海兔脯氨酸‑海兔异亮氨酸肽的衍生物的制作方法

本文提供了海兔脯氨酸-海兔异亮氨酸(dolaproine-dolaisoleuine)肽类似物，包含这类化合物的药物组合物，以及用这类化合物治疗癌症的方法。

背景

癌症是仅次于冠状动脉疾病的导致人类死亡的第二主要病因。在美国，癌症占近四分之一的死亡。全球每年有上百万人死于癌症。根据美国癌症协会(americancancersociety)所报道，仅在美国，癌症引起的死亡每年超过五十万人，并且每年新增确诊病例超过150万。虽然由心脏病引起的死亡已显著下降，但由癌症引起的死亡总体呈上升趋势。除非发现新药，预计到下世纪早期，癌症将成为主要死因。

全球有数种癌症明显成为主要杀手。特别是肺癌、前列腺癌、乳腺癌、结肠癌、胰腺癌、卵巢癌和膀胱癌代表了癌症死亡的主要原因。鲜有例外，转移性癌症是致命的。此外，即使那些患者最初在原发性癌中存活下来，但一般经验表明他们的生活发生极大改变。许多癌症患者经历由于顾虑到可能会复发或治疗失败导致的严重焦虑。许多患者在治疗后经历身体虚弱。此外，许多癌症患者会经历复发。

有前景的新癌症疗法包括尾海兔素和合成尾海兔素类似物如奥瑞他汀(美国专利号5,635,483、5,780,588、6,323,315、和6,884,869；shnyder等，(2007)int.j.oncol.31：353-360；otani，m.等，jpn.j.cancerres.2000，91，837-844；pct国际公开号wo01/18032a3、wo2005/039492、wo2006/132670、和wo2009/095447；fennell，b.j.等，j.antimicrob.chemther.2003，51，833-841)。尾海兔素和奥瑞他汀已显示干扰微管动力学，由此破坏细胞分裂(woyke等(2001)antimicrob.agentsandchemother.45(12)：3580-3584)并具有抗癌(美国专利号5,663,149)和抗真菌活性(pettit等(1998)antimicrob.agentschemother.42∶2961-2965)。不幸的是，尽管初期热度很高，但在ii期临床试验中作为单一试剂，尾海兔素10显示不佳结果(shnyder(2007)，同上)。奥瑞他汀家族中的某些化合物已经显示作为具有比尾海兔素改善的功效和药物特性的临床候选物的更大前景(pettit等，(1995)anti-cancerdrugdes.10：529-544；pettit等，(1998)anti-cancerdrugdes.13：243-277；shnyder(2007)，同上)。已经描述了这种结构类型的各种合成类似物(美国专利号6,569,834；美国专利号6,124,431；和pettit等，(2011)j.nat.prod.74：962-968)。

奥瑞他汀具有多种性质，使得它们对于药物开发而言有吸引力。首先，这些化合物是效力极高。其次，由于肽支架，它们的制备是直接的。第三，它们与一般的肽，或者其他具体癌症药物类别相比具有良好的药物动力学和代谢概况。

尽管具有显著的优势，仍然需要具有所需药物性质的新癌症疗法。

概述

本文提供了新海兔脯氨酸-海兔异亮氨酸肽类似物。因此，本文提供了式(i)的化合物：

其中

r¹和r²各自独立地是-h或烷基；

x是-o-，-nr^z-，-s-，或不存在；

其中r^z是-h或烷基；

r³是下式基团：

其中r¹⁵和r¹⁶各自独立地是-h、-oh、-nh2、-sh、-n3、烷基、烯基、炔基、-烷基-oh、-烷基-nh2、-烷基-sh、或-烷基-n3；

r⁴是下式基团：

其中r¹⁷和r¹⁸各自独立地是-h、-oh、-nh2、-sh、-n3、-co2h、烷基、烯基、炔基、-烷基-oh、-烷基-nh2、-烷基-sh、-烷基-n3或-烷基-co2h

r⁵是仲丁基或异丁基；

r⁶是-h或烷基；

r⁷和r⁸各自独立地是-h、烷基、-co2r^a、conr^br^c、取代或未取代的苯基、或取代或未取代的杂环；

其中r^a是-h或烷基；

r^b和r^c各自独立地是h或烷基；

r⁹是-h或烷基；或者r⁹与r⁴及它们连接的原子一起形成取代或未取代的杂环烷基环；

r¹⁰是-h或烷基；

r¹¹是-h或烷基；

r¹²是-h或烷基；

r¹³是-h或烷基；并且

r¹⁴是-h、-oh或烷基；

前提是，当x不存在并且r¹⁵、r¹⁶、r¹⁷和r¹⁸各自是甲基时，r⁸不是取代或未取代的苯基、或取代或未取代的杂环；

或其药学上可接受的盐。

本文还提供了包含有效量的至少一种式(i)的化合物，或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。

本文还提供了治疗患有或诊断患有癌症的对象的方法，包括向需要这种治疗的对象给予有效量的至少一种式(i)的化合物，或其药学上可接受的盐。

本文还提供了至少一种式(i)的化合物，或其药学上可接受的盐用于治疗需要这种治疗的对象中癌症的用途。

本文还提供了至少一种式(i)的化合物，或其药学上可接受的盐在制备用于治疗需要这种治疗的对象中癌症的药物中的用途。

本文还提供了含有至少一种式(i)的化合物，或其药学上可接受的盐用于治疗需要这种治疗的对象中的癌症，以及使用说明的试剂盒。

本文还提供了包含至少一种式(i)的化合物，或其药学上可接受的盐的制品，其用于治疗需要这种治疗的对象中的癌症。

附图的简要说明

图1显示了用实施例2、实施例4和实施例6处理的微管蛋白的体外微管蛋白聚合数据。未处理的(缓冲剂)微管蛋白显示基线水平的微管蛋白聚合。微管蛋白稳定剂(紫杉醇)和微管蛋白去稳定剂(对照)用作对照。所有的化合物以10μm的终浓度使用。

图2显示了用实施例1、实施例3和实施例5处理的微管蛋白的体外微管蛋白聚合数据。未处理的(缓冲剂)微管蛋白显示基线水平的微管蛋白聚合。微管蛋白稳定剂(紫杉醇)和微管蛋白去稳定剂(对照)用作对照。所有的化合物以10μm的终浓度使用。

图3显示了用实施例8、实施例9和实施例12处理的微管蛋白的体外微管蛋白聚合数据。未处理的(缓冲剂)微管蛋白显示基线水平的微管蛋白聚合。微管蛋白稳定剂(紫杉醇)和微管蛋白去稳定剂(对照)用作对照。所有的化合物以10μm的终浓度使用。

图4显示了用实施例7、实施例10和实施例11处理的微管蛋白的体外微管蛋白聚合数据。未处理的(缓冲剂)微管蛋白显示基线水平的微管蛋白聚合。微管蛋白稳定剂(紫杉醇)和微管蛋白去稳定剂(对照)用作对照。所有的化合物以10μm的终浓度使用。

图5显示了用实施例19、实施例20和实施例21处理的微管蛋白的体外微管蛋白聚合数据。未处理的(缓冲剂)微管蛋白显示基线水平的微管蛋白聚合。微管蛋白稳定剂(紫杉醇)和微管蛋白去稳定剂(对照)用作对照。所有的化合物以10μm的终浓度使用。

图6显示了用实施例13、实施例16和实施例22处理的微管蛋白的体外微管蛋白聚合数据。未处理的(缓冲剂)微管蛋白显示基线水平的微管蛋白聚合。微管蛋白稳定剂(紫杉醇)和微管蛋白去稳定剂(对照)用作对照。所有的化合物以10μm的终浓度使用。

图7显示了用实施例14、实施例15、实施例18、实施例20和实施例23处理的微管蛋白的体外微管蛋白聚合数据。未处理的(缓冲剂)微管蛋白显示基线水平的微管蛋白聚合。微管蛋白稳定剂(紫杉醇)和微管蛋白去稳定剂(对照)用作对照。所有的化合物以10μm的终浓度使用。

图8显示了用实施例17、实施例19、实施例25和实施例26处理的微管蛋白的体外微管蛋白聚合数据。未处理的(缓冲剂)微管蛋白显示基线水平的微管蛋白聚合。微管蛋白稳定剂(紫杉醇)和微管蛋白去稳定剂(对照)用作对照。所有的化合物以10μm的终浓度使用。

图9显示了如实施例b1中所述，在使用pc3细胞的体外细胞毒性实验中实施例1、2、3和紫杉醇的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图10显示了如实施例b1中所述，在使用hct15细胞的体外细胞毒性实验中实施例1、2、3和紫杉醇的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图11显示了如实施例b1中所述，在使用hcc-1954细胞的体外细胞毒性实验中实施例1、2、3和紫杉醇的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图12显示了如实施例b1中所述，在使用pc3细胞的体外细胞毒性实验中实施例4、5和6的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图13显示了如实施例b1中所述，在使用hct15细胞的体外细胞毒性实验中实施例4、5和6的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图14显示了如实施例b1中所述，在使用hcc-1954细胞的体外细胞毒性实验中实施例4、5和6的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图15显示了如实施例b1中所述，在使用pc3细胞的体外细胞毒性实验中实施例7、8和9的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图16显示了如实施例b1中所述，在使用hct15细胞的体外细胞毒性实验中实施例7、8和9的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图17显示了如实施例b1中所述，在使用hcc-1954细胞的体外细胞毒性实验中实施例7、8和9的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图18显示了如实施例b1中所述，在使用pc3细胞的体外细胞毒性实验中实施例10、11和12的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图19显示了如实施例b1中所述，在使用hct15细胞的体外细胞毒性实验中实施例10、11和12的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图20显示了如实施例b1中所述，在使用hcc-1954细胞的体外细胞毒性实验中实施例10、11和12的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图21显示了如实施例b1中所述，在使用pc3细胞的体外细胞毒性实验中实施例13、14和15的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图22显示了如实施例b1中所述，在使用hcc-1954细胞的体外细胞毒性实验中实施例13、14和15的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图23显示了如实施例b1中所述，在使用pc3细胞的体外细胞毒性实验中实施例16、21和22的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图24显示了如实施例b1中所述，在使用hcc-1954细胞的体外细胞毒性实验中实施例16、21和22的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图25显示了如实施例b1中所述，在使用pc3细胞的体外细胞毒性实验中实施例17、18和19的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图26显示了如实施例b1中所述，在使用hcc-1954细胞的体外细胞毒性实验中实施例17、18和19的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图27显示了如实施例b1中所述，在使用pc3细胞的体外细胞毒性实验中实施例20和23的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图28显示了如实施例b1中所述，在使用hcc-1954细胞的体外细胞毒性实验中实施例20和23的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图29显示了如实施例b1中所述，在使用pc3细胞的体外细胞毒性实验中实施例25和26的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

图30显示了如实施例b1中所述，在使用hcc-1954细胞的体外细胞毒性实验中实施例25和26的结果。数据绘制成与未处理的对照孔相比，存活百分比对比测试化合物浓度。

发明详述

为简便起见，该说明书中引用的出版物的内容(包括专利)通过引用纳入本文。

本文所用术语“包含”、“含有”和“包括”以其开放、非限定的含义使用。

为提供更简明的描述，本文中的一些定量表达前不使用术语“约”。应理解无论是否明确地使用术语“约”，本文中的每个含量均表示实际给定的数值，且其还表示基于本领域普通技术所能合理推断的给定数值的近似值，包括由于实验和/或测量条件产生的这类给定数值的等同值和近似值。

术语“烷基”其本身或作为其他术语的部分，是指含有正、仲、叔或环碳原子的饱和c1-c12烃。具体的烷基是具有1-8个碳原子、1-6个碳原子、或1-4个碳原子的那些。烷基的示例包括但不限于，甲基(me)、乙基(et)、正丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基(tbu)、正戊基、异戊基、叔戊基、和正己基、异己基。在一些实施方式中，烷基具有正、仲、或叔碳原子并且没有环碳原子。

术语“烯基”本身或作为其他术语的部分，是指含有正、仲、叔或环碳原子的c2-c12烃，其在至少一个位置不饱和，即碳-碳，sp²双键。具体的烯基是具有2-8个碳原子、2-6个碳原子、或2-4个碳原子的那些。示例包括但不限于：乙烯基(-ch＝ch2)、烯丙基(-ch2ch2＝ch2)、环戊烯基(-c5h7)、和5-己烯基(-ch2ch2ch2ch2ch＝ch2)。在一些实施方式中，烯基具有正、仲、或叔碳原子并且没有环碳原子。

