专利名称：一种绵枣儿皂苷b的制备方法
技术领域：
本发明属于天然药物化学领域，尤其是涉及一种绵枣儿皂苷B的制备方法。
背景技术：
绵枣儿为风信子科绵枣儿属多年生草本植物，鳞茎含绵枣儿皂苷、绵枣儿素等皂苷成分，具有强心利尿、消肿止痛作用。绵枣儿皂苷B为留体皂苷，是绵枣儿皂苷的主要成分之一，具有抗肿瘤活性，CAS号 144863-06-9，分子式 C59H94O29，分子量 1267.37。通过文献检索，尚未发现有绵枣儿皂甙B的制备方法公开。
发明内容
本发明的目的是解决现有技术不足和缺陷，提供一种高效、简单的绵枣儿皂苷B的制备方法。本发明的目的是采用以下技术方案实现的:一种绵枣儿皂苷B的制备方法，其特征在于包含以下步骤:
A.取绵枣儿打浆，加生物酶酶解3-20小时，再加4-10倍量70-90%乙醇溶液回流提取，提取液减压浓缩，浓缩液加水稀释，上大孔树脂柱吸附，乙醇溶液梯度洗脱，洗脱液减压回收试剂，浓缩液以水饱和的正丁醇萃取，萃取液浓缩至干，以乙醇溶解，加入丙酮至沉淀不再产生，过滤，得粗提物；
B.上述粗提物利用高速逆流 色谱制备，依据蒸发光散射检测器谱图分别收集流分，干燥流分即得。所述步骤A中的生物酶可选纤维素酶、果胶酶和淀粉酶中的一种。所述步骤A中的大孔树脂型号可选ADS-21、AB-8、NK-9和HPD500中的一种。所述步骤A中的乙醇溶液梯度洗脱为:以5-10倍柱体积30-50%乙醇溶液洗脱杂质，再以5-10倍柱体积60-80%乙醇溶液洗脱成分。步骤B中的高速逆流色谱溶剂系统为正丁醇、冰醋酸和水溶液混合，比例
3-5:1-2:4-7,上相作为固定相，下相作为流动相。采用本方法制备绵枣儿皂苷B，提取效率高，产品收率高，操作简单，易于工业化生产。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
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实施例1:
取新鲜绵枣儿鳞茎IOkg打浆加入多功能提取罐，加5%。纤维素酶酶解5小时，再加5倍量70%乙醇溶液回流提取3次，提取液减压浓缩，浓缩液加水稀释，上ADS-21大孔树脂柱吸附，以6倍柱体积50%乙醇溶液洗脱杂质，再以8倍柱体积70%乙醇溶液洗脱成分，洗脱液减压回收试剂，浓缩液以水饱和的正丁醇萃取3次，萃取液浓缩至干，以无水乙醇溶解，力口入丙酮至沉淀不再产生，过滤，得粗提物。取正丁醇、冰醋酸和水溶液混合，比例3:1:4，上相作为固定相，下相作为流动相，流动相溶解粗提物，以800rpm转速,流速2ml/min,用高速逆流色谱仪分离，依据蒸发光散射检测器谱图分别收集流分，干燥流分，得白色粉末3g，含量 98.2%ο实施例2:
取新鲜绵枣儿鳞茎IOkg打浆加入多功能提取罐，加3%。淀粉酶酶解20小时，再加7倍量80%乙醇溶液回流提取2次，提取液减压浓缩，浓缩液加水稀释，上AB-8大孔树脂柱吸附，以5倍柱体积40%乙醇溶液洗脱杂质，再以7倍柱体积80%乙醇溶液洗脱成分，洗脱液减压回收试剂，浓缩液以水饱和的正丁醇萃取3次，萃取液浓缩至干，以无水乙醇溶解，力口入丙酮至沉淀不再产生，过滤，得粗提物。取正丁醇、冰醋酸和水溶液混合，比例5:2:7，上相作为固定相，下相作为流动相，流动相溶解粗提物，以900rpm转速,流速3ml/min,用高速逆流色谱仪分离，依据蒸发光散射检测器谱图分别收集流分，干燥流分，得白色粉末3.2g，含量95.4%。实施例3:
