一种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的方法
【专利摘要】本发明公开了一种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的方法，包括如下操作步骤：其特征在于包含原料准备、醇提、萃取、分离、纯化等步骤。使用本方法提取的骆驼蓬碱，具有提取工艺简单，得到的骆驼蓬碱纯度高等特点。
【专利说明】一种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的方法。
【背景技术】
[0002]叉毛蓬为藜科叉毛蓬属植物，一年生草本，它主要分布于中国新疆维吾尔族自治区，中亚和西伯利亚也有分布。研究结果表明，叉毛蓬群落是研究区内稳定性最高的一个群落，是演替的顶级群落。叉毛蓬具有很好的饲用价值，是荒漠草场中良好的牧草之一。
[0003]有关叉毛蓬的研究主要集中于生态学研究和遗传学研究方面，而有关其成分分析及生物活性的研究较少。
[0004]骆驼蓬碱的药理作用比较广泛，具有抗癌、抗菌、消炎、止痒、抗原虫及中枢神经系统、心血管系统和对肌肉离子通道等多方面药理作用。骆驼蓬生物碱的提取大多从骆驼蓬属植物中提取，工艺多采用乙醇回流、超声提取或混合溶剂提取后再用酸溶碱沉法制备。传统方法存在得率低、损失大、耗能高等缺点。
[0005]在干旱的沙漠地区生长的叉毛蓬中也含有大量的骆驼蓬碱。因此，本发明提供了一种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的方法。本方法工艺简单，得到的骆驼蓬碱纯度高。
【发明内容】
[0006]本发明的目的是提供一种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的方法。
[0007]本发明公开了一种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0008]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0009]醇提I?5次:按Ikg原料加入70?95%的乙醇2?5L的比例回流提取I?3h，过50?300 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 10% ；
[0010]萃取I?5次:将浓缩液在浓缩液体积I倍以上的石油醚、氯仿、乙酸乙酯中的至少一种中萃取，过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 10% ；
[0011]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.3?0.5，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物。
[0012]上述所得化合物I粗提物，经确定该化合物I中含有骆驼蓬碱。
[0013]上述原料准备步骤中优选使用粉碎或切成< 2厘米的颗粒或段的干燥叉毛蓬原植物。
[0014]上述萃取步骤，优选与先在石油醚中萃取，之后在使用氯仿或乙酸乙酯中的至少一种中萃取。
[0015]上述萃取步骤的过滤可以选用滤纸过滤，也可以选用分液漏斗过滤，还可以选用滤膜过滤，或者选用其他过滤装置。
[0016]为了得到纯度较高的骆驼蓬碱，在洗脱步骤之后，增加纯化步骤，具体操作如下:
[0017]化合物I粗提物经过进一步的硅胶柱层析二氯甲烷:甲醇体积比2?8:1溶剂洗脱，并用反相色谱甲醇-水体系纯化得到化合物II。
[0018]化合物II，经核磁共振谱及高分辨质谱确定该化合物为骆驼蓬碱，检测纯度70%以上。
[0019]使用本方法提取的骆驼蓬碱，具有提取工艺简单，得到的骆驼蓬碱纯度高等特点。
【具体实施方式】
[0020]实施例1:一种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0021]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0022]醇提3次:按Ikg原料加入75%的乙醇2L的比例回流提取3h，过60 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 10% ；
[0023]萃取2次:将浓缩液在浓缩液体积I倍的石油醚、氯仿、乙酸乙酯中的至少一种中萃取，过1ym筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 50% ；
[0024]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.3?0.5，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物，经检测，该化合物I中含有骆驼蓬碱。
[0025]实施例2:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0026]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0027]醇提I次:按Ikg原料加入95%的乙醇5L的比例回流提取lh，过300 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 50% ；
[0028]萃取5次:将浓缩液在浓缩液体积5倍的石油醚、氯仿、乙酸乙酯中的至少一种中萃取，过10ym筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 70% ；
[0029]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.5，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物，经检测，该化合物I中含有骆驼蓬碱。
[0030]实施例3:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0031]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料并将上述原料粉碎或切成< 2厘米的颗粒或段；
[0032]醇提2次:按Ikg原料加入80%的乙醇3L的比例回流提取2h，过ΙΟΟμπι筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 80% ；
[0033]萃取4次:将浓缩液在浓缩液体积7倍的石油醚、氯仿、乙酸乙酯中的至少一种中萃取，过700 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 40% ；
[0034]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.3，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物，经检测，该化合物I中含有骆驼蓬碱。
[0035]实施例4:一种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0036]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料并将上述原料粉碎或切成< 2厘米的颗粒或段；
[0037]醇提5次:按Ikg原料加入85%的乙醇4L的比例回流提取1.5h，过280 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 40% ；
[0038]萃取I次:将浓缩液在浓缩液体积2倍的石油醚、氯仿、乙酸乙酯中的至少一种中萃取，过1000 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 70% ；
[0039]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.4，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物，经检测，该化合物含有骆驼蓬碱。