术语“炔基”本身或作为其他术语的部分，是指含有正、仲、叔或环碳原子的c2-c12烃，其具有至少一个不饱和位点，即碳-碳，sp三键。具体的炔基是具有2-8个碳原子、2-6个碳原子、或2-4个碳原子的那些。示例包括但不限于：乙炔基(-c≡ch)和2-丙炔基(-ch2c≡ch)。在一些实施方式中，炔基具有正、仲、或叔碳原子并且没有环碳原子。

术语“烷氧基”是指-o-烷基，其中o是与分子的其他部分的连接点，并且烷基如上定义。

术语“杂环烷基”表示饱和或部分饱和的单环、或稠合、桥连、或螺环多环环结构且每个环结构含有3至12个选自碳原子和至多三个杂原子(选自氮、氧和硫)的环原子。特定杂环烷基是每个环结构具有3-8个环原子或5-7个环原子的那些。该环结构可任选地含有多至2个碳或硫环原子上的氧代基团。适当连接部分形式的示范性实体包括：

术语“杂芳基”表示单环、稠合双环或稠合多环的芳族杂环(环结构含有选自碳原子和至多四个杂原子(选自氮、氧和硫)的环原子)，每个杂环含有3至12个环原子。特定杂芳基是每个环结构具有3-8个环原子或5-7个环原子的那些。杂芳基基团的示范性示例包括以下实体(以适当连接部分的形式)：

本文所用的术语“杂环”、“杂环的”或“杂环基”包括上述定义的“杂环烷基”和“杂芳基”基团。

本领域技术人员应认识到上文所列或所示的杂环基、杂芳基和杂环烷基的种类不是穷举性的，也可选择这些定义的术语范围内的其他种类。

术语“卤素”指氯、氟、溴或碘。术语“卤代”指氯、氟、溴或碘。

术语“取代的”表示特定基团或部分带有一个或多个取代基。术语“未取代的”表示特定基团不带有取代基。术语“任选取代的”表示特定基团是未取代的或被一个或多个取代基取代。在使用术语“取代的”描述结构系统时，取代可发生在系统上任意价态允许的位置上。

本文所述的任何式旨在表示具有该结构式所示结构的化合物及某些变体或形式。具体地，任何本文所示的式的化合物可具有不对称中心并且因此以不同的对映体形式存在。通式化合物的所有光学异构体和对映异构体，及其混合物均被认为在该式的范围内。因此，本文所述的任何式旨在表示外消旋体，一种或多种对映体形式、一种或多种非对映异构体形式、一种或多种阻旋异构体形式，及其混合物。此外，某些结构可以几何异构体(即，顺式和反式异构体)、互变异构体、或阻旋异构体存在。另外，任何本文所示的式也旨在表示这类化合物的水合物、溶剂合物、以及无定形和多晶型形式中的任一种，及其混合物，即使这类形式没有明确列出。在一些实施方式中，溶剂是水并且溶剂合物是水合物。

本文给出的任何化学式也旨在代表化合物的未标记的形式以及同位素标记形式。同位素标记的化合物具有本文给定化学式所描述的结构，不同之处在于一个或多个原子被具有选择的原子质量或质量数的原子代替。可掺入本文所述化合物的同位素的示例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟、氯和碘的同位素，分别例如²h、³h、¹¹c、¹³c、¹⁴c、¹⁵n、¹⁸o、¹⁷o、³¹p、³²p、³⁵s、¹⁸f、³⁶cl和¹²⁵i。这类同位素标记的化合物可用于代谢研究(优选使用¹⁴c)、反应动力学研究(使用例如²h或³h)、包括检测或成像技术(如正电子发射断层成像术(pet)或单光子发射计算体层成像术(spect))的药物或底物组织分布试验、或对患者的放射性治疗中。具体而言，¹⁸f或¹¹c标记的化合物对于pet或spect研究是特别优选的。另外，用重同位素如氘(即²h)取代能提供因代谢稳定性较高(例如体内半衰期延长或剂量要求降低)而产生的某些治疗优势。本文所述同位素标记化合物及其前药通常可通过进行下面方案或实施例和制备中公开的方法来制备，所述方法是用易于获得的同位素标记的试剂取代非同位素标记的试剂。

当指代任何本文所示的式时，针对特定变量从可能物质中选择特定部分并不旨在限定针对他处出现的变量选择相同物质。换而言之，除非另有说明，在出现超过一种变量的情况中，从特定列表中选择物质独立于针对式中他处相同变量选择物质。

在本文中对一类取代基使用时，命名法“ci-j”(其中j＞i)表示独立地实现从i至j(包括i和j)的每一个碳原子数目的本文所述任意组合物、用途或方法的实施方式。例如，术语c1-3独立地表示含有一个碳原子(c1)的实施方式、含有两个碳原子(c2)的实施方式和含有三个碳原子(c3)的实施方式。

术语cn-m烷基是指脂族链，无论是直链或支链，链中碳的总数n满足n≤n≤m，其中m＞n。

使用autonom^tm软件生成本文所列的化学名。如果化学结构和该结构所列名称之间存在差异，则以结构为准。

根据对分配和命名的上述解释性考虑，应理解本文明示引用组暗示，在化学上有意义并且除非另外说明，独立引用该组的实施方式，并且引用明示的该组的亚组的可能实施方式中的每一个。

在一些实施方式中，r¹和r²各自独立地是-h或烷基，例如c1-6烷基。在一些实施方式中，r¹和r²各自独立地是-h或甲基。在一些实施方式中，r¹和r²各自独立地是烷基。在一些实施方式中，r¹和r²都是甲基。在一些实施方式中，r¹和r²都是-h。

在一些实施方式中，x是不存在。在其它实施方式中，x是-o-。在一些实施方式中，r¹和r²各自独立地是烷基，并且x不存在。在一些实施方式中，r¹和r²都是甲基，并且x不存在。在其他实施方式中，r¹和r²都是-h，并且x是-o-。在一些实施方式中，x是-nr^z-，其中r^z是-h或烷基。在一些实施方式中，r^z是-h。在一些实施方式中，x是r^z是烷基，例如c1-6烷基或甲基。

在某些实施方式中，r³是其中r¹⁵和r¹⁶各自独立地是-h、-oh、-nh2、-sh、-n3、烷基、烯基、炔基、-烷基-oh、-烷基-nh2、-烷基-sh、或-烷基-n3。在其他实施方式中，r¹⁵和r¹⁶各自独立地是-h、烷基、-(ch2)0-6c≡ch、-(ch2)0-6ch＝ch2、-(ch2)0-6oh、-(ch2)0-6nh2、-(ch2)0-6sh、或-(ch2)0-6n3。在一些实施方式中，r¹⁵和r¹⁶各自独立地是-h、-oh、或烷基。在一些实施方式中，r¹⁵和r¹⁶各自独立地是-h、-oh、或甲基。在一些实施方式中，r¹⁵是-oh，且r¹⁶是氢。在一些实施方式中，r¹⁵是-oh，且r¹⁶是甲基。

在某些实施方式中，r³相对于分子的其他部分处于r立体化学构型。在其他实施方式中，r³相对于分子的其他部分处于s立体化学构型。在某些实施方式中，r³基团本身含有一个或多个手性中心，并且这些立体中心各自独立地处于r或s构型。

在某些实施方式中，r⁴是其中r¹⁷和r¹⁸各自独立地是-h、-oh、-nh2、-sh、-n3、-co2h、烷基、烯基、炔基、-烷基-oh、-烷基-nh2、-烷基-sh、-烷基-n3或-烷基-co2h。在其他实施方式中，r⁴是其中r¹⁷是-h、-oh、-nh2、-sh、-n3、-co2h、烷基、烯基、炔基、-烷基-oh、-烷基-nh2、-烷基-sh、-烷基-n3或-烷基-co2h，并且r¹⁸是-h、-oh、-nh2、-sh、-n3、-co2h、烯基、炔基、-烷基-oh、-烷基-nh2、-烷基-sh、-烷基-n3或-烷基-co2h。在其他实施方式中，r¹⁷和r¹⁸各自独立地是-h、烷基、-(ch2)0-6c≡ch、-(ch2)0-6ch＝ch2、-(ch2)0-6oh、-(ch2)0-6nh2、-(ch2)0-6sh、或-(ch2)0-6n3。在一些实施方式中，r¹⁷和r¹⁸各自独立地是-h、-oh、-nh2、-sh、-n3、-co2h、烷基、-烷基-nh2，或-烷基-n3。在一些实施方式中，r¹⁷和r¹⁸各自独立地是-h、-oh、-nh2、-sh、-n3、-co2h、甲基、-ch2nh2，或-ch2n3。

在某些实施方式中，r⁴与r⁹及它们连接的原子一起形成取代或未取代的杂环烷基环。在某些实施方式中，r⁴与r⁹及它们连接的原子一起形成5至7元杂环烷基环，其可以是未取代的或被一个或多个选自-oh、-nh2、-sh、和-n3的基团取代。在某些实施方式中，杂环烷基环是吡咯环，其可以是未取代的或被一个或多个选自-oh、-nh2、-sh和-n3的基团取代。

在某些实施方式中，r⁴相对于分子的其他部分处于r立体化学构型。在其他实施方式中，r⁴相对于分子的其他部分处于s立体化学构型。在某些实施方式中，r⁴基团本身含有一个或多个手性中心，并且这些立体中心各自独立地处于r或s构型。

在某些实施方式中，r⁵是仲丁基。在其它实施方式中，r⁵是异丁基。在某些实施方式中，r⁵相对于分子的其他部分处于r立体化学构型。在其他实施方式中，r⁵相对于分子的其他部分处于s立体化学构型。在一些实施方式中，r⁵基团内的手性中心处于r构型，并且在其他实施方式中，该中心处于s构型。

在某些实施方式中，r⁶是-h。在其他实施方式中，r⁶是烷基，例如，c1-8烷基、c1-4烷基、甲基、或乙基。

在一些实施方式中，r⁷和r⁸各自独立地是-h、烷基、-co2r^a或-conr^br^c；其中r^a是-h或烷基，例如，c1-6烷基或甲基；并且r^b和r^c各自独立地是-h或烷基，例如，c1-6烷基或甲基。

在某些实施方式中，r⁷和r⁸各自独立地是取代或未取代的苯基或者取代或未取代的杂环，其中苯基或杂环可被一个或多个选自卤素、氧代、羟基、氨基、烷基和烷氧基的基团取代。在某些其他实施方式中，r⁷是未取代的3至8元杂环。在某些其他实施方式中，r⁷是取代的3至8元杂环。在某些其他实施方式中，r⁸是任选地被卤素取代的苯基。

在某些实施方式中，r⁷相对于分子的其他部分处于r立体化学构型。在其他实施方式中，r⁷相对于分子的其他部分处于s立体化学构型。

在某些实施方式中，r⁸相对于分子的其他部分处于r立体化学构型。在其他实施方式中，r⁸相对于分子的其他部分处于s立体化学构型。

在一些实施方式中，r⁷是-co2r^a-conr^br^c；四唑基或噻唑基，其中r^a是-h或烷基，例如c1-6烷基或甲基；并且r^b和r^c各自独立地是-h或烷基，例如，c1-6烷基或甲基；并且r⁸是任选地被卤素取代的苯基。

在一些实施方式中，r⁹是-h。在其他实施方式中，r⁹是烷基，例如，c1-8烷基、c1-4烷基、甲基、或乙基。在一些实施方式中，r⁹是-h或甲基。在一些实施方式中，r⁹是甲基。

在一些实施方式中，r¹⁰是-h。在其他实施方式中，r¹⁰是烷基，例如，c1-8烷基、c1-4烷基、甲基、或乙基。在一些实施方式中，r¹⁰是-h或甲基。在一些实施方式中，r¹⁰是甲基。

在一些实施方式中，r¹¹是-h。在其他实施方式中，r¹¹是烷基，例如，c1-8烷基、c1-4烷基、甲基、或乙基。在一些实施方式中，r¹¹是-h或甲基。在一些实施方式中，r¹¹是甲基。

在一些实施方式中，r¹²是-h。在其他实施方式中，r¹²是烷基，例如，c1-8烷基、c1-4烷基、甲基、或乙基。在一些实施方式中，r¹²是-h或甲基。在一些实施方式中，r¹²是甲基。

