专利名称：一种提取纯化角胡麻苷c的方法
技术领域：
本发明涉及制药行业的天然植物有效成分的提取纯化方法，特别涉及一种从马先蒿中提取纯化角胡麻苷C的方法。
背景技术：
角胡麻苷C(ciStan0Side C)是一种苯丙素苷类化合物，分子式为C3tlH38O15,分子量为638. 61。该化合物广泛分布于马先蒿属、角蒿属、醉鱼草属等多个属中。实验研究表明， 角胡麻苷具有多种药理活性，例如拓扑异构酶II抑制剂(高建军，李润召，韩桂秋，等.阿拉善马先蒿中苯丙素苷类拓扑异构酶抑制剂的研究[J].1996，28(l) :50-51.)、抗疲劳活性(廖飞，郑荣梁，高建军，等.毛蕊花苷与角胡麻苷对肌肉疲劳的延缓[J]. 1999，13 (4) 310-311)、羟自由基清除活性(石益民，王文锋，康小红，等.用脉冲辐解法研究苯丙素甙及其类似物与羟自由基的反应[J]· 1999，29 (5) =503-508)等。目前角胡麻苷C的提取主要来源于马先蒿属植物马先蒿等，具有清热解毒、利尿、 保肝等作用，该属植物的研究重点在于其化学成分分析鉴别，提取方法为常规柱层析分离， 仅限于实验室少量制备。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种从马先蒿中提取分离角胡麻苷C的方法，为角胡麻苷C的制备提供简便的提取纯化方法。为达到上述目的，本发明采用的技术方案是1)提取取马先蒿原料粉碎后，加水煎煮，过滤，浓缩，得马先蒿提取液；2)富集将马先蒿提取液用XAD-I大孔吸附树脂柱吸附，然后用20-70%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；3)除杂将乙醇洗脱液通过氧化铝柱，收集下注液；4)分离将下注液浓缩成浸膏，用2-3倍量硅胶拌样上柱，采用硅胶柱层析，以低级醇和乙酸乙酯或正丁醇的混合溶液，即低级醇乙酸乙酯或正丁醇=4-50 100洗脱， 收集相应的角胡麻苷C溶液；5)结晶将所收集的角胡麻苷C溶液浓缩至浸膏状后用无水乙醇溶解，过滤，结晶，重结晶3-5次，得到纯度大于97%的角胡麻苷C晶体。步骤中所述低级醇为甲醇或乙醇。步骤(5)中先用丙酮-甲醇混合溶液溶解、结晶，再用90%-100%%乙醇重结晶。本发明包括马先蒿中角胡麻苷C的提取、大孔树脂富集、氧化铝除杂、硅胶柱分离和结晶等步骤，该方法具有操作简单、成本低、易于产业化等优点。本发明工艺稳定、重现性好、产品纯度高、适宜于工业化大规模生产。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。实施例1 取马先蒿全草粉碎后用水煎煮2次，液料比为8 l(L/kg)，每次煎煮2小时，过滤，浓缩得到马先蒿提取液，将马先蒿提取液用XAD-I大孔吸附树脂柱以1. 5BV/h流速吸附，然后用20%乙醇洗脱，薄层跟踪监测，收集角胡麻苷C洗脱液，将洗脱液过氧化铝柱，收集下注液，浓缩成浸膏，与2倍量的硅胶拌样上柱，以甲醇乙酸乙酯体积比12 100进行洗脱，用薄层跟踪检测，收集相应的角胡麻苷C溶液，将角胡麻苷C溶液浓缩至浸膏，用丙酮-甲醇0 1)混合溶液溶解结晶，最后再用95%乙醇重结晶3次，即得到纯度为95.9% 角胡麻苷C晶体。实施例2:取马先蒿全草粉碎后用水煎煮3次，液料比为10 l(L/kg)，每次煎煮1小时，过滤，浓缩得到马先蒿提取液，将马先蒿提取液用XAD-I大孔吸附树脂柱以1. 5BV/h流速吸附，然后用40%乙醇洗脱，薄层跟踪监测，收集角胡麻苷C洗脱液，将洗脱液过氧化铝柱，收集下注液，浓缩成浸膏，与3倍量的硅胶拌样上柱，以甲醇正丁醇体积比25 100进行洗脱，用薄层跟踪检测，收集相应的角胡麻苷C溶液，将角胡麻苷C溶液浓缩至浸膏，用丙酮-甲醇(3 1)混合溶液溶解结晶，最后再用无水乙醇重结晶3次，即得到纯度为95. 3% 的角胡麻苷C晶体。