘧啶，例如喋啶或 p比咯并嗜咬双环。
在一个具体的实施方案中，术语"蝶酸"还包括叶酸，如在本文 中所使用的该叶酸是基于叶酸骨架的化合物(即基于蝶酰基-谷氨酸 或N-[4(喋啶-6-基甲基氨基)苯曱酰基]-谷氨酸)及其衍生物。这些化 合物包括任选取代的叶酸，亚叶酸，蝶酰多聚谷氨酸 (pteropolyglutamic acid)，以及叶酸受体-结合蝶咬，例如四氢蝶 呤类，二氢叶酸，四氢叶酸，和它们的脱氮杂(deaza)和二脱氮杂 (dideaza)类似物。术语"脱氮杂"和"二脱氮杂"类似物指本领域公认的 类似物，其具有取代天然存在的叶酸结构中的一个或两个氮原子的碳 原子。例如，该脱氮杂类似物包括l-脱氮杂、3-脱氮杂、5-脱氮杂、 8-脱氮杂和10-脱氮杂类似物。该二脱氮杂类似物包括，例如，1，5-二 脱氮杂、5，10-二脱氮杂、8,10-二脱氮杂和5，8-二脱氮杂类似物。
更具体地，本发明涉及在方案1中描述的合成方法，其中具有离 去基团Z的前体IV经18F直接放射性标记以获得具有式III的通式IO
III
方案1.合成方案
已发现通式I或IV的蝶酸(或叶酸)部分可分别以直接的方式容 易且有效地被"F-放射性标记，因此无需对中间体"F-标记物进行合成 及纯化。
优选地，前体IV的直接放射性标记是通过经相转移催化剂活化的 18F进行的，所述相转移催化剂，例如碳酸四丁基铵或氨基聚醚类(e. g. Kryptofix 2.2. 2)联用碳酸钾或草酸钾。在一个具体的实施方案中， 18F是在选自下述的极性非质子溶剂中经Kryptofix活化的乙腈、 丙酮、1，4-二p恶烷、四氢呋喃(THF)、 N-甲基吡咯烷酮(賜P)、 二甲氧 基乙烷(DME)、 二甲基乙酰胺(DMA)、 N，N-二曱基甲酰胺(DMF)、 二曱 基亚砜(DMS0)和六甲基磷酰胺(HMPA)及其混合物。
离去基团Z可以是本领域公知的任何普通的离去基团，其包括例 如Hal， N02，重氮盐，磺酸酯类，其包括曱磺酸酯CH3S020-、甲苯磺 酸酯CH3C6H4S020-、五氟苯甲酸酯、三氟甲磺酸酯CF3S020-，碘银盐 -I+R〃'2, 二烷基/芳基硅烷类-SiOHR'〃2和硅烷醇类-SiHR〃'2，其中R'"独立地是直链或支链Ca-w烷基或任选取代的碳环和杂环基团，其包含 五-、六-或十元环系统等。
Si优选是直链或支链C1-C12烷基，其是未取代的或被至少一个 CN， Hal或冊2取代，并且其中一个或多个非相邻的CH2基团可独立地 被以下代替-0-， -CO-， -CO-O-， -0-C0-， -NR'-， -N=， -NR'-CO-， -CO-NR'-， -NR'-CO-O-， -0-CO-NR'-, -NR'-CO-NR'-，-CH-CH-， -C = C-， -S-， -S03R'-， -PR'-，或具有0、 1或2个杂原子的5-或6-元芳香环， 该芳香环是未取代的或被以下取代CN， Hal, N02， COR'或COOR',其 中R'表示H或Cl-C6烷基，或者其组合。
更优选地，是直链或支链C1-C8烷基，其是未取代的或被至少 一个CN， Hal或N02取代，或具有0、 1或2个杂原子的5-或6-元芳 香环，该芳香环是未取代的或被以下取代CN， Hal， N02， COR'或C00R', 其中R'表示H或C1-C6烷基，或者其组合。
如在本文上述指出的，Si可特别包括氨基酸，如在本文中所使用 的该氨基酸是含有氨基基团(例如，冊2或NH3+)和羧酸基团(例如，C00H 或CO(T)的化合物。在一个具体的实施方案中，所述氨基酸可以是ot-氨基酸、P-氨基酸、D-氨基酸或L-氨基酸。所述氨基酸可以为天然 存在的氨基酸(例如，丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、 苯丙氨酸、色氨酸、蛋氨酸、甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、 酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸 或组氨酸等)或者其可以为其衍生物。衍生物的实例包括任选取代的氨 基酸，例如具有一个或多个选自以下的取代基CN、 Hal和/或N02。 所述氨基酸还可包括任何其它非天然存在的氨基酸，例如正亮氨酸、 正缬氨酸、L-或D-萘基丙氨酸、鸟氨酸、高精氨酸以及其它肽技术 领域公知的(参见，例如M. Bodanzsky， "Principles of Peptide Synthesis,"第1和第2修订版，Springer-Verlag， New York, NY， 1984和1993, 以及Stewart and Young, "Solid Phase Peptide Synthesis,"第2版，Pierce Chemical Co,Rockford， IL， 1984， 二者通过引用并入本文)。氨基酸和氨基酸类似物/衍生物可以商业购