在一些实施方式中，r¹³是-h。在其他实施方式中，r¹³是烷基，例如，c1-8烷基、c1-4烷基、甲基或乙基。在一些实施方式中，r¹³是-h或甲基。在一些实施方式中，r¹³是甲基。

在一些实施方式中，r¹⁴是-h。在一些实施方式中，r¹⁴是烷基，例如，c1-6烷基、甲基、或乙基。在一些实施方式中，r¹⁴是-oh。

在某些实施方式中，r¹⁴相对于分子的其他部分处于r立体化学构型。在其他实施方式中，r¹⁴相对于分子的其他部分处于s立体化学构型。

在一些实施方式中，r⁷是-co2r^a，其中r^a是-h或烷基，例如c1-6烷基或甲基；r⁸是苯基；并且r¹⁴是-h。在一些实施方式中，r⁷是-conr^br^c，其中r^b和r^c各自独立地是-h或烷基，例如c1-6烷基或甲基；r⁸是苯基；并且r¹⁴是-h。在一些实施方式中，r⁷是烷基，例如c1-6烷基或甲基；r⁸是苯基；并且r¹⁴是-oh。在一些实施方式中，r⁷是甲基、r⁸是苯基，并且r¹⁴是-oh。在一些实施方式中，r⁷和r¹⁴都是-h，并且r⁸是吡啶基、哌啶基、未取代的苯基、或被卤素例如氟、氯或溴取代的苯基。在一些实施方式中，r⁷是-co2r^a，其中r^a是-h或烷基，例如，c1-6烷基或甲基；r⁸是-h或烷基，例如，c1-6烷基或甲基；并且r¹⁴是烷基，例如，c1-6烷基、甲基，或乙基。在一些实施方式中，r⁷是-co2r^a，其中r^a是-h或烷基，例如，c1-6烷基或甲基；r⁸是-h或烷基，例如，c1-6烷基或甲基；并且r¹⁴是-oh。

在某些实施方式中，

r¹和r²各自独立地是-h或c1-6烷基；

x是-o-，或不存在；

r³是其中r¹⁵和r¹⁶各自独立地是-h、-oh、或c1-6烷基；

r⁴是其中r¹⁷是-oh、-nh2、-sh、-n3、-co2h、-c1-6烷基-nh2、炔基、烯基、或-c1-6烷基-n3；并且r¹⁸是-h或c1-6烷基；

r⁵是仲丁基；

r⁶是-h；

r⁷是-h、c1-6烷基、-co2r^a、-conr^br^c、四唑基或噻唑基；其中r^a是-h或c1-6烷基；并且r^b和r^c各自是-h或c1-6烷基；

r⁸是-h、c1-6烷基、取代或未取代的苯基或者取代或未取代的杂环；

r⁹是-h；

r¹⁰、r¹¹、r¹²、和r¹³各自独立地是c1-6烷基；并且

r¹⁴是h、c1-6烷基或-oh。

在某些实施方式中，

r¹和r²各自独立地是-h或甲基；

x是-o-，或不存在；

r³是其中r¹⁵和r¹⁶各自独立地是-h、-oh，或甲基；

r⁴是其中r¹⁷是-oh、-nh2、-sh、-n3、-co2h、氨基甲基、炔基、烯基、或叠氮甲基；并且r¹⁸是-h或甲基；

r⁵是仲丁基；

r⁶是-h；

r⁷是-h、甲基、-co2r^a、或-conr^br^c；其中r^a是-h或甲基；并且r^b和r^c各自是-h或甲基；

r⁸是-h、甲基、乙基、吡啶基、哌啶基、未取代的苯基、被卤素取代的苯基；

r⁹是-h；

r¹⁰、r¹¹、r¹²和r¹³各自是甲基；并且

r¹⁴是-h、甲基或-oh。

在某些实施方式中，

r¹和r²各自独立地是-h或c1-6烷基；

x不存在；

r³是其中r¹⁵和r¹⁶各自独立地是-h、-oh或c1-6烷基；

r⁴是其中r¹⁷是-n3，并且r¹⁸是-h或甲基；

r⁵是仲丁基；

r⁶是-h；

r⁷是-h、c1-6烷基、-co2r^a、-conr^br^c、四唑基或噻唑基；其中r^a是-h或c1-6烷基；并且r^b和r^c各自是-h或c1-6烷基；

r⁸是-h、c1-6烷基、取代或未取代的苯基或者取代或未取代的杂环；

r⁹是-h；

r¹⁰、r¹¹、r¹²和r¹³各自独立地是c1-6烷基；并且

r¹⁴是h、c1-6烷基或-oh。

在某些实施方式中，

r¹和r²各自独立地是-h或c1-6烷基；

x是-o-；

r³是其中r¹⁵和r¹⁶各自独立地是-h、-oh或c1-6烷基；

r⁴是其中r¹⁷是-n3，并且r¹⁸是-h或甲基；

r⁵是仲丁基；

r⁶是-h；

r⁷是-h、c1-6烷基、-co2r^a、-conr^br^c、四唑基或噻唑基；其中r^a是-h或c1-6烷基；并且r^b和r^c各自是-h或c1-6烷基；

r⁸是-h、c1-6烷基、取代或未取代的苯基或者取代或未取代的杂环；

r⁹是-h；

r¹⁰、r¹¹、r¹²和r¹³各自独立地是c1-6烷基；并且

r¹⁴是h、c1-6烷基或-oh。

在式(i)的一些实施方式中，其中，

r¹和r²各自独立是甲基；

x不存在；

r³是下式基团：

其中r¹⁵和r¹⁶各自是甲基；

r⁴是下式基团：

其中r¹⁷是-n3、-nh2、-oh、-sh，并且r¹⁸是-h或甲基；

r⁵是仲丁基；

r⁶是-h；

r⁷是-co2r^a或conr^br^c，

其中r^a是-h或c1-6烷基；

r^b和r^c各自独立地是h或c1-6烷基；

r⁸是苯基；

r⁹是-h；

r¹⁰、r¹¹、r¹²和r¹³各自独立地是甲基；并且

r¹⁴是-h。

在式(i)的一些实施方式中，其中，

r¹和r²各自是-h；

x是-o-；

r³是下式基团：

其中r¹⁵和r¹⁶各自是甲基；

r⁴是下式基团：

其中r¹⁷是-n3，并且r¹⁸是-h或甲基；

r⁵是仲丁基；

r⁶是-h；

r⁷是-co2r^a或conr^br^c，

其中r^a是-h或c1-6烷基；

r^b和r^c各自独立地是h或c1-6烷基；

r⁸是苯基；

r⁹是-h；

r¹⁰、r¹¹、r¹²和r¹³各自独立地是甲基；并且

r¹⁴是-h。

应理解，本文提供的任意可变基团定义可与本文提供的任意其他可变基团定义组合使用，从而考虑化学上可行的本文提供的可变基团的所有可能组合和置换。

在某些实施方式中，所述式(i)的化合物选自下组：

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羟基-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羟基-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-(二甲基氨基)-n-((s)-3-羟基-1-(((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-3-甲基丁酰胺；

(2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羟基-n-((3r，4s5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(2s)-2-(二甲基氨基)-n-((2s)-3-羟基-1-(((3r，4s5s)-3-甲氧基-1-((2s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(哌啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-3-甲基丁酰胺；

(2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羟基-n-((3r，4s5s)-3-甲氧基-1-((2s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(哌啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-n-((s)-3-氨基-1-(((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰胺；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-4-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-4-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-((s)-2-(氨基氧基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n，3-二甲基丁酰胺；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-羟基丙酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((2s，3r)-2-(二甲基氨基)-3-羟基丁酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸；

(s)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((2s，3r)-2-(二甲基氨基)-3-羟基丁酰氨基)-n，3-二甲基丁酰胺；

(s)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-羟基丙酰氨基)-n，3-二甲基丁酰胺；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-巯基-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-巯基-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羟基-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羟基-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-羟基丙酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((2s，3r)-2-(二甲基氨基)-3-羟基丁酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯；

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸；

(2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(苯乙基氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((1s，2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-叠氮基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((4-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-叠氮基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((2-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(苯乙基氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((1s，2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((4-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((2-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

(s)-4-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(苯乙基氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(s)-4-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((1s，2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(s)-4-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((4-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

(s)-4-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((2-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基戊-4-炔酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸甲酯；

(2s，3s)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-叠氮基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-(叔丁基氨基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-缬氨酸甲酯；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-6-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基己酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸甲酯；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，4s)-4-叠氮基-1-(二甲基-l-缬氨酰基)-n-甲基吡咯烷-2-甲酰胺基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸甲酯；

(s)-3-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-4-(((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-3-(((s)-1-甲氧基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-4-氧代丁酸；

(2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羟基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((1s，2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-丝氨酸甲酯；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-异亮氨酸甲酯；

(2s，3s)-3-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-(叔丁基氨基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-3-叠氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸甲酯；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-叠氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸甲酯；

(2s，3s)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-3-叠氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰胺；

((2s，3s)-3-叠氮基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-(叔丁基氨基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰胺；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-叠氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸叔丁酯；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-叠氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸叔丁酯；

(2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

(2s，3s)-3-叠氮基-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰胺；

(2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(噻唑-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸叔丁酯；

(2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；和

(2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(噻唑-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺；

及其药学上可接受的盐。

本发明还提供式(i)的化合物的药学上可接受的盐，优选上文所述的那些以及本文所示的特定化合物，以及包括所述盐的药学组合物，以及使用所述盐的方法。

“药学上可接受的盐”旨在表示本文所示化合物的游离酸或碱的盐，其没有毒性、生物学上可以容忍或者生物学上适于向对象给药。通常参见，s.m.berge等，“pharmaceuticalsalts(《药用盐》)”j.pharm.sci.，1977，66，1-19。优选的药学上可接受的盐是药学上有效并且适于接触对象组织而没有过多的毒性、刺激、或过敏反应的那些。本文所述的化合物可具有足够酸性的基团、足够碱性的基团，或两种类型的官能团，并且因此与多种无机或有机碱，以及无机和有机酸反应以形成药学上可接受的盐。药学上可接受的盐的示例包括酸加成盐如硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、1，4-丁炔二酸盐、1，6-己炔二酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、磺酸盐、甲基磺酸盐、丙基磺酸盐、苯磺酸盐、二甲苯磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、苯基乙酸盐、苯基丙酸盐、苯基丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、γ-羟基丁酸盐、乙醇酸盐、酒石酸盐、和扁桃酸盐，以及与无机碱如钠、钾、镁、钙、铝等或有机碱如甲基胺、乙基胺、乙醇胺、赖氨酸、鸟氨酸等的盐，与各种氨基酸或氨基酸衍生物如乙酰基亮氨酸等的盐，铵盐等。

为治疗目的，包括本文所述化合物的药物组合物还可包括一种或多种药学上可接受的赋形剂。药学上可接受的赋形剂指没有毒性且生物学上适于向对象给药的物质。这类赋形剂促进本文所述化合物的配制和给药过程且与活性成分相容。药学上可接受的赋形剂的示例包括稳定剂、润滑剂、表面活性剂、稀释剂、抗氧化剂、粘结剂、着色剂、乳化剂或调味剂。在优选的实施方式中，药物组合物是无菌组合物。

根据本领域中用于多种剂型制备的常规方法，本文所述药物组合物可配制为适当药物溶剂或载剂中的溶液剂、乳剂、混悬剂或分散剂，或者丸剂、片剂、锭剂、栓剂、用于重建的粉末剂或连同固态载剂的胶囊剂。对于局部使用，优选将本文所述的化合物配制为乳膏或软膏或适用于局部给药的类似载剂。本文所述的药物组合物和化合物可在本发明的方法中通过合适的递送途径，例如，口服、经鼻、胃肠外、直肠、局部、眼部，或通过吸入给药。

本文所用术语“治疗”或“处理”旨在指代处于产生治疗益处的目的向对象给予本文所述的化合物。治疗包括逆转、缓解、减轻、抑制疾病、紊乱或病症、或癌症的一种或多种症状的发展，或降低其严重性。术语？对象？指需要该治疗的哺乳动物患者，例如人。

在本文所述的治疗方法中，“有效量”指足以使需要这类治疗的对象获得所需治疗益处的量或剂量。本文所述的化合物的有效量或剂量可通过常规方法(如建模、剂量递增或临床试验)确定，其中考虑常规因素，例如给药或药物递送的模式或途径、试剂的药代动力学、感染的严重程度和过程、对象的健康状态、病情和体重以及主治医生的判断。示例性剂量的范围为每天每千克对象体重约1μg至2mg活性化合物，优选约0.05至100mg/kg/天、或约1至35mg/kg/天、或约0.1至10mg/kg/天。总剂量可以单个或分开的剂量单元(例如bid、tid、qid)给予。