[0040]实施例5:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0041]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料并将上述原料粉碎或切成< 2厘米的颗粒或段；
[0042]醇提2次:按Ikg原料加入73%的乙醇3.5L的比例回流提取2.5h，过200 μ m筛，
取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 20% ；
[0043]萃取5次:将浓缩液在浓缩液体积10倍的石油醚、氯仿、乙酸乙酯中的至少一种中萃取，过50 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 40% ；
[0044]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.5，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物，经检测，该化合物I中含有骆驼蓬碱。
[0045]实施例6:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0046]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0047]醇提I次:按Ikg原料加入78%的乙醇4.5L的比例回流提取3h，过150 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 90% ；
[0048]萃取I次:将浓缩液依次在浓缩液体积4倍的石油醚和氯仿中萃取，过500 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量>60% ；
[0049]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.3，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物，经检测，该化合物I中含有骆驼蓬碱。
[0050]实施例7:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0051]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0052]醇提4次:按Ikg原料加入82%的乙醇2.5L的比例回流提取lh，过50 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 40% ；
[0053]萃取3次:将浓缩液依次在浓缩液体积2倍的石油醚和氯仿中萃取，过60 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 80% ；
[0054]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.4，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物，经检测，该化合物I中含有骆驼蓬碱。
[0055]实施例8:一种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0056]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0057]醇提5次:按Ikg原料加入88%的乙醇4L的比例回流提取2h，过70 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 60% ；
[0058]萃取I次:将浓缩液依次在浓缩液体积3倍的石油醚和氯仿中萃取，过200 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 80% ；
[0059]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.3，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物，经检测，该化合物I中含有骆驼蓬碱。
[0060]实施例9:一种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0061]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0062]醇提2次:按Ikg原料加入93%的乙醇2L的比例回流提取3h，过260μπι筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 70% ；
[0063]萃取4次:将浓缩液依次在浓缩液体积8倍的石油醚和氯仿中萃取，过300 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 70% ；
[0064]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.5，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物，经检测，该化合物I中含有骆驼蓬碱。
[0065]实施例10:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0066]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0067]醇提4次:按Ikg原料加入92%的乙醇5L的比例回流提取2.5h，过220 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 50% ；
[0068]萃取2次:将浓缩液依次在浓缩液体积15倍的石油醚和乙酸乙酯中萃取，过150 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 70% ；
[0069]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.4，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物，经检测，该化合物I中含有骆驼蓬碱。
[0070]实施例11:一种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0071]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0072]醇提5次:按Ikg原料加入72%的乙醇2.5L的比例回流提取1.5h，过210 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 90% ；
[0073]萃取2次:将浓缩液依次在浓缩液体积5倍的石油醚和乙酸乙酯中萃取，过1500 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 50% ；
[0074]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.5，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物，经检测，该化合物I中含有骆驼蓬碱。
[0075]实施例12:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0076]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0077]醇提2次:按Ikg原料加入77%的乙醇3L的比例回流提取3h，过ΙΙΟμπι筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 70% ；
