一种同时提取马钱子碱和士的宁的方法
【专利摘要】本发明涉及一种同时提取马钱子碱和士的宁的方法，其处理步骤包括：在马钱子粗粉中加入酸化水后，连续逆流超声提取后离心得到浸提液，调节PH值为9~10，直接通过预处理的大孔吸附树脂，先用等量的蒸馏水冲洗，再用8~10BV的70~80%的乙醇洗脱，流速为10mL/min，洗脱液减压浓缩至原体积的1/8~10，加入10%的硫酸乙醇溶液，静置，得到硫酸马钱子碱，反复结晶2次，得到纯度大于98%的马钱子碱；结晶后的母液碱化，加入10%的盐酸乙醇溶液，静置，得到盐酸士的宁。本发明采用现代提取技术连续逆流超声提取马钱子碱，具有工艺简单、反应条件温和、提取时间短、选择性高的优点，提取成本低，适用于工业化生产。
【专利说明】—种同时提取马钱子碱和士的宁的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于药物【技术领域】，涉及一种同时提取马钱子碱和士的宁的方法，尤其涉及一种利用连续逆流超声提取马钱子碱和士的宁的方法。
【背景技术】
[0002]马钱子为马钱科植物马钱或云南马钱的干燥成熟种子。马钱子性温，味苦，有大毒，具有通络止痛、散结消肿的功效。马钱子成熟种子中生物碱含量约为1.5飞％，其中主要生物碱是番木鳖碱(又称士的宁)和马钱子碱，其次还含有少量伪番木鳖碱、番木鳖次碱等。马钱子碱和士的宁均为脂溶性生物碱，为白色晶体，难溶于水，易溶于氯仿、乙醇、甲醇等。国内外学者研究证明马钱子碱具有显著的镇痛、消炎、抗肿瘤、中枢神经系统兴奋等作用，药理和临床应用价值更为突出；士的宁能选择性兴奋脊髓，增强骨骼肌的紧张度，临床用于轻瘫或弱视的治疗。
[0003]目前关于马钱子总生物碱的提取的专利和文献较多，主要使用水提取法、酸水提取法、醇回流提取法和氯仿提取法等，均存在诸多不足:耗能高、溶剂使用量大、回收难、污染环境等。如专利CN102432618A所述的一种马钱子总碱的提取分离纯化方法，该方法的缺点是使用毒性较大、挥发性大的氯仿做溶剂萃取，对操作者的健康和环境的影响均较大，不适宜于工业化生产。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种工艺简单、提取效率高，溶剂用量少且易于回收，适用于工业化生产的同时提取马钱子碱和士的宁的方法。
[0005]本发明包括以下步骤:
a.在马钱子粗粉中加入5~8倍(重量比)的pH值为2.0-5.0的盐酸水溶液酸化后，于4(T60°C、4(T60KHZ下连续逆流超声提取2~4h后离心得到浸提液，碱调节pH值为9~10 ；
b.将上述溶液直接通过预处理的大孔吸附树脂，先用等量的蒸馏水冲洗，再用flOBV的70-80%的乙醇洗脱，流速为10mL/min，洗脱液减压浓缩至原体积的1/8~10 ；
c.加入10%的硫酸乙醇溶液，静置，得到沉淀硫酸马钱子碱，反复结晶2次，得到纯度大于98%的马钱子碱；
d.上述结晶后的母液碱化后，加入10%的盐酸溶液，静置，得到盐酸士的宁。
[0006]步骤a和d中所述的调节pH的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠等无机碱。
[0007]步骤b中所述的预处理方法为用95%乙醇浸泡24h，再用蒸馏水洗至无醇味，改用5%的HCl浸泡2h，蒸馏水洗至中性，再改用5%的NaOH浸泡2h，蒸馏水洗至中性，备用。
[0008]步骤b中所述的大孔吸附树脂为AB-8、D-1Ol或D72阳离子交换树脂等。
[0009] 本发明采用连续逆流技术和超声提取同步进行，利用超声波的空化作用，破坏植物药材的细胞，使溶剂易于渗入细胞内，同时超声波的强烈振动能传递巨大能量给浸提的药材和溶剂，使它们做高速运动，加强了胞内物质的释放、扩散和溶解，使用最少的溶剂得到最大的溶解度，提高了提取效果，显著减少了溶剂用量，同时连续化作业，提高了生产效率。与传统的提取方法相比，该方法具有操作简单，提取效率高，提取成本低等优点，适于工业化生产。