本文所述的化合物可在药物组合物或方法中与癌症治疗中的其他活性成分联用。其他活性成分可与本文所述的化合物分开给予或者可与本文所述的化合物一起包含在本文所述的药物组合物中。例如，其他活性成分是已知或发现有效治疗癌症，包括针对与癌症相关的其他靶标有活性的那些，诸如但不限于万珂、利妥昔单抗、氨甲蝶呤、贺赛汀、长春新碱、泼尼松、伊立替康等或其组合。这类组合可用于增加效力、减少一种或多种副作用或减少所需的本发明化合物剂量。

本文所述的化合物可与癌症治疗中的其他活性成分联用，用于药物组合物或方法。其他活性成分可与本文所述的化合物分开给予或者可与本文所述的化合物一起包含在本文所述的药物组合物中。例如，其他活性成分是已知或发现有效治疗癌症，包括针对与癌症相关的其他靶标有活性的那些，诸如但不限于万珂、利妥昔单抗、氨甲蝶呤、贺赛汀、长春新碱、泼尼松、伊立替康等或其组合。这类组合可用于增加效力、减少一种或多种副作用或减少所需的本发明化合物剂量。

现在，通过参考用于本文中通用制备方法的示意性合成方案和之后的具体实施例来描述式(i)的化合物。本领域技术人员应认识到，为获得本文中的多种化合物，可对起始材料进行适当选择，从而通过适当地带有或不带有保护的反应方案使用最终所需的取代基以生成所需的产物。或者，可能需要或想要在最终所需的取代基位置上采用可通过反应方案携带并在适当时可被所需取代基替代的合适基团。另外，本领域技术人员将认识到，可使用保护基团来保护某些官能基团(氨基、羧基或侧链基团)免于反应条件，并且可在合适时在标准条件下去除这类基团。方案a中描述的各反应均优选在约室温至所用有机溶剂的回流温度的温度下进行。除非另有说明，变量如上文所定义，可参考式(i)。

方案a

参考方案a，式(i)的化合物的制备从海兔异亮氨酸(dil)标记的(a)的受保护酸形式开始(参见pettit等，(1994)j.org.chem.59∶1796-1800)。化合物(a)显示带有叔丁基酯保护基团，但本领域技术人员可选择合适的替代方式。在标准肽偶联条件下实现与氮保护的缬氨酸或异亮氨酸衍生物(b)偶联，其中pg是合适的氨基保护基团，如boc(叔丁氧基羰基)或芴基甲氧羰基(fmoc)基团。例如，反应在氰基膦酸二乙酯(depc)、pybrop、pybop、bop、二异丙基碳二亚胺(dic)、二环己基碳二亚胺(dcc)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(edci)、1-羟基苯并三唑(hobt)、1-羟基-7-氮杂-苯并三唑(hoat)、hbtu(o-苯并三唑-1-基-n，n，n’，n’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐)、hatu(o-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐)等或其组合存在下进行。反应一般在叔胺碱，如二异丙基乙基胺存在下进行。合适的溶剂包括二氯甲烷、n，n-二甲基甲酰胺(dmf)、二甲亚砜(dmso)、乙酸乙酯等。通过在合适条件下的去保护去除所得二肽(c)上的氨基保护基团。例如，在pg是boc基团的情况中，用三氟乙酸处理化合物(c)以形成游离胺(d)。在pg是fmoc基团的情况中，用哌啶或二乙基胺处理化合物(c)以产生化合物(d)。在上述的肽偶联条件下，化合物(d)然后偶联至氨基酸衍生物(e)(如果需要，以保护形式)以生成三肽(f)。用酸处理去除羧基保护基团以提供游离酸(g)。

方案b

参考方案b，在上述肽偶联条件下，命名为(h)的氨基保护海兔脯氨酸(dap)(参见pettit等，(1994)j.org.chem.59∶6287-6295)与胺(j)(其使用本领域已知的方法制备)偶联。如方案a所述，所得的二肽(k)受保护以提供化合物(l)。

方案c

参考方案c，酸(g)和胺(l)在上述肽偶联条件下偶联以提供式(i)的化合物。在反应产物是式(i)的保护形式的情况中，采用合适的去保护条件以得到目标化合物。

实施例

提供以下实施例以显示，但不限制本文提供的组合物、用途和方法。使用上述通用方法制备化合物。

在实施例中使用以下化学缩写：dov(海兔缬氨酸)；abu(2-氨基丁酸)；dil(海兔异亮氨酸)；dpr(2，3-二氨基丙酸)；su(琥珀酰亚胺基)；dab(2，4-二氨基丁酸)；dap(海兔脯氨酸)；bzl(苄基)；和tr(三苯甲基)。

在40℃下使用以下方法之一(所示)，在aquityuplcbehc81.7μm2.1x50mm柱上获取lcms停留时间：

方法a：0-0.50分钟：等度80水/10乙腈/10水中1％甲酸；0.50-3.50分钟：线性梯度80水/10乙腈/10水中1％甲酸至0水/90乙腈/10水中1％甲酸；3.50-3.99分钟等度0水/90乙腈/10水中1％甲酸；3.99-4.00分钟线性梯度0水/90乙腈/10水中1％甲酸至80水/10乙腈/10水中1％甲酸。

方法b：0-0.50分钟：等度85水/5乙腈/10水中1％甲酸；0.50-1.60分钟：线性梯度85水/5乙腈/10水中1％甲酸至0水/98乙腈/2水中1％甲酸；1.60-1.80分钟等度0水/98乙腈/2水中1％甲酸；1.80-1.90分钟线性梯度0水/98乙腈/10水中1％甲酸至85水/10乙腈/5水中1％甲酸；1.90-2.00分钟等度85水/5乙腈/10水中1％甲酸。

实施例1

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羟基-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

向ch2cl2(20ml)中boc-dap-oh二环己基胺盐(8.00g，17.1mmol)和h-phe-omehcl盐(4.42g，20.5mmol)的搅拌的室温悬液中添加二异丙基乙基胺(diea；9.13ml，51.3mmol)，之后添加焦碳酸二乙酯(depc；5.15ml，34.2mmol)。10小时后，通过液相色谱/质谱(lcms)的分析显示反应完成。使用ch2cl2中2％至10％meoh作为洗脱液，通过硅胶(硅胶40μm，3.0x17.0cm)上的快速色谱来分离boc-dap-phe-ome。获得总共7.45g的boc-dap-phe-ome(16.61mmol，97％产率)。

向ch2cl2(10ml)中boc-dap-phe-ome(4.67g，10.4mmol)的搅拌的室温溶液添加三氟乙酸(tfa；10ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共2.52g的h-dap-phe-ome的tfa盐(6.23mmol，59％)。

向乙酸乙酯(etoac；15ml)中fmoc-ser(bzl)-oh(2.82g，6.76mmol)和h-dil-otbu盐酸盐(2.00g，6.76mmol)的搅拌的室温溶液中添加diea(2.17ml，12.2mmol)。溶液冷却至(0℃)并搅拌20分钟。向反应混合物中添加diea(2.17ml，12.2mmol)。溶液冷却至(0℃)并搅拌20分钟。向反应混合物中添加2-氯-1-甲基碘化吡啶鎓(cmpi；2.76g，10.8mmol)并且使反应混合物达到室温。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用0.1mhcl(150mlx2)洗涤粗反应。有机馏分在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。使用己烷中18％至90％etoac作为洗脱液，通过硅胶(硅胶40μm，3.0x17.0cm)上的快速色谱来分离fmoc-ser(bzl)-dil-otbu。获得总共3.75g的fmoc-ser(bzl)-dil-otbu(5.69mmol，84％产率)。

向mecn(5ml)中fmoc-ser(bzl)-dil-otbu(1.79g，2.72mmol)的搅拌室温溶液中添加哌啶(4ml)。5小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用己烷萃取粗反应混合物并且mecn层经真空浓缩以产生不需要进一步纯化使用的粗h-ser(bzl)-dil-otbu。

向dmf(10ml)中粗h-ser(bzl)-dil-otbu和dov(0.790g，5.44mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(1.45ml，8.16mmol)，之后添加hatu(2.07g，5.44mmol)。5小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.882g的dov-ser(bzl)-dil-otbu的tfa盐(1.30mmol，48％)。

向ch2cl2(5ml)中dov-ser(bzl)-dil-otbu(0.288g，0.425mmol)的室温溶液中添加tfa(4ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发以产生不需要进一步纯化使用的粗dov-ser(bzl)-dil-ohtfa盐。

向dmf(10ml)中粗dov-ser(bzl)-dil-ohtfa盐和h-dap-phe-ometfa盐(0.163g，0.467mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(1.45ml，1.70mmol)，之后添加hatu(0.323g，0.850mmol)。6小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.217g的dov-ser(bzl)-dil-dap-phe-ome的tfa盐(0.228mmol，54％)。

在回流条件下，对meoh(5ml)中dov-ser(bzl)-dil-dap-phe-ometfa盐(0.217g，0.228mmol)和活性炭载钯(10％pd基，0.174g)的搅拌室温悬液进行氢化。48小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物在硅藻土垫上过滤并且将滤液浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.104g的标题化合物的tfa盐(0.121mmol，47％)。lcmsrt＝2.32分钟(方法a)；esi-msm/z748.72[m+h]⁺；hrmsm/z748.4846[c39h65n5o9+h]⁺.

实施例2

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羟基-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

向etoac(15ml)中fmoc-thr(bzl)-oh(2.92g，6.76mmol)和h-dil-otbu盐酸盐(2.00g，6.76mmol)的搅拌室温溶液中添加diea(2.17ml，12.2mmol)。溶液冷却(0℃)并搅拌20分钟。向反应混合物中添加diea(2.17ml，12.2mmol)。溶液冷却(0℃)并搅拌20分钟。向反应混合物中添加cmpi(2.76g，10.8mmol)并且使反应混合物达到室温。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用0.1mhcl(100mlx2)洗涤粗反应。有机馏分在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。使用己烷中18％至90％etoac作为洗脱液，通过硅胶(硅胶40μm，3.0x17.0cm)上的快速色谱来分离fmoc-thr(bzl)-dil-otbu。获得总共3.71g的fmoc-thr(bzl)-dil-otbu(5.51mmol，82％产率)。

向mecn(5ml)中fmoc-thr(bzl)-dil-otbu(3.71g，5.51mmol)的搅拌室温溶液中添加哌啶(4ml)。5小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用己烷萃取粗反应混合物并且mecn层经真空浓缩以产生不需要进一步纯化使用的粗h-thr(bzl)-dil-otbu。

向dmf(20ml)中粗h-thr(bzl)-dil-otbu和dov(1.60g，11.0mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(2.95ml，16.5mmol)，之后添加hatu(4.19g，11.0mmol)。6小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共1.09g的dov-ser(bzl)-dil-otbu的tfa盐(1.58mmol，29％)。

向ch2cl2(5ml)中dov-thr(bzl)-dil-otbutfa盐(0.331g，0.478mmol)的室温溶液中添加tfa(4ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发以产生不需要进一步纯化使用的粗dov-thr(bzl)-dil-ohtfa盐。

向dmf(10ml)中粗dov-thr(bzl)-dil-ohtfa盐和h-dap-phe-ometfa盐(0.183g，0.526mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(0.341ml，1.92mmol)，之后添加hatu(0.364g，0.957mmol)。24小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.290g的dov-thr(bzl)-dil-dap-phe-ome的tfa盐(0.300mmol，63％)。

对meoh(5ml)中dov-thr(bzl)-dil-dap-phe-ometfa盐(0.290g，0.300mmol)和活性炭载钯(10％pd基，0.232g)的搅拌室温悬液进行氢化。24小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物在硅藻土垫上过滤并且滤液经浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.129g的标题化合物的tfa盐(0.147mmol，43％)。lcmsrt＝2.40分钟(方法a)；esi-msm/z762.75[m+h]⁺；hrmsm/z762.5009[c40h67n5o9+h]⁺.