[0078]萃取3次:将浓缩液依次在浓缩液体积8倍的石油醚和乙酸乙酯中萃取，过1200 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 80% ；
[0079]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.4，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物，经检测，该化合物I中含有骆驼蓬碱。
[0080]实施例13:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0081]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0082]醇提5次:按Ikg原料加入75%的乙醇3.5L的比例回流提取lh，过80 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 40% ；
[0083]萃取5次:将浓缩液依次在浓缩液体积7倍的石油醚和乙酸乙酯中萃取，过300 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 30% ；
[0084]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.5，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物，经检测，该化合物I中含有骆驼蓬碱。
[0085]实施例14:一种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0086]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0087]醇提4次:按Ikg原料加入90%的乙醇4L的比例回流提取1.5h，过140μπι筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 20% ；
[0088]萃取4次:将浓缩液依次在浓缩液体积2倍的石油醚、氯仿、乙酸乙酯中萃取，过350 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 40% ；
[0089]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.3，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物，经检测，该化合物I中含有骆驼蓬碱。
[0090]实施例15:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0091]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0092]醇提3次:按Ikg原料加入85%的乙醇5L的比例回流提取2.5h，过220 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 10% ；
[0093]萃取3次:将浓缩液在浓缩液体积9倍的石油醚、氯仿、乙酸乙酯中的至少一种中萃取，过450 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 90% ；
[0094]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.5，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物；
[0095]纯化:将化合物I粗提物经过进一步的硅胶柱层析二氯甲烷:甲醇体积比6:1溶剂洗脱，并用反相色谱甲醇-水体系纯化得到化合物II，经核磁共振谱及高分辨质谱确定该化合物为骆驼蓬碱，检测纯度80%。
[0096]实施例16:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0097]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0098]醇提2次:按Ikg原料加入80%的乙醇2.8L的比例回流提取3h，过250 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 90% ；
[0099]萃取2次:将浓缩液在浓缩液体积3倍的石油醚、氯仿、乙酸乙酯中的至少一种中萃取，过120 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 70% ；
[0100]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.4，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物；
[0101]纯化:将化合物I粗提物经过进一步的硅胶柱层析二氯甲烷:甲醇体积比8:1溶剂洗脱，并用反相色谱甲醇-水体系纯化得到化合物II，经核磁共振谱及高分辨质谱确定该化合物为骆驼蓬碱，检测纯度75%。
[0102]实施例17:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0103]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0104]醇提2次:按Ikg原料加入83%的乙醇3.2L的比例回流提取2h，过290 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 60% ；
[0105]萃取4次:将浓缩液在浓缩液体积4倍的石油醚、氯仿、乙酸乙酯中的至少一种中萃取，过200 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 50% ；
[0106]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.35，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物；
[0107]纯化:将化合物I粗提物经过进一步的硅胶柱层析二氯甲烷:甲醇体积比2:1溶剂洗脱，并用反相色谱甲醇-水体系纯化得到化合物II，经核磁共振谱及高分辨质谱确定该化合物为骆驼蓬碱，检测纯度90%。
[0108]实施例18:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0109]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料并将上述原料粉碎或切成< 2厘米的颗粒或段；
[0110]醇提3次:按Ikg原料加入86%的乙醇4.8L的比例回流提取1.5h，过190 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 70% ；
[0111]萃取I次:将浓缩液在浓缩液体积11倍的石油醚、氯仿、乙酸乙酯中的至少一种中萃取，过180 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 50% ；
[0112]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.45，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物；
[0113]纯化:将化合物I粗提物经过进一步的硅胶柱层析二氯甲烷:甲醇体积比5:1溶剂洗脱，并用反相色谱甲醇-水体系纯化得到化合物II，经核磁共振谱及高分辨质谱确定该化合物为骆驼蓬碱，检测纯度85%。
[0114]实施例19:一种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0115]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料并将上述原料粉碎或切成< 2厘米的颗粒或段；
