用于治疗微生物介导的疾病的截短侧耳素衍生物的制作方法

专利名称：用于治疗微生物介导的疾病的截短侧耳素衍生物的制作方法
说 明 书
用于治疗微生物介导的疾病的截短侧耳素衍生物
本发明涉及有机化合物，即截短侧耳素。
截短侧耳素，式A化合物
为天然存在的抗生素，例如由4旦子菌纲截短侧耳(basidomycetes Pleurotus mutilus)牙口巾白氏,J耳(P. passeckerianus)产生，例如参见The Merck Index,第13版，第7617条。许多具有截短侧耳素主环结构且在羟 基被取代的其它截短侧耳素已经被开发为例如抗微生物剂。
根据WO 02/04414 Al的截短侧耳素衍生物，例如14-0-[(氨基环己 烷-2-基(和-3-基)-硫基)-乙酰基]-木替林；根据WO 07/014409 Al例如 14-0-[((单-或二烷基氨基)-环烷基硫基)-乙酰基]-木替林和根据W〇 07/000004 Al例如[((酰基-羟基-氨基)-环烷基硫基)-乙酰基]-木替林，是 已知的。
我们现在发现截短侧耳素具有令人感兴趣的活性以及意料不到的 显著的代谢稳定性。
根据本发明的截短侧耳素衍生物为式(I)的化合物
#巾
7n为0 ~ 4;
m为0或1,条件是硫原子和R3为连位(如果m二0则113位于2'位， 和如果m = 1则么R3位于l'位)； R为乙基或乙烯基；
Ri为氪或(CL6)烷基， R2为氢或 -(C3-6)环烷基，或
-未取代的(d—6)烷基，或
-被一个或多个以下取代基取代的(d-6)烷基
-羟基；优选一个或两个，
-曱氧基，
-卤素，
-((:3—6)环烷基，或
R4和R2与它们连接的氮原子一起形成5 ~ 7元杂环，所述杂环包含 至少一个氮原子或一个氮原子和一个另外例如选自N或0的杂原子， 或
Rj为羟基且R2为甲酰基； Rg为OH、 OR4、囟素原子、或
-条件是R3连接于2'则R3表示-0-(CH2)p-0，其中p为2或3;
R4为未取代的(d—6)烷基或(C3-6)环烷基。
本发明优选的化合物为式(II)的化合物
其中n、 R、 R^、 R2和Rg如上定义。
本发明更优选的化合物为式(ni)的化合物
8-式(V)化合物
<formula>formula see original document page 9</formula>其中n、 R和R2如上定义。 特别优选的化合物选自
14-0- {[(1 R,2R,4R)-4-氨基-2-羟基-环己基硫基(sulfanyl)]-乙酰基}-木 替林(mutilin)
14-0-([(lS,2S,4S)-4-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林
14-0-([(lR,2R,5S)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林
14-0-([(lS,2S,5R)-5-氨基-2-鞋基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林
14-0-([(lR,2R,4S)-4-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林及其 (1S,2S,4R)非对映体
14-0-{[(1 R,2R,5R)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林
14-0-([(lS,2S,5S)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林
14-0-U(lR，2R,3R)-3-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林及 其(1S,2S,3S)非对映体
14-0-([(lR,2R,4R)-4-二乙基氨基-2-鞋基-环己基硫基]-乙酰基)-木 替林及其(1S，2S，4S)非对映体
14-0-{[(lR,2R,4R)-4-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替 林及其(1S,2S,4S)非对映体
14-0-{[(lR,2R,5S)-5-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林 及其(1S,2S，5R)非对映体
14-0-{[(1 R,2R,5S)-5-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替 林及其(1S,2S,5R)非对映体
14-0-([(lR,2R,4S)-4-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替 林及其(1S,2S,4R)非对映体
14-0-([(lR,2R,5R)-5-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木 替林及其(1S,2S,5S)非对映体
14-0-{[(lR,2R,3R)-3-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替 林及其(1S,2S,3S)非对映体
14-0-([(lR,2R,3R)-3-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木 替林及其(1S,2S,3S)非对映体
14-0-{[(lR,2R,4S)-4-(甲酰基-羟基-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基L木替林及其(1S,2S,4R)非对映体
14-0-{[(lR,2R,5S)-5-(曱酰基-羟基-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基》-木替林及其(lS,2S,5R)非对映体
14-CH[(lR,2R,3R/S)-3-(曱酰基-羟基-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林及其(lS,2S,3R/S)非对映体
14-0-([(lR,2R,5S)-2-羟基-5-曱氨基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林及其(1S,2S,5R)非对映体
14-0-([(lR,2R,5S)-5-烯丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林及其(1S,2S,5R)非对映体
14-0-([(lR,2R,5S)-2-羟基-5-(2-曱氧基-乙基氨基)-环己基硫基]-乙酰基)-木替林及其(lS,2S,5R)非对映体
14-0-([(lR,2R,4R"-2-鞋基-4-(2-羟基-乙基氨基)-环己基硫基]-乙酰基)-木替林及其(lS,2S,4S"非对映体
14-0-U(lR,2R,4R"-4-环己基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林及其(1S,2S,4S"非对映体
14-CH[(lR,2R，4R"-4-环丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基卜木替林及其(1S,2S,4S"非对映体
14-0-U(lR,2R,5S"-4-环丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林及其(1S,2S,5R"非对映体
14-0-([(lR,2R,4S"-4-环丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林及其(1S,2S,4R"非对映体
14-CH[(lR,2R,5R"-2-羟基-5-吗啉-4-基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林及其(1S，2S,5S"非对映体
14-0-U(lR,2R,5S"-2-羟基-5-吗啉-4-基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林及其(1S,2S,5R"非对映体
14-GK[(lR,2R,5S)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基ri9,20-二氬-木替林及其(1S,2S,5R)非对映体
14-0-([(lR，2R,5S)-5-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-19,20-二氢-木替林及其(lS,2S,5R)非对映体
14-O-([(lR,2R,5R)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-19,20-二氬-木替林及其(1S,2S,5S)非对映体
14-0-([(lR,2R)-4-氨基甲基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林及其(1S,2S)非对映体
14-0-{[5-氨基-2-氯-环己基硫基]-乙酰基}-木替林
ii14-〇-{[4-氨基-2-氯-环己基硫基]-乙酰基}-木替林
14-0-[(4-氨基-1-羟基-环己基甲基硫基)-乙酰基]-木替林
14-0-([(lR,2R)-2-羟基-5-(3-曱氨基-丙基)-环己基硫基]-乙酰基)-木替林及其(l S,2S)非对映体
14-CH[(lR,2R)-2-鞋基-4-(3-曱氨基-丙基)-环己基硫基]-乙酰基卜木替林及其(1S,2S)非对映体
14-0-([(lR,2R)-5-(3-氨基-丙基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基卜木替林及其(1S,2S)非对映体
14-0-([(lR,2R)-4-(3-氨基-丙基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林及其(1S,2S)非对映体
14-0-([(6R,8R)-8-氨基-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-6-基硫基]-乙酰基卜木替林及其(6S,8S)非对映体
14-0-{[4-氨基-2-甲氧基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林
和
14-0-{[5-氨基-2-曱氧基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林。
本发明所提供的化合物在本文中也指定为"(根据)本发明的化合
物"。本发明的化合物包括任何形式例如游离形式、盐形式、溶剂化物
形式、以及盐和溶剂化物形式的化合物。
根据另 一方面，本发明提供了盐和/或溶剂化物形式的本发明化合物。
所述盐优选包括药学上可接受的盐，尽管例如为了制备/分离/纯化的目的也包括药学上不能接受的盐。
本发明化合物的盐包括碱盐或酸加成盐。药学上可接受的碱盐包括铵盐诸如三甲基铵盐、碱金属盐诸如钠和钾的盐、碱土金属盐诸如4丐和镁的盐、以及有机碱的盐，包括伯、仲、4又胺诸如异丙胺、二乙胺、乙醇胺、三曱胺、二环己胺和N-甲基-D-葡萄糖胺的盐，优选钠盐。酸加成盐包括本发明化合物与酸形成的盐，所述酸例如是氩富马酸(hydrogenfumaric acid)、富马酸、酒石酸、乙烷-l,2-二磺酸、马来酸、奈1,5-磺酸、乙酸、马来酸、琥珀酸、水杨酸、壬二酸、2-[(2,6-二氯苯基)氨基]苯乙酸、盐酸、氖氯酸(deuterochloric acid);优选盐酸。
可将游离形式的本发明化合物转化成盐形式的相应化合物，反之亦然。可将游离形式或盐形式和/或溶剂化物形式的本发明化合物转化成非
12本发明化合物可以以异构体及其混合物例如光学异构体、非对映异构体、顺/反构象异构体的形式存在。本发明的化合物可例如含有不对称
碳原子，并因此可以以对映体(enatiomer)或非对映异构体及其混合物例如外消旋体或非对映体混合物的形式存在。任何不对称的碳原子可以以(R)-、 (S)-或(R,S)-构型、优选以(R)-或(S)-构型存在。
例如在式I化合物中，环烷基环中连接(CH2)mS基团的碳原子、环烷基环中连接R3基团的碳原子、环烷基环中连接(CH2)nN(R4R2)基团的
碳原子，所有这些均为不对称的碳原子。因此与这样的不对称碳原子连接的取代基可以存在(R)和(S)构型，包括其混合物。例如，如果在式I化合物中R2为取代的烷基且取代基连接在此烷基侧链的碳原子上，连接此取代基的该碳原子为不对称碳原子，这样的取代基可以存在(R)和(S:构型，包括其混合物。
与木替林-三环(tricyclus)不对称碳原子连接的取代基的构型优选与天然截短侧耳素的构型相同。
异构体混合物可以根据需要例如按照例如类似于常规的方法进行分离，以得到纯异构体。本发明包括任何异构体形式及其任何异构体混合物的本发明化合物。本发明也包括本发明化合物的互变异构体，只要互变异构体可以存在。
本发明化合物表现出药理活性，因此可用作药物。例如，本发明化合物表现出抗微生物活性，例如下述的抗菌活性抗革兰氏阳性菌，例如凝固酶阳性葡萄球菌(Staphylococci)如金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus),凝固酶阴性葡萄球菌如表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、 溶血性葡萄球菌(Staphylococcushaemolyticus), 和链3求菌(Streptococci)如酉良脓链J求菌(Streptococcuspyogenes)、月申炎链玉求菌(Streptococcus pneumoniae),肠J求菌(Enterococci)如屎肠球菌(Enterococcus faecmm),以及单核细胞增多性李司'戈菌(Listeria monocytogenes); 和抗革兰氏阴性菌诸如莫4立菌属(Moraxella)如粘膜炎莫拉菌(Moraxella catarrhalis)、和嗜血菌属如流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)、 牙口军团菌属^口 口耆月申军团菌(Legionellapneumophila)、奈'瑟J求菌牙斗长口淋病奈'瑟氏菌(Neisseria gonorrhoeae);以及抗支原体(Mycoplasms),衣原体(Chlamydia),和专性厌氧菌如脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)、 难辨 一炎菌(Clostridium difficile)、才炎菌属 (Fusobacterium spp.)、禾口丙f复才干菌属(Propionibacterium spp.)。
抗需氧菌的体外活性通过琼脂稀释试验或微量稀释试验按照临床 实验室标准委员会(Clinical和Laboratory Standards Institute)(CLSI,前身 NCCLS)文件号M7-A7 Vol.26，No. 2: "Methods for dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria that Grow Aerobically-Approved Standard; 第七版(2006)"进行测定；抗厌氧菌的试验按照临床实验室标准委员会 (CLSI,前身NCCLS)文件号Mll-A6,Vol. 24,No. 2: "Methods for Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobic Bacteria-Approved Standard;第六版(2004)"进行；和体内活性通过败血病小鼠模型抗金黄色 葡萄球菌进行测试。
因此本发明化合物适合治疗和预防微生物例如细菌介导的疾病。可 以治疗的疾病也包括例如螺杆菌属(Helicobacter)如幽门螺杆菌 (Helicobacter pylori)介导的疾病和结核分4支杆菌(Mycobacterium tuberculosis)介导的疾病。可以治疗的疾病也包括一般炎性疾病，其中所 述炎症例如包括粉刺是由微生物介导的。
另一方面，本发明提供了用作药物、优选用作抗微生物诸如抗生素 和例如抗厌氧药物的本发明化合物。
另一方面，本发明提供了用于粉刺治疗的本发明化合物。
又 一 方面，本发明提供了用于制备治疗疾病以及治疗粉剌的药物的 本发明化合物，所述疾病是由微生物诸如细菌介导的，例如
-由细菌介导的疾病，所述细菌例如选自葡萄球菌、链球菌、肠球菌；
-由细菌介导的疾病，所述细菌例如选自莫拉菌属、嗜血菌属、军团 菌属、奈瑟^求菌牙牛；
-由螺杆菌属介导的疾病；
-由结核分枝杆菌介导的疾病；
-例如由支原体，衣原体和专性厌氧菌介导的疾病。
给需要这种治疗的受试者施用有效量的例如以药物组合物形式的本发 明化合物。
再一方面，本发明提供了用于治疗粉剌的的方法，其包括给需要这 种治疗的受试者施用有效量的例如以药物组合物形式的本发明化合物。治疗包括治疗和预防。
对于抗微生物和粉刺治疗，合适的剂量当然将依赖例如所用的本发 明化合物的化学性质和药动学数据、宿主个体、给药方式、以及所治疗 的病症的性质和严重程度而变化。然而， 一般情况下，为了在多数哺乳
动物例如人中获得满意的结果，推荐的日剂量为约0.5 mg-3 g的本发明 化合物，适宜地例如以最高达每天四次分份剂量地施用。
本发明的化合物可例如以包衣或未包衣的片剂、胶嚢、可注射溶液 或混悬液的形式，例如以安瓿、小药瓶的形式，以乳剂、凝胶、糊剂、 吸入粉末、泡沫剂、酊剂、唇膏剂、滴剂、喷雾剂的形式，或以栓剂的 形式，例如以类似于大环内酯例如红霉素类如克拉霉素和阿奇霉素的形 式，通过任何常^见的途径给药，例如肠道给药，例如包括鼻、颊、直肠、 口服给药；胃肠外给药，例如包括静脉内、肌肉内、皮下给药；或局部 给药，例如包括经皮表给药、鼻内给药、气管内给药。
本发明的化合物可以以下列形式给药以药学上可接受盐的形式， 例如酸加成盐或碱加成盐如金属盐的形式给药；或以游离形式给药；任 选地以溶剂化物的形式给药。盐形式的本发明化合物表现出与游离形 式、任选的溶剂化物形式的本发明化合物的相同程度的活性。
根据本发明，本发明的化合物可单独或者与一种或多种其它药物活 性剂相组合用于药物治疗。所述的其它药物活性剂包括例如其它抗生素 和抗炎剂，和如果本发明化合物用于治疗粉刺，其它药用剂包括对粉刺 有效的另外的药物。
所述的组合包括固定组合，其中两种或多种药物活性剂在同 一制剂 中；药盒，其中两种或多种药物活性成分在分开的制剂中并在同一包装 中销售，例如，带有共同给药的说明；以及自由组合，其中，药物活性 剂分开包装，但给出了用于同时或序贯给药的说明。
另一方面，本发明提供了药物组合物，其包含游离形式或药学上可 接受的盐形式和/或溶剂化物形式的本发明化合物；以及至少一种药用赋 形剂、例如载体或稀释剂，例如包括填充剂、粘合剂、崩解剂、流动调 节剂、润滑剂、糖和甜味剂、芳香剂、防腐剂、稳定剂、润湿剂和/或乳 化剂、增溶剂、用于调节渗透压的盐和/或緩冲剂。
另一方面，本发明提供了根据本发明的药物组合物，其还包含另一 种药物活性剂。
15所述的药物组合物可以按照例如类似于常规的方法例如通过混合、
制粒、包衣、溶解或冷冻干燥过程来生产。单位剂型可含有例如约0.5 mg
至约2000 mg,诸如10 mg至约500 mg的活性成分。
本发明的化合物还适宜用作兽药，例如兽用活性化合物，例如用于
预防和治疗动物例如家禽、猪和牛中的孩i生物例如细菌性疾病；和例如
用于人工授精以及卵浸泡技术的稀释液体。
另一方面，本发明提供了用作兽药的本发明化合物。
又 一 方面，本发明提供了用于制备用作兽药的兽用组合物的本发明
化合物。
另一方面，本发明提供了预防和治疗微生物例如细菌性疾病的兽医 方法，其包括给需要这种治疗的受试者施用有效量的例如以兽药组合物 形式的本发明化合物。
下述实施例1 ~37其后显示出了抗金黄色葡萄球菌ATCC49951和 肺炎链球菌ATCC49619的MICs〈2 ju g/ml。
本发明化合物的代谢稳定性应用冷藏保存的原代培养(pnmary)的人 肝细胞进行测定。在5和25 iu g/mL测试化合物存在和缺失下，将1 x 106 细胞/mL在37。C、 5%(302中孵育4小时。为了评价测定条件下的体外 降解，也在肝细胞缺失下将各个测试化合物的样品孵育。孵育通过使反 应混合物冷冻而停止。在超滤和用乙腈洗涤过滤器后，应用LC/MS(离 子阱)，分析样品溶液中母体化合物的消失或代谢物的出现。代谢稳定性 值为相应于孵育后检测到的母体化合物％ 。
本发明化合物在与环己基环连接的硫取代基的连位上引入R3基团 优选羟基显示出料想不到的微生物学上活性成分代谢稳定性的改善。与 没有R3基团优选羟基连接在截短侧耳素侧链的环己基部分的衍生物相
的。 ^ 、 、 、、 口 '
例如5 jLig/mL浓度的化合物在用人肝细胞孵育4小时后，本发明 实施例2的14-CH[(lR,2R,5S)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基r木替 林盐酸盐及其(1S,2S,5R)非对映体盐酸盐的混合物，发现有66%母体化 合物，而没有羟基的类似衍生物14-0-{[(lR,3R)-3-氨基-环己基硫基]-乙 酰基)-木替林盐酸盐及其(lS,3S)非对映体盐酸盐的混合物，只可以检测 到24%母体化合物。俗名木替林是指IUPAC系统名(lS,2R,3S,4S,6R,7R,8R,14R)-3,6-二 轻基-2,4,7,14-四甲基-4-乙歸基-三环[5.4.3.0^]十四烷-9-酮。在这些实施 例中，截短侧耳素书f生物的编号类似于H. Berner(Bemer,H.; Schulz,G.; Schneider H. TWra/ze^ow 1980,36,1807-181 l.)所述的木替林的编号系统
<formula>formula see original document page 17</formula>
截短侧耳素硫醇和截短侧耳素甲苯磺酸酯为下式化合物:
广 ,
实施例1. 14-0-{[(1 R，2R,4R)-4-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林盐酸盐+(18,23,43)非对映体盐酸盐
步骤Al. 14-0-([(lR,2R，4R)-4-叔丁氧基羰基氨基-2-幾基-环己基硫 基]-乙酰基}-木替林+(18,23,43)非对映体和
14-0-U(lR,2R,5S)-5-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林+(18,23,511)非对映体和
14-0-([(lR,2R,4S)-4-叔丁氧基羰基氨基-2-鞋基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林十(1S,2S,4R)非对映体
向3,4-环氧环己基-氨基曱酸叔丁基酯(G 6 mez-S d nchez,E.; Marco誦Contelles J. 7""ra/ze^cw 2005,(5/,1207隱1219.)(4.27g，20mmol)和截 短侧耳素石危醇(Nagarajan,R. Eli Lilly和Company 1978,US4,130,709)(7.10g,18 mmol)于200 ml四氢吹喃的溶液中，加入氧化铝(40 g，Brockmann活 性I,中性)，并将形成的混合物在室温搅拌40小时。将混悬液过滤并在 减压下浓缩。剩余物经色谱法(二氧化硅，环己烷/乙酸乙酯=1/1),得到 14-0-([(lR,2R,4R)-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基卜 木替林 + (1S，2S,4S)非对映体(a)(Rf = 0.38,1.34g,12Q/。)以及 14-0-U(lR,2R,5S)-5-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基卜木 替林+(18,23,511)非对映体和14-0-U(lR,2R，4S)-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,4R)非对映体的混合物 (b)(Rf= 0.26,2.81 g,25%),为无色非结晶性泡沫。
(a) : & NMR (400MHz，DMSO-d6, 5 ,ppm,特別地)6,74 (d,lH,NH,J = 7Hz),6.13 (dd,lH,19-H,J=llHz和18Hz),5.54 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m，2H,20-H),4.90 (d,lH,2'-OH,J = 5Hz),4.48 (d,lH,l l-OH,J = 6Hz),3.55-3.20 (m,6H,l'隱H,2'画H，4'-H,1 l-H,22画H),2.40 (bs,lH,4隱H),1.36 (s,3H,15-CH3),1.35 (s,9H,叔丁基),1.06 (s,3H,18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3,J =7Hz),0.62 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 630 (画a+),1237 (2画a+)。
(b) : !H NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)6.70 (d,lH，NH,J = 7Hz)，6.12 (dd，lH,19-H,J = HHz和18Hz),5.34 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20-H),4.82,4.78 (d,lH,2'隱OH,J = 4Hz)，4.48 (d,lH,l l-OH,J = 6Hz),3.55-3.20 (m,5H,2'隱H,4V5'画H,11-H,22-H),2.97 (m,lH,l'-H),2.40 (bs,lH,4隱H),1.35 (s,12H,15-CH3,叔丁基),1.05 (s,3H,18-CH3),0.82 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS画ESI (m/z): 630 (固a+),1237 (2顧a+)。
或步骤A2. 14-0-([(lR,2R,4R)-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基 硫基]-乙酰基卜木替林+ (1S，2S,4S)非对映体和
14-0-([(lR,2R,5S)-5-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林+(13,28,511)非对映体和
14-0-([(lR,2R,4S)-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替4木+(18,28,411)非对映体
向3，4-环氧环己基-氨基曱酸叔丁基酯(10 g,47 mmol)和截短侧耳素 硫醇(16.6 g,42 mmol)于200 ml甲醇和20 ml 二梦恶烷中的溶液中，加入2N
18200880007780.5
NaOH(21 ml,42mmo1)，并将形成的混合物在室温搅拌16小时。反应完 成后，用稀HCl调节pH为7，在减压下浓缩反应混合物。剩余物用水 和盐水稀释，用乙酸乙酯萃取3次。有机层经硫酸钠干燥和过滤。将滤 液在减压下浓缩，经色谱法(二氧化硅，环己烷/乙酸乙酯=1/1)后，得到 14-0-([(lR,2R,4R)-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基卜 木替林 + (1S,2S,4S)非对映体(Rf = 0.40,3.lg,12%产率)以及 14-0- {[(1 R,2R，5S)-5-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木 替林+ (1S,2S，5R)非对映体和14-0-([(lR,2R,4S)-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (lS,2S,4R)非对映体的混合物(Rf = 0.25,6.35 g,25%),为无色非结晶性泡沫。
或步骤A3. 14-0-U(lR,2R，4R)-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基 硫基]-乙酰基卜木替林+ (1S,2S,4S)非对映体和
14-0-([(lR,2R,5S)-5-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基〉-木替林+(18,23,511)非对映体
向截短侧耳素硫醇(9.25 g,23.5 mmol)于100 ml乙腈(经4A分子筛干 燥)的溶液中，加入1,5-二氮杂二环[4.3.0]壬-5-烯(DBN,2.9 n 1,23.5 mmol),在室温氩气气氛下搅拌1小时，然后向混合物中加入顺式-3,4-环氧环己基-氨基曱酸叔丁基酯(4.17 g,19.5 mmol),并在室温再搅拌16 小时。在减压下浓缩反应混 合物。向剩余物中加入水和盐水，用二氯曱 烷萃取3次。有机层经硫酸钠干燥和过滤。将滤液在减压下浓缩，经色 i普法(二氧化石圭，环己烷/乙酸乙酯=1/1)后，得到14-0-{[(lR,2R,4R)-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S，2S,4S)非 对映体(Rf = 0.38,5.07&43%)以及14-0-([(lR,2R,5S)-5-叔丁氧基羰基氨 基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基卜木替林+ (lS，2S,5R)非对映体(Rf = 0.25,2.95 g，16.5%),为无色非结晶性泡沫。
步骤B. 14-0-([(lR,2R，4R)-4-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木 替林+ (1S,2S,4S)非对映体
在4'C,向14-0-([(lR,2R,4R)-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基 硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,4S)非对映体(1.34 g,2.20 mmol)于75 ml 二氯甲烷的溶液中，加入三氟乙酸(4 ml),并在室温搅拌5小时。将反应混合物用二氯曱烷稀释，谨慎地倾入饱和的NaHC03溶液中。分离相 层，水层用二氯甲烷洗涤两次。将合并后的有机层经硫酸钠干燥和过滤。 经色谱法(二氧化硅，乙酸乙酯/曱醇/35%氨溶液=50/50A)后，得到 14-〇-{[(1 R,2R,4R)-4-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (lS,2S,4S)非对映体(745 mg,67。/o产率)，为无色非结晶性泡沫。
& NMR (400MHz,DMSO-d6, 5，ppm,特别地)6.14 (dd,lH,19画H,J = 11Hz 和 18Hz),5.54 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20-H),4.50 (d,lH,ll-OH,J = 6Hz),3.50-3.20 (m,5H，2'國H,4'-H,1 l-H,22画H),2.55 (m,lH,l'-H),2.40 (bs,lH,4陽H),1.35 (s，3H,15-CH3),1.06 (s，3H,18-CH3),0.82 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz)，0.62 (d，3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 508 (MH+),530 (MNa+),1015 (2MH+),1037 (2MNa+)。
步骤C. 14-0-([(lR,2R,4R)-4-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基卜木 替林盐酸盐十(1S，2S,4S)非对映体盐酸盐
将14-0-U(lR,2R,4R)-4-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林 + (1S,2S,4S)非对映体(325 mg,0.64 mmol)于20 ml 二嚙烷中的溶液用1N HCl(0.64m1,0.64 mmol)处理。在室温搅拌30分钟后，将溶液冻干得到 14-0-U(lR,2R,4R)-4-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林盐酸盐 + (1S,2S,4S)非对映体盐酸盐(定量的产率)，为无色无定形固体。
工H NMR (500MHz,DMSO-d6, 5,ppm,特别地)7.6 (bs,3H,NH3+),6.14 (dd,lH,19隱H,J = 11Hz 和 18Hz),5.55 (d，lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m，2H,20國H),4.52 (d,lH,l l扁OH,J = 6Hz),3.50-3.20
(m,4H，2'-H,ll-H,22-H),3.03 (m,lH,4'陽H),2.53 (m,lH,l'-H),2.40
(bs,lH,4-H),1.37 (s,3H,15-CH3),1.06 (s,3H,18-CH3),0.82 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz) 。 MS匿ESI (m/z): 508 (MH+),530 (顧a+),1015 (2MH+),1037 (2画a+),542 (MCr)。
实施例1A 14-0-([(lS,2S,4S)-4-氨基-2-鞋基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林和14-0-([(lR,2R,4R)-4-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木
替林
将实施例1步骤B的14-0-{[(lR,2R,4R)-4-氨基-2-羟基-环己基硫 基〗-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,4S)非对映体的混合物(12 g,23.6 mmol)在手性柱(250 x 20 mm CHIRALCEL OD-H,正庚烷/乙醇/二乙胺= 80/20/0.l)上进行拆分，得到14-0-([(lS 2S 4S"-4-氨基-2-羟基-环己基 硫基]-乙酰基)-木替林(a)(先洗脱的化合物，4.76g,37。/。产率，未校正的) 和14-CH[(lR 2R 4R"-4-氨基-2-鞋基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林 (b)(后洗脱的化合物，3.63 g,30。/。产率，未校正的)，为无色非结晶性泡 沫。
(a) : & NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)6.13 (dd,lH,19-H,J =11Hz和 18Hz),5.54 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20-H),4.50 (d,lH,l l画OH,J = 6Hz),3.50-3.20 (m,5H,2'陽H,4'-H,1 l-H,22-H),2.55 (m,lH,l'隱H),2.40 (bs,lH,4-H),1.35 (s,3H,15-CH3)，1.05 (s,3H,18-CH3),0.82 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS画ESI (m/z): 508 (MH+),530 (顧a+),1015 (2MH+),1037 (2画a+),506 (M邻，542 (MCr)。
(b) :丄HNMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)6.13 (dd,lH,19-H,J =11Hz和 18Hz)，5.54 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20-H),4.50 (d,lH,ll-OH,J = 6Hz),3.50-3.20 (m,5H,2'-H,4'-H,1 l-H,22-H),2.55 (m,lH,l'画H),2.40 (bs,lH,4-H),1.35 (s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.82 (d，3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62 (d,3H，16-CH3,J = 7Hz)。 MS陽ESI (m/z): 508 (MH+),530 (画a+),1015 (2固+),1037 (2顧a+),506 (M-H) ;542 (MCr)。
实施例2. 14-0-([(lR,2R，5S)-5-氨基-2-轻基-环己基硫基]-乙酰基〉-木替林盐酸盐+(18,23,5尺)非对映体盐酸盐
步骤A. 14-0-([(lR,2R,5S)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木 替林+ (1S，2S,5R)非对映体和
14-0-([(lR,2R，4S)-4-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,4R)非对映体
