专利名称：卡贝缩宫素的制备方法
技术领域：
本发明属于多肽药物制备方法技术领域，特别涉及卡贝缩宫素的制备方法。
背景技术：
卡贝缩宫素(Carbetocin)是一种合成的具有激动剂性质的长效催产素8肽类似物，其临床和药理特性与天然产生的催产素类似。像催产素一样，卡贝缩宫素与子宫平滑肌的催产素受体结合，引起子宫的节律性收缩，在原有的收缩基础上，增加其频率和增加子宫张力。在非妊娠状态下，子宫的催产素受体含量很低，在妊娠期间增加，分娩时达高峰。因此卡贝缩宫素对非妊娠的子宫没有作用，但是对妊娠的子宫和刚生产的子宫具有有效的子宫收缩作用。不论是静脉注射还是肌肉注射卡贝缩宫素后，子宫迅速收缩，可在2分钟内达到一个明确强度。单剂量静脉注射卡贝缩宫素对子宫的活性作用可持续大约1个小时，因此足以预防刚生产后的产后出血。产后给予卡贝缩宫素后，在收缩的频率与幅度方面都比催产素为长。研究表明，当硬膜外或腰麻下剖腹产术后立即单剂量静脉给予卡贝缩宫素 100 μ g，在预防子宫张力不足和减少产后出血方面，卡贝缩宫素明显优于安慰剂。在产后的早期给予卡贝缩宫素也可以促进子宫的恢复。卡贝缩宫素具有以下的结构
权利要求
1.卡贝缩宫素的制备方法，包括固相多肽合成法制备卡贝缩宫素树脂、卡贝缩宫素树脂酸解得到卡贝缩宫素粗品、卡贝缩宫素粗品纯化得到卡贝缩宫素纯品，其中固相多肽合成法制备卡贝缩宫素树脂的方法包括如下步骤(1)以氨基树脂为起始树脂载体，依次通过偶联反应接入卡贝缩宫素氨基酸序列中相对应的Fmoc-保护氨基酸，得线形卡贝缩宫素树脂
2.根据权利要求1所述的卡贝缩宫素的制备方法，其特征在于步骤(1)、(4)的偶联反应添加缩合试剂和活化试剂；缩合试剂选自N，N-二异丙基碳二亚胺、N，N-二环己基碳二亚胺，六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷、2- (7-氮杂-IH-苯并三氮唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯、苯并三氮唑-N，N，N' ,N'-四甲基脲六氟磷酸盐或O-苯并三氮唑-N，N，N'， N'-四甲基脲四氟硼酸酯；活化试剂选自1-羟基苯并三唑、N-羟基-7-氮杂苯并三氮唑。
3.根据权利要求1所述的卡贝缩宫素的制备方法，其特征在于步骤(I)Fmoc-保护氨基酸的摩尔用量为氨基树脂中氨基总摩尔数的1. 2 6倍。
4.根据权利要求1所述的卡贝缩宫素的制备方法，其特征在于步骤(1) 所述的 Fmoc-保护氨基酸分别为Rnoc-Gly-0H，Fmoc-Leu-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Cys((CH2) 3C00R)，Fmoc-Asn-OH，Fmoc-Gln-OH，Fmoc-IIe-OH, Fmoc-Tyr(Me)-OH。
5.根据权利要求1所述的卡贝缩宫素的制备方法，其特征在于步骤(2)脱去侧链烯丙基的试剂为四三苯基膦钯和苯硅烷，四三苯基膦钯与苯硅烷摩尔比为1 8 12，四三苯基膦钯用量为侧链烯丙基摩尔量的0. 2 0. 3倍。
6.根据权利要求1所述的卡贝缩宫素的制备方法，其特征在于步骤(1)偶联反应前去Fmoc保护的试剂为哌啶/N，N- 二甲基甲酰胺混合溶液，混合溶液按体积比计含哌啶 10 30%。
7.根据权利要求1所述的卡贝缩宫素的制备方法，其特征在于步骤(1)、(3)脱去 Fmoc保护的试剂为10 30 % (V/V)哌啶/N，N- 二甲基甲酰胺溶液，使用的脱Fmoc保护试剂用量为所投料树脂重量的5 15倍。
8.根据权利要求1 7任一项所述的卡贝缩宫素的制备方法，其特征在于步骤(1) (4)中Gin, Asn的侧链用Trt保护。
9.根据权利要求1 8任一项所述的卡贝缩宫素的制备方法，其特征在于酸解时酸解剂按体积比计为80 95%三氟醋酸、1 10% 1，2-乙二硫醇和水的混合溶剂，酸解剂用量为所投肽料树脂重量的4 15倍。
10.根据权利要求1 9任一项所述的卡贝缩宫素的制备方法，其特征在于所述氨基树脂为 Rink Amide AM 树脂、Rink Amide MBHA 树脂、Rink Amide 树脂或 Sieber 树脂。
全文摘要
本发明属于多肽药物制备方法技术领域，特别涉及卡贝缩宫素的制备方法。本发明的制备方法使用了新型的巯基保护氨基酸Fmoc-Cys((CH2)3COOAll)，反应效率高、反应条件温和。制备方法包括固相多肽合成法制备卡贝缩宫素树脂、卡贝缩宫素树脂酸解得到卡贝缩宫素粗品、卡贝缩宫素粗品纯化得到卡贝缩宫素纯品，其中固相多肽合成法制备卡贝缩宫素树脂的方法(1)以氨基树脂为起始树脂载体，依次接入卡贝缩宫素氨基酸序列中相对应的Fmoc-保护氨基酸，得线形卡贝缩宫素树脂(2)线形卡贝缩宫素树脂脱去侧链烯丙基；(3)脱去Fmoc保护，(4)环化反应得卡贝缩宫素树脂。本发明采用与接肽链相同的固相偶联反应进行环化，反应条件温和，环化率达到99.5％以上，产品收率高。
文档编号C07K1/06GK102260326SQ201110151928
公开日2011年11月30日 申请日期2011年6月8日 优先权日2011年6月8日
发明者文永均, 曾德志, 王晓莉, 郭德文 申请人:成都圣诺科技发展有限公司