专利名称：一种汉伯藤黄素的制备方法
一种汉伯藤黄素的制备方法技术领域
本发明属于中药提取分离技术领域，涉及一种汉伯藤黄素的制备方法。
技术背景
藤黄系藤黄科(Guttiferae)藤黄伪hanburyi Hook. f.所分泌的胶质树脂味酸涩，有毒，具消肿化毒之功效，始载于《海药本草》，生于热带地区，主要分布与印度和泰国，在临床上可用于治疗痈疽肿毒、顽癣、跌打损伤等，现代研究表明藤黄中的多种化学成分对多种肿瘤细胞具有明显的抑制作用，且安全、不良反应小。藤黄的化学成分主要含 xanthone类化合物，目前已报道的从该树脂中分离得到的化合物达二十余个，均为笼状多异戊烯基xanthone类，该类化合物不仅结构特殊，且多数具有较强的HeLa和HEL细胞毒活性。
汉伯藤黄素(Hanburin)为黄色粉末，分子式为C33H4tlO6,分子量为532. 68， mp. 176°C，是从藤黄中提取分离得到的一种咕吨酮类化合物。药理研究表明汉伯藤黄素对 HeLa细胞和人胚肺成纤维细胞(HEL)的MIC均为12. 5μ g/mL。本发明提供一种汉伯藤黄素的制备方法，为藤黄的进一步开发利用提供了药理原料和理论支持。发明内容
本发明的目的在于提供一种汉伯藤黄素的制备方法，采用超临界(X)2萃取、聚酰胺树脂柱分离及重结晶等步骤从藤黄中提取分离汉伯藤黄素，该方法提取效率高、产品纯度高、易于实现工业化生产。
本发明是通过以下技术方案实现的一种汉伯藤黄素的制备方法，其特征在于包括以下步骤以藤黄树脂为原料，加入超临界CO2萃取罐，以丙酮为夹带剂，在压力20-35MPa，温度35-70°C条件下萃取4- ，收集萃取物，将萃取物以乙醇溶解，按萃取物硅胶=1:2-3比例加入硅胶，拌勻后低温烘干，用石油醚回流脱脂，再用乙醇回流溶解，过滤，浓缩，将浓缩液通过聚酰胺树脂柱，乙醇洗脱，收集汉伯藤黄素对应流分，减压回收试剂，重结晶即得产品。
所述夹带剂为体积百分比70-100%的丙酮溶液，加入量为药材量的10-18%。
所述超临界(X)2分离釜压力为4. 5-7. 5MPa,分离温度为20-45°C。
所述聚酰胺树脂柱层析中，洗脱剂乙醇体积百分比为60-90%。
本发明的有益效果在于本发明采用临界(X)2萃取条件温和、提取时间快、生产周期短、操作参数容易控制，因此，有效成分及产品质量稳定，且工艺流程简单，操作方便，节省劳动力和大量有机溶剂，减少“三废”污染，是一种环保、适用于工业化生产的方法。
具体实施方式
下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明，下列实施例旨在举例描述本发明，而不是以任何方式限制本发明。
实施例1:将藤黄药材粉碎，取5kg投入超临界萃取罐内，加入体积百分比为80%的丙酮溶液作为夹带剂，加入量为0. 6kg (原料重量的12%)，在萃取压力21. 3MPa，萃取温度44°C，CO2流量 18L/h条件下萃取他，调节分离釜压力为4. 5MPa，分离温度为32°C，得藤黄萃取物，将萃取物用乙醇溶解，按萃取物硅胶1:3的比例加入硅胶，搅拌均勻后低温烘干，再加入石油醚回流提取3次，分离出石油醚溶解物，得到不溶于石油醚的固形物，再将固形物用乙醇回流溶解，过滤，将滤液浓缩，通过聚酰胺树脂柱，75%乙醇溶液洗脱，收集含汉伯藤黄素洗脱液， 减压回收试剂，静置析晶，将粗晶再用正己烷-丙酮重结晶，得到0. 63g汉伯藤黄素单体化合物，其纯度为78. 6%。