将实施例1步骤A的M-0-([(lR,2R,5S)-5-叔丁氧基羰基氨基-2-鞋 基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林 + (1S，2S,5R)非对映体和 14-CK[(lR,2R,4S)-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木 替林+ (1S,2S,4R)非对映体的混合物(1.12 g,1.84 mmol)按照实施例1步 骤B的方法处理。处理后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅，乙酸乙 酉旨/甲醇/35%氨溶液=50/50/1),得到14-0-{[(111,211,53)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体(a)(RfZ 0.33,524
21mg,56。/o产率)和14-0-{[(1尺,211，43)-4-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (lS,2S，4R)非对映体(b)(R^ 0.22,160 mg,17%),为无色非结晶 性泡沫。(a) : !H NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)6.13 (dd,lH,19隱H,J =11Hz和 18Hz),5.53 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20匿H),4.51 (d,lH,ll-OH,J = 6Hz),3.48 (m,lH,2'-H),3.42 (m,lH,ll-H),AB-系統(va = 3.37,vB = 3.23,22-H,J = 19Hz),2.98 (m,lH,l'-H),2.82 (m,lH,5'-H),2.40 (bs,lH,4-H),1.36 (s,3H,15-CH3),1.06 (s,3H,18-CH3),0.82 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。(b) : & NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm，特另'J地)6.14 (dd,lH,19-H,J=llHz 和 18Hz),5.54 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.06 (m,2H,20画H),4.51 (bs,lH,ll誦OH),3.79 (m,lH，2'-H),3.42 (m,lH,ll画H),AB-系统(vA = 3.33,vB = 3.23，22-H,J = 15Hz),3.04 (m,lH,4'-H),2.82 (m,lH,l'-H),2.40 (bs,lH,4-H)，1.37 (s,3H,15-CH3),1.06 (s,3H,18-CH3)，0.81 (d,3H,17-CH3，J = 7Hz),0.63 (d,3H，16-CH3,J = 7Hz)。步骤B. 14-0-([(lR,2R，5S)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木 替林盐酸盐+(18，23,511)非对映体盐酸盐将14-0-([(lR,2R,5S)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林 + (1S,2S,5R)非对映体(516 mg,1.02 mmol)按照实施例1步骤C的方法处 理，得到14-CH[(lR,2R,5S)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林 盐酸盐+ (1S,2S,5R)非对映体盐酸盐(533 mg，96。/。产率)，为无色无定形 固体。工H NMR (500MHz,DMSO-d6, 5 ，ppm,特另'J 地)7.7 (bs,3H,NH3+),6.13,6.12 (2dd,lH,19-H,J = 11Hz 和 18Hz),5.55 (d,lH，14-H,J = 8Hz),5.05 (m，2H,20-H),4.53 (d,lH,ll-OH,J = 6Hz),3.70 (m,lH,2'隱H),3.42 (t,lH,ll-H,J = 6Hz)，3.35 (m,2H,22匿H),3.09 (m,2H,l'-H,5'-H),2.40 (bs,lH,4陽H),1.35 (s,3H,15-CH3),1.05(s,3H,18-CH3),0.82 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 508 (MH+),530 (薩a+),1015 (2MH+),1037 (2固a+),542(Mcr)。22实施例2A. 14-0-{[(111,211，53)-5-氨基-2-鞋基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林和14-0-([(lS,2S,5R)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基r木替林将实施例2步骤A的14-0-([(lR,2R,5S)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体的混合物(4.91 g,9.67 mmol)在手 性柱(250 x 20 mm CHIRALCEL OD-H,正庚烷/异丙醇/二乙胺= 80/20/0.l)上进行拆分，得到14-0-([(lR 2R 5S"-5-氨基-2-羟基-环己基 硫基]-乙酰基)-木替林(a)(先洗脱的化合物,2.07 g,42y。产率，未校正的) 和14-CH[(lS,2S 5R"-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林 (b)(后洗脱的化合物,2.36g,48y。产率，未校正的)，为无色非结晶性泡沫。(a) : & NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)6.13 (dd，lH,19-H,J =11 Hz和 18Hz),5.53 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m，2H,20-H),4.72 (d,lH,2'-OH，J = 4Hz)，4.50 (d,lH,l l-OH,J = 6Hz),3.47 (m,lH,2'隱H)，3.45-3.20 (m，3H,11國H,22-H)，2.98 (m,lH,l'画H),2.80 (m,m,5'-H)，2.40 (bs,lH,4-H),1.36 (s,3H,15-CH3),1.06 (s,3H,18-CH3)，0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 508 (MH+),530 (固a+),1015 (2MH+),1037 (2画a+),506 (M-H)-,542 (MCl.)。(b) : ^NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)6.13 (dd,lH,19画H,J =11Hz和 18Hz),5.53 (d，lH,14-H,J = 8Hz)，5.05 (m,2H,20-H),4.72 (d,lH，2'-OH，J = 4Hz),4.50 (d,lH,l l-OH,J = 6Hz),3.47 (m,lH,2'-H),3.45-3.20 (m,3H,1 l-H,22-H),2.98 (m,lH,l'-H),2.80 (m,lH,5'画H),2.40 (bs,lH,4-H),1.36 (s，3H，15-CH3)，1.06 (s,3H,18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 508 (固+),530 (画a+),1015 (2MH+)，1037 (2画a+)，506 (M画H) 542 (MCr)。实施例3. 14-0-([(lR,2R,4S)-4-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林盐酸盐+(13,23,411)非对映体盐酸盐将实施例2步骤A的14-0-([(lR,2R,4S)-4-氨基-2-鞋基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S,2S,4R)非对映体(152 mg,0.30 mmol)按照实施例1 步骤C的方法处理，得到14-0-([(lR,2R,4S)-4-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林盐酸盐 + (1S,2S,4R)非对映体盐酸盐(148 mg,91。/。产率)， 为无色无定形固体。力 NMR(500MHz,DMSO-d 6, 5 ,ppm,特另'J地)7.8(bs,3H,NH3+),6.14,6.13 (2dd,lH,19誦H,J = HHz和18Hz),5.55 (d,lH,14-H,J =8Hz),5.20 (d,lH,2'-OH),5.05 (m,2H,20-H),4.53 (d，lH,l l-OH,J = 6Hz),3.88 (m,lH,2'國H),3.42 (t,lH,l l-H,J=6Hz),3.32 (m,2H,22-H),3.22 (m,m,4'-H),2.92 (m,lH,l'-H),2.40 (bs,m,4-H),1.35 (s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3，J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J=7Hz)。 MS画ESI (m/z): 508 (MH+),530 (MNa+),1015 (2MH+),1037 (2画a+),542(Mcr)。实施例4. 14-0-([(lR,2R,5R)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+(13,23,53)非对映体步骤A.叔丁基-二曱基-(顺式-3,4-环氧环己基氧基)硅烷向3-环己烯-l-醇(Amburgey,J.C; Shuey,S. W.; Pedersen,L. G.; Hiskey R.》wwgamc C/2e冊Wry 1994,",172-197.)(10 g,102 mmol)于200 ml 二氯 曱烷的溶液中，加入乙酰丙酮氧4凡(vanadyl acetylacetonate)(0.5 g,催4b剂) 和叔丁基氪过氧化物(20.4ml5.5M,于癸烷中，112mmo1),并在室温搅 拌过夜。在4。C,将形成的反应混合物用叔丁基二甲基氯硅烷(16.9 g,112 mmol)、咪唑(9.02 g,132 mmol)和4-二甲基氨基吡啶(2.49 g,20 mmol)处 理，并在室温搅拌5小时。将反应混合物用二氯曱烷稀释，随后用10% NaHS03溶液、饱和NaHC〇3溶液和盐水萃取，有纟几层经》克酸钠干燥和 过滤。将滤液在减压下浓缩，经色谱法(二氧化硅，环己烷/乙酸乙酯=15/1〕 后，得到叔丁基-二甲基-(顺式-3,4-环氧环己基氧)硅烷(R产0.35,18.3 g,79y。产率)，为无色的油。丄H NMR (500MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm): 3.55 (m,lH),3.00 (m,2H),2.15 (m,lH),2.00 (m,lH),1.80 (m,lH),1.50 (m，lH),1.35 (m,lH),1.35 (m,lH),1.25 (m,lH),0.83 (s,9H,叔丁基),0.0 (s,9H,Si(CH3)2)。步骤B. 14-0-U(lR,2R,5S)-5-(叔丁基-二甲基-甲硅氧基)-2-羟基-环 己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体按照实施例1步骤A2的方法将叔丁基-二曱基-(顺式-3,4-环氧环己 基氧)硅烷(6.41 g,28 mmol)用截短侧耳素硫醇处理。得到粗制的 14-0-([(1R,2R,5S)-5-(叔丁基-二曱基-曱硅氧基)-2-羟基-环己基硫基]-乙 酰基)-木替林+ (1S，2S,5R)非对映体，为无色非结晶性泡沫，将其直接24用于下一步骤。
& NMR (400MHz,DMSO-d6，5,ppm,特别地):6.13 (dd,lH,19画H,J = 11Hz 和 18Hz),5.52 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20画H),4.78 (dd,lH,2'-OH,J = 5Hz 和 6Hz),4.48 (d,lH,l l隱OH,J = 6Hz),3.88 (m，lH,5'國H),3.15-3.45 (m,4H,2'-H，l 1-H,22-CH2),2.92 (m,lH,l'-H),2.38 (bs,lH,4-H),1.36 (s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.86 (s,9H,叔丁 基),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)，0.0 (s,6H,Si(CH3)2)。
步骤C. 14-0-U(lR,2R,5S)-2,5-二羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林 + (18,28,511)非对映体
向14-0-U(lR,2R,5S)-5-(叔丁基-二甲基-甲硅氧基)-2-羟基-环己基硫 基]-乙酰基)-木替林+ (lS,2S,5R)非对映体(9.46g,15.1 mmol)于25 ml四 氢呋喃的溶液中，加入乙酸和水的混合物(3:l,100ml),并在40。C搅拌2 天。在减压下将反应混合物浓缩至近干，将剩余物溶于乙酸乙酯，并进 行色谱法(二氧化硅，环己烷/乙酸乙酯=1/3)后，得到 14-0-{[(lR,2R,5S)-2,5- 二羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林 + (13,28,511)非对映体(1^= 0.27,7.07 g，92。/。产率)，为无色非结晶性泡沫。
丄H雇R (400MHz,DMSO-d6, 5,ppm,特别地)6.12 (dd,lH,19陽H,J = 11Hz 和 18Hz),5.53 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20陽H),4.72 (dd,lH，2'-OH，J = 2Hz 和 5Hz),4.48 (d,lH,l l-OH,J = 6Hz)，4.43 (t,lH,5'-OH),3.68 (m,lH,5'-H),3.45-3.20 (m,4H,2'隱H,1 l-H,22國H),2.94 (m,lH,l'画H),2.38 (bs，lH,4誦H),1.36 (s,3H,15-CH3),1.06 (s,3H,18-CH3),0.82 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 531 (顧a+),1039 (2顧a+)。
步骤D. 14-CH[(lR,2R,5S)-2-羟基-5-甲烷磺酰氧基-环己基硫基]-乙 酰基}-木替林+(13，28,511)非对映体
向14-0-U(lR,2R,5S)-2,5-二羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体(6.07 g,11.9 mmol)于36 ml吡咬中的溶液中，加入曱 石黄酰氯(l.l ml,14.3 mmol)，并将形成的混合物在室温搅拌过4复。冲妻着在 减压下蒸发溶剂；将剩余物用IN HC1稀释并用乙酸乙酯萃取3次。将合并后的有机层用盐水洗涤，经v琉酸钠干燥和过滤。将滤液浓缩，经柱 色镨法(二氧化硅，环己烷/乙酸乙酯=1/1)纯化，得到
14-0-([(lR，2R,5S)-2-羟基-5-曱烷磺酰氧基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林 + (lS,2S,5R)非对映体(Rf 0.15,2.55 g,36。/。产率)，为无色非结晶性泡沫。 ^ NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特另'J 地)6.12 (dd,lH,19-H,J=llHz 和 18Hz),5.54 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.07 (m,2H,20-H),5.00 (t,lH,2'-OH,J = 5Hz),4.78 (m,lH,5'隱H),4.50 (d,lH,l l-OH,J = 6Hz),3.55-3.25 (m,4H,2'-H,1 l-H,22誦H),2.91 (m,lH,l'陽H),2.38 (bs,lH,4國H),1.36 (s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.80 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。
步骤E. 14-0-([(lR,2R,5R)-5-叠氮基-2-羟基-5-甲烷磺酰氧基-环己 基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5S)非对映体
将14-CH[(lR,2R,5S)-2-羟基-5-甲烷磺酰氧基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体(2.55 g,4.35 mmol)和叠氮化钠(0.85 g,13 mmol)于30 ml二曱基曱酰胺的溶液在8(TC加热6小时。将反应混 合物用水和盐水稀释，用乙酸乙酯萃取3次。将合并后的有机层用水和 盐水洗涤，经硫酸钠干燥和过滤。在减压下除去溶剂，得到粗制的 14-0-([(lR,2R,5R)-5-叠氮基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S,2S^S)非对映体(定量的产率,环己烷/乙酸乙酯二 l/l,Rf = 0.35),为无 色非结晶性泡沫，将其直接用于下一步骤。
力 NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特另'J地)6.15,6.13 (2dd,lH，19-H,J = 11 Hz和18Hz),5.56,5.54 (2d,lH，14-H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20-H),4.90 (d,lH,2'-OH,J = 5Hz),4.50,4.49 (2d,lH,1 l画OH,J = 6Hz),3.50-3.25 (m,5H,2'-H,5'隱H，1 l-H,22-H)，2.64 (m,lH,l'-H),2.40 (bs,lH,4-H)，1.36 (s,3H,15-CH3),1.06 (s,3H,18-CH3)，0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。
步骤F. 14-0-([(lR,2R,5R)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木 替林+(18,28,53)非对映体
向14-0-([(lR,2R,5R)-5-叠氮基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替 林+ (1S,2S,5S)非对映体(2.4 g,4.50 mmol)于30 ml四氢呋喃的溶液中，加入三苯基膦(1.18 g,4.50 mmol),并在室温搅拌过夜。接着加入水(大约 3 ml),将反应混合物回流加热1小时。在蒸发溶剂后，将剩余物用水和 盐水稀释，用乙酸乙酯萃取3次。将合并后的有机层经硫酸钠干燥和过 滤，经色语法(二氧化硅，乙酸乙酯/甲醇/35%氨溶液=100/100/1),得到 14-0- {[(1 R,2R,5R)-5 -氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (lS,2S,5S)非对映体(Rf^ 0.3,1.74 g,79。/。产率)，为无色非结晶性泡沫。
工H NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特另'J地)7.25,6.65 (2bs,lH,NH),6.14 (dd,lH,19-H,J = HHz和18Hz),5.54 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.04 (m,2H,20-H),4.50 (bs, 1 H, 11誦0H),3.55-3.10
(m,5H,2'画H,5'-H,ll-H,22-H),2.58 (m,m,l'-H),2.40 (bs,lH,4-H),1.36 (s,3H, 15-CH3), 1.05 (s,3H, 18-CH3),0.81 (d,3H， 17-CH3, J=7Hz),0.62 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 508 (MH+),530 (顧a+),1037 (2顧a+)。
实施例4A. 14-0-([(lR,2R,5R)-5-氨基-2-轻基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林和14-0-([(lS,2S,5S)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木
替林
将实施例4步骤F的14-0-([(lR,2R,5R)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5S)非对映体(4 g，7.87 mmol)的混合物在手性 柱(250 x 20 mm CHIRALPAK IC,正庚烷/四氢呋喃/二乙胺=70/30/0.1) 上拆分，得到14-CH[(lS,2S 5S"-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林(后洗脱的化合物,l.l g,28。/。产率，未校正的)，为无色非结晶性泡 沫。
丄H NMR (400MHz,DMSO-d6，5,ppm,特别地):6.13 (dd,lH,19-H,J = 11Hz 和 18Hz),5.54 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.06 (m,2H,20-H),5.76 (d,lH,2'隱0H,J = 7Hz),4.50 (d,lH,ll-OH,J = 7Hz),3.55-3.15 (m,5H，2'-H,ll-H,5'隱H,22隱H),2.48 (m,lH,r-H),2.40 (bs,lH,4隱H),1.36 (s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H，18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS画ESI (m/z): 508 (MH+),1037 (2固a+)，506 (M-H)—,542 (MCr)。
实施例5. 14-0-([(lR,2R，3R)-3-氨基-2-羟基-环己基硫基 乙酰基〉-木替林盐酸盐+(13,23,38)非对映体盐酸盐
步骤A. 14-0-([(lR,2R,3R)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基硫 基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,3S)非对映体
按照实施例1步骤Al的方法，将(顺式)-2，3-环氧环己基-氨基甲酸叔 丁 基酉旨(O'Brien,P.; Childs,A.,C; Ensor,G. (9rgamc Z^"era 2003,5f26人4955-4957.)(1 g,4.69 mmol)用截短侧耳素硫醇处理。处理后将 反应混合物进行色谱法(二氧化硅，环己烷/乙酸乙酯=1/1),得到 14-0-{[(111,211,311)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (lS,2S，3S)非对映体(Ri^ 0.5,1.32 g,46%)，为无色非结晶性泡 沫。
& NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特另'J 地)6.12 (m,2H,NH,19画Hz),5.54 (d,lH,14画H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20-H),4.96 (d,lH,2'-OH,J = 4Hz),4.50,4.99 (2d,lH,1 l画OH，J = 6Hz)),3.65 (m,lH,2'画H),3.57 (m,lH,3 '-H),3.42 (t，lH,ll-H，J = 6Hz),AB-系统(vA = 3.30,3.29,VB = 3.23,3.22,22-H,J = 15Hz),3.06 (m,lH,l'-H),2.40 (bs,m,4-H),1.36 (s,12H,叔丁基,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.82 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 6Hz)。
步骤B. 14-0-U(lR,2R,3R)-氨基-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林 十(1S,2S，3S)非对映体
按照实施例1步骤B的方法处理14-0-([(lR,2R,3R)-3-叔丁氧基羰基 氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基卜木替林+ (1S,2S,3S)非对映体(400 mg,0.658 mmol)。处理后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅，乙酸乙酉旨/ 曱醇=1/5)，得到14-0-([(lR,2R,3R)-3-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林+(13,23,33)非对映体(1^= 0.1,249 mg,75%),为无色非结晶 性泡沫。
MS隱ESI (m/z): 508 (MH+),530 (MNa+),1015 (2MH+),1037 (2画a+)。
步骤C. 14-0-([(lR,2R,3R)-3-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木 替林盐酸盐+(18,23，48)非对映体盐酸盐
按照实施例1步骤C的方法处理14-0-([(lR,2R,3R)-氨基-羟基-环己 基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,3S)非对映体(249 mg,0.49 mmol),得到14-0-([(lR，2R,3R)-3-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林盐酸 盐+(18,28,38)非对映体盐酸盐(24711^,93%产率)，为无色无定形固体。 & NMR (400MHz,DMSO-d6，5,ppm,特别地)7.8 (bs,3H,NH3+),6.13 (d,2H,19-Hz,J = 11Hz 和 18Hz),5.80 (d,lH,2'-0H,J = 4Hz),5.55 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20隱H),4.55,4.54 (2d,lH,1 l陽OH,J = 6Hz)),3.87 (m,lH,2'-H),3.42 (t,lH,l l-H,J=6Hz),AB-系统(v八=3.35,vB = 3.24,22-H,J = 15Hz),3.20,3.13 (2m,lH,3 '-H,l'隱H),2.40 (bs,lH,4-H),1.36 (s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。
MS-ESI (m/z): 508 (MH+),1015 (2MH+),542
(Mcr)。
实施例6. 14-0-([(lR,2R,4R)-4-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+(18,23,48)非对映体和
14-0-{[(lR,2R,4R)-4-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替 林+(13,28,43)非对映体
向实施例1步骤B的14-0-([(lR,2R,4R)-4-氨基-2-羟基-环己基硫 基]-乙酰基}-木替林+ (1S，2S，4S)非对映体(900 mg,1.77 mmol)于10 ml 二氯曱烷的溶液中，加入乙醛(2.77ml,lM,于二氯曱烷中)和乙酸(77 ju 1,1.77 mmol),并在室温搅拌30分钟。将形成的反应混合物用三乙酰氧 基硼氲化钠(750 mg,3.54mmol)处理，并在室温搅拌过夜，用二氯曱烷稀 释，接着用NaHC03溶液和盐水萃取。有机层经辟u酸钠干燥和过滤。将 滤液进行色谱法(二氧化硅,乙酸乙@旨/甲醇/35%氨溶液=50/50/1),得到 14-CH[(lR,2R,4R)-4-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林 + (lS,2S,4S)非对映体(a)(92 mg，9。/o产率)和14-0-{[(lR，2R,4R)-4-乙基氨 基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林十(lS,2S,4S)非对映体(b)(163 mg,17。/。产率)，为无色非结晶性泡沫。
(a): !H NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm，特别地)6.14 (dd,lH,19-H,J =11Hz和 18Hz),5.55 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m,2H，20-H),4.83 (d,lH,2'-〇H,J = 4Hz),4.47 (d,lH,l l-OH，J = 6Hz),3.42 (m,lH,l l-H),AB-系 統(va = 3.50,3.42,vB = 3.30 ,3.27,22-H，J = 15Hz),3.25 (m,lH,2'-H),2.50 (m,2H, 1 '-H,4'画H),2.40 (m,5H,NCH2,4-H), 1.36 (s，3H, 15-CH3), 1.05 (s,3H，18-CH3),0.92 (t,6H，NCH2CH3,J = 7Hz),0.81 (d,3H，17-CH3,J =7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz) 。 MS-ESI (m/z): 564 (固十),586 (画a+),562 (M陽H)-。
(b): NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm，特别地)6.13 (dd,lH,19-H,J =11Hz和 18Hz),5.54 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20-H),4.48 (d,lH，ll-OH,J = 6Hz),3.42 (m,lH,ll画H),AB-系统(vA = 3.48,vB = 3.25，22-H,J = 15Hz),2.55 (m,2H,l'-H,4'-H),2.40 (bs，lH,4隱H),1.35 (s，3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.95 (t,3H,NCH2CH3,J = 7Hz),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 6Hz)。 MS-ESI (m/z): 536 (固+),558 (画a+),534 (M-H)-。
实施例7. 14-0-{[(lR，2R,5S)-5-乙基氨基-2-鞋基-环己基硫基]-乙 酰基}-木替林盐酸盐+ (1S,2S,5R)非对映体盐酸盐
步骤A. N-乙基-N-(环己-3-烯基)-氨基曱酸叔丁基酯
向环己-3-烯基-氨基曱酸^又丁基酯(Kampferer,P.; Vasella,A. //e/v"謡C/nw,ca 2004,S7,2764-2789)(4.34 g，22 mmol)于20 ml
DMSO的溶液中，加入氲化钠(880 mg,60。/。分散液,22 mmol)，搅拌1小 时后加入乙基碘(1.78 ml,22 mmol)。在室温再搅拌2小时后，在减压下 浓缩反应混合物。剩余物用水和盐水稀释，用乙酸乙酯萃取3次。将有 机层经硫酸钠干燥和过滤。将滤液在减压下浓缩并经色错法(二氧化硅, 环己烷/乙酸乙酯=12/1)后，得到无色固体的标题化合物(R尸 0.30,2.88g,58o/o产率)。
工H NMR (400MHz，CDCl3, 5 ,ppm): 5.61 (m,2H,双键),4.08 (bs,lH,NCH),3.15 (m,2H,NCH2),2.15,1.75 (2m,6H),1.47 (s,9H,叔丁 基),1.13 (t,3H，NCH2CH3,J = 7Hz)。
步骤B. N-乙基-N-(顺式-3,4-环氧环己基)-氨基曱酸叔丁基酯 将N-乙基-N-(环己-3-烯基)-氨基甲酸叔丁基酯(2.87 g,12.7 mmol)溶 于75ml二氯曱烷，并用3-氯过氧苯曱酸(4.50g,70。/。，19mmol)处理。在 室温搅拌20小时后，在减压下浓缩反应混合物。剩余物用乙酸乙酯稀 释，接着用10。/。NaHS03溶液、饱和NaHC03溶液和盐水萃取。将有机 层经硫酸钠干燥和过滤。将滤液在减压下浓缩并经色谱法(二氧化硅，环 己烷/二喁烷=5/1)后，得到标题化合物(Rf = 0.2,1.50 g，49。/。产率)。H NMR (400MHz,CDCl3, 5 ,ppm): 4.0 (bs,lH,NCH),3.14 (m,2H,NCH2),3.06 (bs,2H,环、氧4匕物),2.13,2.08,1.88,1.60,1.36 (4m,6H),1.47 (s,9H,叔丁基),0..08 (t,3H,NCH2CH3)。
步骤C. 14-0-([(lR,2R,5S)-5-(叔丁氧基羰基-乙基-氨基)-2-羟基-环己 基硫基]-乙酰基}-木替林+(18,23,511)非对映体
将N-乙基-N-(顺式-3,4-环氧环己基)-氨基甲酸叔丁基酯(1.5 g,6.2 mmol)按照实施例1步骤Al的方法用截短侧耳素硫醇处理。处理后将反 应混合物进行色谱法(二氧化硅，环己烷/二-恶烷=3/1),得到 14-(H[(lR,2R,5S)-5-(叔丁氧基羰基-乙基-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙 酰基}-木替林+ (lS,2S,5R)非对映体(Rf = 0.4,2.57 g,65。/。产率)，为无色非 结晶性泡沫。
MS-ESI (m/z》536 (MH+),558 (画a+),534 (M-H)-。
步骤D. 14-0-([(lR,2R，5S)-5-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基)-木替林+(13,28,511)非对映体
按照实施例1步骤B的方法处理14-0-([(lR,2R,5S)-5-(叔丁氧基羰 基-乙基-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R)非对映 体(2.57 g,4.04 mmol)。处理后将反应混合物进ff色i普法(二氧^^圭，乙酸 乙酉旨/甲醇/35%氨溶液=100/100/1),得到14-0-([(lR,2R,5S)-5-乙基氨基 -2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (lS,2S,5R)非对映体(Rf = 0.3,1.08 g,50%),为无色非结晶性泡沫。
& NMR (500MHz,CDCl3, 5 ,ppm,特别地):6.48 (dd,lH,19-H,J = 10Hz和18Hz),5.77 (m,lH,14-H),5.36 (m,lH,20画H),5.22 (d,lH,20-H,J = 17Hz),3.45 (d,lH,2'画H),3.37 (d,lH,ll-H,J = 6Hz),3.25 (m,lH,22-H),2.97 (m,lH,l'-H),2.91 (m,lH,5'-H),2.63 (q,2H，NCH2,J = 7Hz),2.10 (bs,m,4-H),1.46 (s,3H,15-CH3),1.18 (s,3H,18-CH3),1.12 (t,3H,NCH2CH3,J =7Hz),0.98 (d，3H,17-CH3,J = 7Hz),0.73 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。
步骤E. 14-0-([(lR,2R,5S)-5-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林盐酸盐+(13,28,511)非对映体盐酸盐
按照实施例1步骤C的方法处理14-0-{[(111,211,53)-5-乙基氨基-2-轻基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体(86 mg,0.16 mmol),得到14-0-([(lR,2R，5S)-5-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基)-木替林盐酸盐+(18,23,511)非对映体盐酸盐(83 11^,90%产率)，为无 色无定形固体。