取新鲜绵枣儿鳞茎IOkg打浆加入多功能提取罐，加2%。果胶酶酶解10小时，再加8倍量90%乙醇溶液回流提取2次，提取液减压浓缩，浓缩液加水稀释，上HPD500大孔树脂柱吸附，以8倍柱体积40%乙醇溶液洗脱杂质，再以6倍柱体积75%乙醇溶液洗脱成分，洗脱液减压回收试剂，浓缩液以水饱和的正丁醇萃取3次，萃取液浓缩至干，以无水乙醇溶解，力口入丙酮至沉淀不再产生，过滤，得粗提物。取正丁醇、冰醋酸和水溶液混合，比例4:1:5，上相作为固定相，下相作为流动相，流动相溶解粗提物，以850rpm转速,流速2ml/min,用高速逆流色谱仪分离，依据蒸发光散射检测器谱图分别收集流分，干燥流分，得白色粉末3.1g,含量97.2%ο·
权利要求
1.一种绵枣儿皂苷B的制备方法，其特征在于包含以下步骤: A.取绵枣儿打浆，加生物酶酶解3-20小时，再加4-10倍量70-90%乙醇溶液回流提取，提取液减压浓缩，浓缩液加水稀释，上大孔树脂柱吸附，乙醇溶液梯度洗脱，洗脱液减压回收试剂，浓缩液以水饱和的正丁醇萃取，萃取液浓缩至干，以乙醇溶解，加入丙酮至沉淀不再产生，过滤，得粗提物； B.上述粗提物利用高速逆流色谱制备，依据蒸发光散射检测器谱图分别收集流分，干燥流分即得。
2.如权利要求1所述的绵枣儿皂苷B的制备方法，其特征在于所述步骤A中的生物酶可选纤维素酶、果胶酶和淀粉酶中的一种。
3.如权利要求1所述的绵枣儿皂甙B的制备方法，其特征在于所述步骤A中的大孔树脂型号可选ADS-21、AB-8、NK-9和HPD500中的一种。
4.如权利要求1所述的绵枣儿皂苷B的制备方法，其特征在于所述步骤A中的乙醇溶液梯度洗脱为:以5-10倍柱体积30-50%乙醇溶液洗脱杂质，再以5-10倍柱体积60-80%乙醇溶液洗脱成分。
5.如权利要求1所述的绵枣儿皂苷B的制备方法，其特征在于所述步骤B中的高速逆流色谱溶剂系统为正 丁醇、冰醋酸和水溶液混合，比例3-5:1-2:4-7，上相作为固定相，下相作为流动相。
全文摘要
本发明公开了一种操作简便、污染小的绵枣儿皂苷B的制备方法。方法如下A.取绵枣儿打浆，加生物酶酶解3-20小时，再加4-10倍量70-90%乙醇溶液回流提取，提取液减压浓缩，浓缩液加水稀释，上大孔树脂柱吸附，乙醇溶液梯度洗脱，洗脱液减压回收试剂，浓缩液以水饱和的正丁醇萃取，萃取液浓缩至干，以乙醇溶解，加入丙酮至沉淀不再产生,过滤,得粗提物；B.上述粗提物利用高速逆流色谱制备,依据蒸发光散射检测器谱图分别收集流分，干燥流分即得。采用本发明生产绵枣儿皂苷B，所得产品纯度高，生产成本低。
文档编号C07J21/00GK103232517SQ20131018338
公开日2013年8月7日 申请日期2013年5月17日 优先权日2013年5月17日
发明者刘东锋, 万冬梅 申请人:南京泽朗医药科技有限公司