专利名称：一种提取制备长叶松酸的方法
技术领域：
本发明属于天然药物领域，具体涉及一种提取制备长叶松酸的方法。
背景技术：
长叶松酸(Palustricacid),分子式为 C2tlH3tlO2,分子量为 302. 46, CAS 号为1945-53-5，是二萜酸类化合物，mp. 162-167 °C。药理研究表明，长叶松酸具有拒食作用，对锯角叶锋等有强的拒食作用。长叶松酸还可抗血小板聚集，可抑制兔血小板由PAF、ADP和隹丐离子甾体诱导的血小板聚集。长叶松酸广泛存在于柏科植物刺桧Juniperus axycedrusL.和松科植物马尾松massoniana Lamb.和长叶松ZY/ws palustris Mill.中。 现有文献中还没有检索到从马尾松树脂中提取制备高纯度长叶松酸的工艺报道。
发明内容
本发明的目的就是提供一种提取制备长叶松酸的方法，以填补目前高纯度长叶松酸提取制备技术的空白。本发明的目的是通过以下技术方案实现的
一种提取制备长叶松酸的方法，其特征在于包括以下步骤
1)乙醇提取将马尾松树脂粉碎，投入提取罐，加入体积百分比55-75%的乙醇，采用回流提取或连续提取等方法提取2-4小时，收集提取液，用2%药用活性炭脱色，过滤，回收乙醇得到浸膏；
2)大孔树脂吸附将所得浸膏用去离子水稀释，经大孔吸附树脂柱纯化，先用去离子水，再用50-70%乙醇洗脱，减压回收乙醇得到提取物；
3)高速逆流色谱纯化将所得提取物用高速逆流色谱法进一步纯化，采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，得到纯度95%以上的长叶松酸。步骤3)所述溶剂系统为甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水，其体积比为(15-17):(20-24)(3-6) : (12-15)。本发明的有益效果是本发明以大孔吸附树脂为载体，乙醇为溶剂，经高速逆流色谱进一步分离纯化，得到纯度大于95%的长叶松酸产品，所用试剂为安全无毒试剂，可回收重复利用。本发明方法工序简单、绿色环保，产品纯度高。
具体实施例方式 实施例I:
将马尾松树脂药材粉碎，取5kg加入20L70%乙醇溶液加热回流提取2小时，过滤，滤渣再加入12L70%乙醇溶液回流提取I. 5小时，过滤，合并两次提取液，用2%药用活性炭脱色，过滤，回收乙醇，再用去离子水稀释到7L，通过预处理好的DlOl大孔吸附树脂柱，先用去离子水洗脱至洗脱液无色，再用70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩液干燥得到总二萜提取物。将总二萜提取物用高速逆流色谱法进行纯化，以甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水(17:24:3. 5:14)为溶剂系统，下相为流动相，上相为固定相，收集长叶松酸流分，回收溶剂得到长叶松酸，经HPLC法测定，其纯度为96. 8%。实施例2
将马尾松树脂药材粉碎，取5kg加入22L60%乙醇溶液加热回流提取3小时，过滤，滤渣再加入18L60%乙醇溶液回流提取2小时，过滤，药渣再加入12L60%乙醇回流提取I. 5小时，过滤，合并三次提取液，用2%药用活性炭脱色，过滤，回收乙醇，再用去离子水稀释到7L，通过预处理好的DlOl大孔吸附树脂柱，先用去离子水洗脱至洗脱液无色，再用65%乙醇洗脱，收集65%乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩液干燥得到总二萜提取物。将总二萜提取物用高速逆流色谱法进行纯化，以甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水(15:20:6:12)为溶剂系统，下相为流动相，上相为固定相，收集长叶松酸流分，回收溶剂得到长叶松酸，经HPLC法测定，其纯度为96. 4%。实施例3