& NMR (400MHz,CDCl3, 5 ,ppm,特别地)9.3 (bs,2H,NH2+),6.45 (m,lH,19-H),5.73 (d,lH,14-H,J = 10Hz),5.35 (m,lH,20國H),5.22 (d,lH,22画H,J = 18H),3.85 (m,lH,2'-H),3.33 (m，3H,11-H，22-H),3.07 (m,2H,NCH2),2.10 (bs，lH,4-H),1.50 (t,3H，NCH2CH3,J = 7Hz),1.45 (s,3H,15-CH3),1.18 (s,3H,18-CH3),0.90 (d,3H,17-CH3，J = 7Hz)，0.73 (d,3H,16-CH3，J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 536 (MH+),5.70 (MCr)。
实施例8. 14-0-([(lR，2R，5S)-5-二乙基氨基-2-鞋基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林盐酸盐+ (1S,2S,5R)非对映体盐酸盐
步骤A. 14-0-(l(lR,2R，5S)-5-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体
按照实施例6的方法，将实施例7步骤D的14-0-{[(lR,2R,5S)-5-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体 (250 mg,0.47 mmol)用乙醛(53 m 1,0.93 mmol)处理。处理后将反应混合 物进行色语法(二氧化硅,乙酸乙酯/曱醇=1A)，得到14-0-{[(lR,2R,5S)-5-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体 (Rf = 0.2,230 mg,87%),为无色非结晶性泡沫。
工H NMR (400MHz,CDCl3, 5 ,ppm,特别地):6.48 (dd,lH,19隱H,J = 11Hz 和 17Hz),5.77 (d,lH,14-H,J= 8Hz),5.36 (m,lH,20-H)，5.22 (d,lH,20-H,J = 17Hz),3.57，3.36,3.21，3.03,2.72
(5m,6H,l'隱H,2'誦H,5'匿H,ll-H,22隱H),2.59 (m,4H,NCH2),2.11 (bs,lH,4-H),1.46 (s,3H,15-CH3),1.18 (s,3H,18-CH3),0.98 (t,6H，NCH2CH3,J = 7Hz),0.88 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.73 (d，3H,16-CH3,J = 7Hz)。
步骤B. 14-0-([(lR，2R,5S)-5-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林盐酸盐+(13,23,511)非对映体盐酸盐
将14-0-{[(111,211，58)-5-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S，2S,5R)非对映体(230 mg,0.41 mmol)按照实施例1步骤C的
32方法处理，得到14-0-{[(111,211,58)-5-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基卜木替林盐酸盐+ (1S,2S,5R)非对映体盐酸盐(223 mg,9P/o产率)， 为无色无定形固体。
& NMR (400MHz,CDCl3, 5 ，ppm,特别地)11.5 (bs,3H,NH+),6.46 (dd,lH,19画H,J = 11Hz 和 17Hz),5.74 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.34 (m,lH,20-H),5.22 (d,lH,22國H，J = 17H),3.98 (m,lH,2'-H),3.60-2.90 (m,9H, 1 '-H,5'-H, 11 -H,22-H,NCH2)，2.10 (bs, 1H,4-H), 1.48
(m,9H,NCH2CH3,15-CH3), 1.18 (s,3H, 18-CH3),0.89 (d,3H, 17-CH3, J = 7Hz),0.73 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz) 。 MS-ESI (m/z): 564 (MH+)，586 (画a+),1149 (2固a+),598 (MCr)。
实施例9. 14-0-([(lR,2R,4S)-4-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基卜木替林+(13,23,411)非对映体
按照实施例6的方法处理实施例2步骤A的14-0-{[(lR,2R,4S)-4-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,4R)非对映体(680 mg,1.34 mmol)。处理后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅，乙酸乙酯/ 甲醇=1/1),得到14-〇-{[(111,211,48)-4-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+(18,28,411)非对映体(1^= 0.2,129 mg,17%),为无色非 结晶性泡沫。
丄H NMR (500MHz,DMSO-d6, 5,ppm,特别地)6.13 (dd,lH,19-H，J = 11Hz 和 18Hz),5.54 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20-H),4.70 (d,lH,2'-OH),4.49 (d,lH,l l-OH,J = 6Hz),3.70 (m,lH,2'-H)，3.42 (t,lH,ll-H,J = 6Hz),AB画系統(Va = 3.36，vB = 3.22,22画H，J = 15Hz)，2.72 (m,2H,l'-H,4'-H),2.47 (m，2H,NCH2),2.40 (bs,lH,4隱H),1.35
(s,3H,15-CH3),1.04 (s，3H,18-CH3),0.95 (t,3H,NCH2CH3,J = 7Hz),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 536 (MH+),558 (顧a+),534 (M-H)-。
实施例10. 14-0-([(lR，2R，5R)-5-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5S)非对映体
按照实施例6的方法处理实施例4步骤F的14-0-{[(lR,2R,5R)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S，2S,5S)非对映体(420mg,0.827 mmol)。处理后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅,乙酸乙酉旨/ 曱醇/35%氨溶液=50/50/1),得到14-0画([(lR,2R,5R)画5-二乙基氨基-2陽 羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (lS，2S，5S)非对映体(Rf = 0.2,95 mg,20%),为无色非结晶性泡沫。
!H NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)6.13 (dd,lH,19隱H,J = 11Hz 和 18Hz),5.55 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20-H),4.79 (m,lH,2'隱OH),3.55國3.15 (m,2'-H,5'國H,1 l-H,22-H),2.58 (m,lH,l'國H),2.40 (m,5H,NCH2,4-H)， 1.37 (s,3H, 15-CH3), 1.06 (s,3H, 18-CH3),0.92
(t,3H,NCH2CH3,J = 7Hz),0,83 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H，16-CH3,J =7Hz)。 MS-ESI (m/z): 564 (MH+),586 (画a+),562 (M國H) 598 (MCr)。
实施例11. 14-0-([(lR,2R,3R)-3-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林+(13,28,33)非对映体
步骤A.[(lR，2R,3R)-2-羟基-3-(2,4,6-三曱基-千基硫基)-环己基]-氨基 曱酸叔丁基酯+(18,23,33)非对映体
向(顺式)-2，3-环氧环己基-氨基甲酸叔丁基酯(ether)(O'Brien,P.; Childs,A.,C; Ensor,G. 2003,5f2》,4955-4957.)(14.9 g,68.9
mmol)和2,4,6-三甲基千硫醇(11.5 g,68.9 mmol)于50 ml甲醇的溶液中， 加入lONNaOH (5 ml,50 mmol)，并将形成的混合物在室温搅拌16小时。 反应混合物用水和盐水稀释，用乙酸乙酯萃取3次。有机层经硫酸钠干 燥和过滤。将滤液进行色谱法(二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯=5/1),得到 [(1R,2R,3R)-2-羟基-3-(2,4,6-三甲基-千基硫基)-环己基]-氨基曱酸叔丁基 酯+ (lS,2S,3S)非对映体(Rf二 0.25,5.92g,23。/。产率)，为无色非结晶性泡 沫。
& NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ，ppm): 6.78 (s,2H,芳香族的-H),6.15 (bd,OH),4.95(bd,NH),3.75 (d,lH,SCH2),3.68 (m,2H),3.02
(m,lH,SCH),2.30 (s,9H，CH3),2.30,l.90,1.40 (3m,6H),1.35 (s，9H,叔丁基)。
步骤 B.[(lR,2R,3R)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基 (silanyloxy))-3-(2,4,6-三曱基-节基硫基)-环己基]-氨基曱酸叔丁基酯+ (1S,2S,3S)非对映体
将[(lR,2R,3R)-2-羟基-3-(2,4,6-三曱基-千基硫基)-环己基]-氨基甲酸叔丁基酯+ (1S,2S,3S)非对映体(2.46 g,6.49 mmol)于50 ml二曱基曱酰 胺的溶液用叔丁基二甲基氯硅烷(978 mg,6.49 mmol)和咪唑(552 mg,8.11 mmol)处理，并在80。C搅拌5天。在减压下浓缩反应混合物。剩余物用 O.lNHCl稀释，用乙酸乙酯萃取3次。将合并后的有机层用盐水洗涤， 经硫酸钠干燥和过滤。色谱法(二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯=10/1)后，得 到[(1R,2R,3R)-2-(叔丁基-二曱基-硅烷氧基)-3-(2,4,6-三甲基-千基硫基)-环-己基]-氨基甲酸叔丁基酯+ (lS,2S,3S)非对映体(Rf = 0.25,3.0 g,94% 产率)。
& NMR (500MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm): 6.80 (s,2H，芳香族的-H),6.20 (bd，NH),3.90,3.75,3.63 (3m,4H,NCH，OCH,SCH2),2.98 (m,lH,SCH),2.30 (s,9H,CH3),l.90,1.50,1.33 (3m,6H)，1.35 (s，9H,C-叔丁基),0.85 (s，9H,Si-叔 丁基),O.O (s,6H,Si(CH3)2)。
步骤C. [(111,211,311)-2-(叔丁基-二曱基-硅烷氧基)-3-(2,4,6-三曱基-节基硫基)-环己基]-乙基-氨基曱酸叔丁基酯+ (1S,2S,3S)非对映体
按照实施例7步骤A的方法将[(lR,2R,3R)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧 基)-3-(2,4,6-三甲基-千基硫基)-环己基]-氨基曱酸叔丁基酯+ (1S,2S,3S) 非对映体(3.0 g,6.08 mmol)的溶液用乙基石典处理。处理后将反应混合物进 行色谱法(二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯=3/1),得到[(lR,2R,3R)-2-(叔丁基-二甲基_硅烷氧基)_3-(2,4,6-三曱基-千基硫基)-环己基]-乙基-氨基曱酸叔 丁基酯+ (1S,2S,3S)非对映体(1.20 g,38%)。
MS-ESI (m/z): 544 (MNa+),1065 (2顧a+)。
步骤D. [(111,211,311)-2-(叔丁基-二曱基-硅烷氧基)-3-巯基-环己基]-乙基-氨基甲酸叔丁基酯+(18,23,38)非对映体
在-78。C 、氩气气氛下将[(lR,2R，3R)-2-(叔丁基-二曱基-硅烷氧 基)-3-(2,4,6-三甲基-千基硫基)-环己基]-乙基-氨基甲酸叔丁基酯+ (1S,2S,3S)非对映体(1.20 g,2.30 mmol)于10 ml四氢吹喃和20 ml液氨中 的溶液用钠(106 mg,4.60 mmol)处理，并在-78。C搅拌1小时。然后加入 固体氯化4妄，让反应混合物升温至室温，用四氢呋喃稀释，并用氮气流 溢。将剩余的混合物过滤，并在减压下浓缩，得到粗制的 [(1R，2R,3R)-2-(叔丁基-二曱基-硅烷氧基)-3-巯基-环己基]-乙基-氨基甲酸叔丁基酯+ (1S,2S,3S)非对映体(定量的产率)，将其直接用于下一步骤。
MS-ESI (m/z): 412 (顧a+),801 (2画a+)。
步骤E. 14-CH[(lR,2R,3R)-3-(叔丁氧基羰基-乙基-氨基)-2-(叔丁基-二甲基_硅烷氧基)_环己基硫基]_乙酰基}_木替林+ (1S,2S,3S)非对映体
将粗制的[(1R,2R,3R)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-3-巯基-环己基]-乙基-氨基曱酸叔丁基酯+ (1S,2S,3S)非对映体(895 mg,2.30mmol)溶于 30 ml四氲p夫喃，接着用截短侧耳素曱苯磺酸酯(979 mg,1.84 mmol)和叔 丁醇钾(206 mg,1.84 mmol)处理，将形成的混合物在室温搅拌16小时。 蒸发溶剂后，将剩余物1N HC1稀释，用乙酸乙酯萃取3次。将合并后 的有机层用NaHC03溶液和盐水洗涤，经硫酸钠干燥和过滤。色谱法(二 氧化硅，环己烷/乙酸乙酯=10/1)后，得到14-0-([(lR,2R,3R)-3-(叔丁氧基 羰基-乙基-氨基)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-环己基硫基]-乙酰基}-木 替林+ (lS,2S,3S)非对映体(Rf^ 0.5,468 mg,27。/。产率)。
& NMR (400MHz,DMSO-d6, 5,ppm,特别地)6.14 (dd,lH,19画H,J = 11Hz 和 18Hz),5.55 (d,lH,14-H,J = 8Hz)，5.05 (m,2H,20-H),4.49 (m,lH,l l-OH),3.94 (m,lH,2'画H),3.43 (t，lH，l l-H,J=6Hz),3.28,3.04 (2m,5H,l'-H,22-H,NCH2),2.40 (bs，lH,4-H)，1.40 (s,9H,叔丁基),1.36,1.35 (2s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H，18-CH3),0.87 (s,9H,Si画叔丁基),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.64,0.62 (2d,3H,16-CH3,J = 7Hz) 0.05,-0.05 (2s,6H,Si(CH3)2)。
步骤F. 14-0-([(lR,2R，3R)-3-乙基氨基-2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧 基)-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S,2S,3S)非对映体和
14-0-{[(lR,2R,3R)-3-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替 林+(13,28,38)非对映体
按照实施例1步骤B的方法，将14-CH[(lR,2R,3R)-3-(叔丁氧基羰 基-乙基-氨基)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-环己基硫基]-乙酰基}-木替 林+ (1S,2S,3S)非对映体(468 mg,0.624 mmol)用三氟乙酸处理过夜。处 理后将反应混合物进行色语法(二氧化硅,乙酸乙酉旨/曱醇=1/2)，得到无色 固体的14-0-([(lR,2R,3R)-3-乙基氨基-2-(叔丁基-二曱基-硅烷氧基)-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (lS,2S,3S)非对映体(a)(Rf = 0.6,144 mg,36o/。产率)和14-0-{[(lR,2R，3 R)-3-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙 酰基}-木替林+ (13,23,38)非对映体03)(1^ = 0.25,177 mg,53。/c产率)。
(a) : MS-ESI (m/z): 672 (画a+),1321 (2画a+)。
(b) : ^NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特別地)6.14 (dd,lH,19-H,J =11Hz和 18Hz),5.54 (d,lH,14-H，J = 8Hz),5.05 (m,2H，20-H),4.76 (m,lH,2'陽OH),4.49,4.48 (2d,lH,n-OH,J = 6Hz)，3.55 (m,lH，2'國H),3.42 (t,lH,ll-H,J = 6Hz),AB-系統(va = 3.37,vB = 3.18,22-H,J = 15Hz),3.05 (m,lH,3'-H),2.66 (m,lH,l'-H),2.50 (m,2H,NCH2),2.40 (bs,lH,4-H),1.36 (s,3H，15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.98 (t,3H,NCH2CH3，J = 7Hz),0.81 (d，3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62 (d，3H,16-CH3,J=7Hz) 。 MS陽ESI (m/z): 536 (MH+),558 (MNa+)，1071 (2MH+)，1093 (2画a+),534 (M國H).。
实施例12. 14-0-U(lR,2R,3R)-3-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙 酰基}-木替林十(1S,2S,3S)非对映体
步骤A. 14-0-([(lR,2R,3R)-3-二乙基氨基)-2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧 基)-环己基硫基]-乙酰基卜木替林+ (1S,2S,3S)非对映体
按照实施例6的方法，将实施例11步骤F的14-0-{[(lR,2R，3R)-3-乙基氨基-2-(叔丁基-二曱基-硅烷氧基)-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,3S)非对映体(144 mg，0.222 mmol)用乙醛(25 y 1,0.444 mmol)处 理。处理后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅,乙酸乙酯/曱醇=2/1),得 到14-0-([(lR，2R,3R)-3-二乙基氨基)-2-(叔丁基-二曱基-硅烷氧基)-环己 基硫基]-乙酰基}-木替林+ (lS,2S，3S)非对映体(Rf = 0.5,110 mg,73%)， 为无色非结晶性泡沫。
!H NMR (400MHz,DMSO-d6, 5,ppm,特别地)6.14 (dd,lH,19隱H,J = 11Hz 和 18Hz),5.53 (d,lH,14隱H,J = 7Hz)，5.05 (m,2H，20-H),4.98 (m,lH,ll-OH),3.97 (m,lH,2'-H),3.42 (t，lH，ll-H,J = 6Hz),3.24 (m,2H,H画22),3.00 (m,lH,l'陽H)，2.70 (m，lH,3'画H),2.55 (m,4H，NCH2)，2.40 (bs,lH,4-H)，1.36 (s，3H，15-CH3),1.05 (s,3H，18-CH3),0.87
(m,15H,NCH2CH3,Si-叔丁基),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62,0.60 (2d,3H,16-CH3,J = 7Hz),0.07 (s,6H,Si(CH3)2)。步骤B. 14-0-([(lR,2R,3R)-3-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林+(18,23,33)非对映体
向14-0-([(lR,2R,3R)-3-二乙基氨基-2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S,2S,3S)非对映体(101 mg，0.149 mmol) 于5 ml四氩吹喃的溶液中，加入氟化四丁铵(0.44 ml,lM,于四氢p夫喃 中,0.447 mmol)。在室温搅拌2天后，将反应混合物在减压下浓缩，用 NaHC03溶液稀释，用乙酸乙酯萃取2次。将合并后的有机层经石克酸钠 干燥和过滤。将滤液进行色谱法(二氧化硅，乙酸乙酉旨/曱醇=1/2),得到 14-0-([(lR,2R，3R)-3-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林 + (1S,2S,3S)非对映体(R^ 0.2,8 mg,10。/。产率)，为无色非结晶性泡沫。
& NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特另'J地)6.15,6.14 (2dd,lH,19-H，J=llHz 和 18Hz),5.54 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20隱H),4.99,4.42 (2m,2H,1 l-OH,2'隱OH)，3.87 (m,lH，2'画H),3.42 (t,lH,ll-H,J = 6Hz),3.25 (m，2H,H-22),3.05 (m,lH,l'-H)，2.60 (m,3H,3'-H,NCH2),2.40 (bs,lH,4-H),1.35 (s,3H,15-CH3),1.05
(s,3H,18-CH3)，0.90 (m,6H,NCH2CH3),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62,0.61 (2d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS画ES1 (m/z): 564 (MH+),586 (画a+),1149 (2画a+),562 (M陽H)、
实施例13. 14-0-([(lR,2R,4S)-4-(曱酰基-羟基-氨基)-2-鞋基-环己基 硫基]-乙酰基)-木替林+(13，23，411)非对映体
步骤Al. 14-0-([(7R,8R)-7-羟基-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-8-基硫基]-乙 酰基}-木替林+ (7S,8S)非对映体
按照实施例1步骤A2的方法处理7，8-环氧-1,4-二氧杂-螺[4.5]癸烷 (Zhang,L.; Koreeda,M. (9rg聽c Le 2002,4(2/),3755-3758.)(6.25 g,40 mmol)和截短侧耳素疏醇(8 g,20 mmol)。处理后将反应混合物进行色谱 法(二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯=1/1)，得到14-0-([(7R,8R)-7-轻基-l,4-二 氧杂-螺[4.5]癸-8-基硫基]-乙酰基}-木替林+ (7S,8S)非对映体(Rf = 0.3，8.40 g,76。/Q产率)，为无色非结晶性泡沫。
& NMR (500MHz,DMSO-d6, 5,ppm,特别地):6.14 (dd,lH,19-H,J = 11Hz 和 18Hz),5.55 (d,lH,14隱H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20-H),4.95 (d,m,2'-OH,J = 6Hz),4.50 (d,lH,l l-OH,J = 6Hz),3.82(m,4H,OCH2CH20),3.55-3.25 (m,4H,2'-H,l l-H,H画22)，2.58 (m,lH,l'-H),2.40 (bs,lH,4-H),1.35,1.34 (2s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.81
(d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 573 (画a+),549 (M画H)-。
或步骤A2. 14-0-U(7R,8R)-7-羟基-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-8-基硫基]-乙酰基)-木替林+ (7S,8S)非对映体和14-0-([(7R,8R)-8-羟基-l，4-二氧 杂-螺[4.5]癸-7-基硫基]-乙酰基}-木替林+ (7S,8S)非对映体
按照实施例1步骤A3的方法处理7,8-环氧-1,4-二氧杂-螺[4.5]癸烷 (6.24 g,39.95 mmol)和截短侧耳素硫醇(16.4 g,41.7 mmol)。处理后将反应 进行色谱法(二氧化硅,乙酸乙酯/甲苯=1/1),得到14-0-([C7R,SR)-7-羟 基-1,4-二氧杂-螺[4.5]癸-8-基硫基]-乙酰基}-木替林+ (7S，8S)非对映体 以及14-0-([(7R,8R)-8-羟基-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-7-基硫基]-乙酰基)-木 替林+(73,88)非对映体的混合物(&= 0.24,4.40 g,20。/。产率)，无色固体。
丄H NMR (500MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特另'J地)6.14,6.12 (2dd,lH,19隱H,J = 11Hz和18Hz),5.55,5.53 (2d,lH,14画H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20-H),4.95,4.87 (d+dd,lH,2'-OH,J = 6Hz),4.50,4.49 (2d,lH,1 l陽OH,J =6Hz),3.83 (m,4H,OCH2CH20),3.55-3.25 (m,4H,2'-H,ll-H,H-22),2.77,2.57 (2m,lH，l'-H)，2.40 (bs,lH,4画H),1.36,1.36 (2s,3H,15-CH3),1.05
(s,3H，18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3，J 二 7Hz),0.62 (d,3H，16-CH3,J = 7Hz)。
MS-ESI (m/z): 573 (MNa+),549 (M画H)一。
步骤B. 14-0-([(7R,8R)-7-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-l,4-二氧杂-螺 [4.5]癸-8_基硫基]-乙酰基}-木替林+ C7S,SS)非对映体
将步骤Al的14-〇-{[(711，811)-7-羟基-1,4-二氧杂-螺[4.5]癸-8-基硫基]-乙酰基}-木替林+ (7S,8S)非对映体(8.4 g,15.3 mmol)于50 ml二曱基曱 酰胺的溶液用叔丁基二苯基氯硅烷(5.16 ml,19.8 mmol)和咪哇(1.66 g,24.4 mmol)处理，并在80。C搅拌过夜。在减压下浓缩反应混合物。剩 余物用水和盐水稀释，用乙酸乙酯萃取3次。将合并后的有机层用水和 盐水洗涤，经硫酸钠干燥和过滤。色谱法(二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯= 1/1)后，得到14-0-{[(7R,8R)-7-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-l,4-二氧杂-螺 [4.5]癸-8-基硫基]-乙酰基}-木替林+ (7S,8S)非对映体(Rf = 0.7,8.03g,67。/。产率)。
& NMR(400MHz,DMSO-d6, 5,ppm，特别地)7.7-7.35 (m,lOH,芳香 族的-H),6.15,6.13 (2dd,lH,19-H,J = HHz 和 18Hz),5.57,5.53 (2d,lH,14國H,J = 7Hz),5.05 (m,2H,20-H),4.50 (m,lH,l l-OH),3.30 (m,lH,2'-H),3.70-2.80 (m,8H,OCH2CH20,l'-H,l 1隱H,22-H),2.40
(bs,lH,4-H),1.39,1.36 (2s,3H,15-CH3),1.05 (s，3H，18-CH3),1.00 (s,9H,Si-叔 丁基),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62,0.60 (2d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 811 (顧a+)。
步骤C. 14-CK[(lR,2R)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-氧代-环己基 硫基]-乙酰基}-木替林十(1S,2S)非对映体
将14-0-U(7R,8R)-7-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-l,4-二氧杂-螺[4.5] 癸-8-基硫基]-乙酰基}-木替林+ (7S,8S)非对映体(8.03 g，10.2 mmol)溶于 100 ml二氯曱烷，用蒙脱石KIO(IO g)在室温处理3天。经硅藻土过滤 后，在减压下浓缩反应混合物，并经色谱法(二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯 =2/1)得到14-0-([(lR,2R)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-氧代-环己基 硫基]-乙酰基}-木替林+ (13,28)非对映体(1^= 0.38,5.24 g,69Q/。产率)。
& NMR (400MHz，DMSO-d6, 5,ppm,特别地)7.65-7.40 (m,lOH,芳 香族的-H),6.15,6.13 (2dd，lH，19-H,J= 11Hz和18Hz),5.53 (d,lH,14-H,J = 7Hz),5.00 (m,2H,20-H),4.47 (m,lH,l l-OH),4.24 (m,lH,2'画H),3.41 (t,lH,ll-H,J = 6Hz),3.20-3.00 (m,2H,22-H)，2.60 (m,lH,l'-H),2.40 (bs,lH,4-H),1.35,1.33 (2s,3H,15-CH3),1.06 (s,3H,18-CH3),0.97 (s,9H,Si-叔 丁基),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.58 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。
步骤D. 14-0-([(lR,2R)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-肟基 (hydroxyimino)-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S,2S)非对映体
向14-0-([(lR,2R)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-氧代-环己基硫 基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S)非对映体(2.50 g,3.36 mmol)于10 ml二曱 基曱酰胺的溶液中，加入羟胺盐酸盐(233 mg,3.36 mmol)和三乙胺(0.47 m1,3.36 mmol)，并在室温搅拌过夜。在减压下浓缩反应混合物，用水和 盐水考希释，用乙酸乙酯萃取3次。将合并后的有才几层用水洗涤两次，并 经硫酸钠干燥和过滤。在减压下除去溶剂，得到粗制的14-0-([(lR,2R)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-肟基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林+ (1S,2S)非对映体(定量的产率,环己烷/乙酸乙酯二 2/l，Rf = 0.25,0.35),将其用于下一步骤，没有进一步纯化。
步骤E. 14-0-([(lR,2R,4S)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-羟基氨基 -环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,4R)非对映体和
14-0- {[(1 R,2R，4R)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-羟基氨基-环己基 硫基]-乙酰基)-木替林+(18,23,48)非对映体
将14-0-([(lR,2R)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-肟基-环己基硫 基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S)非对映体(2.55 g,3.36 mmol)溶于10 ml乙 酸，并用氰基硼氢化钠(210mg,3.36mmol)在室温处理90分钟。在减压 下浓缩反应混合物。剩余物用NaHC03溶液稀释，用乙酸乙酯萃取3次。 将合并后的有机层经硫酸钠干燥和过滤。将滤液进行色i普法(二氧化硅, 环己烷/乙酸乙酯=2/3)，得到14-CH[(lR,2R,4S)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷 氧基)_4-羟基氨基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,4R)非对映体 (a)(Rf = 0.5,590 mg,23。/o产率)和14-0-([(lR,2R,4R)-2-(叔丁基-二苯基-硅 烷氧基)-4-羟基氨基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,4S)非对映 体(b)(Rf二 0.3,670 mg,26o/。产率)。
(a) :丄H NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)7.6-7.35 (m,10H, 芳香族的隱H),6.93 (bs,lH,NH/OH),6.12,6.08 (2dd,lH,19-H,J = 11Hz和 18Hz),5.50 (m,2H,14-H,NH/OH),5.00 (m,2H,20-H),4.47 (m,lH,ll隱OH),3.95 (m,lH,2'-H),3.40 (t,lH,ll-H,J = 6Hz),3.10-2.60 (m,4H,l'隱H，4'-H，22國H),2.40 (bs,lH，4-H),1.31,1.30 (2s,3H,15-CH3),1.00 (s,12H,18-CH3,Si國叔丁基),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.55 (d,3H,16-CH3,J =7Hz)。
(b) : & NMR (400MHz，DMSO-d6, 5,卯m,特别地)7.7-7.35 (m,lOH, 芳香族的-H),6.85 (s,lH,NH/OH),6.16,6.04 (2dd,lH,19画H,J = 11Hz和 18Hz),5.55 (m,2H,14画H,NH/OH),5.05 (m,2H,20-H),4.49 (d,lH,ll画OH,J = 6Hz)，3.55 (m,lH,2'-H),3.42 (t,lH，ll隱H,J = 6Hz),AB-系統(va = 3.37,vB = 3.18,22陽H,J = 14Hz)，2.88 (m,lH,r-H),2.54 (m,lH,4'-H),2.40 (bs,lH,4-H),1.39,1.37 (2s,3H,15-CH3),1.06 (s,3H,18-CH3),1.00 (s,9H,Si-叔 丁基),0.83 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.64,0.62 (2d,3H，16-CH3,J = 7Hz)。步骤F. 14-0-([(lR，2R，4S)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-(甲酰基-羟基-氨基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,4R)非对映体