22得(Sigma Chemical Co.; Advanced Chemtech)或者使用本领域已知 的方法合成。在另一具体的实施方案中，该氨基酸还可以是聚氨基酸 的一部分(亦称为多肽)，其中如上文定义的多种相同或不同的氨基酸 是共价连接的，即通过常规肽或其它键连接。
优选的氨基酸包括例如谷氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、 赖氨酸、精氨酸、半胱氨酸及其衍生物，并且优选的聚氨基酸包括它 们各自的均聚物(即聚谷氨酸、聚天冬氨酸等)。最优选的是任选取代 的天冬氨酸和谷氨酸。
基团X:至Xs， Ri至Rs， p和q以更详细的方式对基团P的性质定 义。本领域的技术人员仍然知晓在蝶酸和/或叶酸骨架内的这些基团的 范围。
因此，如在本文中所使用的至Xs彼此独立地是C或N。 在一个优选的实施方案中，R!和R2彼此独立地表示H，烷基，-OR'， -NHR'，更优选地是-OR'， -NHR'。
在一个优选的实施方案中，R3是H， CI-C12烷基或C1-C12烷酰基。
在另一个优选的实施方案中，l是H，亚硝基，CI-C12烷氧基或 C1-C12烷酰基。
在另一个优选的实施方案中，R5是H， CN， Hal, N02， C1-C12烷 基，C1-C12烷氧基，C1-C12烷酰基，C2-C12烯基，C2-C12炔基，(C1-C12 烷氧基)羰基，(CI-C12烷基氨基)羰基。更优选地，R5是H， C1-C12 烷基，CI-C12烷氧基，CI-C12烷酰基，(CI-C12烷氧基)羰基，和 (Cl-C12烷基氨基)羰基。
应该理解的是，(H)q表示在指定环上的(例如，在X3， C6, n和 X4上的)所有H取代基，因此q可具有1至7的值。例如，q-7表 示完全饱和的5， 8-二脱氮杂类似物(X3 = X4 - C) ， q = 1表示完全未 饱和的类似物，且X3 = X4 = N。
还应该理解的是，p取决于X的性质和环的芳香性，因此其可为进一步应该理解的是，缩写"N"和"C"表示所有可能的饱和程 度，例如，N包括-NH-和-N-连接基，C包括-CH2-和-CH-连接基。
在另一个优选的实施方案中，本发明涉及根据方案1的合成方 法，其中叶酸或其衍生物的谷氨酸根部分经18F直接放射性标记并且所 获得的化合物因此具有式V
V
其中
X6， X7彼此独立地是C， N或0，
R6, R7彼此独立地是H,直链或支链C广Cu烷基，其是未取代的或 被至少一个CN， Hal或冊2取代或基团-S2-"F，其中S2是直链或支 链C1-C12烷基，其是未取代的或被至少一个CN， Hal或卯2取代， 并且其中一个或多个非相邻的CH2基团可独立地被以下代替-O-， -CO-， -CO-0-， -0-CO-， -NR'-， -N-， -NR'-CO-， -CO-NR'-， -NR'-CO-O-， -0-CO-NR'-, -NR'-CO-NR'-，-CH-CH-， -C = C-， -S-， -S03R'-， -PR'-, 或具有0、 1或2个杂原子的5-或6-元芳香环，该芳香环是未取代的或 被以下取代CN， Hal， N02， COR'或COOR'，其中R'表示H或Cl-C6烷 基，或者其组合，
条件是R6和R7中的至少一个是基团-S广"F，并且 X!至Xs， R,至R5， m， p和q，及其优选的实施方案如本文上述所 定义的。
因此更具体地，所获得的式V的化合物可由具有式VI或Via的化 合物表示，<formula>formula see original document page 25</formula>其中Xi至X" K至R7， m， p和q，及其优选的实施方案如本文上述所定义的。
因此，在一个具体的实施方案中本发明预期根据方案l的通式VI或Via的"F-标记的化合物的合成方法，
<formula>formula see original document page 25</formula><formula>formula see original document page 26</formula>
其中
X,至Xs彼此独立地是C或N，
X6， X7彼此独立地是C， 0或N,
R2彼此独立地是H， Hal， -OR', -NHR', CI-C12烷基，C1-C12烷氧基，C1-C12烷酰基，C2-C12烯基，C2-C12炔基，(C1-C12烷氧基)羰基，或(C1-C12烷基氨基)羰基，其中R'是H或Cl-C6烷基，
R3， R4彼此独立地是H，甲酰基，亚氨基甲基，亚硝基，Cl-C12烷基，Cl-C12烷氧基，C1-C12烷酰基，卣素取代的C1-C12烷酰基，
Rs是H, CN， Hal， N02， C1-C12烷基，C1-C12烷氧基,C1-C12烷酰基，C2-C12烯基，C2-C12炔基，(CI-C12烷氧基)羰基，和(C1-CU烷基氨基)羰基，
R6， R7彼此独立地是H或直链或支链d-Cu烷基，其是未取代的或净皮至少一个CN， Hal或N02取代，