实施例3

(s)-2-(二甲基氨基)-n-((s)-3-羟基-1-(((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-3-甲基丁酰胺

向ch2cl2(20ml)中boc-dap-oh二环己基胺盐(10.0g，21.4mmol)和2-(2-吡啶基)乙基胺(3.83ml，32.0mmol)的搅拌的室温悬液中添加diea(11.4ml，64.1mmol)，之后添加depc(4.83ml，32.0mmol)。过夜搅拌后，通过lcms的分析显示反应完全。使用ch2cl2中2％至10％meoh/1％net3作为洗脱液，通过硅胶(硅胶40μm，3.0x17.0cm)上的快速色谱来分离boc-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺。获得总共7.42g的boc-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺(19.0mmol，89％产率)。

向ch2cl2(10ml)中boc-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺(7.42g，19.0mmol)的搅拌室温溶液添加tfa(10ml)。过夜搅拌后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共4.50g的h-dap-(2-吡啶基)乙基胺的tfa盐(11.1mmol，59％)。

向ch2cl2(5ml)中dov-ser(bzl)-dil-otbu(0.287g，0.423mmol)的室温溶液中添加tfa(4ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发以产生不需要进一步纯化使用的粗dov-ser(bzl)-dil-ohtfa盐。

向dmf(10ml)中粗dov-ser(bzl)-dil-ohtfa盐和h-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺tfa盐(0.136g，0.466mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(0.302ml，1.70mmol)，之后添加hatu(0.322g，0.847mmol)。6小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.258g的dov-ser(bzl)-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺的tfa盐(0.288mmol，68％)。

对meoh(5ml)中dov-ser(bzl)-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺tfa盐(0.258g，0.330mmol)、甲酸铵(0.062g，0.991mmol)和活性炭载钯(10％pd基，0.100g)的搅拌室温悬液进行氢化。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物在硅藻土垫上过滤并且滤液经浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.014g的标题化合物的tfa盐(0.017mmol，5％)。lcmsrt＝1.76分钟(方法a)；esi-msm/z691.56[m+h]⁺；hrmsm/z691.4755[c36h62n6o7+h]⁺.

实施例4

(2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羟基-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向ch2cl2(5ml)中dov-thr(bzl)-dil-otbu(0.357g，0.618mmol)的室温溶液中添加tfa(4ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发以产生不需要进一步纯化使用的粗dov-thr(bzl)-dil-ohtfa盐。

向dmf(10ml)中粗dov-thr(bzl)-dil-ohtfa盐和h-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺tfa盐(0.198g，0.680mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(0.441ml，2.47mmol)，之后添加hatu(0.470g，1.24mmol)和hobt(0.189g，1.24mmol)。6小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.356gdov-thr(bzl)-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺的tfa盐(0.392mmol，63％)。

meoh(5ml)中dov-thr(bzl)-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺tfa盐(0.356g，0.392mmol)、甲酸铵(0.085g，1.35mmol)和活性炭载钯(10％pd基，0.175g)的搅拌室温悬液经氢化。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物在硅藻土垫上过滤并且滤液经浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.010g的标题化合物的tfa盐(0.012mmol，3％)。lcmsrt＝1.72分钟(方法a)；esi-msm/z705.56[m+h]⁺；728.33[m+na]⁺；hrmsm/z705.4917[c37h64n6o7+h]⁺.

实施例5

(2s)-2-(二甲基氨基)-n-((2s)-3-羟基-1-(((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((2s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(哌啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-3-甲基丁酰胺

标题化合物作为实施例3中氢化反应的副产物获得。获得总共0.010g的标题化合物的tfa盐(0.001mmol)。lcmsrt＝1.83分钟(方法a)；esi-msm/z697.76[m+h]⁺；hrmsm/z697.5226[c36h68n6o7+h]⁺.

实施例6

(2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羟基-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((2s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(哌啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

标题化合物作为实施例4中氢化反应的副产物获得。获得总共0.010g的标题化合物的tfa盐(0.012mmol)。lcmsrt＝1.81分钟(方法a)；esi-msm/z711.43[m+h]⁺；hrmsm/z711.5389[c37h70n6o7+h]⁺.

实施例7

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

向etoac(10ml)中(2s，3s)-fmoc-abu(3-n3)-oh(1.00g，2.74mmol)和h-dil-otbu盐酸盐(0.810g，2.74mmol)的搅拌室温溶液中添加diea(0.880ml，4.93mmol)。溶液冷却(0℃)并搅拌20分钟。向反应混合物中添加diea(0.880ml，4.93mmol)。溶液冷却(0℃)并搅拌20分钟。向反应混合物中添加cmpi(1.12g，4.38mmol)并且使反应混合物达到室温。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用0.1mhcl(100mlx2)，之后用盐水(20mlx2)洗涤粗反应。有机馏分在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩以产生不需要进一步纯化使用的粗fmoc-abu(3-n3)-dil-otbu(1.12g，1.84mmol)。

向mecn(10ml)中fmoc-abu(3-n3)-dil-otbu(1.00g，1.65mmol)的搅拌室温溶液中添加哌啶(2ml)。5小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用己烷萃取粗反应混合物并且mecn层经真空浓缩以产生不需要进一步纯化使用的粗h-abu(3-n3)-dil-otbu。

向dmf(10ml)中粗h-abu(3-n3)-dil-otbu和dov(0.478g，3.29mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(0.880ml，4.94mmol)，之后添加hatu(1.25g，3.29mmol)。6小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.670g的dov-abu(3-n3)-dil-otbu的tfa盐(1.07mmol，65％)。

向ch2cl2(5ml)中dov-abu(3-n3)-dil-otbutfa盐(0.289g，0.425mmol)的室温溶液中添加tfa(5ml)。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发以产生不需要进一步纯化使用的粗dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa盐。

向dmf(10ml)中粗dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa盐(1.04g，1.82mmol)和h-dap-phe-ometfa盐(1.59g，3.44mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(1.18g，1.60ml，9.11mmol)，之后添加hatu(1.74g，4.56mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共935mg的标题化合物的甲酸盐(1.12mmol，49％)。lcmsrt＝1.09分钟(方法a)；esi-msm/z787.53[m+h]⁺；hrmsm/z787.5072[c40h66n8o8+h]⁺.

实施例8

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

向etoac(10ml)中fmoc-dpr(boc)-oh(1.44g，3.38mmol)和h-dil-otbu盐酸盐(1.00g，3.38mmol)的搅拌室温溶液中添加diea(1.08ml，6.08mmol)。溶液冷却至(0℃)并搅拌20分钟。向反应混合物中添加另外的diea(1.08ml，6.08mmol)并且0℃溶液搅拌20分钟。向反应混合物中添加cmpi(1.38g，5.41mmol)并且使反应混合物升温至室温。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用0.1mhcl(100mlx2)，之后用盐水(20mlx2)洗涤粗反应。有机馏分在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。使用己烷中18％至90％etoac作为洗脱液，通过硅胶(硅胶40μm，3.0x17.0cm)上的快速色谱来分离fmoc-dpr(boc)-dil-otbu。获得总共1.27g的fmoc-dpr(boc)-dil-otbu(1.90mmol，56％产率)。

向mecn(10ml)中fmoc-thr(bzl)-dil-otbu(1.27g，1.90mmol)的搅拌室温溶液中添加哌啶(2ml)。5小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用己烷萃取粗反应混合物并且mecn层经真空浓缩以产生不需要进一步纯化使用的粗h-dpr(boc)-dil-otbu。

向dmf(10ml)中粗h-dpr(boc)-dil-otbu和dov(0.552g，3.80mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(1.02ml，5.70mmol)，之后添加hatu(1.45g，3.80mmol)。6小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.598g的dov-dpr(boc)-dil-otbu的tfa盐(0.871mmol，46％)。

向ch2cl2(10ml)中dov-dpr(boc)-dil-otbutfa盐(1.52g，2.65mmol)的室温溶液中添加tfa(5ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发以产生不需要进一步纯化使用的粗dov-dpr-dil-ohtfa盐。

向ch2cl2(10ml)中dov-dpr-dil-ohtfa盐(1.00g，1.89mmol)和fmoc-osu(0.891g，2.64mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(0.460ml，2.64mmol)。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共1.49g的富集dov-dpr(fmoc)-dil-oh的甲酸盐。

向dmf(10ml)中dov-dpr(fmoc)-dil-oh甲酸盐(1.20g，1.75mmol)和h-dap-phe-ometfa盐(0.982g，2.13mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(0.970g，1.30ml，7.514mmol)，之后添加hatu(1.43g，3.76mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共1.01g的dov-dpr(fmoc)-dil-dap-phe-ome(1.04mmol，56％)。

向乙腈(10ml)中dov-dpr(fmoc)-dil-dap-phe-ome(1.01g，1.04mmol)的搅拌23℃溶液中添加哌啶(5ml)。3小时后，通过lcms的分析显示反应完全。向粗反应溶液中添加己烷。乙腈层经真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共413g的标题化合物的甲酸盐(0.521mmol，50％)。lcmsrt＝2.10分钟(方法a)；esi-msm/z747.84[m+h]⁺；hrmsm/z747.5008[c39h66n6o8+h]⁺.

实施例9

(s)-n-((s)-3-氨基-1-(((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰胺

向dmf(10ml)中粗dov-dpr(fmoc)-dil-oh和h-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺tfa盐(0.230g，0.789mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(0.511ml，2.87mmol)，之后添加hatu(0.545g，1.43mmol)。6小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(25mlx3)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.150gdov-dpr(fmoc)-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺的tfa盐(0.146mmol，20％)。

向mecn(10ml)中dov-dpr(fmoc)-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺tfa盐(0.150g，0.146mmol)的搅拌室温溶液中添加哌啶(2ml)。5小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用己烷萃取粗反应混合物并且mecn层经真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.089g的标题化合物的tfa盐(0.111mmol，75％)。lcmsrt＝1.52分钟(方法a)；esi-msm/z690.67[m+h]⁺；hrmsm/z690.4917[c36h63n7o6+h]⁺.

实施例10

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

向etoac(10ml)中n-boc-4-叠氮基-丙氨酸二环己基胺盐(1.02g，2.47mmol)和h-dil-otbu盐酸盐(0.730g，2.74mmol)的搅拌室温溶液中添加diea(0.792ml，4.44mmol)。溶液冷却(0℃)并搅拌20分钟。向反应混合物中添加diea(0.792ml，4.44mmol)。溶液冷却(0℃)并搅拌20分钟。向反应混合物中添加cmpi(1.01g，3.95mmol)并且使反应混合物达到室温。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用0.1mhcl(100mlx2)，之后用盐水(20mlx2)洗涤粗反应。有机馏分在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩以产生不需要进一步纯化使用的粗n-boc-4-叠氮基-ala-dil-otbu(1.08g，2.29mmol)。

向ch2cl2(5ml)中n-boc-4-叠氮基-ala-dil-otbu(1.08g，2.29mmol)的室温溶液中添加tfa(3ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发以产生不需要进一步纯化使用的粗h-4-叠氮基-ala-dil-ohtfa盐。

向dmf(10ml)中dov(0.739g，5.09mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(1.36ml，7.63mmol)，之后添加hatu(1.95g，5.09mmol)。在10分钟后，向反应混合物中添加粗h-4-叠氮基-ala-dil-oh。6小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.130gdov-4-叠氮基-ala-dil-oh的tfa盐(0.261mmol，10％)。

向dmf(10ml)中粗dov-4-叠氮基-ala-dil-ohtfa盐(0.130g，0.261)和h-dap-phe-ometfa盐(0.205g，0.588mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(0.140ml，0.783mmol)，之后添加hatu(0.198g，0.522mmol)。6小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.015g的标题化合物的tfa盐(0.017mmol，7％)。lcmsrt＝2.36分钟(方法a)；esi-msm/z773.48[m+h]⁺；hrmsm/z773.4916[c39h64n8o8+h]⁺.