向14-0-([(lR,2R，4S)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-羟基氨基-环己 基硫基]-乙酰基卜木替林+ (1S,2S,4R)非对映体(474 mg，0.622 mmol)于 15 ml叔丁基甲基醚的溶液中，加入2,2,2-三氟曱酸乙酯(594 |u 1,6.22 mmol)，并回流加热5小时。4夸反应混合物冷S卩至室温，滴力口150ml庚 烷。经过滤将形成的沉淀分离，得到无色固体的14-0-([(lR,2R,4S)-2-(叔
丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-(曱酰基-羟基-氨基-环己基硫基]-乙酰基}-木 替林+(18,23,411)非对映体(307 11^,62%产率,环己烷/乙酸乙酯=l/3,Rf = 0.5)。
& NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特另'J地)9.6,9.2 (2bs,lH,NOH),8.2,7.9 (2s,lH,CHO),7.65-7.35 (m,10H,芳香族的 誦H),6.12,6.08 (2dd,lH,19-H,J = 11Hz和 18Hz),5.50 (d，lH，14-H,J = 7Hz),5.05 (m,2H,20-H),4.47 (m,lH,ll画OH),3.40 (t,lH,ll-H,J = 6Hz),2.37 (bs,lH,4隱H),1.31,1.30 (2s,3H,15-CH3),1.03 (s,12H，18-CH3,Si-叔丁基),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.55 (d,3H,16-CH3,J = 6Hz)。
步骤G. 14-0-([(lR,2R,4S)-4-(甲酰基-羟基-氨基)-2-羟基-环己基硫 基]-乙酰基}-木替林+(13,23,411)非对映体
将14-0-([(lR，2R,4S)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-(曱酰基-羟基-氨基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,4R)非对映体(215 mg,0.272 mmol)于10 ml四氪吹喃中用氟化四丁4妄(1.36 ml,lM于THF中，1.36 mmol)处理，并在室温搅拌24小时。将反应用水、NaHC03溶液和盐水 (1:1 :l)的混合物稀释，用乙酸乙酯萃取3次。将合并后的有机层经硫酸 钠干燥，过滤，并在减压下浓缩。向剩余物中滴加入250 ml庚烷。经过 滤将形成的沉淀分离，得到无色固体的14-0-([(lR,2R,4S)-4-(曱酰基-羟 基-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,4R)非对映体(97 mg,65。/。产率,二氯甲烷/曱醇=9/1 ，Rf = 0.4)。
!H NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm，特另'J地)9.65,9.25 (2bs,lH,NOH),8.2,7.9 (2s，lH,CHO),6.13 (m,lH，19-H),5.54 (d，lH,14-H,J = 8Hz)，5.05 (m,2H,20-H),4.49 (d,lH,ll画OH,J = 6Hz),3.42 (t,lH,ll誦H,J = 6Hz)，2.40(bs,lH,4-H),1.36(s,3H，15-CH3),1.06 (s，12H,18-CH3),0.81(d，3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 6Hz)。 MS画ESI (m/z): 574 C画a+),550 Ol-H)\1101 (2M-H)-。
实施例14. 14-0-([(lR,2R,5S)-5-(曱酰基-羟基-氨基)-2-羟基-环己基 硫基]-乙酰基)-木替林+(18,28,511)非对映体
步骤A. (7R,8R)-8-(2,4,6-三曱基千基硫基)-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-7-醇 + (78,88)非对映体
按照实施例1步骤A2的方法将7,8-环氧-1,4-二氧杂-螺[4.5]癸烷 (Zhang,L.; Koreeda,M. 丄e"ew 2002,《2",3755-3758.)(22 g,120
mmol)用2,4,6-三曱基千硫醇(20g,120mmol)处理。处理后将反应混合物 进行色谱法(二氧化硅，环己烷/乙酸乙酯=2/1),得到油的 (7R,8R)-8-(2,4,6-三甲基千基硫基)-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-7-醇+ (7S,8S) 非对映体(1^= 0.4,33 g,85。/。产率)。
MS-ESI (m/z): 345 (画a+),667 (2画a+)。
步骤B.乙酸(7R,8R)-7-(2,4,6-三曱基节基硫基)-l,4-二氧杂-螺[4.5] 癸-8-基酯+(78,83)非对映体
在氩气气氛下，向三苯基膦(26.5 g,101 mmol)于500 ml四氢吹喃的 溶液中，力口入偶氮二甲酸异丙基酯(isopropyl azodicarboxylate)( 19.6 ml,lOl mmol),并搅拌30分钟。然后加入于150 ml四氬呋喃中的 (7R,8R)-8-(2,4,6-三曱基千基硫基)-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-7-醇+ (7S,8S) 非对映体(27.7 g,86 mmol)和乙酸(7.7 m1,135 mmol),将反应混合物在80 。C加热24小时。将形成的反应混合物在减压下浓缩，并经色i普法(二氧 化硅,环己烷/乙酸乙酉旨/曱醇=3A)得到乙酸(7R,8R)-7-(2,4,6-三甲基千基 硫基)-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-8-基酯+ (7S,8S)非对映体(Rf二 0.4,7.0 g,22% 产率)。
丄H NMR (500MHz,CDCl3， 5 ,ppm): 6.81 (s,2H,芳香族的-H),4.85 (m,lH,CHO),3.96 (m,4H,OCH2CH20),AB ^統(va = 3.83,vB = 3.79，J = 1 lHz,SCH2),2.99 (m，lH,CHS)，2.36 (s,6H,CH3),2.23 (s,3H,CH3)，2.18 (m,lH),2.12 (m,lH)，2.11 (s,3H,COCH3),1.90-1.58 (m,4H)。 MS-ESI (m/z): 387 (顧a+)。
43步骤C. (7R,8R)-7-巯基-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-8-醇+ (7S,8S)非对映
体
按照实施例11步骤D的方法，将乙酸(7R,8R)-7-(2,4,6-三甲基千基硫基)-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-8-基酯+ (7S,8S)非对映体(6.33 g,17.4 mmol)用钠(1.6 g,69.5 mmol)处理。处理后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅，环己烷/乙酸乙酯=1/1),得到(7R,8R)-7-巯基-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-8-醇+(7S,8S)非对映体(R^ 0.4,1.36 g,38%)。
工H 丽R (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm): 4.89 (d,lH,OH),3.83(m,4H,OCH2CH20),3.17 (m,lH,CHO),2.76 (m,lH,CHS),2.43
(s,lH,SH),1.90-1.30,6H)。 MS-ESI (m/z): 189(M-H)—。
步骤D. 14-0-([(7R,8R)-8-羟基-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-7-基硫基]-乙酰
基}-木替林+(73,83)非对映体
按照实施例11步骤E的方法，将(7R,8R)-7-巯基-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸_8-醇+ (7S,8S)非对映体(1.36 g,7.15 mmol)用截短侧耳素甲苯磺酸酯(3.8 g,7.15 mmol)处理。处理后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯=1/1),得到14-0-U(7R,8R)-8-羟基-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-7-基硫基]-乙酰基}-木替林十(7S,8S)非对映体(Rf = 0.25,1.90 g,48%)，为无色非结晶性泡沫。
MS-ES1 (m/z): 573 (画a+),1123 (2画a+),549 (M-H)-,585 (MC1-)。
步骤E. 14-0-([(7R，8R)-8-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-7-基硫基]-乙酰基}-木替林+ (7S,8S)非对映体
按照实施例13步骤B的方法处理14-0-([(7R,8R)-8-羟基-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-7-基硫基]-乙酰基}-木替林+ (7S,8S)非对映体(1.90 g,3.45mmol)。处理后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯=3/2),得到14-0-([(7R,8R)-8-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-7-基硫基]-乙酰基}-木替林+(78,83)非对映体(1^= 0.6,1.65 g,61%),为无色非结晶性泡沫。
& NMR (400MHz，DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)7.7-7.35 (m,10H,芳香族的陽H),6.13，6.12 (2dd,lH,19隱H,J = 11Hz和18Hz),5.53 (d，lH，14-H,J =7Hz),5.05 (m,2H,20画H),4.50 (m,lH,ll-OH),3.78 (m,4H，OCH2CH2O),3.70(m,lH,l'-H),3.42 (m,lH,l 1-H),3.05 (m,3H,2'-H,22-H),2.40
(bs,lH,4-H),1.36,1.34 (2s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),1.00 (s,9H,Si隱叔丁基),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.60,0.58 (2d,3H，16-CH3，J = 7Hz)。
步骤F. 14-0-([(lR,2R)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-5-氧代-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+(18,23)非对映体
按照实施例13步骤C的方法处理14-0-([(7R,8R)-8-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-1,4-二氧杂-螺[4.5]癸-7-基硫基]-乙酰基}-木替林+ (7S,8S)非对映体(1.65 g,2.09 mmol)。得到粗制的14-0-([(lR，2R)-2-(叔丁基-二苯基_硅烷氧基)_5-氧代-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S)非对映体(1.34 &86%产率，环己烷/乙酸乙酯=2/1,1^=0.3),为无色非结晶性泡沫，将其直接用于下一步骤。
丄H NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)7.7-7.35 (m,lOH,芳香族的-H)，6.11,6.09 (2dd，lH,19-H,J = 11Hz和18Hz),5.48 (d,lH,14-H,J =7Hz),4.98 (m,2H,20陽H),4.47 (m,lH,l l-OH),4.03 (m,lH,l'-H),3.45-2.95(m,4H,ll-H,2'-H,22-H),2.37 (bs,lH,4-H),1.31,1.29 (2s，3H,15-CH3),1.02(s,12H,18-CH3,Si-叔丁基),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.53 (d,3H,16-CH3,J=7Hz)。 MS画ESI (m/z): 767 (顧a+),779 (MCr)。
步骤G. 14-0-([(lR,2R)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-5-肟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+(13,23)非对映体
按照实施例13步骤D的方法处理14-0-([(lR,2R)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-5-氧代-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S)非对映体(1.34 g,1.80 mmol)。得到粗制的14-0-([(lR,2R)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)_5-肟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S)非对映体(定量的
产率,环己烷/乙酸乙酯=l/l,Rf = 0.6)为无色非结晶性泡沫，将其直接用于下一步骤。
步骤H. 14-0-([(lR,2R,5S)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-5-羟基氨基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体和
14-0-([(lR,2R,5R)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-5-羟基氨基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+(18,23，58)非对映体按照实施例13步骤E的方法处理14-0-([(lR,2R)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-5-肟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S)非对映体(2.55 g,3.36 mmol)。处理后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯=1/3),得到14-0-([(lR,2R,5S)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-5-羟基氨基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体(a)(R尸0.4,220 mg,16。/。产率)和14-0-([(lR,2R,5R)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-5-羟基氨基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5S)非对映体(b)(R产0.25,560 mg,41。/。产率)。
(a) :力NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm，特别地)7.65-7.35 (m,10H,芳香族的-H),7.00 (bs,lH,NH/OH),6.11,6.09 (2dd,lH,19-H,J = 11Hz和18Hz),5.50 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.00 (m,2H,20-H),4.47 (m,lH,ll-OH),3.80(m,lH,2'-H),3.40 (t,lH,ll-H,J = 6Hz),3.00 (m,lH,l'-H),AB-系统(vA =3.93,vB = 3.80,22画H,J = 15Hz),2.68 (m,lH,5'画H),2.40 (bs,lH,4-H)，1.31,1.29(2s,3H,15-CH3),1.00 (s，12H,18-CH3,Si-叔丁基),0.81 (d,3H,17-CH3,J =7Hz),0.55 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。
(b) : & NMR (400MHz,DMSO-d6, 5,ppm,特别地)7.7-7.35 (m,lOH,芳香族的-H),6.97 (s,lH,NH/OH),6.16,6.14 (2dd,lH,19-H,J = 11Hz和18Hz),5.56 (m,2H,14画H),5.40 (bs，lH,NH/OH),5.07 (m,2H,20-H),4.49,4.48(2d,lH,ll画OH,J = 6Hz)，3.48 (m,lH,2'-H),3.43 (t,lH,ll-H,J = 6Hz),3.24(m,2H，22画H)，2.79 (m，lH,l'國H),2.40 (bs,lH,4-H),2.33 (m,lH,5'-H),1.38,1.35(2s,3H，15-CH3),1.05 (s,3H，18-CH3),0.98 (s,9H,Si-叔丁基),0.81(d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63,0.61 (2d,3H,16-CH3,J = 6Hz)。
步骤I. 14-0-{[(111,211,53)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-5-(甲酰基-羟基-氨基-环己基硫基]-乙酰基卜木替林+ (1S,2S,5R)非对映体
按照实施例13步骤F的方法处理14-0-([(lR,2R,5S)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-5-羟基氨基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体(215 mg,0.282 mmol)。经过滤分离沉淀，得到无色固体的14-CH[(lR,2R,5S)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-5-(曱酰基-羟基-氨基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体(135 mg,61。/o产率,环己烷/乙酸乙酯=1/3 ,Rf= 0.65)。
工H NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特另'J地)9.8,9.3(2bs,lH,NOH),8.2,7.9 (2bs,lH,CHO),7.60-7.35 (m,lOH,芳香族的隱H)，6.11,6.09 (2dd,lH,19-H,J = 11Hz和 18Hz),5.50 (d,lH,14-H,J =8Hz),5.00 (m,2H,20-H),4.47 (d,lH,ll-OH,J = 6Hz),3.40 (t,lH,ll-H,J =6Hz),2.37 (bs,lH,4-H),1.32,1.30 (2s,3H,15-CH3),1.03 (s,12H,18隱CH3,Si-叔丁基),0.82,0.80 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.55 (d,3H，16-CH3,J = 6Hz)。
步骤J. 14-0-([(lR,2R,5S)-5-(曱酰基-羟基-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基卜木替林+(13,23,511)非对映体
按照实施例13步骤G的方法处理14-0-([(lR,2R,5S)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-5-(曱酰基-羟基-氨基-环己基-硫基]-乙酰基}-木替林+(lS,2S,5R)非对映体(130mg,0.164mmo1)。经过滤分离沉淀，得到无色固体的14-0-([(lR,2R,5S)-5-(甲酰基-羟基-氨基)-2-轻基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体(77 mg,85。/。产率，二氯甲烷/甲醇二9/l,Rf=0.4)。
NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特另'J地)9.7,9.3(2bs,lH,NOH),8.2,7.9 (2s,lH,CHO),6.13 (dd,lH,19-H,J = HHz 和18Hz),5.53 (d,lH，14-H,J = 8Hz),5.06 (m,2H,20陽H)，4.91 (d,lH，2'-OH),4.49(d,lH,ll-OH,J = 6Hz),4.2,3.7 (2m,2H,2'-H,5'-H)，3.41 (t,lH,ll-H,J =6Hz),3.28 (m,2H,22陽H)，3.13 (m,lH,l'陽H),2.40 (bs，lH,4陽H),1.35(s,3H,15-CH3),1.06 (s,12H，18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63(d,3H，16-CH3,J = 6Hz)。 MS-ESI (m/z): 574 (顧a+),1125 (顧a+),550(M-H)-,llOl (2M-H)-。
实施例15. 14-CH[(lR,2R,3R/S)-3-(曱酰基-羟基-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S，2S,3R/S)非对映体
步骤A. 14-0-([(6R,7R)-6-羟基-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-7-基硫基]-乙酰基}-木替林+(68,78)非对映体
按照实施例1步骤Al的方法处理6,7-环氧-1,4-二氧杂-螺[4.5]癸烷(Vankar , Y.D.; Reddy M. V.; Chaudhun,N. C. r"raW謂1994,50「37人11057-11078.)(16.24 g，104 mmol)和截短侧耳素硫醇(20.5g,52 mmol)。处理后将反应混合物进行色镨法(二氧化硅，环己烷/二嗜烷=2/1),得到14-CH[(6R,7R)-6-羟基-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-7-基硫基]-乙酰
47基}-木替林+(63,73)非对映体(1^= 0.5,15.6 g,55。/。产率)，为无色非结晶 性泡沫。
丄H NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地):6.13 (dd,lH,19-H,J = 11Hz 和 18Hz),5.53 (d,lH,14-H，J = 7Hz),5.05 (m,2H,20-H),4.90
(d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62 (d,3H,16-CH3,J = 6Hz)。
步骤B. 14-0-([(lR,2R)-2-羟基-3-氧代-环己基硫基]-乙酰基)-木替林 + (13,23)非对映体
按照实施例13步骤C的方法处理14-0-([(6R,7R)-6-羟基-l,4-二氧杂 -螺[4.5]癸-7-基硫基]-乙酰基}-木替林+ (6S,7S)非对映体(15.6 g，28.4 mmol)。处理后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯= 1/1),得到14-(H[(lR,2R)-2-羟基-3-氧代-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S,2S)非对映体(R^ 0.4,3.14 g,22。/。产率)，为无色非结晶性泡沫。
工H丽R (400MHz,DMSO-d6, 5,ppm，特别地)6.13 (dd,lH,19-H,J = 11Hz 和 18Hz)，5.55 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.23 (m,lH,2'-OH),5.05 (m,2H,20隱H),4.49 (d,lH,l l-OH,J = 6Hz),4.00 (m,lH,2'隱H),3.50-3.30 (m,3H,ll-H,22-H),2.86 (m,lH,l'誦H),2.40 (bs,lH,4-H),1.35
(s,3H,15-CH3),1.06 (s,3H,18-CH3),0.80 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.61 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 529 (顧a+),1035 (2薩a+)。
步骤C. 14-CH[(lR,2R)-2-羟基-3-肟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林 + (13,23)非对映体
按照实施例13步骤D的方法处理14-0-([(lR,2R)-2-羟基-3-氧代-环 己基硫基]-乙酰基〉-木替林+ (1S,2S)非对映体(3.14 g,6.19 mmol)。处理 后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯=1/1),得到 14-0-([(lR,2R)-2-羟基-3-肟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S,2S) 非对映体(&= 0.2,1.75 g,54Q/。产率)，为无色非结晶性泡沫。
工H NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特另'J 地)10.5 (s,lH,NOH),6.13,6.12 (2dd,lH,19-H,J = 11Hz和18Hz),5.54 (d,lH,14-H,J
(m,lH,2'画OH),4.47 (m,lH,ll-H),3.50-3.20 (bs,lH,4-H),1.35,1.34
(m,lH,ll-OH),3.97
(m,2H,22陽H)，2.80 (2s,3H,15-CH3),1.05
(m,lH,2'-H),3.32 (m,lH,l'-H),2.40
(s，3H,18-CH3),0.81= 8Hz),5.33 (d,lH,2'-OH，J = 4Hz),5.05 (m,2H,20-H),4.50 (m,lH,ll-OH)，3.96 (m,lH,2'画H),3.42 (t,lH,ll画H,J = 6Hz),3.25 (m,2H,22画H),3.14 (m,lH,l'-H),2.40 (bs,lH，4-H),1.35 (s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。
步骤D. 14-CH[(lR,2R,3R/S)-2-鞋基-3-鞋基氨基-环己基硫基]-乙酰 基)-木替林+(13,28,311/8)非对映体
按照实施例13步骤E的方法处理14-0-([(lR,2R)-2-羟基-3-肟基-环 己基石危基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S)非对映体(1.75 g,3.35 mmol)。处理 后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅，乙酸乙酯/甲醇=10/1),得到 14-CK[(lR,2R,3R/S)-2-羟基-3-羟基氨基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,3R/S)非对映体(R^ 0.2,1.34 &65%产率)，为无色非结晶性泡沫。
^ NMR (400MHz，DMSO-d6, 5 ,ppm,特另'J 地)7.1 (bs,lH,NH/OH),6.12,6.11 (2dd,lH，19-H，J = 11Hz 和 18Hz),5.53 (d，lH,14画H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20画H),4.90 (m ,lH,2'-OH),4.5 (m,lH,ll陽OH),3.41 (t,lH,ll画H,J = 6Hz),3.73,3.53,3.30，3.14,3.01,2.87 (6m,5H,l'-H,2'-H,3'陽H,22-H),2.40 (bs,lH,4-H),1.35 (2s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。
步骤E. 14-0-([(lR,2R,3R/S)-3-(曱酰基-羟基-氨基)-2-羟基-环己基 硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,3R/S)非对映体
按照实施例13步骤F的方法处理14-0-([(lR,2R，3R/S)-2-羟基-3國羟 基氨基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S,2S,3R/S)非对映体(899 mg，1.72 mmol)。 经过滤分离沉淀后，得到无色固体的 14-0-([(lR,2R,3R/S)-3-(曱酰基-羟基-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林+ (1S,2S,3R/S)非对映体(724 mg,76。/。产率,二氯甲烷/甲醇二 9/l,Rf=0.5)。
工H NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特另'J地)9.6,9.9.4,9.1 (3bs,lH,NOH),8.2,7.9 (2s,lH,CHO),6.13,6.11 (2dd,lH,19-H，J = 11Hz和 18Hz),5.54 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.24 (m,lH，2'隱OH)，5.05 (m,2H,20-H),4.49 (m,lH,ll-OH)，3.86,3.60 (2m,lH,2'陽H),3.39 (t，lH,ll陽H,J = 6Hz),3.28,3.13,2.64 (3m,4H,l'-H,3 '-H,22-H),2.38 (bs,lH,4陽H),1.36(s,3H,15-CH3),1.06 (s,12H,18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 574 (顧a+),1125 (2MNa+),550 (M-H)-,llOl (2M-H)-。
实施例16. 14-CH[(lR,2R,5S)-2-轻基-5-曱氨基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林盐酸盐+(13,23,511)非对映体盐酸盐
步骤A. N-甲基-N-(环己-3-烯基)-氨基曱酸叔丁基酯
按照实施例7步骤A的方法将环己-3-烯基-氨基曱酸叔丁基酯 (Kampferer，P.; Vasella,A. //e/ve"ca C/n脂ca勿a 2004,S7，276"7S9)(3 g,15.2 mmol)和曱基碘(0.95 m1,15.2 mmol)处理1小时。处理后将反应混 合物进行色谱法(二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯=10/1),得到无色固体的标 题化合物(& = 0.22,2.04g,64。/。产率)。
丄H NMR (200MHz,CDCl3, 5 ，ppm): 5.64 (bs,2H,双键),4.17 (bs,lH,NCH),2.74 (s,3H,NCH3),2.13，1.70 (2m,6H),1.47 (s,9H,叔丁基)。
步骤B. N-曱基-N-(顺式-3,4-环氧环己基)-氨基曱酸叔丁基酯
按照实施例7步骤B的方法将N-曱基-N-(环己-3-烯基)-氨基曱酸叔
丁基酯(2 g,9.5 mmol)和3-氯过氧苯甲酸(2.2 g,70%，8.9 mmol)处理1小
时。处理后得到粗制的标题化合物(二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯=3/1,Rf =
0.25,1.70 g,79。/o产率)。
!H NMR (200MHz,CDCl3, 5 ,ppm): 4.0 (bs,lH,NCH),3.15 (bs,2H,环氧
化物),2.67 (s,3H,NCH3),2.30-1.10 (m，6H),1.45 (s,9H,叔丁基)。
步骤C. 14-0-([(lR,2R,5S)-5-(叔丁氧基羰基-曱基-氨基)-2-羟基-环 己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S，2S,5R)非对映体
按照实施例1步骤A3的方法，将1^-曱基^-(顺式-3，4-环氧环己基)-氨基曱酸叔丁基酯(1.7 g，7.5 mmol)用截短侧耳素硫醇(2.95 g,7.5 mmol) 处理。处理后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯= 2/1),得到无色固体的14-〇-{[(111，211,58)-5-(叔丁氧基羰基-曱基-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (lS,2S,5R)非对映体(Rf = 0.23,1.3 g,28。/。产率)。
& NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地):6.12 (2dd,lH,19画H,J =
5011Hz 和 18Hz),5.54 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20-H),4.9 (d,lH,2'-0H,J = 4Hz),4.47 (d,lH,ll-OH,J = 6Hz),3.97 (m,lH,5'匪H),3.70 (bs,lH,2'-H),3.42 (m,lH,l l-H),3.28 (m,2H,22-H),3.11 (m,lH,l'-H),2.62 (s,3H,NCH3),2.40 (bs,lH,4-H),1.37 (s,9H,叔丁基),1.35 (s,3H,15-CH3),1.04 (s,3H,18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d，3H,16-CH3,J = 7Hz)。
步骤D. 14-0-{[(111,211,53)-2-羟基-5-曱氨基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+(18,28,511)非对映体
按照实施例1步骤B的方法处理14-0-([(lR,2R,5S)-5-(叔丁氧基羰 基-曱基-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R)非对映 体(1.3 g,2.1 mmol)。处理后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅,二氯曱 烷/甲醇/异丙醇/水/乙酸=80/20/6/3/2),接着^M"生萃取，得到无色固体的 14-0-{[(111,211,58)-2-羟基-5-曱氨基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (13,28，511)非对映体(1^= 0.4,690 mg,63%)。
工H NMR (500MHz，DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)6.14 (dd,lH,19-H,J = 11Hz 和 18Hz),5.54 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.06 (m,2H,20-H),4.81 (bs,lH,2'-OH),4.52 (d,lH,l l隱OH,J = 6Hz),3.51 (m,lH,2'画H),3.43 (m,lH,ll陽H),3.30 (m,2H，22-H)，3.00 (m,lH,l'-H),2.63 (m,lH,5'画H),2.41 (bs,lH,4-H),2.29 (s,3H,NCH3),1.37 (s,3H,15-CH3),1.06 (s,3H，18-CH3)，0.82 (d,3H，17-CH3,J = 7Hz),0.64 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。