S2是直链或支链C1-C12烷基，其是未取代的或被至少一个CN，Hal或N02取代，并且其中一个或多个非相邻的CH2基团可独立地被以下代替..-0-， -C0-， -CO-0-， -0-CO-， -NR'-， -N-， -NR'-CO-， -CO-NR'-，-NR'-CO-O-， -O-CO-NR'-， -NR'-CO-NR'-，-CH=CH-， -C芸C-， -S-， -S03R'-，-PR'-，或具有0、 1或2个杂原子的5-或6-元芳香环，该芳香环是未取代的或被以下取代CN， Hal， N02, COR'或COOR'，其中R'表示H或C1-C6烷基，或者其组合，
m是0或1，
p是0， 1或2，且
q具有1至7的值，
26包括步骤(a)提供式VII或Vila的前体，
Vila
其中Z是离去基团，并且Xi至X7， Id至R7， S2，m， p和q如本文上述所定义的，和
(b)使所述前体经历18F的直接放射性标记。
S2优选是直链或支链Cl-C8垸基，其是未取代的或被至少一个CN，Hal或冊2取代或五或六元芳香环，该芳香环是未取代的或被以下取代CN， Hal， N02, COR'或COOR'，其中R'表示H或Cl-C6烷基，或者其组合，更优选为直链或支链Cl-C6烷基，其是未取代的或被至少一个CN， Hal或N02取代。
本发明化合物的一个进一步的具体实施方案包括例如化合物，其中Xi至Xs是N， R！是NYA， R2是0， R4是Y" p是O且q是l。<formula>formula see original document page 28</formula>Xfi — Rfi
Villa
X6, X7彼此独立地是C， N或0，
Ym Y2彼此独立地选自H，甲酰基，直链或支链d-Cu烷基，其是未取代的或被至少一个CN， Hal或冊2取代，
L选自H，甲酰基，亚硝基，直链或支链d-Cu烷基，其是未取代的或,皮至少一个CN， Hal或恥2取代，
R6, R7彼此独立地是H或直链或支链C广Cu烷基，其是未取代的或被至少一个CN， Hal或N02取代，并且
S2是直链或支链C1-C12烷基，其是未取代的或被至少一个CN,Hal或N02取代，并且其中一个或多个非相邻的CH2基团可独立地被以下代替-0-， -CO-， -C0-0-， -0-C0-， -NR'-, -N-， -NR'-CO-， -CO-NR'-，-NR'-CO-0-, -O-CO-NR'-， -NR'-CO-NR'-， -CH-CH-， -CsC-, -S-， -S03R'-，-PR'-,或具有0、 1或2个杂原子的5-或6-元芳香环，该芳香环是未取代的或被以下取代CN， Hal， N02， COR'或COOR',其中R'表示H或
因此，在一个进一步的具体的实施方案中，本发明涉及式VIII或VIIIa的化合物，
N—YCl-C6烷基，或者其组合。
术语"烷基"，当单独或组合使用时，指含有1至12个碳原子的直链或支链烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、己基等。更优选的烷基含有l至8，更优选1至4个碳原子。
如在本文中所使用的术语"烯基"，单独或者与其它基团组合，是指含有2至12个碳原子的直链或支链炕基，例如亚甲基、乙烯基、丙烯基、异丙烯基、丁烯基、叔丁烯基、仲丁烯基、异丁烯基、戊烯基、异戊烯基、戊二烯基、异戊二烯基、己烯基等。优选的烯基含有2至6个碳原子。
如在本文中所使用的术语"炔基"是指具有一个或多个碳碳三键的碳原子的直链或支链。优选的炔基含有2至12，更优选2至6个碳原子。
如在本文中所使用的术语"烷氧基"是指如上文定义的烷基，其被氧取代，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、叔丁氧基等。
如在本文中所使用的术语"烷酰基"是指甲酰基，或者是被羰基末端取代的如上文定义的烷基，例如乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基等。
如在本文中所使用的术语"烷基氨基"是指被氮取代的如上文定义的烷基，其包括单烷基氨基例如甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、叔丁基氨基等，以及二烷基氨基例如二曱基氨基、二乙基氨基、曱基丙基氨基等。
如在本文中所使用的术语"g素"是指任何第7族元素，包括氟、氯、溴、》舆和砹(0)。
在另一方面，本发明涉及通过本发明的方法获得的化合物，例如式I至VIII化合物。
在进一步方面，本发明提供了通过本发明的方法获得的新叶酸放射性药物用于方便且有效地施用于有诊断成像需要的受试者的用途。
因此，本发明提供了用于表达叶酸受体的细胞或细胞群的诊断成像的方法，所述方法包括以诊断成像量施用至少一种本发明叶酸放射性药物的步骤，以及获得所述细胞或细胞群的诊断影像的步骤。
此成像可以在体外或体内用表达叶酸-受体的细胞或细胞群进行。因此，本发明提供了用于组织样品中的表达叶酸受体的细胞的体外检测方法，其包括使所述组织样品与有效量的至少 一种本发明叶酸放射性药物接触并且达到足够的时间和条件以使结合发生，并通过
PET成像检测此结合。
在另 一方面，本发明提供了本发明叶酸放射性药物方便且有效地施用于有诊断成像或者监测癌症治疗和炎性疾病和自身免疫疾病的治疗的需要的受试者的用途。