实施例3:取马先蒿全草粉碎后用水煎煮3次，液料比为15 l(L/kg)，每次煎煮1.5小时， 过滤，浓缩得到马先蒿提取液，将马先蒿提取液用XAD-I大孔吸附树脂柱以1. OBV/h流速吸附，然后用70%乙醇洗脱，薄层跟踪监测，收集角胡麻苷C洗脱液，将洗脱液过氧化铝柱，收集下注液，浓缩成浸膏，与2倍量的硅胶拌样上柱，以乙醇正丁醇体积比50 100进行洗脱，用薄层跟踪检测，收集相应的角胡麻苷C溶液，将角胡麻苷C溶液浓缩至浸膏，用丙酮-甲醇(5 1)混合溶液溶解结晶，最后再用90%乙醇重结晶5次，即得到纯度为96.7% 角胡麻苷C晶体。实施例4:取马先蒿全草粉碎后用水煎煮2次，液料比为20 l(L/kg)，每次煎煮2小时，过滤，浓缩得到马先蒿提取液，将马先蒿提取液用XAD-I大孔吸附树脂柱以1. OBV/h流速吸附，然后用60%乙醇洗脱，薄层跟踪监测，收集角胡麻苷C洗脱液，将洗脱液过氧化铝柱，收集下注液，浓缩成浸膏，与3倍量的硅胶拌样上柱，以甲醇正丁醇体积比18 100进行洗脱，用薄层跟踪检测，收集相应的角胡麻苷C溶液，将角胡麻苷C溶液浓缩至浸膏，用丙酮-甲醇0 1)混合溶液溶解结晶，最后再用95%乙醇重结晶4次，即得到纯度为96.2% 角胡麻苷C晶体。实施例5 取马先蒿全草粉碎后用水煎煮2次，液料比为6 l(L/kg)，每次煎煮2小时，过滤，浓缩得到马先蒿提取液，将马先蒿提取液用XAD-I大孔吸附树脂柱以1. OBV/h流速吸附，然后用50 %乙醇洗脱，薄层跟踪监测，收集角胡麻苷C洗脱液，将洗脱液过氧化铝柱， 收集下注液，浓缩成浸膏，与3倍量的硅胶拌样上柱，以甲醇正丁醇体积比4 100进行洗脱，用薄层跟踪检测，收集相应的角胡麻苷C溶液，将角胡麻苷C溶液浓缩至浸膏，用丙酮-甲醇(3 1)混合溶液溶解结晶，最后再用90%乙醇重结晶4次，即得到纯度为95.3% 角胡麻苷C晶体。实施例6 取马先蒿全草粉碎后用水煎煮3次，液料比为12 l(L/kg)，每次煎煮1.5小时， 过滤，浓缩得到马先蒿提取液，将马先蒿提取液用XAD-I大孔吸附树脂柱以1. 5BV/h流速吸附，然后用30%乙醇洗脱，薄层跟踪监测，收集角胡麻苷C洗脱液，将洗脱液过氧化铝柱，收集下注液，浓缩成浸膏，与2倍量的硅胶拌样上柱，以乙醇乙酸乙酯体积比32 100进行洗脱，用薄层跟踪检测，收集相应的角胡麻苷C溶液，将角胡麻苷C溶液浓缩至浸膏，用丙酮-甲醇0 1)混合溶液溶解结晶，最后再用无水乙醇重结晶3次，即得到纯度为95.6% 角胡麻苷C晶体。
权利要求
1.一种提取纯化角胡麻苷C的方法，其特征在于包括以下步骤1)提取取马先蒿原料粉碎后，加水煎煮，过滤，浓缩，得马先蒿提取液；2)富集将马先蒿提取液用XAD-I大孔吸附树脂柱吸附，然后用20-70%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；3)除杂将乙醇洗脱液通过氧化铝柱，收集下注液；4)分离将下注液浓缩成浸膏，用2-3倍量硅胶拌样上柱，采用硅胶柱层析，以低级醇和乙酸乙酯或正丁醇的混合溶液，即低级醇乙酸乙酯或正丁醇=4-50 100洗脱，收集相应的角胡麻苷C溶液；5)结晶将所收集的角胡麻苷C溶液浓缩至浸膏状后用无水乙醇溶解，过滤，结晶，重结晶3-5次，得到纯度大于97%的角胡麻苷C晶体。
2.根据权利要求1所述的提取纯化角胡麻苷C的方法，其特征在于步骤中所述低级醇为甲醇或乙醇。
3.根据权利要求1所述的提取纯化角胡麻苷C的方法，其特征在于步骤(5)中先用丙酮-甲醇混合溶液溶解、结晶，再用90% -100%%乙醇重结晶。
全文摘要
一种提取纯化角胡麻苷C的方法，将马先蒿原料粉碎，加水煎煮、过滤浓缩，提取液经大孔吸附树脂柱吸附再以20-70％乙醇依次洗脱，高浓度乙醇洗脱液过氧化铝柱，回收乙醇后再用硅胶柱层析分离，结晶得到纯度97％以上的角胡麻苷C晶体。本发明包括马先蒿中角胡麻苷C的提取、大孔树脂富集、氧化铝除杂、硅胶柱分离、结晶等工艺，该方法具有成本低、操作简单、易于工业化等优点。
文档编号C07H15/18GK102250162SQ20111015177
公开日2011年11月23日 申请日期2011年6月7日 优先权日2011年6月7日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司