实施例2:将藤黄药材粉碎，取5kg投入超临界萃取罐内，加入体积百分比为70%的丙酮溶液作为夹带剂，加入量为0. 9kg (原料重量的18%)，在萃取压力28. 4MPa，萃取温度35°C，CO2流量 15L/h条件下萃取他，调节分离釜压力为6. 5MPa，分离温度为20°C，得藤黄萃取物，将萃取物用乙醇溶解，按萃取物硅胶1:2的比例加入硅胶，搅拌均勻后低温烘干，再加入石油醚回流提取4次，分离出石油醚溶解物，得到不溶于石油醚的固形物，再将固形物用乙醇回流溶解，过滤，将滤液浓缩，通过聚酰胺树脂柱，60%乙醇溶液洗脱，收集含汉伯藤黄素洗脱液， 减压回收试剂，静置析晶，将粗晶再用正己烷-丙酮重结晶，得到0. 68g汉伯藤黄素单体化合物，其纯度为75. m。
实施例3:将藤黄药材粉碎，取5kg投入超临界萃取罐内，加入体积百分比为95%的丙酮溶液作为夹带剂，加入量为0. 5kg (原料重量的10%)，在萃取压力34. 8MPa，萃取温度70°C，CO2流量 20L/h条件下萃取4h，调节分离釜压力为7. 5MPa，分离温度为45°C，得藤黄萃取物，将萃取物用乙醇溶解，按萃取物硅胶1:3的比例加入硅胶，搅拌均勻后低温烘干，再加入石油醚回流提取2次，分离出石油醚溶解物，得到不溶于石油醚的固形物，再将固形物用乙醇回流溶解，过滤，将滤液浓缩，通过聚酰胺树脂柱，90%乙醇溶液洗脱，收集含汉伯藤黄素洗脱液， 减压回收试剂，静置析晶，将粗晶再用正己烷-丙酮重结晶，得到0. 74g汉伯藤黄素单体化合物，其纯度为73. 4%。
权利要求
1.一种汉伯藤黄素的制备方法，其特征在于包括以下步骤以藤黄树脂为原料，加入超临界(X)2萃取罐，以丙酮为夹带剂，在压力20-35MPa，温度35_70°C条件下萃取4_8h，收集萃取物，将萃取物以乙醇溶解，按萃取物硅胶=1:2-3比例加入硅胶，拌勻后低温烘干，用石油醚回流脱脂，再用乙醇回流溶解，过滤，浓缩，将浓缩液通过聚酰胺树脂柱，乙醇洗脱， 收集汉伯藤黄素对应流分，减压回收试剂，重结晶即得产品。
2.如权利要求1所述的一种汉伯藤黄素的制备方法，其特征在于所述夹带剂为体积百分比70-100%的丙酮溶液，加入量为药材量的10-18%。
3.如权利要求1所述的一种汉伯藤黄素的制备方法，其特征在于所述超临界(X)2分离釜压力为4. 5-7. 5MPa，分离温度为20_45°C。
4.如权利要求1所述的一种汉伯藤黄素的制备方法，其特征在于所述聚酰胺树脂柱层析中，洗脱剂乙醇体积百分比为60-90%。
全文摘要
本发明提供一种汉伯藤黄素的制备方法，其特征在于采用超临界CO2萃取、聚酰胺树脂柱分离及重结晶等步骤从藤黄中提取分离汉伯藤黄素。本发明方法提取效率高、产品纯度高、易于实现工业化生产。
文档编号C07D493/10GK102503950SQ201110303499
公开日2012年6月20日 申请日期2011年10月10日 优先权日2011年10月10日
发明者刘东锋, 郭琴 申请人:南京泽朗医药科技有限公司