在另一方面，本发明提供了同时诊断和治疗的方法，其包括给有此需要的受试者施用诊断有效量的至少一种本发明叶酸放射性药物以及治疗活性剂，以及获得所述组织的诊断影像以观察治疗过程。
本发明方法的受试者优选是哺乳动物，例如动物或人，优选人。
剂量取决于期望效果的性质(例如诊断或治疗的形式)，治疗的种类和频率，诊断器械，制剂应用的形式，以及接受者的年龄、体重、营养、状态，同步治疗的种类(如果有的话)。
然而，最优选的剂量可以适合于个体受试者，这是本领域技术人员不需要过多的试验就可以理解和确定的。这通常包括标准剂量的调节，例如如果患者有较低体重的话可降低剂量。
治疗可以以较小量开始，在最佳量以下，为了达到最佳效果可以增加量。在PET扫描机上的成像操作发生在施用该放射性示踪剂之后的几分钟内至2-4小时内。时间安排取决于成像靶标和放射性示踪剂的动力学以及希望的信息。
本发明叶酸放射性药物的优选施用途径是通过静脉注射。
用于注射的适宜形式包括本发明上述叶酸放射性药物的无菌水溶液或分散液。通常该放射性药物被配制在生理援沖液中。叶酸放射性药物可采用本领域认可的技术进行灭菌，所述的技术 包括但不限于，添加抗细菌剂或抗真菌剂，例如，对羟基苯甲酸酯、 三氯叔丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等。优选地，将它们在施用之前 进行无菌过滤以消除对额外灭菌剂的需求。
对于待注射的溶液而言，优选的单位剂量为约0. 01 mL至约10 mL。 静脉施用之后，如果需要，体内器官或肿瘤的成像可以发生在放射标 记试剂已被施用于受试者之后的几分钟至2-4小时，使得足够量的施 用剂量在所选靶区内累积。
本发明叶酸放射性药物还可以用于取自受试者的组织检查物中的 表达叶酸受体的细胞的体外检测。因此，在进一步的实施方案中，本 发明提供了用于组织样品中的表达叶酸受体的细胞例如肿瘤细胞的体 外检测方法，其包括使所述组织样品与有效量的本发明叶酸放射性药 物接触并且达到足够的时间和条件，从而使结合发生并通过成像技术 检测此结合。
样品可以通过熟练技术人员已知的操作收集，例如通过收集组织 检查物或者体液，通过抽吸气管或肺样品等。
待测定的组织样品包括怀疑含有表达叶酸受体的细胞的任何组 织，所述细胞例如肿瘤细胞、上皮细胞、肾、胃肠道或肝胆系统及其 它。可以用例如显微镜用薄片切片机将样品切开以有助于显微镜检查 和观测。在与一种本发明叶酸放射性药物孵育之前或者之后，还可以 将样品用适宜的固定剂固定，以改善样品组织的组织学质量。
足以使本发明叶酸放射性药物与细胞上的叶酸受体结合的时间和 条件包括标准组织培养条件，即样品可以在体外培养并且与本发明络 合物或组合物的一种在生理介质中孵育。这些条件是熟练技术人员已 知的。另选地，可以将样品固定，然后与本发明叶酸放射性药物在等 渗或生理緩冲溶液中孵育。
为了所有的应用，方便的是在或者接近它们使用的地方制备本发 明的化合物。
根据本公开内容，本文公开和要求保护的所有化合物和/或方法可以被制备并完成而不需要过多的试验。对于本领域技术人员显而易见 的是，可以将变型用于本发明而不会偏离本发明范围。本文提供的实
施例将是说明性的并且不是穷尽的；因此，说明性的实施例将不会净皮 认为是以任何方式限制本发明。
实施例 材料和方法
红外光谱是在Jasco FT/IR-6200 ATR-IR上记录的。核磁共振波 谱是用Bruker 400 MHz或500 MHz波谱仪以相应的溶剂信号作为内标 记录的。化学位移是以相对于四甲基硅烷(O. 00 ppm)的百万分之一 (ppm)分部分报告的。偶合常数值/是以赫兹(Hz)给出；以下缩写用于 试验部分以用于描述'H-NMR波i瞽单峰(s)、 二重峰(d)、三重峰(t)、 多重峰(m)、双二重峰(dd)。复杂多重峰的化学位移是以它们出现的范 围给出的。低分辨率质谱(LR-MS)是用Micromass Quattro micro API LC-ESI记录的。
对水敏感的反应是在氩气下在火焰干燥的玻璃器皿中进行的。反 应通过薄层色语法(TLC，在EM Science 0.25 mm厚、预涂覆硅胶60 F-254玻璃载板上进行)或HPLC监测。HPLC是在配备有L-74 QQ可调吸 收检测器的Merck-Hitachi L-7000系统上进行的。分析型HPLC是用 XBridge⑧柱(C18, 5nm， 4.6 x 150 mm, Waters)、叶吏用以下溶剂系统 (1 mL/min)进行的:0. 1 % TFAaq (溶剂A)，乙腈(溶剂B), 1 mL/min; 0-1 min， 95 % A; 1-15 min, 95 — 5 % A; 15-20 min， 5 % A; 20 — 22min， 5 — 95°"; 22 — 25 min， 95 % A。半制备型HPLC是用XBridge 半制备柱(C18， 5jiin， 10 x 150 nrni， Waters) 、 3 mL/min的恒强度的 NH4HC03 (10 raM， 88 %) / CH3CN (12%)进行的。全部化学品是如供应的 那样使用的而不同于其它描述。