实施例11

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-4-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

向etoac(10ml)中n-boc-4-叠氮基-高丙氨酸二环己基胺盐(1.01g，2.37mmol)和h-dil-otbu盐酸盐(0.700g，2.37mmol)的搅拌室温溶液中添加diea(0.759ml，4.26mmol)。溶液冷却(0℃)并搅拌20分钟。向反应混合物中添加diea(0.759ml，4.26mmol)。溶液冷却(0℃)并搅拌20分钟。向反应混合物中添加cmpi(0.967g，3.79mmol)并且使反应混合物达到室温。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用0.1mhcl(100mlx2)，之后用盐水(20mlx2)洗涤粗反应。有机馏分在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩以产生不需要进一步纯化使用的粗n-boc-4-叠氮基-高ala-dil-otbu(1.09g，2.25mmol)。

向ch2cl2(5ml)中n-boc-4-叠氮基-高ala-dil-otbu(1.09g，2.25mmol)的室温溶液中添加tfa(3ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发以产生不需要进一步纯化使用的粗h-4-叠氮基-高ala-dil-ohtfa盐。

向dmf(10ml)中dov(0.652g，4.49mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(1.20ml，6.73mmol)，之后添加hatu(1.71g，4.49mmol)。在10分钟后，向反应混合物中添加粗h-4-叠氮基-高ala-dil-ohtfa盐。6小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.127g的dov-4-叠氮基-高ala-dil-oh的tfa盐(0.223mmol，10％)。

向dmf(10ml)中粗dov-4-叠氮基-高ala-dil-ohtfa盐(0.127g，0.223)和h-dap-phe-ometfa盐(0.198mmol，0.568mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(0.140ml，0.783mmol)，之后添加hatu(0.198g，0.522mmol)。6小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.015g的标题化合物的tfa盐(0.017mmol，7％)。lcmsrt＝2.38分钟(方法a)；esi-msm/z787.49[m+h]⁺；hrmsm/z787.5078[c40h66n8o8+h]⁺.

实施例12

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-4-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

向etoac(10ml)中fmoc-dab(boc)-oh(1.54g，3.38mmol)和h-dil-otbu盐酸盐(1.00g，3.38mmol)的搅拌室温溶液中添加diea(1.08ml，6.08mmol)。溶液冷却(0℃)并搅拌20分钟。向反应混合物中添加另外的diea(1.08ml，6.08mmol)并且0℃溶液搅拌20分钟。然后，向反应混合物中添加cmpi(1.38g，5.41mmol)并且使反应混合物升温至室温。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用0.1mhcl(100mlx2)，之后用盐水(20mlx2)洗涤粗反应。有机馏分在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。使用己烷中18％至90％etoac作为洗脱液，通过硅胶(硅胶40μm，3.0x17.0cm)上的快速色谱来分离fmoc-dab(boc)-dil-otbu。获得总共1.18g的fmoc-dpr(boc)-dil-otbu(1.73mmol，51％产率)。

向mecn(10ml)中fmoc-dab(boc)-dil-otbu(1.18g，1.73mmol)的搅拌室温溶液中添加哌啶(2ml)。5小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用己烷萃取粗反应混合物并且mecn层经真空浓缩以产生不需要进一步纯化使用的粗h-dab(boc)-dil-otbu。

向dmf(10ml)中粗h-dab(boc)-dil-otbu和dov(0.502g，3.46mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(0.925ml，5.19mmol)，之后添加hatu(1.32g，3.46mmol)。6小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.410g的dov-dab(boc)-dil-otbu的tfa盐(0.583mmol，34％)。

向ch2cl2(10ml)中dov-dab(boc)-dil-otbutfa盐(0.240g，0.419mmol)的室温溶液中添加tfa(2ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发以产生不需要进一步纯化使用的粗dov-dab-dil-ohtfa盐。

向ch2cl2(5ml)中dov-dab-dil-ohtfa盐(0.175g，0.406mmol)和fmoc-osu(0.151g，0.447mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(0.080ml，0.447mmol)。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发。粗反应混合物溶于etoac并用0.1mhcl(100mlx2)，之后用盐水(20mlx2)洗涤。有机馏分在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩以产生不需要进一步纯化使用的粗dov-dab(fmoc)-dil-oh。

向dmf(10ml)中粗dov-dab(fmoc)-dil-oh(0.363g，0.556mmol)和h-dap-phe-ometfa盐(0.194g，0.420mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(0.291ml，1.67mmol)，之后添加hatu(0.424g，1.11mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(30mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.2％水性甲酸中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共449mg的富集dov-dab(fmoc)-dil-dap-phe-ome的甲酸盐。

向mecn(10ml)中dov-dab(fmoc)-dil-dap-phe-ome甲酸盐(0.449g)的搅拌室温溶液中添加哌啶(5ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用己烷萃取粗反应混合物并且mecn层经真空浓缩。通过用phenomenexgemininxc1810μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作为洗脱液的rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共43.0g的标题化合物的甲酸盐(0.053mmol，13％)。lcmsrt＝1.24分钟(方法b)；esi-msm/z761.57[m+h]⁺；hrmsm/z761.5165[c40h68n6o8+h]⁺.

实施例13

(s)-2-((s)-2-(氨基氧基)-3-甲基丁酰氧基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n，3-二甲基丁酰胺

向在etoac(3ml)中搅拌的h-dil-otbu盐酸盐(0.60g。2.03mmol)和fmoc-val-oh(0.829g，2.44mmol)的溶液中添加diea(0.65ml，3.7mmol)。反应冷却至0℃并搅拌20分钟，之后添加diea(0.65ml，3.7mmol)。反应混合物再冷却(0℃)20分钟，之后添加cmpi(0.83g，3.7mmol)。8小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用1mhcl(150mlx2)和盐水(50ml)洗涤反应混合物。有机相在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。使用己烷中18％至90％etoac作为洗脱液，通过硅胶(硅胶40μm，3.0x17.0cm)上的快速色谱来分离fmoc-val-dil-otbu。获得总共1.1g的fmoc-val-dil-otbu(1.9mmol，93％产率)。

向ch2cl2(10ml)中fmoc-val-dil-otbu(0.883g，1.52mmol)和boc-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺(0.451g，1.52mmol)的搅拌室温悬液添加tfa(5ml)。8小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发以产生粗fmoc-val-dil-oh和h-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺tfa盐，其使用不需要进一步纯化。

向etoac(2ml)中粗h-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺tfa盐和fmoc-val-dil-oh的搅拌室温悬液中添加diea(1.10ml，6.08mmol)，之后添加depc(0.92ml，6.08mmol)。15小时后，通过lcms的分析显示反应完全。反应用饱和nahco3溶液(50ml)，之后用水(50mlx2)洗涤。有机馏分在硫酸镁垫上过滤并真空浓缩。使用ch2cl2中5％至10％meoh作为洗脱液，痛过硅胶(硅胶40μm，23x123mm)上的快速色谱来纯化所得粘稠油状物。获得总共0.888g的fmoc-val-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺(1.11mmol，73％产率)。

向ch2cl2(5ml)中fmoc-val-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺(1.75g，2.19mmol)的搅拌室温溶液添加哌啶(5ml)。8小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发以产生粗h-val-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺，其使用不需要进一步纯化。

向dmf(5ml)中粗h-val-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺和n-boc-n-羟基val-oh(0.390g，1.67mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(0.797ml，5.02mmol)，之后添加hatu(1.28g，3.34mmol)。8小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(50mlx3)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤，在硫酸镁垫上干燥，过滤并真空浓缩以产生0.563g的粗n-boc-n-羟基val-val-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺(0.712mmol，43％)，其使用不需要进一步纯化。

向dmf(2ml)中n-boc-n-羟基val-val-dil-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺(0.563g，0.712mmol)的室温溶液添加tfa(2ml)。2小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.209g的标题化合物的tfa盐(0.302mmol，43％)。lcmsrt＝1.70分钟(方法a)；esi-msm/z691.53[m+h]⁺；hrmsm/z691.4755[c36h62n6o7+h]⁺.

实施例14

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-羟基丙酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸

向meoh(10ml)中h-ser(bzl)-oh(0.500g，2.56mmol)和多聚甲醛(1.15g，38.4mmol)的搅拌室温溶液中添加hco2nh4(0.808g，12.8mmol)和活性炭载钯(10％pd基，0.250g)。72小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物在硅藻土垫上过滤并且滤液经浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.168g的n，n-二甲基ser(bzl)-oh的tfa盐(0.498mmol，19％)。

向ch2cl2(20ml)中fmoc-val-dil-otbu(13.3g，22.8mmol)的搅拌室温溶液中添加哌啶(15ml)。8小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发以产生不需要进一步纯化使用的粗h-val-dil-otbu。

向dmf(10ml)中粗h-val-dil-otbu和n，n-二甲基ser(bzl)-ohtfa盐(0.780g，3.49mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(1.25ml，6.99mmol)，之后添加hatu(1.77g，4.66mmol)。6小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.220g的n，n-二甲基ser(bzl)-val-dil-otbu的tfa盐(0.325mmol，14％)。

向ch2cl2(5ml)中n，n-二甲基ser(bzl)-val-dil-otbutfa盐(0.220g，0.325mmol)的室温溶液中添加tfa(2ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发以产生不需要进一步纯化使用的粗n，n-二甲基ser(bzl)-val-dil-ohtfa盐。

向dmf(5ml)中粗n，n-二甲基ser(bzl)-val-dil-ohtfa盐(0.166g，0.477mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(0.207ml，1.30mmol)，之后添加hatu(0.330g，0.868mmol)。4小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.201g的n，n-二甲基ser(bzl)-val-dil-dap-phe-ome的tfa盐(0.211mmol，49％)。

向meoh(6ml)和水(1.0ml)中n，n-二甲基ser(bzl)-val-dil-dap-phe-ometfa盐(0.201g，0.211mmol)和nh4hco2(2.00g，31.7mmol)的搅拌室温悬液中添加10％pd/c(10mg)。在室温下剧烈搅拌该溶液。10小时后，通过lcms分析显示反应完全，和苯丙氨酸甲酯的水解。反应混合物在硅藻土垫上过滤并且滤液经浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共63.0mg的标题化合物的tfa盐(0.074mmol，31％)。lcmsrt＝2.01分钟(方法a)；esi-msm/z734.61[m+h]⁺；hrmsm/z734.4715[c38h63n5o9+h]⁺.

实施例15

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((2s，3r)-2-(二甲基氨基)-3-羟基丁酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸

向meoh(40ml)中h-thr(bzl)-oh(2.00g，9.56mmol)和多聚甲醛(9.87g，95.6mmol)的搅拌室温溶液中添加hco2nh4(3.01g，47.8mmol)和活性炭载钯(10％pd基，1.00g)。72小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物在硅藻土垫上过滤并且滤液经浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共1.54g的n，n-二甲基thr(bzl)-oh的tfa盐(4.38mmol，19％)。

向dmf(20ml)中粗h-val-dil-otbu和n，n-二甲基thr(bzl)-ohtfa盐(1.21g，5.10mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(1.82ml，10.2mmol)，之后添加hatu(2.59g，6.80mmol)。6小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(15ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.161g的n，n-二甲基thr(bzl)-val-dil-otbu的tfa盐(0.234mmol，7％)。

向ch2cl2(5ml)中n，n-二甲基thr(bzl)-val-dil-otbutfa盐(0.220g，0.325mmol)的室温溶液中添加tfa(2ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发以产生不需要进一步纯化使用的粗n，n-二甲基thr(bzl)-val-dil-ohtfa盐。

向dmf(5ml)中粗n，n-二甲基thr(bzl)-val-dil-ohtfa盐(0.118g，0.339mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(0.147ml，0.927mmol)，之后添加hatu(0.235g，0.618mmol)。4小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.186g的n，n-二甲基thr(bzl)-val-dil-dap-phe-ome的tfa盐(0.193mmol，62％)。

向meoh(6ml)和水(1.0ml)中n，n-二甲基thr(bzl)-val-dil-dap-phe-ometfa盐(0.186g，0.193mmol)和nh4hco2(2.00g，31.7mmol)的搅拌室温悬液中添加10％pd/c(100mg)。在室温下剧烈搅拌该溶液。72小时后，通过lcms分析显示反应完全，和苯丙氨酸甲酯的水解。反应混合物在硅藻土垫上过滤并且滤液经浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共63.0mg的标题化合物的tfa盐(0.073mmol，38％)。lcmsrt＝2.04分钟(方法a)；esi-msm/z748.58[m+h]⁺；hrmsm/z748.4854[c39h65n5o9+h]⁺.

实施例16

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，55)-4-((2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸

向meoh(0.1ml)和thf(0.1ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-ometfa盐(60mg，0.067mmol)的搅拌室温溶液中添加水(0.1ml)中一水合氢氧化锂(9.6mg，0.229mmol)。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共55.0mg的标题化合物的tfa盐(0.062mmol，93％)。lcmsrt＝2.25分钟(方法a)；esi-msm/z773.45[m+h]⁺；hrmsm/z773.49119[c39h64n8o8+h]⁺.

实施例17

(s)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((2s，3r)-2-(二甲基氨基)-3-羟基丁酰氨基)-n，3-二甲基丁酰胺

向ch2cl2(10ml)中n，n-二甲基thr-val-dil-dap-phe-ohtfa盐(40mg，0.053mmol)的搅拌室温溶液中加入氯化铵(5.72mg，0.107mmol)、diea(28.6μl，0.160mmol)和edci(30.3mg，0.107mmol)。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共28.0mg的标题化合物的tfa盐(0.037mmol，70％)。lcmsrt＝2.14分钟(方法a)；esi-msm/z747.61[m+h]⁺；hrmsm/z747.5017[c39h66n6o8+h]⁺.