[0010]下面将结合【具体实施方式】进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
[0011]【具体实施方式】:
实施例1:
在500g马钱子粗粉中加入5倍(重量比)的pH值为5.0的盐酸水溶液酸化后，于60°C、40KHz下连续逆流超声提取4h后离心得到浸提液，氢氧化钠调节pH值为9，将上述溶液直接通过预处理的AB-8大孔吸附树脂，先用等量的蒸馏水冲洗，再用8BV的70%的乙醇洗脱，流速为10mL/min，洗脱液减压浓缩至原体积的1/8，加入10%的硫酸乙醇溶液，静置，得到沉淀硫酸马钱子碱，反复结晶2次，经HPLC检测，得到8.0g纯度98.1%的马钱子碱；上述结晶后的母液碱化后，加入10%的盐酸溶液，静置，得到盐酸士的宁。
[0012]实施例2:
在500g马钱子粗粉中加入8倍(重量比)的pH值为4.0的盐酸水溶液酸化后，于50°C、60KHz下连续逆流超声提取3h后离心得到浸提液，氢氧化钾调节pH值为10，将上述溶液直接通过预处理的D-1Ol大孔吸附树脂，先用等量的蒸馏水冲洗，再用1BV的80%的乙醇洗脱，流速为10mL/min，洗脱液减压浓缩至原体积的1/10，加入10%的硫酸乙醇溶液，静置，得到沉淀硫酸马钱子碱，反复结晶2次，经HPLC检测，得到8.6g纯度为98.9%的马钱子碱；上述结晶后的母液碱化后，加入10%的盐酸溶液，静置，得到盐酸士的宁。
[0013]实施例3:
在500g马钱子粗粉中加入7倍(重量比)的pH值为2.0的盐酸水溶液酸化后，于40°C、50KHz下连续逆流超声提取2h后离心得到浸提液，碳酸钠调节pH值为9.5，将上述溶液直接通过预处理的D-72大孔吸附树脂，先用等量的蒸馏水冲洗，再用9BV的75%的乙醇洗脱，流速为10mL/min，洗脱液减压浓缩至原体积的1/9，加入10%的硫酸乙醇溶液，静置，得到沉淀硫酸马钱子碱，反复结晶2次，经HPLC检测，得到8.2g纯度为98.5%的马钱子碱；上述结晶后的母液碱化后，加入10%的盐酸溶液，静置，得到盐酸士的宁。
【权利要求】
1.一种同时提取马钱子碱和士的宁的方法，其特征在于，包括以下步骤: a.在马钱子粗粉中加入5~8倍(重量比)的pH值为2.0-5.0的盐酸水溶液酸化后，于4(T60°C、4(T60KHZ下连续逆流超声提取2~4h后离心得到浸提液，碱调节pH值为9~10 ； b.将上述溶液直接通过预处理的大孔吸附树脂，先用等量的蒸馏水冲洗，再用flOBV的70-80%的乙醇洗脱，流速为10mL/min，洗脱液减压浓缩至原体积的1/8~10 ； c.加入10%的硫酸乙醇溶液，静置，得到沉淀硫酸马钱子碱，反复结晶2次，得到纯度大于98%的马钱子碱； d.上述结晶后的母液碱化后，加入10%的盐酸溶液，静置，得到盐酸士的宁。
2.根据权利要求1所述的一种同时提取马钱子碱和士的宁的方法，其特征在于，步骤a和d中所述的调节pH的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠等无机碱。
3.根据权利要求1所述的一种同时提取马钱子碱和士的宁的方法，其特征在于，步骤b中所述的预处理方法为用95%乙醇浸泡24h，再用蒸馏水洗至无醇味，改用5%的HCl浸泡2h,蒸馏水洗至中性，再改用5%的NaOH浸泡2h，蒸馏水洗至中性，备用。
4.根据权利要求1所述的一种同时提取马钱子碱和士的宁的方法，其特征在于，步骤b中所述的大孔吸附树脂为 AB-8、D-101或D72阳离子交换树脂等。
【文档编号】C07D491/22GK104072505SQ201410266302
【公开日】2014年10月1日 申请日期:2014年6月16日 优先权日:2014年6月16日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京泽朗医药科技有限公司