步骤E. 14-0-{[(1^211,58)-2-羟基-5-曱氨基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林盐酸盐+(18,23,511)非对映体盐酸盐
按照实施例1步骤C的方法处理14-0-([(lR，2R,5S)-2-羟基-5-甲氨 基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体(690 mg,1.32 mmol),得到无色固体的14-0-([(lR,2R,5S)-2-羟基-5-曱氨基-环己基硫 基]-乙酰基}-木替林盐酸盐+(18,23,511)非对映体盐酸盐(731 mg,定量的
产率)。
NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)8.65 (bs,2H,NH2+),6.14 (2dd,lH,19-H,J = 11Hz 和 18Hz),5.54 (d,lH,14匿H,J = 8Hz),5.06 (m,2H,20隱H),4.51 (d,lH,l l-OH,J = 6Hz),3.72 (m,lH，2'陽H)，3.43 (m,lH,ll-H),3.37-3.00 (m,4H，22-H,l'-H,5'-H),2.50 (s,3H,NCH3),2.40
51(bs,lH,4-H),1.36 (s,3H,15-CH3),1.06 (s,3H,18-CH3),0.82 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz)，0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 522 (MH+),556 (MCl.)。
实施例17. 14-0-([(lR,2R,5S)-5-烯丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙 酰基}-木替林盐酸盐+ (1S,2S,5R)非对映体盐酸盐
步骤A. N-烯丙基-N-(环己-3-烯基)-氨基甲酸叔丁基酯
按照实施例7步骤A的方法将环己-3-烯基-氨基曱酸叔丁基酯 (Kampferer,P.; Vasella,A. //e/ve"ca C/2z>mca爿"a 2004,S7,2764-27S9)(3 g,15.2 mmol)和烯丙基碘(1.4 ml,15.2 mmol)处理过夜。处理后将反应混合 物进行色谱法(二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯=10/1),得到无色固体标题化 合物(R严0.55,2.Og,55。/。产率)。
!H NMR (200MHz,CDCl3, 5 ,ppm): 5.60 (m,2H,双4建),5.80,5.10,3.64 (3m,5H,烯丙基),4.18 (bs,lH,NCH),2.14,1.74 (2m,6H),1.45 (s,9H,叔丁基)。
步骤B. N-烯丙基-N-(顺式-3,4-环氧环己基)-氨基甲酸叔丁基酯 按照实施例7步骤B的方法将N-烯丙基-N-(环己-3-烯基)-氨基曱酸
4又丁基酯(2 g,8.4 mmol)和3-氯过氧苯曱酸(2.2 g,70%,8.9 mmol)处理过
夜。处理后得到粗制的标题化合物(二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯=3/l,Rf =
0.31,1.90 g,89。/。产率)。
& NMR (200MHz,CDCl3, 5 ,ppm): 5.76,5.10,3.66 (3m,5H,烯丙
基)，4.04 (bs,lH,NCH),3.12 (bs，2H,环氧化物),2.30-1.20 (m,6H),1.47 (s，9H,
叔丁基)。
步骤C. 14-0-{[(111,211,53)-5-(叔丁氧基羰基-烯丙基-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体
按照实施例1步骤A2的方法将N-烯丙基-N-(顺式-3,4-环氧环己基)-氨基曱酸叔丁基酯(1.9 g,7.5 mmql)用截短侧耳素硫醇(2.95 g,7.5 mmol) 处理。处理后将反应进行色镨法(二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯=3/1-〉 1/1), 得到14-0-U(lR，2R,5S)-5-(叔丁氧基羰基-烯丙基-氨基)-2-羟基-环己基硫 基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体和截短侧耳素二硫化物的混 合物(环己烷/乙酸乙酯=1/1 ,Rf=0.21 ,2.49 g)。
& NMR (400MHz，DMSO-d6, 5 ,ppm，特别地)6.12 (2dd,lH,19-H，J =11Hz和18Hz),5.74 (m,lH,NCH2CHCH2),5.54 (d,lH,14陽H,J = 8Hz),5.05 (m,4H,20-H,NCH2CHCH2),4.87 (d,lH，2'隱OH,J = 3Hz),4.49 (d,lH，l l画OH,J = 6Hz)，3.95 (m,lH,5'-H),3.68 (bs,3H,2'-H,NCH2CHCH2),3.42 (t,lH，ll-H,J = 6Hz),3.26 (m,2H,22-H),3.09 (m,lH,l'画H),2.39 (bs,lH,4-H),1.37 (s,9H,叔丁 基),1.35 (s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz) 。 MS-ESI (m/z): 670 (顧a+),1317 (2顧a+),646 (M-H)-。
步骤D. 14-0-([(lR,2R,5S)-5-烯丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林+(13,28,511)非对映体
按照实施例1步骤B的方法处理14-0-([(lR，2R,5S)-5-(叔丁氧基羰 基_烯丙基_氨基)_2_羟基_环己基硫基]_乙酰基}_木替林+ (1S,2S,5R)非对
映体和截短侧耳素二錄i/ft物的混合物(2.4 g)。处理后将反应混合物进4亍 色谱法(二氧化硅，二氯曱烷/曱醇/异丙醇/水/乙酸=80/20/6/3/2),接着碱 性萃取，得到无色固体的14-0-([(lR,2R,5S)-5-烯丙基氨基-2-羟基-环己 基硫基]-乙酰基卜木替林+ (1S,2S,5R)非对映体(R^ 0.5,250 mg)。
力NMR (500MHz,DMSO画d6，5,ppm,特别地)6.14 (dd,lH,19-H,J = 11Hz和18Hz),5.82 (m,lH,NCH2CHCH2),5.55 (d,lH,14隱H，J = 8Hz),5.10 (m，4H,20-H,NCH2CHCH2)，4.77 (m,lH,2'-OH),4.51 (d,lH,l l-OH，J = 6Hz),3.50画3.10 (m,6H,2'-H,ll-H,22-H,NCH2CHCH2),2.99 (m，lH,l'-H),2.68 (m,lH,5'-H),2.40 (bs,lH,4國H),1.37 (s,3H，15-CH3),1.06 (s,3H,18-CH3),0.82 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 548 (MH+),546 (M-H) 582 (MCl-)。
步骤E. 14-0-U(lR,2R,5S)-5-烯丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基)-木替林盐酸盐+(18,28,511)非对映体盐酸盐
按照实施例1步骤C的方法处理14-GK[(lR,2R,5S)-5-烯丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基卜木替林+ (1S,2S,5R)非对映体(250 mg,0.46 mmol),得到无色固体的14-〇-{[(lR,2R,5S)-2-羟基-5-乙基氨基-环己基硫 基]-乙酰基}-木替林盐酸盐+ (1S,2S,5R)非对映体盐酸盐(273 mg,定量的 产率,未校正的)。
力NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)8.85 (bs,2H,NH2+),6.13
53(2dd,lH,19-H,J = 11Hz 和 18Hz),5.87 (m,lH,NCH2CHCH2),5.55 (d,lH,14隱H,J = 8Hz),5.47，5.37 (2d,2H,NCH2CHCH2，J = 17Hz 和 10Hz),5.06 (m,2H,20-H),4.51 (d,lH,ll画OH，J = 6Hz),3.72 (m,lH，2'-H),3.56 (d，2H,NCH2CHCH2,J = 6Hz),3.43 (t,lH,ll画H,J = 6Hz),3.34 (m,2H，22-H),3.13 (m,2H,l'-H,5'-H),2.40 (bs,lH,4隱H),1.36
(s,3H,15-CH3),1.06 (s,3H,18-CH3),0.81 (d,3H，17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 548 (MH+),582 (MCl隱)。
实施例18. 14-0-([(lR,2R,5S)-2-羟基-5-(2-甲氧基-乙基氨基)-环己基 硫基]-乙酰基}-木替林盐酸盐+ (1S,2S,5R)非对映体盐酸盐
步骤A. N-(2-曱氧基-乙基)-N-(环己-3-烯基)-氨基甲酸叔丁基酯
按照实施例7步骤A的方法将环己-3-烯基-氨基曱酸叔丁基酯 (Kampferer,P.; Vasella,A. //e/ve"ca C/n>m'ca爿cto 2004,S7，27^/扁27S9)(3 g,15.2 mmol)和2-溴乙基甲基醚(1.43 ml,15.2 mmol)处理过夜。处理后将 反应混合物进行色谱法(二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯=7/1)，得到无色固体 的标题化合物(R产0.33,1.2 g,31。/。产率)。
& NMR (200MHz,CDCl3, 5 ，ppm): 5.61 (m,2H,双键),4.10 (bs, 1 H，NCH),3.50-3.15 (m,7H,NCH2CH2OCH3),2.15 ， 1.72 (2m,6H), 1.47 (s,9H,叔丁基)。
步骤B. N-(2-曱氧基-乙基)-N-(顺式-3,4-环氧环己基)-氨基曱酸叔丁
基酯
按照实施例7步骤B的方法将N-(2-甲氧基-乙基)-N-(环己-3-烯基)-氨基甲酸^又丁基酯(1.2 g,4.7 mmol)和3-氯过氧苯曱酸(1.2 g,70%，4.87 mmol)处理过周末。处理后得到粗制的标题化合物(二氧化硅,环己烷/乙 酸乙酯=3/l，Rf= 0.33,1.08 g,85。/o产率)。
力画R (200MHz，CDCl3, 5 ,ppm): 3.94 (bs，lH,NCH),3.50画3.05 (m,9H,NCH2CH2OCH3,环氧化物),2.30-1.20 (m,6H),1.45 (s,9H,叔丁基)。
步骤C. 14-0-([(lR,2R,SS)-S-(叔丁氧基羰基-(2-曱氧基-乙基)-氨 基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S，5R)非对映体
按照实施例1步骤A2的方法将N-(2-曱氧基-乙基)-N-(顺式-3,4-环氧环己基)-氨基曱酸叔丁基酯(1.08 g,4.0 mmol)用截短侧耳素石克醇(1.57 g,4.0 mmol)处理。处理后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅，环己烷/乙 酸乙酯=1/2),得到14-0-{[(111,211,58)-5-(叔丁氧基羰基-(2-甲氧基-乙基)-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (lS,2S,5R)非对映体(Rf = 0.5,500 mg,19o/o产率)的无色固体。
NMR (400MHz,DMSO-d6， 5 ,ppm,特别地)6.13 (2dd,lH,19-H,J = 11Hz 和 18Hz),5.54 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m,2H,20-H),4.88 (d,lH,2'-OH,J = 4Hz),4.48 (d,lH,ll画OH,J = 6Hz),3.85 (m,lH,5'画H),3.68 (bs,lH,2'-H),3.42 (t，lH,ll陽H,J = 6Hz),3.35隱3.05
(m，lOH,22-H,NCH2CH2OCH3,r-H),2.40 (bs，lH,4-H),1.38 (s,9H,叔丁 基),1.35 (s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。
步骤D. 14-0-([(lR，2R,5S)-2-羟基-5-(2-甲氧基-乙基氨基)-环己基硫 基]-乙酰基卜木替林+ (1S,2S,5R)非对映体
按照实施例1步骤B的方法处理14-0-([(lR,2R,5S)-5-(叔丁氧基羰 基-(2-曱氧基乙基)-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体(500 mg,0.75 mmol)。处理后将反应混合物进行色谱 法(二氧化硅,二氯曱烷/曱醇/异丙醇/水/乙酸=80/20/6/3/2),接着碱性萃 取，得到无色固体的14-CK[(lR,2R，5S)-2-羟基-5-(2-曱氧基-乙基氨基)-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (lS,2S,5R)非对映体(Rf = 0.6,330 mg,78%)。
TH NMR (500MHz,DMSO-d6, 5,ppm,特别地)6.14 (dd,lH,19画H,J = 11Hz 和 18Hz)，5.54 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.06 (m,2H,20画H),4.74 (m,lH,2'陽OH),4.51 (2d,lH,1 l隱OH,J = 6Hz),3.50-3.20
(m,9H, 11 -H,2'-H,22-H，NCH2CH2OCH3)，2.97 (m， 1 H, 1 '匪H),2.63
(m，3H，5'-H,NCH2CH2OCH3)，2.40 (bs, 1 H，4-H), 1.37 (s,3H， 15-CH3), 1.06 (s,3H,18-CH3),0.82 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。
步骤E. 14-0-U(lR,2R,5S)-2-羟基-5-(2-曱氧基-乙基氨基)-环己基硫 基]-乙酰基}-木替林盐酸盐+ (1S,2S,5R)非对映体盐酸盐
按照实施例1步骤C的方法处理14-0-([(lR,2R,5S)-2-轻基-5-(2-甲氧基-乙基氨基)-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体 (330 mg,0.58mmo1),得到14-0-([(lR,2R,5S)-2-羟基-5-(2-甲氧基-乙基氨 基)-环己基硫基]-乙酰基卜木替林盐酸盐+ (1S,2S,5R)非对映体盐酸盐 的无色固体(355 mg定量的产率,未校正的)。
!H NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特別地)8.65 (bs,2H,NH2+),6.13 (2dd,lH,19-H,J = 11Hz和 18Hz),5.55 (d,lH,14國H,J = 8Hz),5.06 (m,2H,20-H),4.51 (d,lH,l l-OH,J = 6Hz),3.71 (m,lH,2'-H),3.57 (m,5H,NCH2CH2OCH3),3.42 (t,lH,ll-H,J = 6Hz),3.33
(m,2H,22-H),3.20-3.00 (m,4H,r-H,5'-H,NCH2CH2OCH3),2.40 (bs,lH,4-H),1.36 (s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3，J = 7Hz),0.63 (2d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 566 (固+),600 (MCr)。
实施例19. 14-0-([(lR,2R,4R"-2-羟基-4-(2-羟基-乙基氨基)-环己基 硫基]-乙酰基}-木替林盐酸盐+ (1S,2S,4S"非对映体盐酸盐
步骤A. 14-0-([(lR,2R,4R/S)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-(2-羟基 -乙基氨基)-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,4R/S)非对映体
向实施例13步骤C的14-0-([(lR,2R)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧 基)_4-氧代-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S)非对映体(1.50 g,2.01 mmol)于20 ml 二氯甲烷的溶液中，加入乙醇胺(0.12 m1,2.01 mmol)和4太 酸异丙酉旨(titamum(IV) lsopropoxide)(0.7 m1,2.52 mmol),并在室温搅拌2 小时。将形成的反应混合物用氰基硼氢化钠(126 mg,2 mmol)在室温处理 过夜，用另外的二氯曱烷稀释，用NaHC03溶液萃取。有机层经硫酸钠 干燥和过滤。将滤液进行色谱法(二氧化硅,二氯曱烷/曱醇=30/1)，得到 14-0-{[(111,211,411/8)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-(2-羟基-乙基氨基)-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (lS,2S,4R/S)非对映体(Rf = 0.3,230 mg，14y。产率)。
& NMR (500MHz,CDCl3, 5,ppm,特别地)7.8-7.30 (m,lOH,芳香族 的-H),6.47 (m,lH,19-H),5.75,5.69 (2d,lH,14-H,J = 8Hz),5.40-5.15 (m,lH,20-H),4.04,3.65 (2m,lH,2'陽H),3.64,3.51 (2m，2H,NCH2CH2OH),3.36 (m,lH,ll-H),2.74,2.54 (2m,2H,NCH2CH2OH),2.11 (bs,lH,4画H),1.44,1.45 (2s,3H,15-CH3),1.17,1.16 (s,3H,18-CH3),1.08 (s,9H,Si-叔丁基),0.88 (2d,3H,17-CH3),0.75-0.65 (m,3H,16-CH3)。 MS隱ESI (m/z): 790 (MH+),824
56(Mcr)。
步骤B. 14-0-([(lR,2R,4R"-2-羟基-4-(2-羟基-乙基氨基)-环己基硫 基]-乙酰基}-木替林+(18,23,48*)非对映体
将14-0-{[(111,211,411/3)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-(2-羟基-乙 基氨基)-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S，2S,4R/S)非对映体(230 mg,0.29 mmol)于15 ml乙腈的溶液用HF(40。/。水溶液,2滴)处理，在室温 搅拌过夜。将反应加入NaHC03溶液，用二氯甲烷萃取。将合并后的有 机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。色语法(二氧化硅,二氯甲烷/ 曱醇=6/1)后，得到标题化合物(R产0.4,50 mg,3P/。产率)。
丄H NMR (400MHz，CDCl3， 5 ,ppm,特别地):6.48 (dd,lH,19画H,J = 11Hz 和 17Hz),5.76,5.68 (2d,lH,14隱H,J = 8Hz),5.40-5.15
(m, 1 H,20-H),3.66 (t,2H,NCH2CH2OH, J = 5Hz),3.50-3.15
(m,4H,2'-H,l 1-H,22H),2.80 (m,2H,NCH2CH2OH),2.63 (m,2H, 1 '誦H,4'-H),2.11 (bs, 1 H，4-H), 1.46 (s,3H, 15-CH3)， 1.18
(s,3H,18-CH3),0.89 (d,3H,17-CH3),0.73 (2d,3H,16-CH3)。 MS-ESI (m/z): 552 (MH+)。
步骤C. 14-0-([(lR,2R,4R"-2-羟基-4-(2-羟基-乙基氨基)-环己基硫 基]-乙酰基)-木替林盐酸盐+ (1S,2S,4S"非对映体盐酸盐
按照实施例1步骤C的方法处理14-0-{[(111,211,411*)-2-羟基-4-(2-羟基-乙基氨基)-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S，2S,4S"非对映体 (50mg,0.091 mmol),得到14-0-{[(111,211,411*)-2-羟基-4-(2-羟基-乙基氨 基)-环己基硫基]-乙酰基}-木替林盐酸盐+ (1S,2S,4S"非对映体盐酸盐 (43 mg，80o/o产率)的无色固体。
^ NMR (500MHz,CDCl3, 5 ,ppm,特别地)6.46 (dd，lH,19-H,J = 11Hz和17Hz),5.76 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.37 (d，lH,20-H,J=l lHz),5.23 (d,lH,20-H,J = 17Hz),3.95 (m,2H,NCH2CH2OH,J = 5Hz),3.58 (m,lH,2'-H),3.40画3.10 (m,5H,1 l-H,22H,NCH2CH2OH),2.72
(m,lH,l'-H),2.11 (bs,lH,4画H),1.46 (s,3H，15-CH3)，l. 18 (s,3H,18-CH3),0.89 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.73 (d,3H,16-CH3,J=7Hz) 。 MS隱ESI (m/z): 552 (MH+),586 (MCr)。
57实施例20. 14-CH[(lR,2R，4R"-4-环己基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基卜木替林盐酸盐+ (1S,2S,4S"非对映体盐酸盐
步骤A. 14-0-{[(111，211,411*)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-(2-羟基-乙基氨基)-环己基硫基]-乙酰基卜木替林+ (1S,2S,4S"非对映体
按照实施例19步骤A的方法，将实施例13步骤C的14-0-([(lR,2R)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-氧代-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S,2S)非对映体(1.50 g,2.01 mmol)用环己胺(0.23 ml,l.Olmmol)处理。处理后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅,二氯甲烷/曱醇=30/1),得到14-0-([(lR,2R,4R"-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-环己基氨基环己基硫基]乙酰基)木替林+ (lS,2S,4S"非对炚体(Rt - 0.13,150mg,9o/o产率)。
!H NMR (500MHz,CDCl3， 5 ,ppm,特别地)7.8-7.3 (m,10H,芳香族的-H),6.48 (dd,lH,19画H,J = 11Hz 和 17Hz),5.76 (d,lH,14-H,J =8Hz),5.40画5.15 (m,lH,20-H),3.62 (m,lH,2'-H),3.40國3.10
(m，3H,ll画H,22-H),2.77 (m,lH,l'-H),2.11 (bs,lH,4隱H),1.46
(s,3H,15-CH3),1.16 (s,3H,18-CH3),1.07 (s,9H，Si-叔 丁 基),0.88(2d,3H,17-CH3),0.74,0.73 (2d，3H,16-CH3)。 MS-ESI (m/z): 828 (MH+),862
(Mcr)。
步骤B. 14-0-{[(111,211,411*)-4-环己基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,4S"非对映体
按照实施例19步骤B的方法将14-0-([(lR,2R,4R"-2-(叔丁基-二苯基_硅烷氧基)_4-环己基氨基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S，2S,4S"非对映体(IOO mg,0.121 mmol)用HF(40。/。水溶液,30滴)处理5小时。处理后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅,二氯曱烷/曱醇=10/1),得到标题化合物(&= 0.13,23 mg,32。/。产率)。
^ NMR (500MHz，CDCl3, 5 ,ppm,特别地):6.46 (dd，lH,19-H,J =11Hz 和 17Hz),5.75 (m,lH,14-H),5.40-5.15 (m,lH,20-H),3.49(m,lH,2'-H),3.35 (m,lH,ll-H), AB画系統(Va = 3.30,vB = 3.20,22画H,J =15Hz),3.01 (m,lH,4'-H),2.67 (m,lH,l'-H) 2.09 (bs,lH,4-H),1.45(s,3H,15-CH3),1.16 (s,3H,18-CH3),0.87 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.72(d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 591 (MH+)。步骤C. 14-0-([(lR,2R,4R"-4-环己基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基L木替林盐酸盐+(13,23,43*)非对映体盐酸盐
按照实施例1步骤C的方法处理14-0-([(lR,2R,4R"-4-环己基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,4S"非对映体(23 mg,0.039mmol),得到无色固体的14-0-([(lR,2R,4R"-4-环己基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林盐酸盐+ (1S,2S,4S"非对映体盐酸盐(26 mg,定量的产率,未校正的)。
NMR (500MHz,CDCl3, 5 ,ppm,特别地)9.3 (bs,2H,NH2+),6.46(dd,lH,19-H,J = 11Hz 和 17Hz),5.75 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.38(d,lH，20-H,J——=——12IIz),5.22——(d,lII,20-II;J = 17IIz),3.50-3.00(m,6H,2'國H,ll-H,22H,NcHex),2.65 (m,2H,l'-H,3a'-H),2.10 (bs，lH,4-H),1.45(s,3H,15-CH3),1.18 (s,3H,18-CH3),0.88 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz)，0.73(d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 591 (MH+),624 (MC1一)。
实施例21. 14-0-{[(限,2!1,411*)-4-环丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S,2S,4S"非对映体
步骤A. 14-0-([(lR，2R,4R"-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-环丙基氨基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,4S"非对映体
按照实施例19步骤A的方法，让实施例13步骤C的14-CH[(lR,2R)-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-氧代-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S)非对映体(750 mg,l.Ol mmol)与环丙胺(0.07ml,l.Ol mmol)于40 ml二氯曱烷中反应。在用氰基硼氢化钠处理后，加入乙醇(0.7ml)，在室温将混合物搅拌过夜。处理后将反应混合物进行色语法(二氧化硅,二氯甲烷/曱醇=30/1),得到14-0-([(lR,2R,4R"-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-4-环丙基氨基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+(lS,2S,4S承)非对映体(Rf^ 0.35,283 mg,36。/o产率)。
H NMR (500MHz,DMSO-d6, 5,ppm,特别地)7.65-7.35 (m,lOH,芳香族的-H),6.12 (m,lH，19-H)，5.5.2,5.51 (2d,lH,14-H,J = 8Hz),5.00(m,lH,20-H),4.50 (t,lH,l l-OH,J = 5.5Hz),3.94 (m,lH，2'画H),3.41(m,lH,ll-H),3.05-2.80 (m,4H,22-H,l'隱H,4'-H),2.39 (bs,lH,4-H),1.86 (m,lH,环丙基(cPr)),1.33 (2s,3H,15-CH3),1.12 (s,12H,18陽CH3,Si画叔丁基),0.81(d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.57,0.56 (2d,3H,16-CH3,J = 7Hz),0.25，0.06 (2m,4H:环丙基)。MS-ESI (m/z): 786 (MH+),784 (M-H)一。
步骤B. 14-0-([(lR,2R,4R"-4-环丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+(13,28,43*)非对映体
按照实施例13步骤G的方法，将14-0-([(lR,2R,4R"-2-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)_4_环丙基-氨基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+
(1S,2S,4S^非对映体(223 mg,0.284 mmol)用氟化四丁铵处理过夜。处理后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅,二氯曱烷/甲醇=10/1),得到标题化合物(Rf^ 0.2,10 mg,6。/。产率)。
& NMR (500MHz,DMS〇-d6, 5,ppm,特别地)6.13 (dd,lH,19-H,J =HHz 禾口 17Hz),5.50 (d,lH,14-H,J = 7Hz),5.05 (m,lH，20隱H)，4.87(m,lH,2'隱OH),4.50 (d,lH,ll-OH,J = 6Hz),3.55-3.20
(m,4H,22-H,2'-H,ll-H),2.50 (m,2H,l'-H,4'-H),2.40 (bs,lH,4-H),2.01 (m,lH，环丙基),1.35 (s,3H,15-CH3),1.04 (s，3H,18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3,J =7Hz),0.62 (d,3H,16-CH3,J = 6Hz),0.32,0.15 (2m,4H,环丙基)。MS-ESI (m/z):548 (MH+),1095 (2MH+)，1117 (2固a+),582 (MCr)。
实施例22. 14-CH[(lR,2R,5S"-4-环丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林盐酸盐+ (1S，2S,5R"非对映体盐酸盐
步骤A. 14-0-([(lR,2R)-2-羟基-4-氧代-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S,2S)非对映体和14-0-U(lR,2R)-2-羟基-5-氧代-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+(18,28)非对映体
将14-0-{[(711,811)-7-羟基-1,4-二氧杂-螺[4.5]癸-8-基硫基]-乙酰基}-木替林+ (7S,8S)非对映体以及14-0-([(7R,8R)-8-羟基-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸_7-基硫基]-乙酰基}-木替林+ (7S,8S)非对映体(3.96 g,7.19 mmol)溶于50 ml 二噶烷中，并在室温用4N HC1 (5 m1,20 mmol)处理6小时。将反应混合物在减压下浓缩，加入NaHC03溶液，用乙酸乙酯萃取3次。有机层经硫酸钠干燥和过滤。将滤液在减压下浓缩并进行色谱法(二氧化硅，环己烷/二哺烷=2/1)，得到标题化合物的混合物(Rf: 0.30,860 mg,24%产率)。
& NMR (500MHz,DMSO-d6， 5 ,ppm,特另'J 地)6.13(m,lH，19-H),5.56,5.54 (2d，lH,14-H,J = 8Hz),5.38,5.32 (2m,lH,2'-OH),5.05(m,2H,20-H),4.50 (d,lH,ll隱OH,J = 5Hz),3.95,3.83 (2m,lH,2'-H),3.50-3.20 (m,3H,ll-H,22画H),3.17,3.07 (2m,lH,r-H),2.40 (bs,lH,4-H),1.35,1.33 (2s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.81 (d，3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63,0.62 (2d，3H,16-CH3)。 529 (画a+),505 (M画H)-。
步骤B. 14-0-([(lR,2R,5S"-5-环丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林+ (1S,2S,4R"非对映体和14-0-([(lR,2R,4S"-4-环丙基氨 基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基卜木替林+ (1S,2S,4R"非对映体
按照实施例19步骤A的方法将14-0-([(lR,2R)-2-羟基-4-氧代-环己 羞硫基]-乙酖基)-木替林+ (1S S)非对映体和14-0-{[(1]^ ^)- -羟基-5-氧代-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S)非对映体(250 mg,0.493 mmol)于15ml二氯曱烷中与环丙胺(0.03 m1,0.493 mmol)反应。在用氰基 硼氢化钠处理后，加入乙醇(0.7ml),在室温将混合物搅拌过夜。处理后 将反应混合物进行色谙法(二氧化硅,二氯甲烷/曱醇=20/1),得到 14-CH[(lR,2R,5S"-4-环丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林 + (lS,2S,5R"非对映体(a)(二氯曱烷/甲醇二 10/l,Rf = 0.22,34 mg,13。/o产 率)和14-0-([(lR,2R,4S"-4-环丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木 替沐+ (lS,2S,4R"非对映体(b)(二氯曱烷/曱醇10/l,Rf = 0.13,26 mg，4。/。产率)。
(a) : }H NMR (500MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地):6.13 (m,lH,19-H,J =11 和 18Hz),5.53 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.06 (m,lH,20-H),4.67 (t,lH，2'-OH),4.47 (d,lH,ll-OH,J = 6Hz),3.50-3.20 (m,4H,11隱H,2'画H,22-H) 2.92 (m,lH,r-H),2.71 (m,lH,5'-H),2.39 (bs,lH，4隱H),1.96 (m,lH,环丙 基),1.36 (s,3H,15-CH3),l,05 (s,3H,18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz),0.32,0.16 (2m，4H,环丙基)。MS-ESI (m/z): 548 (MH+),546 (M-H)-。