实施例1: Y-2-氟乙基-叶酸的合成
32(a) Y-Glu(氟乙基)甲酯的合成
在火焰干燥的烧瓶中加入B0C-Glu-0Me (556mg， 2. 13mmol)、干 燥DMF (10ml)和Et3N (0. 9ml， 1.9当量)。将该反应混合物冷却至0 。C，加入HBTU (808mg， 1当量)并且将该反应混合物搅拌10分钟。在 O'C向该反应混合物中逐滴加入2-氟乙胺(212ml ， 1当量)在干燥的DMF (10ml)和Et3N(0. 9ml， 1.9当量)中的溶液。将反应搅拌2小时，使 其温热至室温并搅拌过夜。向该反应混合物中加入水(10ml)并用 EtOAc萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgS04干燥并在真空下浓 缩以产生浅黄色油状物。
'H-NMR (300 MHz， DMSO-cU [ppm]: 7,78 (bs， NH); 6.60 (bs， NH); 4.77 (bs， OH); 4.62 (t, CH); 3.47 (m， CH3); 3.37 (t， CH2); 3.11 (t, CH2); 2.89 (t， CH2); 2.73 (t, CH2); 1.39 (s， CH3)
(b) y-2-氟乙基-叶酸的合成
将y -Glu(氟乙基)甲酯(450mg， 1.48mmol )溶解在过量的 TFA/CH2C12 (1: 1)中直到通过TLC/HPLC监测出现BOC完全脱保护。 在真空下除去过量的TFA/CH2Cl2以产生浅黄色油状物的Glu(羟乙基) 甲酯的TFA盐，该盐根据在EPA07105987和EPA07105984所提到的 操作在与N2-N， N-二曱基氨基亚甲基-10-甲酰基-蝶酸的偶合反应中 直接使用。
实施例2: Y-(2-(对甲苯磺酰基)乙基)叶酰胺的合成 (a) BOC-Glu(羟乙基)甲酯的合成
在火焰千燥的烧瓶中加入BOC-Glu-OMe (556mg， 2. 13mrao1)、干 燥的DMF (10ml)和Et3N (0.9ml， 1.9当量)。将该反应混合物冷却 至O'C，加入HBTU (808fflg， l当量)并且将该反应混合物搅拌10分 钟。在(TC向该反应混合物中逐滴加入氨基醇(0. 13ml， 1当量)在干 燥的DMF (10ml)和Et3N (0.9ml, 1.9当量)中的溶液。将反应搅拌 2小时，使其温热至室溫并搅拌过夜。向该反应混合物中加入水(10ml)并用EtOAc萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO,干燥并在真 空下浓缩以产生浅黄色油状物。
力-NMR (300 MHz, DMS0-d6) [ppm]: 9.40 (bs， NH); 7.72 (bs, NH); 4.52 (t， CH); 3.54 (m， CH3); 3.44 (t， CH2); 3.14 (t， CH2); 2.56 (t， CH2); 2.20 (t， CH2); 1.24 (s， CH》
(b) Y-(2-(对曱苯磺酰基)乙基)叶酰胺的合成 将B0C-Glu(幾乙基)甲酯(450mg， 1. 48mmo1)溶解在过量的 TFA/CH2C12 (1:1)中直到通过TLC/HPLC监测出现B0C完全脱保护。在 真空下除去过量的TFA/CH2Cl2以产生浅黄色油状物的Glu(羟乙基)甲 酯的TFA盐，该盐根据在EPA07105987和EPA07105984所提到的操 作在与N2-N, N-二曱基氨基亚曱基-10-甲酰基-蝶酸的偶合反应中直 接使用。将Y-U-羟乙基)叶酰胺(26jumol )溶解在二氯甲烷(10 ml) 中并冷却至0。C。 加入Et3N (10|il， 1. 5当量)和TsCl (7mg， 1. 4当 量)并且在O"C搅拌该反应混合物2小时。然后，使该混合物温热至室 温并搅拌过夜。
将反应混合物倾入水(15ml)中，分离层。水相经二氯甲坑萃取并 且合并的有机相在MgS04上干燥。在真空下除去溶剂。产物通过使用 硅胶的柱色镨和戊烷和乙酸乙酯的洗脱系统纯化以产生黄色油状物。
然后，冲艮据文献的操作(Coenen, H. H. PET Chemistry - The Driving Force in Molecular Imaging, Schubiger， P.A.; Lehmann, L; Friebe， M， Eds.; Springer: Berlin, 2007, pp. 15-50)，所 述化合物作为前体用于直接脂肪族亲核"F-标记。
权利要求
1.通式I的18F-标记的化合物的合成方法，其中P是蝶酸，并且S1是间隔基，包括步骤(a)提供式II的前体，其中Z是离去基团，并且P和S1是如上述所定义的，和(b)使所述前体进行18F的直接放射性标记以获得式I化合物。