将马尾松树脂药材粉碎，取5kg加入18L55%乙醇溶液加热回流提取4小时，过滤，滤渣再加入14L55%乙醇溶液回流提取2. 5小时，过滤，合并两次提取液，用2%药用活性炭脱色，过滤，回收乙醇，再用去离子水稀释到7L，通过预处理好的DlOl大孔吸附树脂柱，先用去离子水洗脱至洗脱液无色，再用50%乙醇洗脱，收集50%乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩液干燥得到总二萜提取物。将总二萜提取物用高速逆流色谱法进行纯化，以甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水(16:23:5:15)为溶剂系统，下相为流动相，上相为固定相，收集长叶松酸流分，回收溶剂得到长叶松酸，经HPLC法测定，其纯度为97. 2%。实施例4:
将马尾松树脂药材粉碎，取5kg加入24L65%乙醇溶液加热回流提取3. 5小时，过滤，滤渣再加入18L65%乙醇溶液回流提取I. 5小时，过滤，药渣再加入15L65%乙醇提取I. 5小时，过滤，合并三次提取液，用2%药用活性炭脱色，过滤，回收乙醇，再用去离子水稀释到7L，通过预处理好的AB-8大孔吸附树脂柱，先用去离子水洗脱至洗脱液无色，再用60%乙醇洗脱，收集60%乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩液干燥得到总二萜提取物。将总二萜提取物用高速逆流色谱法进行纯化，以甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水(17:21:4:13)为溶剂系统，下相为流动相，上相为固定相，收集长叶松酸流分，回收溶剂得到长叶松酸，经HPLC法测定，其纯度为98. 1%。实施例5:
将马尾松树脂药材粉碎，取5kg加入25L75%乙醇溶液加热回流提取2小时，过滤，滤渣再加入20L75%乙醇溶液回流提取I. 5小时，过滤，合并两次提取液，用2%药用活性炭脱色，过滤，回收乙醇，再用去离子水稀释到7L，通过预处理好的HPD100大孔吸附树脂柱，先用去离子水洗脱至洗脱液无色，再用55%乙醇洗脱，收集55%乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩液干燥得到总二萜提取物。将总二萜提取物用高速逆流色谱法进行纯化，以甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水(15:22:3:14)为溶剂系统，下相为流动相，上相为固定相，收集长叶松酸流分，回收溶剂得到长叶松酸，经HPLC法测定，其纯度为97. 6%。
权利要求
1.一种提取制备长叶松酸的方法，其特征在于包括以下步骤 1)乙醇提取将马尾松树脂粉碎，投入提取罐，加入体积百分比55-75%的乙醇，采用回流提取或连续提取等方法提取2-4小时，收集提取液，用2%药用活性炭脱色，过滤，回收乙醇得到浸膏； 2)大孔树脂吸附将所得浸膏用去离子水稀释，经大孔吸附树脂柱纯化，先用去离子水，再用50-70%乙醇洗脱，减压回收乙醇得到提取物； 3)高速逆流色谱纯化将所得提取物用高速逆流色谱法进一步纯化，采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，得到纯度95%以上的长叶松酸。
2.根据权利要求I所述的提取制备长叶松酸的方法，其特征在于，步骤3)所述溶剂系统为甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水，其体积比为(15-17) :(20-24) :(3-6) :(12-15)。
全文摘要
本发明涉及天然药物的分离，具体的说是一种提取制备长叶松酸的方法，将马尾松树脂粉碎后，用乙醇提取、脱色、过滤、浓缩得到浸膏，再用去离子水稀释，经大孔吸附树脂柱纯化、洗脱、浓缩，干燥得粗品，粗品用高速逆流色谱法进一步纯化，结晶干燥得到纯度95%以上的长叶松酸。本发明实现后与传统工艺相比，具有简便、快速、制备量大、产品纯度高等优点，易于推广使用。
文档编号C07C61/29GK102875365SQ201210360010
公开日2013年1月16日 申请日期2012年9月25日 优先权日2012年9月25日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司