[0116]醇提5次:按Ikg原料加入89%的乙醇4.2L的比例回流提取2.5h，过220 μ m筛，
取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 40% ；
[0117]萃取2次:将浓缩液在浓缩液体积12倍的石油醚、氯仿、乙酸乙酯中的至少一种中萃取，过240 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 70% ；
[0118]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.5，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物；
[0119]纯化:将化合物I粗提物经过进一步的硅胶柱层析二氯甲烷:甲醇体积比4:1溶剂洗脱，并用反相色谱甲醇-水体系纯化得到化合物II，经核磁共振谱及高分辨质谱确定该化合物为骆驼蓬碱，检测纯度70%。
[0120]实施例20:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0121]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0122]醇提4次:按Ikg原料加入71 %的乙醇4.7L的比例回流提取3h，过240 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 60% ；
[0123]萃取I次:将浓缩液依次在浓缩液体积18倍的石油醚和氯仿中萃取，过330 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 80% ；
[0124]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.3，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物；
[0125]纯化:将化合物I粗提物经过进一步的硅胶柱层析二氯甲烷:甲醇体积比3:1溶剂洗脱，并用反相色谱甲醇-水体系纯化得到化合物II，经核磁共振谱及高分辨质谱确定该化合物为骆驼蓬碱，检测纯度75%。
[0126]实施例21:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0127]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0128]醇提3次:按Ikg原料加入74%的乙醇2.3L的比例回流提取lh，过230μπι筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 80% ；
[0129]萃取5次:将浓缩液依次在浓缩液体积3倍的石油醚和乙酸乙酯中萃取，过210 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 50% ；
[0130]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.45，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物；
[0131]纯化:将化合物I粗提物经过进一步的硅胶柱层析二氯甲烷:甲醇体积比6:1溶剂洗脱，并用反相色谱甲醇-水体系纯化得到化合物II，经核磁共振谱及高分辨质谱确定该化合物为骆驼蓬碱，检测纯度90%。
[0132]实施例22:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0133]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料并将上述原料粉碎或切成< 2厘米的颗粒或段；
[0134]醇提2次:按Ikg原料加入79%的乙醇2.8L的比例回流提取2.5h，过130 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 70% ；
[0135]萃取I次:将浓缩液依次在浓缩液体积7倍的石油醚和氯仿中萃取，过270 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量>60% ；
[0136]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.35，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物；
[0137]纯化:将化合物I粗提物经过进一步的硅胶柱层析二氯甲烷:甲醇体积比7:1溶剂洗脱，并用反相色谱甲醇-水体系纯化得到化合物II，经核磁共振谱及高分辨质谱确定该化合物为骆驼蓬碱，检测纯度85%。
[0138]实施例23:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0139]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料并将上述原料粉碎或切成< 2厘米的颗粒或段；
[0140]醇提4次:按Ikg原料加入82%的乙醇3L的比例回流提取1.5h，过220 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 80% ；
[0141]萃取3次:将浓缩液依次在浓缩液体积10倍的石油醚和乙酸乙酯中萃取，过310 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 70% ；
[0142]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.5，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物；
[0143]纯化:将化合物I粗提物经过进一步的硅胶柱层析二氯甲烷:甲醇体积比3:1溶剂洗脱，并用反相色谱甲醇-水体系纯化得到化合物II，经核磁共振谱及高分辨质谱确定该化合物为骆驼蓬碱，检测纯度83%。
[0144]实施例24:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0145]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料并将上述原料粉碎或切成< 2厘米的颗粒或段；
[0146]醇提5次:按Ikg原料加入94%的乙醇3.8L的比例回流提取2h，过270 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 90% ；
[0147]萃取2次:将浓缩液依次在浓缩液体积5倍的石油醚、氯仿和乙酸乙酯中萃取，过180 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 90% ；
[0148]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.35，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物；
[0149]纯化:将化合物I粗提物经过进一步的硅胶柱层析二氯甲烷:甲醇体积比2:1溶剂洗脱，并用反相色谱甲醇-水体系纯化得到化合物II，经核磁共振谱及高分辨质谱确定该化合物为骆驼蓬碱，检测纯度82%。
[0150]实施例25:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0151]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料并将上述原料粉碎或切成< 2厘米的颗粒或段；
[0152]醇提2次:按Ikg原料加入95%的乙醇3.3L的比例回流提取3h，过120 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 60% ；