2. 根据权利要求l的方法，其中S是直链或支链C1-C12烷基， 其是未取代的或被至少一个CN, Hal或N02取代，并且其中一个或多个 非相邻的CH2基团可独立地被以下代替-O-, -CO-， -CO-O-， -0-CO-， -NR'- , -N= ， -NR'-CO- ， -CO-NR'- ， -NR'-CO-O- ， -O-CO-NR'- ， -NR'-C0-NR'-，-CH=CH-， -C = C-, -S-, -S03R'-， -PR'-,或具有0、 l或 2个杂原子的5-或6-元芳香环，该芳香环是未取代的或被以下取代CN， Hal, N02， C0R'或C00R'，其中R'表示H或CI-C6垸基，或者其组合。
3. 根据权利要求1的方法，其中18F在步骤(b)中是通过相转移 催化剂，例如碳酸四丁基铵或氨基聚醚类(例如Kryptofix 2. 2. 2)联用 碳酸钾或草酸钾进行活化的。
4. 根据权利要求l的方法，其中Z选自Hal, N02，重氮盐，磺酸酯类，其包括甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、五氟苯甲酸酯、三氟甲磺酸酯， 碘银盐，二烷基/芳基硅烷类和硅烷醇类。
5.根据权利要求1的方法，其中所获得的通式I化合物具有式III,<formula>formula see original document page 3</formula>III其中，Xt至Xs彼此独立地是C或N,R,， R2彼此独立地是H， Hal， -OR'， -NHR'， C1-C12烷基，C1-C12 烷氧基，C1-C12烷酰基，C2-C12烯基，C2-C12炔基，(C1-C12烷氧基) 羰基，或(C1-C12烷基氨基)羰基，其中R'是H或CI-C6烷基，R3， R4彼此独立地是H，甲酰基，亚氨基甲基，亚硝基，Cl-C12烷基， Cl-C12烷氧基，C1-C12烷酰基，闺素取代的C1-C12烷酰基，115是H， CN， Hal, N02， C1-C12烷基，C1-C12烷氧基，C1-C12烷 酰基，C2-C12烯基，C2-C12炔基，(C1-C12烷氧基)羰基，(C1-C12烷 基氨基)羰基，S,是直链或支链CI-C12烷基，其是未取代的或被至少一个CN， Hal或冊2取代，并且其中一个或多个非相邻的CH2基团可独立地被以下代替-0-， -CO-， -CO-O-， -0-C0-， -NR'-， -N=， -NR'-CO-， -CO-NR'-， -NR'-C0-0-， -O-CO-NR'-， -NR'-C0-NR'-，-CH=CH-, -C = C_， -S-， -S03R'-， -PR'-，或具有0、 1或2个杂原子的5-或6-元芳香环，该芳香环是未取 代的或被以下取代CN， Hal, N02， C0R'或C00R',其中R'表示H或Cl-C6 烷基，或者其组合，p是0， 1或2，且q具有1至7的值。
6. 通式ni的18f-标记的化合物的根据权利要求i的合成方法，<formula>formula see original document page 4</formula>其中Xi至X;彼此独立地是C或N，R!， R2彼此独立地是H， Hal， -OR'， -NHR'， CI-C12烷基，C1-C12 烷氧基，C1-C12烷酰基，C2-C12晞基，C2-C12炔基，(C1-C12烷氧基) 羰基，或(C1-C12烷基氨基)羰基，其中R'是H或C1-C6烷基，R3， R4彼此独立地是H，曱酰基，亚氨基甲基，亚硝基，Cl-C12烷基， C1-C12烷氧基，C1-C12烷酰基，卣素取代的C1-C12烷酰基，Rs是H， CN， Hal, NO" C1-C12烷基，CI-C12烷氧基，C1-C12烷 酰基，C2-C12烯基，C2-C12炔基，(C1-C12烷氧基)羰基，(CI-C12烷 基氨基)羰基，S,是直链或支链C1-C12烷基，其是未取代的或被至少一个CN, Hal 或N0z取代，并且其中一个或多个非相邻的CH2基团可独立地被以下代 替-0-， -CO-， -CO-O-， -O-CO-， -NR'-， -N=， -NR'-C0-, -CO-NR'-, -NR'-C0-0-， -O-CO-NR'-， -NR'-CO-NR'-， 一CH-CH-， —CsC-， —S-， -S03R'-， -PR'-，或具有0、 1或2个杂原子的5-或6-元芳香环，该芳香环是未取 代的或被以下取代CN， Hal, N02， C0R'或C00R'，其中R'表示H或C1-C6烷基，或者其组合，p是0, 1或2，且 q具有1至7的值， 包括步骤(a)提供式IV的前体，qIV其中Z是离去基团，并且Xi至X5， l至R5， Sm p和Q是如上述所 定义的，和(b)使所述前体进行18F的直接放射性标记。
7. 根据权利要求7的方法，其中是直链或支链C1-C8烷基， 其是未取代的或被至少一个CN， Hal或冊2取代，或具有0、 1或2个 杂原子的5-或6-元芳香环，该芳香环是未取代的或被以下取代CN,Hal， N02， COR'或COOR'，其中R'表示H或Cl-C6烷基，或者其组合。
8. 根据权利要求7的方法，其中18F在步骤(b)中是通过相转移催 化剂，例如碳酸四丁基铵或氨基聚醚类(例如Kryptof ix 2. 2. 2)联用碳 酸钾或草酸钾活化的。