实施例18

(s)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-羟基丙酰氨基)-n，3-二甲基丁酰胺

向ch2cl2(10ml)中n，n-二甲基ser-val-dil-dap-phe-ohtfa盐(12mg，0.016mmol)的搅拌室温溶液中加入氯化铵(1.00mg，0.019mmol)、diea(3.21μl，0.018mmol)和edci(5.09mg，0.018mmol)。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共10.0mg的标题化合物的tfa盐(0.014mmol，83％)。lcmsrt＝2.07分钟(方法a)；esi-msm/z733.63[m+h]⁺；hrmsm/z733.4866[c38h64n6o8+h]⁺.

实施例19

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-巯基-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

向etoac(15ml)中fmoc-cys(trt)-oh(3.96g，6.76mmol)和h-dil-otbu盐酸盐(2.00g，6.76mmol)的搅拌室温溶液中添加diea(2.17ml，12.2mmol)。溶液冷却(0℃)并搅拌20分钟。向反应混合物中添加另外的diea(2.17ml，12.2mmol)并且0℃溶液搅拌20分钟。然后向反应混合物中添加cmpi(2.76g，10.8mmol)并且使反应混合物达到室温。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用0.1mhcl(100mlx2)，之后用盐水(20mlx2)洗涤粗反应。有机馏分在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。使用己烷中18％至90％etoac作为洗脱液，通过硅胶(硅胶40μm，3.0x17.0cm)上的快速色谱来分离fmoc-cys(trt)-dil-otbu。获得总共4.73g的fmoc-cys(trt)-dil-otbu(5.72mmol，85％产率)。

向mecn(10ml)中fmoc-cys(trt)-dil-otbu(2.61g，3.16mmol)的搅拌室温溶液中添加哌啶(5ml)。5小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用己烷萃取粗反应混合物并且mecn层经真空浓缩以产生不需要进一步纯化使用的粗h-cys(trt)-dil-otbu。

向dmf(15ml)中粗h-cys(trt)-dil-otbu和dov(0.916g，6.31mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(1.69ml，9.47mmol)，之后添加hatu(2.40g，6.31mmol)。8小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共1.40gdov-cys(trt)-dil-otbu的tfa盐(1.66mmol，52％)。

向ch2cl2(10ml)中dov-cys(trt)-dil-otbutfa盐(1.40g，1.66mmol)的室温溶液中添加tfa(5ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发以产生不需要进一步纯化使用的粗dov-cys(trt)-dil-ohtfa盐。

向dmf(10ml)中dov-cys(trt)-dil-ohtfa盐(0.225g，285mmol)和h-dap-phe-ometfa盐(0.139mmol，0.301mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(0.237ml，1.33mmol)，之后添加hobt(0.102g，0.666mmol)和hatu(0.253g，0.666mmol)。过夜搅拌后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(50mlx3)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩，并且使用不需要进一步纯化。

向dov-cys(trt)-dil-dap-phe-ometfa盐(0.568g，0.507mmol)的室温溶液中添加tfa(10ml)。60℃下12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共10.0mg的标题化合物的二硫桥二聚体tfa盐(0.011mmol，3％)。lcmsrt＝2.50分钟(方法a)；esi-msm/z764.60[m+h]⁺；hrmsm/z763.4547z＝2.

实施例20

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-巯基-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸

向dcm(20ml)中boc-dap-oh二环己基胺盐(6.47g，13.8mmol)和h-phe-otbuhcl盐(3.91g，15.2mmol)的搅拌室温溶液中添加diea(8.78ml，55.2mmol)，之后添加depc(3.12ml，20.7mmol)。8小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物经真空蒸发以得到不需要进一步纯化使用的粗产物。

向ch2cl2(10ml)中boc-dap-phe-otbu(5.25g，10.7mmol)的搅拌室温溶液添加tfa(10ml)。12小时后，通过lcms分析显示反应完全，其是游离苯丙氨酸羧酸和tbu酯的混合物。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得2.85g的h-dap-phe-otbutfa盐的琥珀色油状物(5.65mmol)并且获得总共2.01g的h-dap-phe-ohtfa盐的黄色油状物(4.49mmol)。

向dmf(10ml)中粗dov-cys(trt)-dil-ohtfa盐(0.208g)和h-dap-phe-ometfa盐(0.144g，0.369mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(0.219ml，1.23mmol)，之后添加hatu(0.234g，0.615mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.509g的富集dov-cys(trt)-dil-dap-phe-otbu的tfa盐。

向富集dov-cys(trt)-dil-dap-phe-otbutfa盐(0.509)的室温溶液中添加tfa(5ml)。溶液加热至60℃并搅拌24小时。24小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共56.0mg的标题化合物的tfa盐(0.065mmol，25％)。lcmsrt＝2.32分钟(方法a)；esi-msm/z750.60[m+h]⁺；hrmsm/z750.4460[c38h63n5o8s+h]⁺.

实施例21

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羟基-n-甲基丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸

向dmf(10ml)中粗dov-ser(bzl)-dil-ohtfa盐(0.232g)和h-dap-phe-otbutfa盐(0.196g，0.389mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(0.326ml，1.83mmol)，之后添加hatu(0.348，0.914mmol)。6小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.378gdov-ser(bzl)-dil-dap-phe-otbu的tfa盐(0.380mmol，98％)。

向ch2cl2(5ml)中dov-ser(bzl)-dil-dap-phe-otbutfa盐(0.455g，0.517mmol)的室温溶液中添加tfa(2ml)。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发以产生不需要进一步纯化使用的粗dov-ser(bzl)-dil-dap-phe-ohtfa盐。

meoh(10ml)中粗dov-ser(bzl)-dil-dap-phe-ohtfa盐和活性炭载钯(10％pd基，10.0mg)的搅拌室温悬液经氢化。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物在硅藻土垫上过滤并且滤液经浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.115g的标题化合物的tfa盐(0.136mmol，28％)。lcmsrt＝2.10分钟(方法a)；esi-msm/z734.61[m+h]⁺；hrmsm/z734.4708[c38h63n5o9+h]⁺.

实施例22

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-3-羟基-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸

向dmf(10ml)中粗dov-thr(bzl)-dil-ohtfa盐(0.180g)和h-dap-phe-otbutfa盐(0.148g，0.294mmol)的搅拌室温悬液中添加diea(0.246ml，1.38mmol)，之后添加hatu(0.262，0.690mmol)。6小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.298gdov-thr(bzl)-dil-dap-phe-otbu的tfa盐(0.296mmol，78％)。

向ch2cl2(5ml)中dov-thr(bzl)-dil-dap-phe-otbutfa盐(0.298g，0.296mmol)的室温溶液中添加tfa(2ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发以产生不需要进一步纯化使用的粗dov-thr(bzl)-dil-dap-phe-ohtfa盐。

meoh(10ml)中粗dov-thr(bzl)-dil-dap-phe-ohtfa盐和活性炭载钯(10％pd基，10.0mg)的搅拌室温悬液经氢化。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物在硅藻土垫上过滤并且滤液经浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共0.120g的标题化合物的tfa盐(0.139mmol，47％)。lcmsrt＝2.22分钟(方法a)；esi-msm/z748.62[m+h]⁺；hrmsm/z748.4842[c39h65n5o9+h]⁺.

实施例23

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-羟基丙酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

meoh(10ml)中n，n-二甲基ser(bzl)-val-dil-dap-phe-ometfa盐(50.0mg，0.053mmol)和活性炭载钯(10％pd基，10mg)的搅拌室温悬液经氢化。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物在硅藻土垫上过滤并且滤液经浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共8.00mg的标题化合物的tfa盐(0.009mmol，18％)。lcmsrt＝2.38分钟(方法a)；esi-msm/z748.57[m+h]⁺；hrmsm/z748.4849[c39h65n5o9+h]⁺.

实施例24

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((2s，3r)-2-(二甲基氨基)-3-羟基丁酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

使用与通用合成方案和实施例中所述的那些方法类似的方法制备标题化合物。

实施例25

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸甲酯

向thf(0.10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-ometfa盐(10mg，0.011mmol)的搅拌室温溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.022ml，0.022mmol)。4小时后，通过lcms的分析显示反应完全并且向反应混合物中添加h2o(0.05ml)。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应混合物。获得总共6.00mg的标题化合物的tfa盐(0.007mmol，62％)。lcmsrt＝2.12分钟(方法a)；esi-msm/z761.63[m+h]⁺；hrmsm/z761.5159[c40h68n6o8+h]⁺.

实施例26

(s)-2-((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰氨基)-3-苯基丙酸

向thf(0.10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-ohtfa盐(10mg，0.011mmol)的搅拌室温溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.022ml，0.022mmol)。4小时后，通过lcms的分析显示反应完全并且向反应混合物中添加h2o(0.05ml)。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应混合物。获得总共2.00mg的标题化合物的tfa盐(0.002mmol，21％)。lcmsrt＝2.02分钟(方法a)；esi-msm/z747.65[m+h]⁺；hrmsm/z747.5008[c39h66n6o8+h]⁺.

实施例27

(2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(苯乙基氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向ch2cl2(20ml)中boc-dap-oh二环己基胺盐(6.47g，13.8mmol)和苯乙胺(3.914g，15.19mmol)的搅拌25℃溶液中添加diea(8.76ml，55.2mmol)，之后添加depc(3.12ml，20.7mmol)。8小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物经真空蒸发以得到不需要进一步纯化使用的粗产物。获得总共4.04g的boc-dap-苯乙胺(10.3mmol)。lcmsrt＝3.00分钟(方法a)；esi-msm/z391.37[m+h]⁺.

向ch2cl2(15.0ml)中boc-dap-苯乙胺(4.04g，10.3mmol)的搅拌25℃溶液添加tfa(15.0ml)。14小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物经真空蒸发并且通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共2.51g的h-dap-苯乙胺的tfa盐(6.21mmol)。lcmsrt＝1.72分钟(方法a)；esi-msm/z291.29[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa盐(0.300g，0.526mmol)和h-dap-苯乙胺tfa盐(0.191g，0.471mmol)的搅拌室温溶液中添加diea(0.343ml，1.97mmol)，之后添加hatu(0.501g，1.31mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、用硫酸镁干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共196mg的标题化合物的tfa盐(0.233mmol，49％)。lcmsrt＝2.45分钟(方法a)；esi-msm/z729.55[m+h]⁺；hrmsm/z729.5030[c38h64n8o6+h]⁺.

实施例28

(2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((1s，2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向ch2cl2(20ml)中boc-dap-oh二环己基胺盐(10.0g，0.021mol)和(1r，2s)-(-)-降麻黄碱(3.87g，0.026mol)的搅拌室温溶液中添加diea(11.4ml，0.064mol)和depc(6.44ml，0.043mol)。14小时后，通过lcms的分析显示反应完全。向粗反应混合物中添加0.1mhcl(20.0ml)。有机层经分离、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩以产生粗产物。获得总共7.92g的boc-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黄碱(18.8mmol，88％)。lcmsrt＝2.25分钟(方法a)；esi-msm/z421.31[m+h]⁺.

向ch2cl2(10ml)中boc-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黄碱(7.92g，18.8mmol)的搅拌室温溶液添加tfa(10ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。制备总共5.00g的h-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黄碱的tfa盐(11.5mmol，61％)。lcmsrt＝1.10分钟(方法a)；esi-msm/z321.33[m+h]⁺.

向dmf(5ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa盐(0.300g，0.526mmol)和h-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黄碱tfa盐(0.211g，0.486mmol)的搅拌室温溶液中添加diea(0.351ml，1.97mmol)，之后添加hatu(0.501g，1.31mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、用硫酸镁干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共128mg的标题化合物的tfa盐(0.147mmol，30％)。lcmsrt＝1.95分钟(方法a)；esi-msm/z759.65[m+h]⁺；hrmsm/z759.5121[c39h66n8o7+h]⁺.