[0153]萃取4次:将浓缩液依次在浓缩液体积8倍的石油醚、氯仿和乙酸乙酯中萃取，过330 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 60% ；
[0154]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.45，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物；
[0155]纯化:将化合物I粗提物经过进一步的硅胶柱层析二氯甲烷:甲醇体积比5:1溶剂洗脱，并用反相色谱甲醇-水体系纯化得到化合物II，经核磁共振谱及高分辨质谱确定该化合物为骆驼蓬碱，检测纯度89%。
[0156]实施例26:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0157]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0158]醇提3次:按Ikg原料加入88%的乙醇5L的比例回流提取lh，过120 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 80% ；
[0159]萃取I次:将浓缩液依次在浓缩液体积12倍的石油醚、氯仿和乙酸乙酯中萃取，过410 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 80% ；
[0160]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.35，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物；
[0161]纯化:将化合物I粗提物经过进一步的硅胶柱层析二氯甲烷:甲醇体积比6:1溶剂洗脱，并用反相色谱甲醇-水体系纯化得到化合物II，经核磁共振谱及高分辨质谱确定该化合物为骆驼蓬碱，检测纯度84%。
[0162]实施例27:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0163]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料并将上述原料粉碎或切成< 2厘米的颗粒或段；
[0164]醇提4次:按Ikg原料加入90%的乙醇5L的比例回流提取2h，过80 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 60% ；
[0165]萃取I次:将浓缩液依次在浓缩液体积12倍的石油醚和氯仿中萃取，过360 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 90% ；
[0166]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.5，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物；
[0167]纯化:将化合物I粗提物经过进一步的硅胶柱层析二氯甲烷:甲醇体积比7:1溶剂洗脱，并用反相色谱甲醇-水体系纯化得到化合物II，经核磁共振谱及高分辨质谱确定该化合物为骆驼蓬碱，检测纯度86%。
[0168]实施例28:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0169]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料；
[0170]醇提4次:按Ikg原料加入87%的乙醇5L的比例回流提取3h，过90 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 90% ；
[0171]萃取5次:将浓缩液依次在浓缩液体积6倍的石油醚和乙酸乙酯中萃取，过IlOOym筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 70% ；
[0172]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.45，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物；
[0173]纯化:将化合物I粗提物经过进一步的硅胶柱层析二氯甲烷:甲醇体积比8:1溶剂洗脱，并用反相色谱甲醇-水体系纯化得到化合物II，经核磁共振谱及高分辨质谱确定该化合物为骆驼蓬碱，检测纯度79%。
[0174]实施例29:—种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤:
[0175]原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料并将上述原料粉碎或切成< 2厘米的颗粒或段；
[0176]醇提5次:按Ikg原料加入92 %的乙醇4.4L的比例回流提取2h，过140 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 80% ；
[0177]萃取3次:将浓缩液依次在浓缩液体积7倍的石油醚、氯仿和乙酸乙酯中萃取，过260 μ m筛过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 50% ；
[0178]分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.4，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物；
[0179]纯化:将化合物I粗提物经过进一步的硅胶柱层析二氯甲烷:甲醇体积比4:1溶剂洗脱，并用反相色谱甲醇-水体系纯化得到化合物II，经核磁共振谱及高分辨质谱确定该化合物为骆驼蓬碱，检测纯度87%。
【权利要求】
1.一种从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的提取方法，其特征在于包含以下步骤: 原料准备:取干燥叉毛蓬原植物作为原料； 醇提I?5次:按Ikg原料加入70?95%的乙醇2?5L的比例回流提取I?3h，过50?300 μ m筛，取过滤液浓缩，浓缩至干物质含量> 10% ； 萃取I?5次:将浓缩液在浓缩液体积I倍以上的石油醚、氯仿、乙酸乙酯中的至少一种中萃取，过滤，将所得萃取液浓缩，浓缩至干物质含量> 10% ； 分离:选取萃取液经过硅胶柱层析，选用二氯甲烷:甲醇的体积比10:1至1:10进行梯度洗脱，通过薄层层析检测，Rf值为0.3?0.5，碘化铋钾显色剂桔红色的组分，浓缩得到化合物I粗提物。
2.根据权利要求1所述的从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的方法，其特征在于:将所选原料粉碎或切成< 2厘米的颗粒或段。
3.根据权利要求1或2所述的从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的方法，其特征在于:萃取步骤中，先在石油醚中萃取，之后在使用氯仿或乙酸乙酯中的至少一种中萃取。
4.根据权利要求1或2所述的从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的方法，其特征在于:在分离步骤之后，增加纯化步骤，具体操作如下:化合物I粗提物经过进一步的硅胶柱层析二氯甲烷:甲醇体积比2?8:1溶剂洗脱，并用反相色谱甲醇-水体系纯化得到化合物II。
5.根据权利要求3所述的从叉毛蓬中提取骆驼蓬碱的方法，其特征在于:在分离步骤之后，增加纯化步骤，具体操作如下:化合物I粗提物经过进一步的硅胶柱层析二氯甲烷:甲醇体积比2?8:1溶剂洗脱，并用反相色谱甲醇-水体系纯化得到化合物II。
【文档编号】C07D471/04GK104230928SQ201410486448
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年9月22日 优先权日:2014年9月22日
【发明者】杨红兵, 王莹, 孙文, 张玲 申请人:石河子大学