9. 根据权利要求6的方法，其中Z选自Hal, N02,重氮盐，磺酸 酯类，其包括甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、五氟苯甲酸酯、三氟甲磺酸酯， 碘铕盐，二烷基/芳基硅烷类和硅烷醇类。
10，根据前述权利要求中任一项的方法，其中所获得的化合物具有式V<formula>formula see original document page 6</formula>其中X6， X7彼此独立地是N或0，R6， R7彼此独立地是H,直链或支链d-Cu烷基，其是未取代的或 被至少一个CN、 Hal或N02取代，或基团-S「"F，其中S2是直链或支 链Cl-C12烷基，其是未取代的或被至少一个CN， Hal或恥2取代，并 且其中一个或多个非相邻的CH2基团可独立地被以下代替-O-， -CO-, -CO-0-， -O-CO-， -NR'-， -N=, -NR'-CO-， -CO-NR'-， -NR'-CO-O-, -O-CO-NR'-， -NR'-CO-NR'-，-CH-CH-， -CsC-， -S-, -S03R'-， -PR'-，或 具有0、 1或2个杂原子的5-或6-元芳香环，该芳香环是未取代的或被 以下取代CN， Hal， N02， COR'或COOR'，其中R'表示H或Cl-C6烷基， 或者其组合，条件是l和R7中的至少一个是基团-S广"F，并且 X,至Xs， R,至Rs， p和q，是如在权利要求7中所定义的。
11. 根据权利要求10的方法，其中S2是直链或支链Cl-C8烷基， 其是未取代的或被至少一个CN， Hal或N02取代，或具有0、 1或2个 杂原子的5-或6-元芳香环，该芳香环是未取代的或被以下取代CN，Hal， N02， C0R'或C00R',其中R'表示H或Cl-C6烷基，或者其组合。
12. 根据前述权利要求中任一项的方法，其中所获得的化合物具有 式VI或VIa，<formula>formula see original document page 7</formula>其中X,至Xs彼此独立地是C或N， X6， X7彼此独立地是C, 0或N，R,， R2彼此独立地是H， Hal, -OR'， -NHR'， CI-C12烷基，C1-C12 烷氧基，CI-C12烷酰基，C2-C12烯基，C2-C12炔基，(C1-C12烷氧基) 羰基，或(C1-C12烷基氨基)羰基，其中R'是H或Cl-C6烷基，R3, R4彼此独立地是H，甲酰基，亚氨基甲基，亚硝基，Cl-C12烷基， Cl-C12烷氧基，C1-C12烷酰基，卣素取代的C1-C12烷酰基，Rs是H， CN， Hal， NO" C1-C12烷基，C1-C12烷氧基，C1-C12烷 酰基，C2-C12烯基，C2-C12炔基，(C1-C12烷氧基)羰基，和(C1-C12烷 基氨基)羰基，R6， R7彼此独立地是H或直链或支链C-Cu烷基，其是未取代的或 -故至少一个CN, Hal或N(h取代，S2是直链或支链C1-C12烷基，其是未取代的或被至少一个CN， Hal 或N02取代，并且其中一个或多个非相邻的CH2基团可独立地被以下代 替-0-， -CO-， -CO-0-， -0-CO-， -NR'-， +， -NR'-CO-， -CO-NR'-， -NR'-CO-O-， -O-CO-NR'-， 一NR'-CO-NR'-， 一CH-CH-， -CsC-， 一S-， -S03R'-，-PR'-，或具有Q、 1或2个杂原子的5-或6-元芳香环，该芳香环是未取 代的或被以下取代CN， Hal， N02， C0R'或C00R'，其中R'表示H或C1-C6 烷基，或者其组合，p是0， 1或2，且q具有1至7的值。
13.通式VI或Via的"F-标记的化合物的根据权利要求1的合成方法，<formula>formula see original document page 8</formula>其中Xi至Xs彼此独立地是C或N， X6， X7彼此独立地是C, 0或N，R,， R2彼此独立地是H, Hal， -OR'， -NHR'， CI-C12烷基，CI-C12 烷氧基，C1-C12烷酰基，C2-C12烯基，C2-C12炔基，(C1-C12烷氧基) 羰基，或(C1-C12烷基氨基)羰基，其中R'是H或C1-C6烷基，R3， R4彼此独立地是H，甲酰基，亚氨基甲基，亚硝基，C1-C12烷 基，C1-C12烷氧基，C1-C12烷酰基，卣素取代的C1-C12烷酰基，Rs是H, CN, Hal, N02， CI-C12烷基，C1-C12烷氧基，C1-C12烷 酰基，C2-C12烯基，C2-C12炔基，(C1-C12烷氧基)羰基，和(C1-C12烷基氨基)羰基，R6, R7彼此独立地是H或直链或支链d-Cu烷基，其是未取代的或 被至少一个CN， Hal或N02取代，S2是直链或支链C1-C12烷基，其是未取代的或被至少一个CN， Hal 或N02取代，并且其中一个或多个非相邻的CH2基团可独立地被以下代 替-0-， -CO-， -C0-0-， -O-CO-, -NR'-， -N-， -NR'-CO-， -CO-NR'-， -NR'-CO-O-， -O-CO-NR'-， -NR'-CO-NR'-，-CH-CH-， -C = C-， -S-, -S03R'-， -PR'-,或具有0、 1或2个杂原子的5-或6-元芳香环，该芳香环是未取 代的或被以下取代CN， Hal， N02， COR'或COOR'，其中R'表示H或C1-C6 烷基，或者其组合，p是0, 1或2，且q具有1至7的值，包括下述步骤(a)提供式VII或Vila的前体，Vila其中Z是离去基团，并且X!至X7， Ri至R" S2， p和q是如上述所定义的，和(b)使所述前体进行"F的直接放射性标记。