(b) : & NMR (500MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)6.13 (m,lH,19-H,J =11 和 18Hz)，5.54 (d,lH,14-H,J=8Hz),5.05 (m,lH,20画H),4.70 (d，lH,2'-OH; J = 5Hz),4.47 (d,lH,l l-OH,J = 6Hz),3.68 (m,lH,2'-H),3.45-3.15 (m,3H,11画H,22-H) 2.86 (m,lH,4'-H),2.71 (m,lH,r-H)，2.39 (bs，lH,4-H),1.96 (m,lH,环丙基),1.35 (s,3H,15隱CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.81(d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62 (d，3H，16-CH3,J =
617Hz),0.32,0.15 (2m,4H,环丙基)。MS-ESI (m/z): 548 (MH+),546 (M-H).。
步骤C. 14-CH[(lR,2R,5S"-5-环丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林盐酸盐+(18,23,511*)非对映体盐酸盐
按照实施例1步骤C的方法处理14-0-([(lR,2R,5S"-4-环丙基氨基 -2-羟基-环己基疏基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R"非对映体(34 mg,0.062 mmo1),得到14-0-([(lR,2R,5R"-4-环丙基氨基-2-羟基-环己基 硫基]-乙酰基)-木替林盐酸盐+ (1S,2S，5S"非对映体盐酸盐的无色固体 (24 mg,66Q/o产率)。
H NMR (500固z,DMSO誦d6, 5,ppm,特别地)6.13 (m,lH,19-H，J = 11 和 18Hz),5.55 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.05 (m,lH,20-H),5.00 (m,lH,2'画OH),4.54 (d,lH,ll-OH,J = 6Hz),3.66 (m,lH,2'國H),3.45画3.05 (m,5H,ll陽H,22-H,l'-H,5'醫H),2.41 (bs,lH,4-H),1.36 (s,3H,15-CH3),1.06 (s,3H,18-CH3),0.82 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz)，0.63 (m,7H,16-CH3，环丙基)。 MS-ESI (m/z): 548 (固+),582 (MCT)。
实施例23. 14-CK[(lR,2R,4S"-4-环丙基氨基-2-羟基-环己基硫 基]-乙酰基}-木替林盐酸盐+ (1S,2S,4R"非对映体盐酸盐
4姿照实施例1步骤C的方法，处理实施例21步骤B的 14-0-([(lR,2R,4S承)-4陽环丙基氨基隱2-羟基-环己基硫基]-乙酖基)-木替林 + (lS,2S,4R"非对映体(10mg,0.018 mmol),得到无色固体的标题化合物 (20 mg,定量的产率,未校正的)。
& NMR (500MHz,DMSO-d6, 5,ppm,特别地)8.6 (bs,2H,NH2+),6.13 (m,lH,19-H,J = 11 和 18Hz),5.55 (d,lH,14-H,J=8Hz),5.26 (m,lH,2'-OH),5.05 (m,lH,20隱H),4.52 (d,lH，l l-OH,J = 6Hz),3.93 (m,lH,2'画H),3.45画3.20 (m,4H,1 l-H,22陽H,4'-H),2.95 (m,lH,l'-H),2.64 (m,lH, 环丙基),2.40 (bs,lH,4-H),1.36 (s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.74 (m,4H,环丙基),0.62 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 548 (MH+),582 (MCr)。
实施例24. 14-0-U(lR,2R,5R"-2-羟基-5-吗啉-4-基-环己基硫基]-乙 酰基]-木替林盐酸盐+ (1S,2S,5S"非对映体盐酸盐
62步骤A. 14-0-U(lR,2R,5R"-2-羟基-5-吗啉-4-基-环己基硫基]-乙酰 基)-木替林+ (1S,2S,SS^非对映体和14-CH[(lR,2R,SS"-2-羟基刁-吗啉 _4-基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R"非对映体
按照实施例19步骤A的方法，让实施例22步骤A的 14-0-([(lR，2R)-2-羟基-4-氧代-环己基硫基]-乙酰基)-木替林+ (1S,2S) 非对映体和14-0-([(lR,2R)-2-羟基-5-氧代-环己基硫基]-乙酰基}-木替林 + (1S,2S)非对映体(270 mg,0.533 mmol)与吗啉(0.05 m1,0.533 mmol)在10 ml二氯甲烷中反应。在用氰基硼氢化钠处理后，加入乙醇(0.6 ml),在 室温将混合物搅拌过夜。处理后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅,二 氯甲烷/曱醇=20/1),得到14-CH[(lR,2R,5R"-2-羟基-5-吗淋-4-基-环己 基硫基]-乙酰基}-木替林+ (lS,2S,5S"非对映体(a)(二氯甲烷/甲醇二 10/l,Rf= 0.32,23 mg,7。/。产率)和14-0-([(lR,2R,5S"-2-羟基-5-吗啉-4-基 -环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (lS,2S,5R"非对映体(b)(二氯曱烷/甲醇 =10/l,Rf= 0.27,40 mg,13。/。产率)。
(a) : & NMR (500MHz,CDCl3, 5 ,ppm，特另'J地)6.47 (m,lH,19-H),5.77,5.75 (2d,lH,14-H,J = 8Hz),5.35 (dd,lH,20-H,J = 3和 11Hz),5.21 (d,lH,20陽H,J = 17Hz),3.70 (s,4H,吗啉),3.40-3.15 (m,4H,2'-H,ll-H,22H),2.53 (m,5H,l'-H,吗啉),2.10 (bs,lH,4-H),1.45 (s,3H,15-CH3),1.17 (s,3H,18-CH3),0.87 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.73,0.72 (2d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 578 (MH+),600 (顧a+),576 (M-H)-， 612(MCr)。
(b) : & NMR (500MHz,CDCl3, 5 ，ppm,特另'J地)6.47 (m,lH,19-H),5.77,5.75 (2d,lH,14-H,J = 8Hz),5.40誦5.15 (m,2H,20-H),3.70 (s,4H,吗啉),3.47 (m,lH，2'-H)，3.35 (m,lH,l l-H),3.22 (m,2H，22-H),2.98 (m,lH,l'-H),2.54,2.45 (2m,4H, 吗 啉 ),2.10 (bs,lH,4-H),1.45 (s,3H,15-CH3),1.17 (s,3H,18-CH3),0.88 (d,3H，17-CH3，J = 6Hz),0.72 (d,3H，16-CH3,J = 7Hz) 。 MS画ESI (m/z): 578 (MH+),600 (MNa+),576 (M-H)-,612 (MCr)。
步骤B. 14-CK[(lR,2R,5R"-2-羟基-5-吗啉-4-基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林盐酸盐+ (1S,2S,SS"非对映体盐酸盐
按照实施例1步骤C的方法处理14-0-{[(lR,2R,5R*)-2-羟基-5-吗啉
63-4-基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5S"非对映体(10 mg,0.017 mmol),得到14-0-([(lR,2R,5R"-2-羟基-5-吗啉-4-基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林盐酸盐+ (1S,2S,5S"非对映体盐酸盐的无色固体(20 mg,定
量的产率,未校正的)。
NMR (500MHz,CDCl3, 5 ,ppm,特别地)13 (bs,lH,NH+),6.47 (m,lH，19-H),5.78,5.76 (2d,lH,14-H,J = 9Hz),5.36 (dd,lH,20-H,J = 4和 11Hz),5.23 (d,lH,20画H; J = 17Hz),4.40，3.98 (2bs,4H,吗啉),3.45-3.20 (m,4H,2'-H,ll-H,22-H),2.91,2.56 (2m，5H,吗啉,l'-H),2.11 (bs,lH,4-H),1.46 (s,3H, 15-CH3), 1.20,1.19 (2s,3H, 18-CH3),0.89 (d，3H, 17-CH3， J = 7Hz),0.74,0.73 (2d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS画ESI (m/z): 578 (MH+),600 (顧a+),612 (MCr)。
实施例25. 14-CK[(lR,2R,5S"-2-羟基-5-吗啉-4-基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林盐酸盐+ (1S,2S,5R"非对映体盐酸盐
3姿照实施例1步骤C的方法处理实施例24步骤A的 14-CH[(lR,2R,5S"-2-羟基-5-吗啉-4-基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R"非对映体(26 mg,0.045 mmol),得到无色固体标题化合物(15 mg,54。/。产率)。
!R NMR (500MHz,CDCl3, 5 ,ppm,特别地)12.8 (bs,lH,NH+),6.47 (m,lH,19-H)，5.75 (m,lH,14-H),5.40画5.15 (m,2H,20-H)，4.40,3.98 (2bs,4H, 吗啉,2'-H),3.50-3.15 (m,6H,5'-H,ll-H,22-H,吗啉),2.98 (m,2H,吗啉),2.11 (bs,lH, 4-H),1.46 (s,3H,15-CH3),1.19 (s,3H,18-CH3)，0.89 (d,3H,17-CH3, J =7Hz),0.74 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz) 。 MS-ESI (m/z): 578 (MH+)，600 (顧a+),612 (MCr)。
实施例26. 14-0-([(lR,2R,5S)-5-氨基-2-鞋基-环己基硫基]-乙酰 基}-19,20-二氢-木替林盐酸盐+ (1S,2S,5R)非对映体盐酸盐
步骤A. 14-0-([(lR,2R,5S)-5-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基硫 基]-乙酰基}-19,20-二氢-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体
向实施例1步骤A的14-0-([(lR,2R,5S)-5-叔丁氧基羰基氨基-2-羟 基画环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S，5R)非对映体(1 g,1.65 mmol) 于20ml乙醇的溶液中，加入把/炭(10%,515 mg,0.48 mmol),并在室温氢化处理过夜。将反应混合物用二氯甲烷处理，过滤，在减压下浓缩滤
液至干，得到 14-0-([(lR,2R，5S)-5-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基 硫基]-乙酰基}-19,20-二氢-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体的无色固体(1 g 定量的产率)。
MS-ESI (m/z): 632 (画a+)。
步骤B. 14-0-([(lR,2R,5S)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-19,20-二氲-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体
按照实施例1步骤B的方法处理14-0-([(lR,2R,5S)-5-叔丁氧基羰基 氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-19,20-二氲-木替林+ (1S,2S,5R)非对 映体(l g,1.64mmo1)。处理后将反应混合物进行色谱法(二氧化硅，乙酸乙 酉旨/曱醇/35%氨溶液=33/66/1),得到无色固体的14-0-{[(lR,2R,5S>5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-19,20-二氢-木替林+ (1S,2S,5R)非对 映体(Rf = 0.35,5卯mg,7P/o产率)。
丄H NMR (400MHz，DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)5.51 (d,lH,14腸H,J = 8Hz),4.74 (bs,lH,2'誦OH),4.37 (m,lH,ll-OH),3.49 (m,lH,2'匿H),3.45-3.15 (m,3H,ll-H,22-H),3.00 (m,lH，l'-H),2.82 (m,lH,5'-H),2.35 (bs,lH,4-H)，1.34 (s,3H,15-CH3),0.85 (s,3H，18-CH3),0.80 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (m,6H,16-CH3,20-H)。
步骤C. 14-0-([(lR,2R,5S)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-19,20-二氬-木替林盐酸盐+ (1S,2S,5R)非对映体盐酸盐
按照实施例1步骤C的方法处理14-0-([(lR,2R,5S)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-19,20-二氬-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体(590 mg,1.16 mmol)，得到无色固体的14-0-([(lR,2R,5S)-5-氨基-2-羟基-环己 基硫基]-乙酰基}-19,20-二氬-木替林盐酸盐+ (1S,2S,5R)非对映体盐酸 盐(566 mg,89。/。产率)。
& NMR (500MHz,DMSO-d6，5,ppm,特别地)7.9 (bs,3H,NH3+),5.52 (d,lH，14-H,J = 8Hz),3.80-3.00 (m,6H，2'-H,11画H,22画H,1'画H,5'-H),2.35 (bs,lH，4陽H),1.35 (s,3H,15-CH3),0.85 (s,3H,18-CH3),0.80 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (m,6H，16-CH3,20-H)。 MS画ESI (m/z): 510 (MH+),544 (MCl.)。实施例27.14-0-([(lR,2R,5S)-5-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙 酰基}-19,20-二氬-木替林盐酸盐+ (1S,2S,5R)非对映体盐酸盐 步骤A. 19,20-二氬-截短侧耳素硫醇将19,20- 二氬-截短侧耳素甲苯石黄酸酯(Egger,H.; Reinshagen,H. Jow72"/ 0/j"^w"cs 1976,29'915-927.)(11,5 g,22.2 mmol)于50 ml丙酮 中的溶液在回流下用為t脲(1.69 g,22.2 mmol)处理1.5小时。将反应混合 物在减压下蒸发至干，用乙醇溶解。溶液中加入溶于20ml水和100ml 乙酸乙酯的焦亚硫酸钠(4.57 g,24.0 mmol)。将二相混合物在剧烈搅拌下 回流1.5小时。冷却至室温后，分离相层，水相用乙酸乙酯萃取3次。 将合并后的有机层经硫酸钠干燥，过滤，并在减压下蒸发溶剂。色谱法 (二氧化珪,环己烷/乙酸乙酯=2/1)后，得到19,20-二氢-截短侧耳素硫醇 (环己烷/乙酸乙酯=4/3,Rf = 0.24,3 g,34。/o产率)。& NMR (500MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特別地):5.53 (d,lH，14-H,J = 8Hz),4.40 (d,lH,ll画OH,J = 6Hz),3.36 (t,lH,ll-H,J = 6Hz),3.25 (m,2H,22-H),2.85 (t,lH,SH,J = 8Hz),2.38 (bs,lH,4隱H),1.37 (s,3H,15-CH3),0.87 (s,3H,18-CH3),0.83 (d,3H,17-CH3，J = 7Hz),0.65 (m,6H,16-CH3，20-H)。步骤B. 14-0-([(lR,2R,5S)-5-(叔丁氧基羰基-乙基-氨基)-2-羟基-环 己基硫基]-乙酰基}-19,20-二氢-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体按照实施例1步骤A3的方法将实施例7步骤B的N-乙基-N-(顺式 -3,4-环氧环己基)-氨基曱酸叔丁基酯(2.8 g，11.6 mmol)在室温用19,20-二 氪-截短侧耳素硫醇(4.60 g,11.6 mmol)处理过周末。处理后将反应混合物 进行色谱法(二氧化硅，环己烷/乙酸乙酯=1/1), 得到 14-0-([(lR,2R,5S)-5-(叔丁氧基羰基-乙基-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙 酰基}-19，20-二氬-木替林+ (lS,2S,5R)非对映体(Rf = 0.35,1.98 g，27。/o产 率)。步骤C. 14-CH[(lR，2R,5S)-5-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-19,20-二氢-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体按照实施例1步骤B的方法处理14-0-([(lR，2R,5S)-5-(叔丁氧基羰 基-乙基-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-19,20-二氢-木替林+(1S,2S,5R)非对映体(1.98 g,3.10 mmol)。处理后将反应混合物进行色谱法 (二氧化硅，乙酸乙酯/曱醇/35%氨溶液=100/10/1),得到无色固体的 14-0-{[(111,211,58)-5-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-19,20-二氢-木替林 + (1S,2S,5R)非对映体(乙酸乙酯/曱醇/35%氨溶液= 100/100/l,Rf = 0.7,150 mg,9。/o产率)。!H NMR (400MHz,DMSO-d6, 5,ppm,特别地)5.52 (d，lH,14國H,J = 7Hz),4.72 (m,lH,2'-OH),4.36 (d,lH,l l-OH,J = 6Hz),3.50-3.15 (m,4H，2'-H,1 l-H,22-H),2.97 (m,lH,l'画H)，2.62 (m,lH,5'-H),2.47(m,2H,NCH2),2.35 (bs,lH,4-H),1.35 (s,3H,15-CH3),0.98(m,3H,NCH2CH3),0.85 (s,3H,18-CH3)，0.80 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (m，6H,16-CH3,20-H) 。 MS-ESI (m/z): 538 (固+),560 (顧a+),536 (M-H)-,572 (MCr)。步骤D. 14-0-([(lR,2R,5S)-5-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-19,20-二氩-木替林盐酸盐+ (1S,2S,5R)非对映体盐酸盐按照实施例1步骤C的方法处理14-0-{[(1&211,58)-5-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-19,20-二氢-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体(38 mg,0.071 mmol),得到无色固体的标题化合物(40 mg,定量的产率)。!H NMR (400MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)5.53 (d，lH,14隱H,J = 8Hz),4.97 (m,lH,2'曙OH)，4.40 (d,lH,l l画OH,J = 6Hz),3.64 (m,lH,2'-H),3.45誦3.20 (m,3H,1 l-H,22-H),2.98 (m,lH,l'-H),2.94(m,lH,5'-H),2.88 (m,2H,NCH2)，2.37 (bs,lH,4-H),1.34 (s,3H,15-CH3),0.98 (t,3H，NCH2CH3，J = 7Hz),0.85 (s,3H,18-CH3),0.80 (d,3H，17-CH3,J = 7Hz),0.63 (m,6H,16-CH3,20-H)。 MS-ESI (m/z): 538 (MH+)。实施例28. 14-0-([(lR，2R，5R)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-19，20-二氢-木替林+ (1S,2S，5S)非对映体步骤A. 14-0-([(lR,2R,5S)-5-(叔丁基-二曱基-曱硅氧基)-2-羟基-环 己基硫基]-乙酰基}-19,20-二氬-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体按照实施例1步骤A3的方法将实施例4步骤A的叔丁基-二曱基 _(顺式_3,4-环氧环己基氧基)-硅烷(864 mg,3.78 mmol)用实施例27步骤A 的19,20-二氢-截短侧耳素石危醇(1.5 g,3.78 mmol)处理。处理后将反应混67合物进行色谱法(二氧化硅，环己烷/乙酸乙酯=3:1)，得到14-CH[(lR，2R,5S)-5-(叔丁基-二曱基-甲硅氧基)-2-羟基-环己基硫基]-乙 酰基}-19,20-二氢-木替林+ (1S，2S,5R)非对映体的无色固体(环己烷/乙 酸乙酯=l/l,Rf= 0.45,1.2 g,5P/o产率)。!H NMR (500MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)5.50 (d,lH,14-H,J = 8Hz),4.81 (m,lH,2'-OH),4.38 (d,lH,l l-OH,J = 6Hz)，3.88 (m,lH,5'-H),3.50-3.20 (m,4H,2'-H,1 l-H,22-H),2.95 (m,lH,l'-H),2.34 (bs,lH,4画H),1.34 (s,3H,15-CH3)，0.84 (m,12H,18-CH3,叔丁基)，0.80 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (m,6H,16-CH3,20-H),0.02 (s,6H,Si(CH3)2)。步骤B. 14-0-{[(111,211,58)-2,5-二羟基-环己基硫基]-乙酰基}-19,20-二氬-木替林+(18,23,511)非对映体按照实施例4步骤C的方法处理14-0-([(lR,2R,5S)-5-(叔丁基-二甲 基-曱硅氧基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-19,20-二氢-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体(1.2 g,1.92 mmol)。处理后将反应混合物进行色谱法 (二氧化硅,环己烷/乙酸乙酯=1/4),得到14-0-([(lR,2R,5S)-2,5画二羟基画 环己基硫基]-乙酰基}-19,20-二氬-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体的无色 固体(环己烷/乙酸乙酯=1 1 ，Rf = 0.2,720 mg,73o/o产率)。NMR (500MHz，DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)5,50 (d,lH,14-H,J = 8Hz),4.74 (d，lH,2'-OH,J = 3Hz)，4.42 (m,lH,5'國OH),4.38 (d,lH,ll-OH,J = 6Hz),丄67 (m,lH,5'國H),3.50-3.20 (m,4H,2'-H,11画H,22-H),2.96(m,lH,l'-H),2.34 (bs,lH,4-H),1.34 (s,3H,15-CH3),0.84 (s，3H,18-CH3),0.80 (d，3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (m,6H,16-CH3,20-H)。步骤C. 14-0-([(lR,2R,5S)-2-羟基-5-曱烷磺酰氧基-环己基硫基]-乙 酰基}-19,20-二氢-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体按照实施例4步骤D的方法处理14-0-U(lR,2R,5S)-2,5-二羟基-环 己基硫基]-乙酰基}-19,20-二氢-木替林+ (1S，2S,5R)非对映体(720 mg，1.41 mmol)。处理后将反应混合物进行色错法(二氧化硅,环 烷/乙酸 乙酯=1/1),得到14-0-{[(lR,2R,5S)-2-羟基-5-甲烷磺酰氧基-环己基硫 基]-乙酰基}-19,20-二氬-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体的无色固体(环己 烷/乙酸乙酯=l/2,Rf = 0.4,640 g，77。/。产率)。工H NMR (500MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm，特别地):5.51 (d,lH，14画H,J = 8Hz),4.79 (m,lH,5'-H),4.38 (bs,lH,l l隱OH),3.60-3.20(m,7H,2'-H,ll-H,22-H,S02CH3),2.93 (m,lH,l'画H),2.35 (bs,lH,4画H),1.35 (s,3H,15-CH3),0.84 (s,3H,18-CH3),0.80 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (m,6H,16-CH3,20-H)。步骤D. 14-0-([(lR,2R,5R)-5-叠氮基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基卜19,20-二氢-木替林+ (1S,2S,5S)非对映体按照实施例4步骤E的方法将14-0-([(lR,2R，5S)-2-羟基-5-甲烷磺酰 氧基-环己基硫基]-乙酰基}-19,20-二氢-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体 (640 mg,1.09 mmol)用叠氮化钠处理。处理后得到粗制的 14-O-([(lR,2R,5R)-5-叠氮基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-19,20-二氲-木 替林+ (lS,2S,5S)非对映体(定量的产率，环己烷/乙酸乙酯^ l/2,Rf = 0.7),将其直接用于下一步骤。步骤E. 14-0-([(lR,2R，5R)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-19,20-二氢-木替林+ (1S,2S,5S)非对映体按照实施例4步骤F的方法将14-0-([(lR,2R,5R)-5-叠氮基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-19,20-二氢-木替林+ (1S,2S,5S)非对映体(584 mg,1.09 mmol)用三苯基膦(342 mg,1.30 mmol)处理。处理后进行色谱法 (二氧化硅,二氯甲烷/曱醇/异丙醇/水/乙酸=80/20/6/3/2),接着碱性萃取， 得到无色泡沫的14-0-([(lR,2R,5R)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-19,20-二氢-木替林+ (lS,2S,5S)非对映体(二氧化硅,二氯曱烷/曱醇 /35%氨溶液=100/10/l,Rf= 0.3,50.5 mg,9。/o产率)。H丽R (500MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特别地)5.51 (d,lH,14國H,J = 8Hz)，4.77 (m，lH,2'画OH),4.38 (d,lH,l l隱OH,J = 8Hz),3.60-3.15 (m,4H，2'-H,ll國H,22-H),2.60 (m,lH,l'-H),2.50 (m,lH,5'-H),2.35(bs,lH,4-H),1.34 (s,3H,15-CH3),0.84 (s,3H,18-CH3),0.80 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.63 (m,6H,16-CH3,20-H)。 MS-ESI (m/z): 510 (MH+)。实施例29. 14-0-([(lR,2R)-4-氨基甲基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林非对映体+(13,23)非对映体步骤A.环己-3-烯基曱基-氨基曱酸叔丁基酯
冷却下，向C-环己-3-烯基-曱胺(3.28 g,29.5 mmol)和N-曱基-吗啉 (2.98 g,29.5mmol)于70 ml无水二氯甲烷的溶液中，加入二石友酸二A又丁酯 (6.44g,29.5mmo1)。将形成的混合物在室温搅拌20小时，在减压下除去 溶剂。剩余物用乙酸乙酯稀释，用1NHC1洗涤。水相用乙酸乙酯萃取3 次，将合并后的有机相用水和盐水洗涤。将形成的有机相经石克酸镁干燥， 过滤，在减压下除去溶剂得到6.57 g棕色油。经柱色谱法(二氧化硅,石 油醚/乙酸乙酯=12/1 ~ 8/1)得到无色固体的环己-3-烯基曱基-氨基甲酸 4又丁基酯(石油醚/乙酸乙酯=10/l,Rf = 0.62,3.06 g,49。/o产率)。
^ NMR (200MHz，DMSO-d6, 5 ,ppm,特另'J地)6.90-6.83 (m,lH，NH),5.66國5.63 (m,2H,烯属的H),2.86 (t,2H，CH2N,J = 6Hz),2.21-1.50 (m,6H,2 x CH2),2.21-0.95 (m,16H,叔丁基,3 x CH2和CH)。
步骤B. (7-氧杂-二环[4.1.0]庚-3-基甲基)-氨基甲酸叔丁基酯 冷却下，向环己-3-烯基甲基-氨基甲酸叔丁基酯(1.5 g,7.10 mmol)于 20 ml无水二氯曱烷的溶液中，加入3-氯过氧苯甲酸(2.45 g,14.2 mmol)。 将形成的混合物在室温搅拌19小时，用饱和的碳酸氢钠和0.5M硫代硫 酸钠水溶液洗涤。水相用二氯曱烷萃取3次，将合并后的有机相用盐水 洗涤。将形成的有机相经石克酸镁干燥，过滤，在减压下除去溶剂得到1.48g 粗制的产品。将3.17 g粗制的产品进行柱色谱法(二氧化硅,石油醚/乙酸 乙酯=3/1),得到无色固体的(7-氧杂-二环[4.1.0]庚-3-基曱基)-氨基曱酸 叔丁基酉旨(Rf = 0.19,2.68 g,81。/o产率)。
& NMR (200MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特另'j地)6.84-6.78 (m,lH,NH),3.09-3.03 (m,2H,CHO),2.71-2.70 (m,2H,CH2N),1.37 (s,9H,叔丁 基)。MS画ESI (m/z): 250 (画a+)，477 (2固a+)。
步骤C. 14-CK[(lR,2R)-4-(叔丁氧基羰基氨基-曱基)-2-羟基-环己基 硫基]-乙酰基卜木替林非对映体+ (1S,2S)非对映体
冷却下，向(7-氧杂-二环[4.1.0]庚-3-基曱基)-氨基甲酸叔丁基酯(1.34 g,5.90 mmol)和截短侧耳素硫醇(2.32 g,5.90 mmol)于25 ml甲醇的溶液 中，滴加入2M NaOH(2.95 m1,5.90 mmol)。将形成的混合物在室温搅拌 过夜，在减压下除去溶剂。剩余物用乙酸乙酯稀释，用盐水洗涤。水相
70用乙酸乙酯萃取3次，将合并后的有机相用盐水洗涤。将形成的有机相
经硫酸镁干燥，过滤，在减压下除去溶剂得到3.86g粗制的产品。经柱
色谱法(二氧化硅，石油醚/乙酸乙酯=1/1),得到无色固体的
14-0-([(lR,2R)-4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基)-木替林非对映体+(13,23)非对映体(Rf = 0.24,2.11 g,58。/。产率)。
!H NMR (500MHz,CDCl3, 5 ,ppm,特另'J地)6.32-6.40 (m,lH,19画H),5.80-5.71 (m，lH,14-H),5,40扁5.15 (m,2H,20匿H),4.64,4.55 (2bs,lH,NH),3.79-3.67,3.58-3.45 (2m,lH,2'國H),3.40-3.31 (m, 1 H, 11 -H),3.29-3.11 (m,2H,22-H),3.10-2.92
(m，2H,CH2N),2.89-2.77,2.74-2.64 (2m,lH,l'-H),1.45 (s,3H,15-CH3),1.43 (s,9H，叔丁基),1.17 (s,3H,18-CH3),0.78-0.66 (m,3H,16-CH3)。 MS-ESI (m/z): 644 (顧a+)。
步骤D. 14-0-([(lR,2R)-4-氨基曱基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基〉-木替林非对映体+(13,28)非对映体
冷却下，向14-0-U(lR,2R)-4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-2-羟基-环己 基硫基]-乙酰基}-木替林非对映体+ (1S,2S)非对映体(1.14 g,1.83 mmol) 于20ml无水二氯甲烷的溶液中，滴加入20ml 1MHC1乙醚溶液。将形 成的混合物在室温搅拌2天，在减压下除去溶剂。剩余物用二氯曱烷稀 释，用碳酸氢钠饱和溶液洗涤。水相用二氯甲烷萃取3次。将形成的有 机相合并，经硫酸镁干燥，过滤，在减压下除去溶剂。经柱色谱法(二氧 化硅,二氯甲烷/曱醇=5/1 ~ 1/1)，得到14-CH[(lR,2R)-4-氨基曱基-2-羟基 -环己基硫基]-乙酰基}-木替林非对映体+ (1S,2S)非对映体的无色固体 (39mg，8。/。产率)。
JH NMR (400MHz，CDCl3, 5 ,ppm,特另'J地)6.58-6.38 (m,lH,19-H),5.87-5.68 (m,lH，14-H); 5.44-5.12 (m,2H,20-H),4.52匪4.34 (m,lH,l'-H),2.68陽2.52 (m,2H,CH2N),1.46 (s,3H,15-CH3),l. 19
(s,3H,18-CH3),0.89 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.74 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS隱ESI (m/z): 544 (MNa+)。
实施例30. 14-0-{[5-氨基-2-氯-环己基硫基]-乙酰基}-木替林乙酸 盐和14-0-{[4-氨基-2-氯-环己基硫基]-乙酰基}-木替林乙酸盐步骤A. (lR,3S,6S)-(7-硫杂-二环[4.1.0]庚-3-基)-氨基曱酸叔丁基酯 十(1S,3R，6R)非对映体
向顺式_3,4-环氧环己基-氨基甲酸叔丁基酯(3.55 g,16.6 mmol)和四 丁基氯化铵(500 mg,1.80mmol)于50 ml叔丁基曱基醚的溶液中，加入于 50 ml水中的硫氰酸钾(8.07 g,83.0 mmol)溶液。将形成的混合物在室温搅 拌7天，分离相层。水相用乙酸乙酯萃取两次，将合并后的有机相用盐 水洗涤。将形成的有机相经硫酸镁干燥，过滤，在减压下除去溶剂得到 4.33 g无色固体的粗制产品。经柱色谱法(二氧化硅,石油醚/乙酸乙酯= 7/1-3/1),得到(lR,3S,6S)-(7-硫杂-二环[4.1.0]庚-3-基)-氨基曱酸叔丁基 酯+ (1S,3R,6R)非对映体(石油醚/乙酸乙酯二 5/l,Rf= 0.54,1.88 g,49。/o产 率,基于回收原料)，为无色晶体。Fp= 105-108° C.
力NMR (500MHz,CDCl3, 5 ,ppm,特别地)4.40 (bs,lH,NH),3.78 (bs,lH，l-H),3.28-3,20 (m,lH,3陽H),3.18-3.09 (m,lH,4-H),2.54 (dd,lH,2a画H,J = 5Hz 和 J = 15Hz),2.40画2.18 (m,2H,5画H),1.98-1.87
(m，lH,2b-H),1.86-1.72 (m,lH,6a画H)，1.58 (s,9H,叔丁基),1.34-1.20 (m,lH，6b-H)。 MS-ESI (m/z): 252 (画a+)。
步骤B. 14-0-([(lR，5R,8R)-3-氧代-2-氧杂-4-氮杂-二环[3.3.1]壬-8-基
硫基]-乙酰基卜木替林+(13,58,88)非对映体
冷却下，向(lR,3S,6SH7-硫杂-二环[4丄0]庚-3-基)-氨基曱酸叔丁基 酯+ (1S,3R,6R)非对映体(2.95 g,12.9 mmol)于160 ml二氯曱烷的溶液 中，加入对甲苯磺酸(1.21 g,6.50 mmol)。将形成的混合物在室温搅拌过 夜，在减压下除去溶剂得到3.26g无色固体。接着将粗制的产品溶于150 ml无水四氪呔喃，冷却下加入截短侧耳素曱苯磺酸酯(13.1 g,24.6mmo1) 随后加入1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU,4.2 m1,28.2 mmol)。将 形成的混合物在室温搅拌过夜，并加入水。混合物用乙酸乙酯萃取4次， 将合并后的有机相用水和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，在减压下除去溶剂 得到9.32g无色固体。经色语法(二氧化硅,二氯甲烷/甲醇=19/1),得到 无色固体的14-0-([(lR,5R,8R)-3-氧代-2-氧杂-4-氮杂-二环[3.3.1]壬-8-基 硫基]-乙酰基卜木替林+ (1S,5S，8S)非对映体(二氯曱烷/甲醇二 20/l,Rf = 0.45,4.36 g,63y。产率)。
!H NMR (500MHz,CDCl3, 5 ,ppm,特别地)6.46 (dd，lH,19-H,J = 7Hz
72和 J = 11Hz),5.77 (d,lH,14陽H,J = 8Hz),5.52 (bs,lH,NH),5.40-5.17 (m,2H,20-H)，4.68-4.55 (m,lH,2'画H),3.63 (bs,lH,4'-H),3.41-3.30
(m,2H, 1 '-H, 11隱H)，3.27-3.12 (m,2H,22隱H), 1.45 (s,3H, 15-CH3), 1.18 (s，3H,18-CH3),0.89 (d，3H,17-CH3,J = 7Hz),0.73 (dd,3H,16-CH3,J = 2Hz和 J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 556 (顧a+)。
步骤C. 14-0-{[5-氨基-2-氯-环己基硫基]-乙酰基}-木替林乙酸盐和 14-0-{[4-氨基-2-氯-环己基硫基]-乙酰基}-木替林乙酸盐
冷却下，向14-0-([(lR,5R,8R)-3-氧代-2-氧杂-4-氮杂-二环[3.3.1]壬 -8-基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,5S,8S)非对映体(500 mg,0.94 mmol)于 2.5ml二哺烷的溶液中，加入6MHCl(7ml)。将形成的混合物搅拌23小 时，加入碳酸氩钠饱和溶液。将形成的溶液用乙酸乙酯萃取2次，将合 并后的有机相用盐水洗涤。将形成的有机相经硫酸镁干燥，过滤，在减 压下除去溶剂得到473mg粗制的产品。经柱色语法(二氧化硅,二氯甲烷/ 曱醇=10/1含有1%乙酸和二氯甲烷/曱醇/二异丙基醚/水/乙酸= 80/20/6/3/2),得到14-0-{[5-氨基-2-氯-环己基硫基]乙酰基}-木替林乙酸 盐0)(二氯曱烷/甲醇/二异丙基醚/水/乙酸=80/20/6/3/2,Rf = 0.5,178 11^,36%产率)和14-0-{[4-氨基-2_氯-环己基硫基]乙酰基}-木替林乙酸盐 0)(二氯甲烷/曱醇/二异丙基醚/水/乙酸=80/20/6/3/2,Rf = 0.43，91 mg,18% 产率)，无色固体。
(a) :力NMR (500MHz，CDCl3, 5 ,ppm，特别地)6.46 (dd,lH,19-H,J = 11Hz和J = 17Hz),5.78 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.45-5.15 (m,2H，20-H),4.32 (m,lH,2'-H),3.41-3.30 (m,2H,1 l-H,l'-H),3.28-3,14 (m,2H,22-H),3.13-3.00 (m,lH,5'画H),2.02 (s,3H,乙酸盐的 CH3)，1.46 (s,3H,15-CH3),1.19 (s,3H,18-CH3)，0.89 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.73 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS隱ESI (m/z): 526 (MH+)。
(b) : & NMR (500MHz,CDCl3, 5 ,ppm,特别地):6.49 (dd,lH,19-H,J = 11Hz 和 J = 17Hz),5.77 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.40-5.15 (m,2H,20陽H),3.88-3.73 (m, 1H，2'-H),3.50-3.15 (m,3H, 11 -H,22-H)，3.00-2.70 (m,2H,l'-H,4'-H),2.03 (s,3H,乙酸盐的 CH3),1.46 (s,3H,15-CH3),1.18 (s,3H,18-CH3),0.88 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.74 (d,3H，16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 526 (MH+)。
73实施例31. 14-0-[(4-氨基-1-羟基-环己基甲基硫基)-乙酰基]-木替林
盐酸盐
步骤A. (l-氧杂-螺[2.5]辛-6-基)-氨基曱酸叔丁基酯 按照实施例7步骤B的方法将(4-亚曱基-环己基)-氨基曱酸叔丁基酯 (Raju，B. 等 ，Woorgam'c awJ MeWc/wa/ CTzem^/Tj 丄e"e^ 2004，/《12),3103-3107)(2.3 g,10.9 mmol)用3-氯过氧苯甲酸(70%纯 度,3.76g，21.8mmol,未校正的)处理。处理后得到黄色固体的标题化合物 (2.3g，93。/。产率)。
!H NMR (DMSO-d6,400 MHz, 5 ,ppm): 6.77 (bd，lH,丽,J = 7Hz),3.35 (m,lH),2.55,2.51 (2s,2H),1.86-1.75 (m,2H),1.73-1.67 (m,2H),1.47陽1.28 (m,2H),1.36 (s,9H,叔丁基),1.22画1.13 (m,2H)。
步骤B. 14-0-[(4-叔丁氧基羰基氨基-1-羟基-环己基甲基硫基)-乙酰 基]-木替林
按照实施例1步骤A3的方法，将截短侧耳素硫醇(2.6 g,6.59 mmol) 用(1_氧杂-螺[2.5]辛-6-基)-氨基曱酸叔丁基酯(1 g,4.40 mmol)处理。处理 后将混合物进行色谱法(二氧化硅,甲苯/乙酸乙酯=5/1-〉 3/1),得到无色 泡沫的标题化合物(曱苯/乙酸乙酯=l/l,Rf= 0.44,0.41 g,15y。产率,未校正 的)。
& NMR (DMSO-d6,500 MHz, 5 ,ppm,特别地):6.66 (d,lH,NH,J = 8Hz),6.14 (dd,lH,19-H,J = 18Hz 和 11Hz),5.54 (d,lH,14-H，J = 8Hz),5.10-5.02 (m,2H,20-H),4.49 (bs,lH,l l陽OH),4.23 (bs,lH),3.46-3.28 (m,3H),3.08 (bs,3H,4'画H),2.60 (s,2H,COHCH2S),2.40 (bs,lH,4-H),2.18 (m,lH),2.12-2.02 (m,3H),1.69-1.54 (m,3H),1.52-1.43 (m,3H),1.35 (s,3H,15-CH3),1.35 (s,9H, 叔 丁 基 )，1.32-1.21 (m,4H),1.08 (s,3H,18-CH3)，l.14-0.98 (m,lH),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62 (d,3H,16-CH3，J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 644 (画a+)。
步骤C. 14-0-[(4-氨基-1-羟基-环己基曱基硫基)-乙酰基]-木替林 按照实施例1步骤B的方法将14-0-[(4-叔丁氧基羰基氨基-1-羟基-环己基甲基硫基)-乙酰基]-木替林(0.36 g,0.58 mmol)用三氟乙酸(0.72 ml) 处理。处理后将混合物进行色谱法(二氧化硅，乙酸乙酯/甲醇/NH4OH(25%) = 50/50/1)，得到无色泡沫的标题化合物(Rf = 0.04,0.13 g,43。/。产率)。
丄H丽R (DMSO-d6,400固z, 5 ,ppm,特别地)6.13 (dd,lH,19隱H,J = 18Hz和11Hz),5.53 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.10 (d,lH,20-H,J = 2Hz),5.02 (d,lH,20-H,J = 2Hz),4.49 (bs,lH),4.21 (bs,lH)，3.42 (m,lH),3.23 (q,2H,H-22,J = 14Hz),2.60 (s,2H,COHCH2S),2.47-2.36 (m,2H),2.23-2.14 (m,lH),2.12-2.04 (m,3H),1.68-1.54 (m,3H)，1.41-1.20 (m,5H),1.35 (s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),1.03 (m,lH),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS誦ESI (m/z) = 522 (固+),544 (画a+)。
步骤D. 14-0-[(4-氨基-1-羟基-环己基甲基硫基)-乙酰基]-木替林盐酸
盐
按照实施例1步骤C的方法，将14-0-[(4-氨基-1-羟基-环己基甲基疏 基)-乙酰基]-木替林(O.l g，0.19mmol)于1 ml 二喵烷的溶液在搅拌下用盐 酸水溶液(0.05 M,11.6 m1,0.58 mmol)处理。1小时后，将混合物冻干过4复， 得到白色固体的标题化合物(107 mg,99。/。产率)。
!H NMR (DMSO-d6,400 MHz, 5 ,ppm,特别地)7.88 (s,3H,NH3+),6.13 (dd,lH,19-H,J = 18Hz和11Hz),5.52 (d,lH,J = 8Hz),5.08 (dd,lH,20-H,J = 5Hz和18Hz),5.03 (dd,lH,20画H,J = 5Hz和llHz),3.25 (q，2H,22-H,J = 14Hz),2.85 (m，lH,4'-H),2.62 (s，2H，COHCH2S),2.40 (s,lH,4-H),2.23陽2.03 (m,4H),1.71-1.56 (m,6H),1.47 (m,lH),1.36 (s,3H,15-CH3),1.41-U9 (m,4H),1.05 (s,3H,18-CH3),1.00 (m,lH),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。
实施例32. 14-0-([(lR,2R)-2-羟基-5-(3-曱氨基-丙基)-环己基疏 基]-乙酰基}-木替林+ (1S，2S)非对映体和14-0-([(lR,2R)-2-羟基-4-(3-曱 氨基-丙基)-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S)非对映体
步骤A. 3-环己-3-烯基-N-曱基-丙酰胺
向3-环己_3_烯基-丙酸曱酯(德国专利DE 4023848 Al 19920130)(20.0 g,119mmol)于75mL曱醇的混合物中，加入曱胺(8M, 于EtOH中，75ml,600 mmo1)。将混合物在室温搅拌一天。向该混合物中 加入另外的曱胺(8M,于EtOH中,40ml,320mmo1),再继续搅拌一天。浓缩混合物，将剩余物用乙酸乙酯吸收，用0.5MHC1水溶液洗涤，干 燥，脱去溶剂，得到浅橙色固体的标题化合物(19.50 g,98y。产率,未校正 的)。
& NMR (CDC13,200 MHz, 5 ,ppm): 5.58 (s,2H,烯属的H),5.57 (m,lH，NH),2.74 (d,3H,NCH3，J = 5Hz)，2.20-1.90 (m,5H),1.75-1.40 (m,5H),1.15 (m,lH)。
步骤B. (3-环己-3-烯基-丙基)-曱基-胺
在(TC搅拌下，向氢化铝锂(95%纯度,5.3 g,139 mmol,校正的)于120 ml四氢吹喃的混悬液中，经25分钟滴加于55 ml四氪呋喃中的3-环己 一3-烯基-N-曱基-丙酰胺(15.5 g,92.7 mmol)溶液。将混合物回流4小时， 室温搅拌过夜，用2MNaOH水溶液淬火，用四氢呋喃稀释，搅拌，过 滤。浓缩滤液，将剩余物用1MHC1水溶液酸化，用二氯甲烷洗涤。水 相用lMNaOH水溶液碱化，用乙酸乙酯萃取。将有机提取物干燥，浓 缩得到浅黄色油的标题化合物(9.38 g,66。/。产率)。
&画R (CDC13,200 MHz, 5 ,ppm): 5.58 (d，2H,烯属的H,J = 2Hz),2.50 (t,2H,J = 7Hz)，2.36 (s,3H,NCH3),2.15-1.90 (m,3H),1.75-1.05 (m，9H)。
步骤C. (3-环己-3-烯基-丙基)-曱基-氨基曱酸叔丁基酯 向(3-环己-3-烯基-丙基)-甲基-胺(7.50 g，48.9 mmol)于75 ml 二嗜烷 的溶液中，加入乙基-二异丙基-胺(11.3 ml,66.0mmol)和二碳酸二叔丁酯 (14.4 g,66.0 mmol)。将混合物在室温搅拌3天，用乙酸乙酯稀释，用冷 的0.1 MHC1水溶液和^灰酸氪钠々包和水溶液洗涤，经石危酸钠干燥，在真 空中浓缩得到混合物。将混合物进行色谱法(二氧化硅，二氯曱烷)后，得 到浅黄色油的标题化合物(14.24 g,定量的产率,未校正的)。
NMR (CDC13,200 MHz, 5 ,ppm): 5.65 (d，2H,烯属的H,J = 2Hz),3.19 (t,2H,CH2N,J = 7Hz),2.84 (s,3H,NCH3),2.15-1.90 (m,3H),1.75陽1.30 (m，5H)，1.45 (s,9H,叔丁基),1.30-1.05 (m,3H)。
步骤D.甲基-[3-(7-氧杂-二环[4.1.0]庚-3-基)-丙基]-氨基甲酸叔丁基
酯按照实施例7步骤B的方法将(3-环己-3-烯基-丙基)-甲基-氨基曱酸 叔丁基酯(14.24 g,56.2 mmol)用3-氯过氧苯曱酸(70%纯度,14.8 g ,60 mmol,校正的)处理，并在室温搅拌3小时。处理后得到浅黄色油的标题 化合物(14.6 &96%产率,未校正的)。
工H NMR (CDC13,200 MHz, 5 ,ppm): 3.15-3.00 (m,4H),2.75 (s,3H,NCH3),2.15-0.70 (m,HH),1.38 (s,9H,叔丁基)。
步骤E. 14-0-U(lR,2R)-5-[3-(叔丁氧基羰基-甲基-氨基)-丙基]-2-羟 基-环己基硫基}-乙酰基}-木替林+ (1S,2S)非对映体和
14-0-{((1R,2R)-4-[3-(叔丁氧基羰基-甲基-氨基)-丙基]-2-羟基-环己 基硫基}-乙酰基}-木替林+(18,23)非对映体
按照实施例1步骤A3的方法，将曱基-[3-(7-氧杂-二环[4丄0]庚-3誦 基)-丙基]-氨基曱酸叔丁基酯(3.00 g,ll.l mmol)用截短侧耳素硫醇(6.57 g,16.7 mmol)处理，并在室温搅拌3天。处理后将混合物进行色谱法(二 氧化硅,环己烷/乙酸乙酯=1 : 1),得到白色泡沫的标题化合物的混合物 (Rf=0.29，3.20 g，43。/。产率,未校正的)。将混合物用于下一步骤。
步骤F. 14-0-([(lR,2R)-2-羟基-5-(3-曱氨基-丙基)-环己基硫基]-乙酰 基)-木替林+(18,28)非对映体和
14-0-{[(111,211)-2-羟基-4-(3-曱氨基-丙基)-环己基硫基]-乙酰基}-木 替林+(13,28)非对映体
向实施例32步骤E的化合物(5.63 g,8.48 mmol,未校正的)于50 ml 二嗜烷中的混合物中，加入HC1(4M,于二嘈、烷中，5.30ml,21.2mmo1)。 将混合物搅拌4小时，脱去溶剂。让剩余物在二氯甲烷和碳酸氢盐饱和 水溶液之间分配，并分离有机层，干燥，脱去溶剂得到混合物。经色镨 法(二氧化硅，二氯甲烷/甲醇/ 28% NH3水溶液=91/6/3)后，得到 14-CK[(lR,2R)-2-羟基-5-(3-曱氨基-丙基)-环己基硫基]-乙酰基卜木替林 + (lS,2S)非对映体(a)(二氯曱烷/曱醇/280/。 NH3水溶液=88/8/4,Rf = 0.18,117 mg,3o/。产率，未校正的)和14-0-([(lR,2R)-2-羟基-4-(3-曱氨基國 丙基)-环己基硫基]-乙酰基}-木替林0)(二氯甲烷/曱醇/28% NH3水溶液 =88/8/4,Rf = 0.10,172 mg,4。/o产率,未校正的)，为白色泡沫。
(a): 力NMR: (400 MHz，DMSO-d6， 5 ,ppm,特另'J地)6.12
77(dd,lH,19-H,J = 11Hz和 18Hz),5.53 (d,lH,14画H,J = 8Hz),5.1-5.0 (m,2H,20-H),4.74 (bs,lH,2'-OH),4.49 (bs,lH,l l-OH),3.59 (m,lH),3.42 (m,m,ll-H)，3.20 (m),2.90 (m,lH),2.42画2.36 (m,3H),2.24 (s,3H , CH3-N),2.21-2.01 (m)，1.72-1.56 (m),1.55-1.10 (m),1.36 (s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),1.00 (m,lH),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62 (d,3 H,16-CH3,J = 7Hz)。
(b): 力丽R: (500 MHz,DMSO-d6, 5 ,ppm,特另'J地)6.13 (m,lH,19-H),5.54 (d,lH,H-14,J = 9Hz),5.10-5.00 (m,2H,20-H),4.74 (bs,lH,2'画OH),4.48 (bs,lH,ll-OH),3.70 (bs,lH,2'隱H),3.41 (m,lH,l 1隱H),3.20 (m,2H,H-22),2.85 (m，lH),2.43國2.37 (m,3H),2.24 (s,3H，CH3-N),2.22-1.89 (m), 1.70-0.96 (m), 1.35 (s,3H, 15-CH3), 1.05 (s,3H, 18-CH3),0.81 (d，3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。
实施例33. 14-0-U(lR,2R)-5-(3-氨基-丙基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+(13,28)非对映体和
14-0-([(lR,2R)-4-(3-氨基-丙基)-2-鞋基-环己基硫基]-乙酰基卜木替 林+(18,23)非对映体
步骤A. N-叔丁氧基羰基-(3-环己-3-烯基-丙基)-氨基甲酸叔丁基酯
搅拌下，向亚氨二甲酸二^又丁酯(22.0 g,100 mmol)于60 ml 二曱基曱 酰胺和180 ml四氬吹喃中的;水冷混合物中，经15分4中分几份加入氢4t 钠(60% ，于矿物油中,2.5 g，62.5 mmol,校正的)。经30分钟向其中点滴加 入曱苯_4-磺酸3-环己-3-烯基-丙酯(Marvell,E.; Sturmer,D.; Kunston,R. Jo^7 a/ 。/Og"mc C/ze脂Wr少1968,53，2991-2993)(14.8 g,50.0 mmol)于15 ml二甲基甲酰胺和45 ml四氳吹喃的混合物中的溶液。将混合物在70 。C搅拌7小时和在室温搅拌16小时，用水稀释，用叔丁基甲基醚萃取。 将有机提取物用水、盐水洗涤，脱去溶剂得到混合物。将混合物进行色 语法(二氧化硅,甲苯/环己烷=75/25)后，得到黄色澄清油的标题化合物 (乙酸乙酯/甲苯=15/85，Rf= 0.19,14.7 g,86。/。产率,未校正的)。
& NMR (CDC13,200 MHz, 5 ,ppm): 5.57 (d,2H,烯属的H,J = 2Hz),3.46 (t,2H,CH2N,J = 8Hz),2.15-1.90 (m,3H),1.75-1.30 (m,5H),1.43 (s,18H,叔丁基),1.30-1.00 (m,3H)。
78200880007780.5 步骤B. N-叔丁氧基羰基-[3-(7-氧杂-二环[4.1.0]庚-3-基)-丙基]-氨基
甲酸^又丁基酯
按照实施例7步骤B的方法将N-叔丁氧基羰基-(3-环己-3-烯基画丙 基)-氨基甲酸叔丁基酯(12.2 g,29.4 mmol,校正的)用3-氯过氧苯甲酸(70% 纯度,8.7g,35.3mmol,校正的)处理，并在室温搅拌4.5小时。处理后，得 到浅黄色油的标题化合物(9.38 g,90。/。产率)。
工H NMR (CDC13,200固z, 5 ,ppm): 3.43 (t,2H,CH2N,J = 8Hz),3.06 (bs,2H),2.15-0.70 (m,HH),1.43 (s,18H,叔丁基)。
步骤C. M-0-([(lR,2R)-5-(3-N,N-二-(叔丁氧基羰基)-氨基-丙基)画2画 羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S)非对映体和
14-0- {[(1R,2R)-4-(3-N,N-二-(叔丁氧基羰基)-氨基-丙基)-2-羟基-环己 基疏基]-乙酰基}-木替林+(13，23)非对映体
按照实施例1步骤A3的方法将N-叔丁氧基羰基-[3-(7-氧杂-二环 [4丄0]庚-3-基)-丙基]-氨基曱酸叔丁基酯(3.00 g,8.44 mmol)用截短侧耳 素硫醇(5.00 g,12.7 mmol)处理，并搅拌24小时。在混合物经色谱法(二 氧化石圭,石油苯(petroleum benzene)/乙酸乙酯二 7/3-> 1/1 )后，得到白色泡 沫的标题化合物的混合物(石油苯/乙酸乙酯=3/2，Rf = 0.30,3.68 g,58。/o产 率,未校正的)。
& NMR (DMSO-d6,500 MHz, 5 ,ppm,特别地)6.12 (dd,lH,19國H,J = 11Hz和 18Hz),5.53 (d,lH,14陽H,J = 8Hz),5.10-5.00 (m,2H,20画H),4.75 (bs,lH)，4.48 (bs,lH,ll-OH)，3.69 (m,0.5H),3.60 (m,0.5H),3.45-3.38 (m,3H)，3.26 (d,lH,22-H,J = 12Hz),3.21 (d,lH,22隱H,J = 13Hz),2.91 (m,0.5H),2.85 (m,0.5H),2.39 (bs,lH,4-H),2.18 (dd,lH,2-H,J = 11Hz和 19Hz),2.12-2.01 (m，3H),1.92 (m，lH),1.70-0.96 (m),1.41 (s,18H,叔丁 基)，1.35 (s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz)，0.62 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。
步骤D. 14-0-([(lR,2R)-5-(3-氨基-丙基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林+(18，28)非对映体和
14-0-([(lR,2R)-4-(3-氨基-丙基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替 林+ (1S，2S)非对映体按照实施例1步骤B的方法将实施例33步骤C的混合物(250 mg,0.33 mmol)的混合物用三氟乙酸(6 ml)处理，并在室温搅拌5天。处 理后经色谱法(二氧化硅,二氯甲烷/甲醇/28% NH4OH水溶液=86:10:4)， 得到白色泡沫的标题化合物的混合物(Rf = 0.08和0.12，50 mg,27。/。产率 未校正的)。
& NMR (DMSO-d6,500 MHz, 5 ,ppm,特别地)6.14 (dd,lH,19-H,J = 11Hz和 18Hz),5.55 (d,lH,14陽H,J = 8Hz),5.13-5.02 (m,2H,20-H),4,75 (bs,lH),4.50 (bs,lH,ll-OH),3.72 (m,0.5H),3.61 (m,0.5H),3.50-3.05 (m),2.92 (m,0.5H),2.86 (m,0.5H),2.47 (m,2H, CH2N),2.41 (bs,lH,4-H),2.19 (dd,lH,2-H),2.13-2.03 (m,3H),1.94 (m,lH),l.73-0.82 (m),1.37 (s,3H,15-CH3),1.06 (s,3H,18-CH3),0.82 (d,3H，17-CH3,J = 7Hz),0.63 (d，J = 7 Hz,3H,16-CH3)。 MS-ESI (m/z): 550 (MH+)，572 (画a+)。
实施例34. 14-0-[(4-氨基-2-氧代-环己基硫基)-乙酰基]-木替林
步骤A.硫代苯曱酸S-((lR,2R,4R)-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环 己基)B旨+(18,28,43)非对映体和
硫代苯曱酸S-((lR,2R,5S)-5-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基)酉旨 十(1S,2S,5R)非对映体
向顺式-3,4-环氧环己基-氨基曱酸叔丁基酯(63.3 g,0.29 mol)于630 ml曱苯的溶液中，加入硫代苯甲酸(105.13 m1,0.90 mmol),随后加入四 丁基氯化铵一水合物(2.66 g,9.00 mmol)。在氩气下将混合物搅拌3.5小 时，加入^友酸氲钠饱和7K溶液，搅拌10分钟，分离有机相。将有机相 用碳酸氲钠饱和水溶液、盐水洗涤，干燥，真空除去溶剂，得到粗制标 题化合物的混合物。将混合物用曱苯/庚烷(l/l)的混合物结晶，得到固体 硫代苯曱酸S-((lR,2R,4R)-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基)酉旨+ (lS,2S,4S)非对映体(a)(22.1 g,2P/。产率)。将母液进行色语法(二氧化硅， 曱苯/乙酸乙酯=8/1-> 7/1),得到硫代苯曱酸S-((lR,2R,4R)-4-叔丁氧基 羰基氨基-2-羟基-环己基)酉旨+ (lS,2S,4S)非对映体的固体(a)(甲苯/乙酸 乙酯=3/1,R产0.35,4.09 g,4。/。产率)和硫代苯曱酸S誦((lR,2R,5S)-5-叔丁 氧基羰基氨基-2-羟基-环己基)酯+ (lS,2S,5R)非对映体的油(b)(甲苯/乙 酸乙酯=3/1,Rf = 0.25，16.57 g,16。/。产率)。
a): & NMR (500MHz，DMSO-d6, 5 ,ppm): 7.88 (d,2H,芳香族的H，J =7Hz),7.66 (t,lH,芳香族的H，J = 7Hz),7.53 (t,2H,芳香族的H,J = 8Hz),6.82 (d,lH,NH,J = 8Hz),5.08 (d,lH,OH,J = 6Hz),3.41 (m,lH),3.33-3.28 (m,2H),2.08 (bd,lH),1.98 (m,lH),1.75 (m,lH),1.36 (s,9H,叔丁基),1.49國1.18 (m,3H)。
(b): & NMR (500MHz,DMSO-d6, 5 ，ppm): 7.91 (d,2H,芳香族的H,J = 8Hz),7.67 (t,lH,芳香族的H,J = 7Hz),7.53 (t,2H,芳香族的H,J = 8Hz),6.85 (d,lH,NH,J = 7Hz),5.12 (d,lH,OH,J = 3Hz),3.89 (d,lH，J = 4Hz),3.62 (bs,lH),3.41 (bs,lH),2.10 (m,lH),l,69-1.48 (m,5H),1.35 (s,9H,叔丁基)。
步骤B.硫代苯甲酸S-(4-叔丁氧基羰基氨基-2-氧代-环己基)酉旨 在氩气下将硫代苯甲酸S-(( 1 R,2R,4R)-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基 -环己基)酉旨+ (1S,2S,4S)非对映体(5 g,14.2 mmol)、 4A-分子筛(3 g) l,l隱 二氩-l,l,l-三乙酰氧基-l,2-苯碘酰-3(lH)-酮(6.33 g,15 mmol)于100 ml 二 氯甲烷酯中的混合物在5。C搅拌1小时和在室温搅拌1小时。将混合物 经硅藻土过滤，干燥，真空浓缩得到粗制的产品。混合物经色谱法(二氧 化硅,曱苯/乙酸乙酯=7/1)后，得到白色固体的标题化合物(曱苯/乙酸乙 酯=3/1 ,Rf = 0.48,4.18 g,84。/。产率)。
& NMR (DMSO画d6,200 MHz, 5 ,ppm): 7.83 (d,2H,芳香族的H,J = 7Hz,),7.71 (t,lH,芳香族的H,J = 7Hz),7.57 (t,2H,芳香族的H,J = 7Hz),7.16 (bd，lH,NH,J = 8Hz),4.48 (m,lH),3.98,3.7 (2m，lH),2.58 (m,2H),2.31-1.68 (m,4H),1.39 (s,9H,叔丁基)。
步骤C. 14-0-[(2-苯曱酰氧基-4-叔丁氧基羰基氨基-环己-1-烯-基硫 基)-乙酰基]-木替林
将硫代苯甲酸S-(4-叔丁氧基羰基氨基-2-氧代-环己基)酯(2 g,5.72 mmol)、截短侧耳素曱苯磺酸酯(3.96 g,7.44 mmol)、碳酸钾(1.58 g,l 1.44 mmol)和四丁基氯化铵一水合物(0.2 g,0.68 mmol)于20 ml 二曱基甲酰胺 和2ml水中的混合物搅拌24小时。混合物用乙酸乙酯吸收，用碳酸氢 钠饱和水溶液和盐水洗涤，干燥，真空浓缩。混合物经色谱法(二氧化硅, 甲苯/乙酸乙酯=5A)后，得到白色泡沫的标题化合物(甲苯/乙酸乙酯= 3/l,Rf= 0.24,2.36 g,58。/o产率)。