14. 根据权利要求12或13的方法，其中S2是直链或支链C1-C8 烷基，其是未取代的或被至少一个CN， Hal或冊2取代，或具有0、 1 或2个杂原子的5-或6-元芳香环，该芳香环是未取代的或被以下取代 CN， Hal, N02， C0R'或C00R'，其中R'表示H或Cl-C6烷基，或者其组 合。
15. 根据前述权利要求中任一项的方法，其中所获得的化合物具有 式VIII或VIIIa，VIIIa<formula>formula see original document page 10</formula>其中，X6， X7彼此独立地是C， N或0，Ym 丫2彼此独立地选自H，甲酰基，直链或支链d-Cu烷基，其是未 取代的或被至少一个CN， Hal或冊2取代，Y3选自H,曱酰基，亚硝基，直链或支链d-Cu烷基，其是未取代的 或被至少一个CN， Hal或N02取代，R6, R7彼此独立地是H或直链或支链C,-C,2烷基，其是未取代的或 被至少一个CN， Hal或N02取代，并且S2是直链或支链C1-C12烷基，其是未取代的或被至少一个CN, Hal 或即2取代，并且其中一个或多个非相邻的CH2基团可独立地被以下代 替-O-， -C0-， -C0-0-， -0-C0-， -NR'-， -N=， -NR'-CO-， -CO-NR'-， -NR'-C0-0-, -O-CO-NR'-， -NR'-CO-NR'-，-CH=CH-, -C^C-, -S-， -S03R'-， -PR'-，或具有0、 1或2个杂原子的5-或6-元芳香环，该芳香环是未取 代的或被以下取代CN， Hal， N02， C0R'或C00R'，其中R'表示H或C1-C6 烷基，或者其组合。
16. 根据权利要求15的方法，其中S2是直链或支链C1-C8烷基， 其是未取代的或被至少一个CN， Hal或冊2取代，或五或六元芳香环， 该芳香环是未取代的或^ 皮以下取代CN， Hal， N02, C0R'或C00R',其中 R'表示H或C1-C6烷基，或者其组合。
17. 式I化合物，由权利要求1-16的方法获得。
18. 根据权利要求17的化合物，具有式III。
19. 根据权利要求16或17的化合物，条件是S!不表示经"F对位 取代的苯甲基。
20. 根据权利要求17-19中任一项的化合物用于在体外或体内表 达叶酸受体的细胞或细胞群的诊断成像的用途。
21. 根据权利要求17-19中任一项的化合物用于方便而有效地施 用于需要诊断成像的受试者的用途。
22. 表达叶酸受体的细胞或细胞群的诊断成像的方法，该方法包括 以诊断成像量施用至少一种权利要求17-19中任一项的化合物的步骤， 以及获得所述细胞或细胞群的诊断影像的步骤。
23. 根据权利要求22的方法，其中所述诊断成像是对体外或体内 表达叶酸受体的细胞或细胞群进行的。
24. 在组织样品中表达叶酸受体的细胞的体外检测方法，其包括使 所述组织样品与有效量的权利要求17-19中任一项的化合物接触并且达 到足够的时间和条件以使结合发生，并通过P E T成像检测此结合。
25. 对受试者进行诊断成像或监测的方法，包括以下步骤(i) 以诊断成像量施用至少一种权利要求17-19中任一项的化合物，和(ii) 使用PET通过检测来自所述至少 一种化合物的信号进行诊断成像。
26. 监测在受试者中的癌症或者炎性疾病和自身免疫疾病的治疗 的方法，包括以下步骤(i)给有此需要的受试者施用诊断有效量的至 少一种权利要求17-19中任一项的化合物以及治疗活性剂，和(ii)使 用PET通过检测来自所述至少一种化合物的信号进行诊断成像以追踪癌 症或者炎性疾病和自身免疫疾病的治疗过程。
27. 权利要求25或26的方法，其与癌症或者炎性疾病和自身免疫疾 病的任何其它的诊断或治疗方法联合使用。
全文摘要
本发明涉及新的¹⁸F-叶酸放射性药物的合成方法，其中氟-18是通过经¹⁸[F]氟化物的直接放射性标记而连接到蝶酸(或叶酸)或其衍生物，和通过该合成方法获得的¹⁸F-叶酸放射性药物以及它们在癌症治疗以及炎性疾病和自身免疫疾病的治疗的诊断和监测中的用途。
文档编号C07B59/00GK101646639SQ200880002708
公开日2010年2月10日 申请日期2008年4月11日 优先权日2007年4月11日
发明者P·拉姆, R·莫泽, S·M·艾梅塔美, T·L·罗斯, V·格罗恩 申请人:默克阿泼洛发股份公司