工H NMR (DMSO-d6,400 MHz, 5 ,ppm,特别地)7.99 (d,2H,芳香族的H，J = 7Hz),7.70 (t,lH，芳香族的H,J = 7Hz),7.54 (t,2H,芳香族的H,J = 8Hz),6.91 (bd,lH,NH,J = 5Hz),6.13 (dd,lH,19-H,J = 18Hz和11Hz),5.53 (dd,lH,14曙H,J = 3Hz和8Hz),5.10 (dd,lH,20腸H,J = 2Hz和17Hz),5.04 (dd,lH,20-H,J = 2Hz 和 11Hz),4.49 (d,lH,l l-OH,J = 6Hz),3.64 (bs,4'-H,lH),3.49-3.35 (m,3H)，2.46画2.34 (m,3H),2.28-2.02 (m,4H),1.87 (m,lH),l.67-1.42 (m,5H),1.41誦1.36 (m,lH),1.37 (s,9H,叔丁基),1.34 (s,3H,15-CH3),1.23 (m,lH),1.06 (s，3H,18-CH3),1.00 (m,lH),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.58 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz,3H)。 MS-ESI (m/z): 732 (顧a+)。
步骤D. 14-0-[(4-叔丁氧基羰基氨基-2-氧代-环己基硫基)-乙酰基]-木
替林
将14-0-[(2-苯甲酰氧基-4-叔丁氧基羰基氨基-环己-l-烯-基硫基)-乙 酰基]-木替林(0.8 g,1.13 mmol)于8 ml甲醇和1.25 ml 1M氢氧化钠水溶 液(1.25 mmol)中的溶液搅拌0.5小时。将混合物用水稀释，用二氯曱烷 萃取。有机提取物经硫酸镁干燥，真空浓缩得到混合物。混合物经色谱 法(二氧化硅,曱苯/乙酸乙酯=5/1)后，得到白色泡沫的标题化合物(甲苯/ 乙酸乙酯=3/l,Rf= 0.13,0.57 g,83。/o产率)。
& NMR (DMSO-d6,400 MHz, 5 ,ppm,特别地)7.04 (m,lH,NH),6.12 (m,lH,19-H)，5.53 (m,lH,14-H),5.09-5.02 (m,2H,20-H),4.49
(m,lH,ll-OH),3.65(m,lH，4'画H),3.40(m,lH),3.32隱3.14 (m,2H),2.39 (s，lH,4-H),2.40-0.95 (m),1.35 (s,9H,叔丁基),1.34 (s,3H,15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.60 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 628 (顧a+)。
步骤E. 14-0-[(4-氨基-2-氧代-环己基硫基)-乙酰基]-木替林
按照实施例32步骤F的方法将14-0-[(4-叔丁氧基羰基氨基-2-氧代-
环己基硫基)-乙酰基]-木替林(0.55 g,0.91 mmol)用2.3 ml 4M HC1 二噹烷
溶液(9.2 mmol)处理，并在室温搅拌2小时。处理后得到白色泡沫的标
题化合物(0.42 g,91。/。产率)。
& NMR (DMSO-d6,400 MHz, 5 ,ppm,特别地)6.13 (m,lH,19-H),5.53
(d,lH,14画H,J = 4Hz),5.05 (m,2H,20-H),4.48 (bs,lH,l 1-〇H),3.55-3.10
82(m),2.41-2.30 (m),2.22-2.13 (m,2H),2.12-1.99 (m,3H),1.69隱1.55 (m,3H),1.55-1.20 (m)，1.35 (s,3H，15-CH3),1.05 (s,3H,18-CH3),0.99 (m，lH),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.61 (d,3H,16-CH3)。
实施例35. 14-0-[(5-氨基-2-氧代-环己基硫基)-乙酰基]-木替林琥珀
酸盐
步骤A.硫代苯甲酸S-(5-叔丁氧基羰基氨基-2-氧代-环己基)酉旨 按照实施例34步骤B的方法将实施例34步骤A的^L代苯曱酸 S-((lR,2R,5S)-5-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基-环己基)酉旨+ (1S,2S,5R)非对 映体(8.7 g，24.8 mmol)用l,l-二氪-l,l,l-三乙酰氧基-l,2-苯碘酰-3(lH)-酮 (11.02 g,26 mmol)处理。处理后将混合物进行色谱法(二氧化硅,甲苯/乙 酸乙酯=6/1),得到白色固体的标题化合物(甲苯/乙酸乙酯=3/1,Rf = 0.43,7.15 g,83。/。产率)。
& NMR (DMSO-d6,200 MHz, 5 ,ppm): 7.91 (d,2H,芳香族的H,J = 7Hz),7.71 (t,lH,芳香族的H,J = 7Hz),7.55 (t,2H,芳香族的H,J = 7Hz),6.97 (d，lH,NH,J = 7Hz),4.70 (m，lH),4.02 (m,lH),2.79 (m,lH)，2.46-2.22 (m,2H),2.18画1.93 (m,2H)，1.75 (m,lH)，1.39 (s,9H,叔丁基)。
步骤B. 14-0-[(2-苯曱酰氧基-5-叔丁氧基羰基氨基-环己-1-烯-基硫 基)-乙酰基]-木替林
按照实施例34步骤C的方法将硫代苯曱酸S-(5-叔丁氧基羰基氨基 -2-氧代-环己基)酯(1 g,2.86 mmol)用截短侧耳素曱苯磺酸酯(1.98 g,3.72 mmol)处理。处理后将混合物进行色谱法(二氧化硅，曱苯/乙酸乙酯= 5/1),得到白色泡沫的标题化合物(甲苯/乙酸乙酯=3/1,Rf = 0.23,1.33 g,65。/。产率)。
力NMR (DMSO-d6，500 MHz, 5 ,ppm,特别地)8.00 (d,2H,芳香族的 H，J = 8Hz),7.70 (t，lH,芳香族的H,J = 7Hz),7.54 (t,2H,芳香族的H,J = 8Hz),6.96 (d,0.5 H,J = 8Hz),6.92 (d,0.5H,J = 8Hz),6.12 (dd,lH，19-H,J = 18Hz和11Hz),5.52 (dd,lH,14画H,J = 3Hz和8Hz)，5.08 (dd,lH，H-20,J = 2Hz和18Hz),5.05 (dd,lH,H陽20,J = 2Hz和11Hz),4.51 (t或2d，lH,J = 6Hz),3.63 (bs,lH),3.47-3.33 (m,3H),2.55 (m,lH),2.44-2.32 (m,2H),2.29-2.14 (m,3H),2.10-2.01 (m,3H),1.84 (m,lH),1.68-1.57(m,3H),1.46 (m,lH),1.39 (s,9H, 叔 丁 基 ),1.34,1.32 (2s,3H,15-CH3),1.29-1.18 (m,3H),1.05 (s,3H,18-CH3),0.98 (m,lH),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.58 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 732 (画a+)。
步骤C. 14-0-[(5-叔丁氧基羰基氨基-2-氧代-环己基硫基)-乙酰基]-木
替林
按照实施例34步骤D的方法将14-0-[(2-苯曱酰氧基-5-叔丁氧基羰 基氨基-环己-l-烯-基硫基)-乙酰基]-木替林(l g,1.41 mmol)用1.55 ml 1M 氬氧化钠水溶液(1.55 mmol)处理。处理后将混合物进行色谱法(二氧化硅: 甲苯/乙酸乙酯=5/1),得到白色泡沫的标题化合物(甲苯/乙酸乙酯= 3/l,Rf= 0.22,0.6 g,70。/o产率)。
H NMR (DMSO-d6,400 MHz, 5 ，ppm,特别地)6.89 (d,0.5H,NH,J = 6Hz),6.86 (d,0.5 H,J = 8Hz),6.17-6.05 (m，lH,19-H),5.51 (d,lH,14隱H,J = 8Hz),5.09-4.99 (m，2H,20-H),4.47 (m,lH,l l陽OH),3.92,3.55
(2m，lH,l'画H),3.79 (m,lH,5'-H),3.40 (t,lH,ll-H,J = 6Hz),3.35-3.12 (m,2H),2.77,2.50 (2m,lH),2.41-1.90 (m),1.71-1.18 (m),1.37 (s,9H,叔丁 基 ),1.35 (s，3H，15-CH3)，1.04 (s,3H,18-CH3),0.99 (m,lH),0.80 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.59 (d,3H,16-CH3,J = 6Hz)。
步骤D. 14-0-[(5-氨基-2-氧代-环己基硫基)-乙酰基]-木替林 按照实施例32步骤F的方法将14-0-[(5-叔丁氧基羰基氨基-2-氧代-环己基硫基)-乙酰基]-木替林(0.3 g,0.5 mmol)用1.25 ml 4M HC1 二嗜烷 溶液(5 mmol)处理，搅拌2小时。处理后得到白色泡沫的标题化合物(0.26 g,定量的产率,未校正的)，将其直接用于下一步骤。 MS-ESI (m/z): 506.0 (MH+)。
步骤E. 14-0-[(5-氨基-2-氧代-环己基硫基)-乙酰基]-木替林琥珀酸盐 搅拌下向14-0-[(5-氨基-2-氧代-环己基硫基)-乙酰基]-木替林(0.26 g,0.5 mmol)于10 ml曱基叔丁基醚和5 ml异丙醇的溶液中，经5分钟时 期内加入于5 ml异丙醇中的琥珀酸(59 mg,0.5 mmol)溶液。将混合物搅 拌4小时，脱去溶剂。将剩余物溶于2ml异丙醇，向其中加入20ml甲
84基叔丁基醚并搅拌1小时。将沉淀滤出，用5 ml甲基叔丁基醚洗涤，真 空干燥，得到白色固体的标题化合物(0.18 g,58%产率)。
& NMR (DMSO-d6,400 MHz, 5 ,ppm,特另'J地)6.18-6.05 (m,lH,H-19),5.52 (d,lH,14画H,J = 7Hz),5.12-4.98 (m,2H，20-H)，4.50 (bs，lH，ll-OH),3.89,3.53 (2m,lH,l'-H),3.42-3.14 (m),2.39 (s,lH),2.27 (s,2H),2.23-1.96 (m),1.69曙1.17 (m),1.34 (s,3H,15-CH3),1.08 (s,3H,18-CH3),l.13-0.93 (m),0.80 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.59 (d，3H,16-CH3,J = 6Hz)。
实施例36. 14-〇-{[(611,811)-8-氨基-1,4-二氧杂-螺[4.5]癸-6-基硫基]-
乙酰基)-木替林琥珀酸盐+(63,88)非对映体琥珀酸盐
步骤A.硫代苯甲酸S-((6R,8R)-8-叔丁氧基羰基氨基-l,4-二氧杂画螺 [4.5]癸-6-基)酯+(68,83)非对映体
将实施例35步骤A的化合物(2.00 g,5.72 mmol)、 1，2-乙二醇(2.0 ml,35.8 mmol)、 25 ml 二氯曱烷和BF3(48。/o纯度,0.60 ml,4.25 mmol)的混 合物搅拌2天。将混合物用二氯甲烷稀释，用碳酸氬钠饱和水溶液和盐 水洗涤，干燥，脱去溶剂。色谱法(二氧化硅,乙酸乙酯/环己烷=1/9-〉 15/85)后，得到泡沫的标题化合物(曱苯/乙酸乙酯=9/l,Rf= 0.28,632 mg,28。/。产率)。
& NMR (DMSO-d6,400 MHz, 5 ,ppm): 7.89 (m,2H,芳香族的H),7.66 (t,lH,芳香族的H,J = 8Hz),7.53 (t,2H,芳香族的H,J = 8Hz),6.86 (d,lH,NH,J = 8Hz),4.04-3.83 (m,5H),3.48 (m,lH),2.09-1.40 (m,6H),1.35 (s,9H,叔丁基)。
步骤B. ((6R,8R)-6-巯基-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-8-基)-氨基曱酸叔丁基 酯+(68,83)非对映体
将硫代苯曱酸S-((6R,8R)-8-叔丁氧基羰基氨基-l,4-二氧杂-螺[4.5] 4f陽6-基)酉旨+ (6S,8S)非对映体(695 mg,1.77 mmol)和肼(80。/。水溶液,0.10 m1,2.65 mmol)于7 ml 二氯甲烷中的混合物搅拌24小时。将混合物用二 氯甲烷稀释，用1MHC1水溶液洗涤，干燥，脱去溶剂，得到黄灰色油 的标题化合物(490 mg,95Q/。产率)。
力NMR(CDC13,400MHz, 5 ,ppm,特另'J 地)4.34
85(bs,lH,NH),4.13-4.05 (m,2H),3.95 3.85 (m，2H),3.49 (bs,lH)，2.98 (m,lH),2.25 (m,lH),1.90-1.75 (m,2H),1.69-1.41 (m),1.37 (s,9H,叔丁基)。
步骤C. 14-0-U(6R,8R)-8-叔丁氧基羰基氨基-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸 -6-基硫基]-乙酰基}-木替林+ (6S,8S)非对映体
按照实施例1步骤A3的方法将((6R,8R)-6-巯基-l,4-二氧杂-螺[4.5] 癸_8_基)_氨基甲酸叔丁基酯+ (6S,8S)非对映体(410 mg,1.42 mmol)用截 短侧耳素曱苯磺酸酯(910mg,1.71 mmol)处理，并搅拌2.5小时。真空中 浓缩混合物，将剩余物用乙酸乙酯吸收，用水、O.lMHCl水溶液、碳 酸氲钠水溶液和盐水洗涤，干燥，脱去溶剂。混合物经色谱法(二氧化硅, 乙酸乙酯/甲苯=1/4)后，得到浅黄色泡沫的标题化合物(Rf = 0.18,613 mg,66。/。产率)。
工H NMR (DMSO-d6,400 MHz, 5 ,ppm,特别地)6.77 (bm,lH,NH),6.13 (dd,lH,19-H,J = 11Hz和 18Hz),5.54 (d,lH,14-H,J = 8Hz),5.11-5.02 (m,2H,H-20),4.47 (m,lH,l l-OH),4.04-3.81 (m,4H),3.39
(m,lH,ll誦H),3.35-3.17 (m,3H),3.02 (m,lH),2.39 (s,lH，4-H),2.25-1.93 (m),1.75-1.18 (m),1.36 (2s，12H,15-CH3,叔丁基),1.05-0.95 (m),1.05 (s,3H,18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.62 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。 MS-ESI (m/z): 672 (顧a+)。
步骤D. 14-0-([(6R,8R)-8-氨基-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-6-基硫基]-乙酰 基)-木替林+ (6S,8S)非对映体
按照实施例1步骤B的方法将14-0-([(6R,8R)-8-叔丁氧基羰基氨基 -1,4-二氧杂-螺[4.5]癸-6-基硫基]-乙酰基}-木替林+ (6S,8S)非对映体 (250 mg,0.39 mmol)用1.5ml三氟乙酸处理，并在室温搅拌6小时。处理 后经色谱法(二氧化硅,二氯曱烷/曱醇=19/1),得到白色泡沫的标题化合 物(二氯甲烷/甲醇=9/l,Rf = 0.15-0.54,160 mg,76Q/。产率)，将其直接用于 下一步骤。
步骤E. 14-0-([(6R，8R)-8-氨基-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-6-基硫基]-乙酰 基}-木替林琥珀酸盐+ (6S,8S)非对映体琥珀酸盐
按照实施例35步骤E的方法将14-〇-{[(611,811)-8-氨基-1,4-二氧杂-螺[4.5]癸-6-基硫基]-乙酰基}-木替林+ (6S,8S)非对映体(120 mg,0.22 mmol)用琥珀酸(25.7 mg,0.22 mmol)处理，得到浅黄色固体的标题化合物 (100 mg,69。/。产率)。
力NMR (DMSO-d6,400 MHz, 5 ,ppm,特另'J地)6.16,6.15 (2dd,lH,19-H,J = 11Hz和18Hz),5.56 (d,lH,14-H，J = 8Hz),5.14-5.02 (m,2H,20-H),4.53 (bs),4.08-3,85 (m),3.48-3.21 (m),3.12-3.01 (m),2.42 (bs,lH,4-H),2.30 (s,4H,琥玉自酸),2,26-2.02 (m),l.84-1.21 (m)，1.38 (s,3H,15-CH3),1.08 (s,3H,18-CH3),0.83 (d,3H,17-CH3,J = 7Hz),0.64 (d,3H,16-CH3,J = 7Hz)。
实施例37. 14-0-{[5-氨基-2-甲氧基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林和 14-0-{[4-氨基-2-甲氧基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林
步骤A. 14-0-{[5-叔丁氧基羰基氨基-2-甲氧基-环己基硫基]-乙酰 基)-木替林和14-0-{[4-叔丁氧基羰基氨基-2-甲氧基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林
搅拌下将实施例1步骤A的14-0-([(lR,2R,5S)-5-叔丁氧基羰基氨基 -2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林+ (1S,2S,5R)非对映体(4.00 g,6.58 mmol)于120 ml 二氯甲烷中的水冷溶液用BF3(48o/。纯度,0.20 m1，1.65 mmol)处理，随后用三甲基硅烷化重氮甲烷(trimethylsilyl diazomethane)(2M,于己烷中,0.82 m1,1.64 mmol)处理。20分钟后，加入 3次另外量的BF3(48。/o纯度,0.20 m1,1.65 mmol)和随后3次另外量的三甲 基硅烷化重氮甲烷(2M,于己烷中,0.82ml,1.64mmo1),每次时间间隔为 20分钟。将混合物在室温搅拌30分钟，加入200 ml石友酸氢钠饱和水溶 液并搅拌。分离有才几相，用石友酸氢钠饱和水溶液洗涤，干燥，脱去溶剂 得到混合物。色谱法(二氧化硅,乙酸乙酉旨/环己烷=1/4-> 1/1)后，得到标 题化合物的混合物(0.49 g,12。/。产率)，为白色泡沫的混合物。
^ NMR (DMSO-d6,500 MHz， 5 ,ppm,特另'J地)6.72 (bm,lH,NH),6.17-6.09 (2dd,lH,19隱H,J = 11Hz 和 18Hz),5.54 (2d,lH,14-H,J = 8Hz),5.10-5.00 (m,2H,20画H),4.49 (d,ll-OH,J = 6Hz),3.50陽3.17 (m)，3.21 (2s,3H,OMe),2.40 (bs,lH,4-H),2.26-2.01 (m),1.73画1.56 (m),l.53-0.96 (m),1.35 (2s,12H,15-CH3,叔丁基),1.05 (s,3H,18-CH3),0.81 (d,3H,17-CH3，J = 7Hz),0.62 (d，3H,16-CH3,J = 7Hz)。步骤B. 14-0-{[5-叔丁氧基羰基氨基-2-甲氧基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林和14-0-{[4-叔丁氧基羰基氨基-2-曱氧基-环己基硫基]-乙酰 基}-木替林
按照实施例32步骤F的方法将14-0-{[5-叔丁氧基羰基氨基-2-曱氧 基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林和14-〇-{[4-叔丁氧基羰基氨基-2-曱氧 基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林(80 mg,0.13 mmol)用0.32 ml 4M HC1 二 嗜烷溶液(1.28 mmol)处理，搅拌2小时。处理后经色谱法(二氧化硅,乙 酸乙酯/曱醇/28Q/o氨水(aq NH3) = 500/100/1),得到白色泡沫的标题化合 物的混合物(12 mg,18Q/。产率,未校正的)。
JH画R (DMSO-d6,500 MHz, 5 ,ppm,特另'j地)6.18-6.05 (m,lH,19-H),5.55 (m,lH,14-H),5.10-5.00 (m,2H,20誦H),4.58,4.50 (2m,lH,ll-OH),3.55-3.20 (m),2.86-2.72 (m),2.44,2.40
(2s,lH,4-H),2.22-1.99 (m),1.78-1.20 (m),1.06,1.05 (2s,3H,18-CH3),1.03 (m,lH),0.81 (m,3H,17-CH3),0.62 (m，3H,18-CH3) 。 MS-ESI (m/z): 522 (固+)。
权利要求
1.式(I)的化合物其中n为0～4；m为0或1，条件是硫原子和R3为连位(如果m＝0则R3位于2′位，和如果m＝1则R3位于1′位)；R为乙基或乙烯基；R1为氢或(C1-6)烷基，R2为氢或-(C3-6)环烷基，或-未取代的(C1-6)烷基，或-被一个或多个以下取代基取代的(C1-6)烷基-羟基；优选一个或两个，-甲氧基，-卤素，-(C3-6)环烷基，或R1和R2与它们连接的氮原子一起形成5～7元杂环，所述杂环包含至少一个氮原子或一个氮原子和一个另外例如选自N或O的杂原子，或R1为羟基且R2为甲酰基；R3为OH、OR4、卤素原子、或-条件是R3连接于2′位则R3表示-O-(CH2)P-O-，其中p为2或3；R4为未取代的(C1-6)烷基或(C3-6)环烷基。
2.式(II)的化合物<formula>formula see original document page 3</formula>II其中n、 R、 R!、 R2和R3如外又利要求1所定义。
3.式(III)的化合物<formula>formula see original document page 3</formula>III其中n、 R、 Ri和R2如权利要求1所定义。
4.式(IV)的化合物<formula>formula see original document page 3</formula>IV其中n、 R:和R2如权利要求1所定义。
5.式(V)的化合物<formula>formula see original document page 3</formula>其中n、 R!和R2如权利要求1所定义。
6.式(VI)的化合物<formula>formula see original document page 4</formula>其中n、 R！和R2如权利要求1所定义。
7.根据权利要求1 ~ 6中 一项的化合物，其选自14-0-([(lR，2R,4R)-4-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林14-CK[(lS,2S,4S)-4-氨基-2-幾基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林14-0-{[(1R,2R,5S)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林14-0-([(lS,2S,5R)-5-氨基-2-鞋基-环己基硫基]-乙酰基卜木替林14-CK[(lR,2R,4S)-4-氨基-2-鞋基-环己基硫基]-乙酰基r木替林及其(1S,2S,4R)非对映体14-0-([(lR,2R,5R)-5-氨基-2-幾基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林 14-0-U(lS,2S,5S)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林 14-0-([(lR,2R,3R)-3-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林及其(1S,2S,3S)非对映体14-0-([(lR,2R,4R)-4-二乙基氨基-2-鞋基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林及其(1S,2S,4S)非对映体14-0-U(lR,2R,4R)-4-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林及其(1S,2S,4S)非对映体14-0-{[(1 R,2RJS)-5-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林及其(1S,2S,5R)非对映体14-CH[(lR,2R,5S)-5-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基》-木替林及其(1S,2S,5R)非对映体14-0-([(lR,2R,4S)-4-二乙基氨基-2-羟基-环己基疏基]-乙酰基)-木替林及其(1S，2S,4R)非对映体14-0-([(lR,2R,5R)-5-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林及其(1S,2S,5R)非对映体14-0-{[(lR,2R,3R)-3-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替 林及其(1S,2S,3S)非对映体14-CH[(lR,2R,3R)-3-二乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-木 替林及其(1S,2S,3S)非对映体14-0-{[(lR,2R,4S)-4-(甲酰基-羟基-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基)-木替林及其(lS,2S,4R)非对映体14-0-{[(lR,2R,5S)-5-(曱酰基-羟基-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰 基)-木替林及其(lS,2S,5R)非对映体14-0-{[(lR,2R,3R/S)-3-(甲酰基-羟基-氨基)-2-羟基-环己基硫基]-乙 酰基卜木替林及其(1S,2S,3R/S)非对映体14-0-U(lR,2R,5S)-2-羟基-5-甲氨基-环己基硫基]-乙酰基卜木替林及 其(1S,2S,5R)非对映体14-0-([(lR,2R,5S)-5-烯丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替 林及其(1S，2S，5R)非对映体14-0-{[(111,211，53)-2-羟基-5-(2-曱氧基-乙基氨基)-环己基硫基]-乙酰 基)-木替林及其(lS,2S,5R)非对映体14-0-([(lR,2R,4R"-2-羟基-4-(2-羟基-乙基氨基)-环己基硫基]-乙酰 基)-木替林及其(lS,2S,4S"非对映体14-CH[(lR,2R,4R^-4-环己基氨基-2-鞋基-环己基硫基]-乙酰基)-木 替林及其(1S,2S,4S"非对映体14-CH[(lR,2R,4R"-4-环丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木 替林及其(1S,2S,4S"非对映体14-0-([(lR,2R,5S"-4-环丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木 替林及其(1S,2S,5R"非对映体14-CH[(lR,2R,4S"-4-环丙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木 替林及其(1S,2S,4R"非对映体14-0-([(1R,2R,5R"-2-鞋基-5-吗啉-4-基-环己基硫基]-乙酰基)-木替 林及其(1S,2S,5S"非对映体14-0-{[(lR,2R,5S*)-2-羟基-5-吗啉-4-基-环己基硫基]-乙酰基}-木替 林及其(1S,2S,5R^)非对映体14-0-{[(lR,2R,5S)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-19,20-二氬-木替林及其(1S,2S,5R)非对映体14-0-{[(111,211,58)-5-乙基氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基}-19,20-二氲-木替林及其(lS,2S,5R)非对映体14-0-{[(1 R,2R,5R)-5-氨基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基} -19,20-二氲-木替林及其(1S,2S,5S)非对映体14-0-([(lR,2R)-4-氨基曱基-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替林及 其(1S,2S)非对映体14-0-{[5-氨基-2-氯-环己基硫基]-乙酰基}-木替林14-0-{[4-氨基-2-氯-环己基硫基]-乙酰基}-木替林14-0-[(4-氨基-1-羟基-环己基甲基硫基)-乙酰基]-木替林14-0-([(lR，2R)-2-羟基-5-(3-曱氨基-丙基)-环己基硫基]-乙酰基卜木 替林及其(1S,2S)非对映体14-0-([(lR,2R)-2-羟基-4-(3-甲氨基-丙基)-环己基硫基]-乙酰基)-木 替林及其(1S，2S)非对映体14-0-([(lR,2R)-5-(3-氨基-丙基)-2-羟基-环己基硫基]-乙酰基)-木替 林及其(1S,2S)非对映体14-0-([(lR,2R)-4-(3-氨基-丙基)-2-鞋基-环己基硫基]-乙酰基)-木替 林及其(1S,2S)非对映体14-0-([(6R,8R)-8-氨基-l,4-二氧杂-螺[4.5]癸-6-基硫基]-乙酰基)-木 替林及其(6S,8S)非对映体14_0-{[4-氨基-2-甲氧基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林和14-0-{[5-氨基-2-曱氧基-环己基硫基]-乙酰基}-木替林。
8. 根据权利要求1 7任何一项的化合物，其为盐和/或溶剂化物的 形式。
9. 根据权利要求1 8任何一项的化合物，其用作药物原料药。
10. 治疗由微生物介导的疾病的方法，其包括给需要这种治疗的受 试者施用有效量的权利要求1 -8任何一项的化合物。
11. 药用药物组合物，其包括与至少一种药用赋形剂相结合的权利 要求1 ~ 8任何一项的化合物。
12. 根据权利要求11的药用药物组合物，其还包括另一种药物活性剂。
全文摘要
本发明涉及式(I)化合物，其中n为0～4；m为0或1，条件是硫原子和R₃为连位(如果m＝0则R₃位于2′位，和如果m＝1则R₃位于1′位)；R为乙基或乙烯基；R₁为氢或(C_1-6)烷基；R₂为氢或-(C_3-6)环烷基、或-未取代的(C_1-6)烷基、或-被一个或多个以下取代基取代的(C_1-6)烷基-羟基(优选一个或两个)、-甲氧基、-卤素、-(C_3-6)环烷基，或R₁和R₂与它们连接的氮原子一起形成5～7元杂环，所述杂环包含至少一个氮原子或一个氮原子和一个另外例如选自N或O的杂原子，或R₁为羟基且R₂为甲酰基；R₃为OH、OR₄、卤素原子、或-条件是R₃连接于2′则R₃表示-O-(CH₂)_P-O-，其中p为2或3；R₄为未取代的(C_1-6)烷基或(C_3-6)环烷基。
文档编号C07C323/00GK101668738SQ200880007780
公开日2010年3月10日 申请日期2008年3月19日 优先权日2007年3月20日
发明者A·R·C·M·巴卢素, D·斯特里克曼, M·费伦西克, R·巴德格鲁伯, R·芒, R·诺瓦克, W·海尔迈耶 申请人:纳布里瓦治疗股份公司