实施例29

(2s，3s)-3-叠氮基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((4-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向ch2cl2(20ml)中boc-dap-oh二环己基胺盐(5.00g，10.7mmol)和2-(4-氯苯基)乙基胺(1.85g，11.7mmol)的搅拌室温溶液中添加diea(6.78ml，42.7mmol)和depc(2.41ml，16.0mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物经真空蒸发以得到不需要进一步纯化使用的粗产物。获得总共4.25g的boc-dap-2-(4-氯苯基)乙基胺(10.0mmol，94％)。lcmsrt＝3.10分钟(方法a)；esi-msm/z425.32[m+h]⁺.

向ch2cl2(15ml)中boc-dap-2-(4-氯苯基)乙基胺(4.25g，10.0mmol)的搅拌室温溶液添加tfa(15ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。制备总共2.27g的h-dap-2-(4-氯苯基)乙基胺的tfa盐(5.18mmol，52％)。lcmsrt＝2.05分钟(方法a)；esi-msm/z325.24[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa盐(0.526g，0.923mmol)和h-dap-2-(4-氯苯基)乙基胺tfa盐(0.347g，0.792mmol)的搅拌室温溶液中添加diea(0.602ml，3.46mmol)，之后添加hatu(0.878g，2.30mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、用硫酸镁干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共596mg的标题化合物的tfa盐(0.680mmol，85％)。lcmsrt＝2.38分钟(方法a)；esi-msm/z763.71[m+h]⁺；hrmsm/z763.4633[c38h63n8o6cl+h]⁺.

实施例30

(2s，3s)-3-叠氮基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((2-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向ch2cl2(10ml)中boc-dap-oh二环己基胺盐(5.00g，10.7mmol)和2-(2-氯苯基)乙基胺(1.85g，11.7mmol)的搅拌室温溶液中添加diea(4.76ml，26.7mmol)和depc(2.41ml，16.0mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物经真空蒸发以得到不需要进一步纯化使用的粗产物。获得总共3.98g的boc-dap-2-(2-氯苯基)乙基胺(9.37mmol，88％)。lcmsrt＝3.04分钟(方法a)；esi-msm/z425.23[m+h]⁺.

向ch2cl2(5ml)中boc-dap-2-(2-氯苯基)乙基胺(3.98g，9.37mmol)的搅拌室温溶液添加tfa(5ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。制备总共2.87g的h-dap-2-(2-氯苯基)乙基胺的tfa盐(6.55mmol，70％)。lcmsrt＝1.83分钟(方法a)；esi-msm/z325.22[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa盐(0.450g，0.789mmol)和h-dap-2-(2-氯苯基)乙基胺tfa盐(0.320g，0.731mmol)的搅拌室温溶液中添加diea(0.515ml，2.96mmol)，之后添加hatu(0.751g，1.97mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应混合物。获得总共253mg的标题化合物的tfa盐(0.289mmol，32％，基于rsm)。lcmsrt＝1.26分钟(方法b)；esi-msm/z763.60[m+h]⁺；hrmsm/z763.4632[c38h63n8o6cl+h]⁺.

实施例31

(2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(苯乙基氧基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向thf(0.5ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-petfa盐(25mg，0.030mmol)的搅拌室温溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.045ml，0.045mmol)。1小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应混合物。获得总共9.0mg的标题化合物的甲酸盐(0.012mmol，41％)。lcmsrt＝1.02分钟(方法b)；esi-msm/z703.71[m+h]⁺；hrmsm/z703.5117[c38h66n6o6+h]⁺.

实施例32

(2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((1s，2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向thf(0.3ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-降麻黄碱tfa盐(27mg，0.031mmol)的搅拌室温溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.046ml，0.046mmol)。2小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性三氟乙酸中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应混合物。获得总共6.8mg的标题化合物的tfa盐(0.008mmol，26％)。lcmsrt＝1.95分钟(方法b)；esi-msm/z733.72[m+h]⁺；hrmsm/z733.5227[c39h68n6o7+h]⁺.

实施例33

(2s，3s)-3-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((4-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向thf(0.3ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-2-(4-氯苯基)乙基胺tfa盐(117mg，0.133mmol)的搅拌室温溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.2ml，0.2mmol)。2小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应混合物。获得总共9.0mg的标题化合物的甲酸盐(0.011mmol，9％)。lcmsrt＝0.97分钟(方法b)；esi-msm/z737.51[m+h]⁺；hrmsm/z737.4731[c38h65n6o6cl+h]⁺.

实施例34

(2s，3s)-3-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((2-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向thf(1.0ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-2-(2-氯苯基)乙基胺甲酸盐(46mg，0.057mmol)的搅拌室温溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.085ml，0.085mmol)。1小时后，通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应混合物。获得总共13.6mg的标题化合物的甲酸盐(0.017mmol，30％)。lcmsrt＝1.03分钟(方法b)；esi-msm/z737.57[m+h]⁺；hrmsm/z737.4731[c38h65n6o6cl+h]⁺.

实施例35

(s)-4-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(苯乙基氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(15ml)中dov-dab(fmoc)-dil-ohtfa盐(0.450g，0.587mmol)和h-dap-苯乙胺tfa盐(0.200g，0.495mmol)的搅拌室温溶液中添加diea(0.360ml，2.07mmol)，之后添加hatu(0.526g，1.38mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、用硫酸镁干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共276mg的富集dov-dab(fmoc)-dil-dap-苯乙胺的甲酸盐(0.266mmol，54％)。lcmsrt＝1.37分钟(方法b)；esi-msm/z925.48[m+h]⁺.

向乙腈(10ml)中dov-dpr(fmoc)-dil-dap-苯乙胺(0.276g，0.266mmol)的搅拌室温溶液中添加哌啶(5ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。向粗反应混合物中添加己烷。乙腈层经真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共98.0mg的标题化合物的甲酸盐(0.120mmol，45％)。lcmsrt＝1.02分钟(方法b)；esi-msm/z703.78[m+h]⁺；hrmsm/z703.5117[c38h66n6o6+h]⁺.

实施例36

(s)-4-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((1s，2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(15ml)中dov-dab(fmoc)-dil-ohtfa盐(0.459g，0.599mmol)和h-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黄碱tfa盐(0.225g，0.518mmol)的搅拌室温溶液中添加diea(0.376ml，2.11mmol)，之后添加hatu(0.536g，1.41mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、用硫酸镁干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共449mg的富集dov-dab(fmoc)-dil-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黄碱的甲酸盐(0.420mmol，81％)。lcmsrt＝1.35分钟(方法b)；esi-msm/z955.74[m+h]⁺.

向乙腈(10ml)中dov-dab(fmoc)-dil-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黄碱甲酸盐(0.449g，0.420mmol)的搅拌室温溶液中添加哌啶(5ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。向粗反应混合物中添加己烷。乙腈层经真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共53.0mg的标题化合物的甲酸盐(0.068mmol，14％)。lcmsrt＝0.79分钟(方法b)；esi-msm/z733.71[m+h]⁺；hrmsm/z733.5227[c39h68n6o7+h]⁺.

实施例37

(s)-4-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((4-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(10ml)中dov-dab(fmoc)-dil-ohtfa盐(0.255g，0.333mmol)和h-dap-2-(4-氯苯基)乙基胺tfa盐(0.127g，0.290mmol)的搅拌室温溶液中添加diea(0.204ml，1.17mmol)，之后添加hatu(0.298g，0.781mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、用硫酸镁干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共190mg的dov-dab(fmoc)-dil-dap-2-(4-氯苯基)乙基胺的甲酸盐(0.177mmol，61％)。lcmsrt＝1.49分钟(方法b)；esi-msm/z959.62[m+h]⁺.

向乙腈(5ml)中dov-dab(fmoc)-dil-dap-2-(4-氯苯基)乙基胺甲酸盐(0.190g，0.177mmol)的搅拌室温溶液中添加哌啶(5ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。向粗反应混合物中添加己烷。乙腈层经真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共118mg的标题化合物的甲酸盐(0.151mmol，85％)。lcmsrt＝1.06分钟(方法b)；esi-msm/z737.55[m+h]⁺；hrmsm/z737.4729[c38h65n6o6cl+h]⁺.

实施例38

(s)-4-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-((2-氯苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(5ml)中dov-dab(fmoc)-dil-ohtfa盐(0.306g，0.399mmol)和h-dap-2-(2-氯苯基)乙基胺tfa盐(0.170g，0.388mmol)的搅拌室温溶液中添加diea(0.300g，400μl，2.29mmol)，之后添加hatu(360mg，0.944mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(10mlx3)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemini10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共115mg的dov-dab(fmoc)-dil-dap-2-(2-氯苯基)乙基胺的白色固体(0.120mmol，26％)。lcmsrt＝1.40分钟(方法b)；esi-msm/z959.75[m+h]⁺.

向乙腈(10ml)中dov-dab(fmoc)-dil-dap-2-(2-氯苯基)乙基胺(0.115g，0.120mmol)的搅拌室温溶液中添加哌啶(2ml)。3小时后，通过lcms的分析显示反应完全。向粗反应混合物中添加己烷。乙腈层经真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共30.0mg的标题化合物的白色固体(0.041mmol，34％)。lcmsrt＝1.15分钟(方法b)；esi-msm/z737.68[m+h]⁺；hrmsm/z737.4729[c38h65n6o6cl+h]⁺.

实施例39

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基戊-4-炔酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸甲酯

向etoac(10ml)中boc-炔丙基gly-oh(1.00g，4.69mmol)和h-dil-otbu盐酸盐(1.15g，3.90mmol)的搅拌25℃溶液中添加diea(1.49ml，9.38mmol)。溶液冷却至(0℃)并且搅拌20分钟，并且添加额外部分的diea(1.49ml，9.38mmol)并且反应混合物在0℃下搅拌20分钟。然后向反应混合物中添加cmpi(1.80g，7.04mmol)，其升温至室温并且搅拌12小时。用0.1mhcl(20mlx2)，之后用盐水(20mlx2)洗涤粗反应混合物。有机馏分在无水硫酸镁上干燥，过滤，并真空浓缩以得到粗产物。获得总共2.05g的boc-炔丙基gly-dil-otbu(4.50mmol，96％)。lcmsrt＝3.46分钟(方法a)；esi-msm/z455.42[m+h]⁺.

向ch2cl2(6ml)中boc-炔丙基gly-dil-otbu(2.05g，4.50mmol)的搅拌25℃溶液添加tfa(6ml)。14小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物经真空浓缩以得到不需要进一步纯化使用的粗产物。获得总共1.30gh-炔丙基gly-dil-oh的tfa盐(3.16mmol，70％)。

向dmf(10ml)中dov(1.27g，8.71mmol)的搅拌25℃溶液中添加diea(2.33ml，13.1mmol)，之后添加hatu(3.32g，8.71mmol)。10分钟后，向反应中添加dmf中h-炔丙基gly-dil-ohtfa盐(1.30g，3.16mmol)的溶液。8小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共455mg的dov-炔丙基gly-dil-oh的tfa盐(0.844mmol，27％产率)。lcmsrt＝1.65分钟(方法a)；esi-msm/z425.95[m+h]⁺.

向dmf(15ml)中dov-炔丙基gly-dil-ohtfa盐(0.198g，0.367mmol)和h-dap-phe-ometfa盐(0.156g，0.338)的搅拌室温溶液中添加diea(0.222ml，1.40mmol)，之后添加hatu(0.355g，0.931mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、用硫酸镁干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共10.0mg的标题化合物的tfa盐(0.012mmol，3％)。lcmsrt＝2.50分钟(方法a)；esi-msm/z756.44[m+h]⁺；hrmsm/z756.4902[c41h65n5o8+h]⁺.

实施例40

(2s，3s)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(0.2ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-oh甲酸盐(42.1mg，0.051mmol)、氯化铵(7.9mg，0.148mmol)、tbtu(52.5mg，0.163mmol)的搅拌室温溶液中添加胡尼碱(0.045ml，0.258mmol)。16小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexgemini-nx10μc-18柱(150x30mm)的使用0.1％水性氢氧化铵中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应混合物。获得总共13.4mg的标题化合物(0.017mmol，33％)。lcmsrt＝1.05分钟(方法b)；esi-msm/z772.61[m+h]⁺；hrmsm/z772.5078[c39h65n9o7+h]⁺.

实施例41

(2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-((2-(吡啶-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa盐(0.300g，0.526mmol)和h-dap-2-(2-吡啶基)乙基胺tfa盐(0.287g，0.709mmol)的搅拌23℃溶液中添加diea(343μl，1.97mmol)，之后添加hatu(0.501g，1.31mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemini-nx10μc-18柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共139mg的标题化合物(0.190mmol，29％)。lcmsrt＝0.916分钟(方法b)；esi-msm/z730.64[m+h]⁺；hrmsm/z730.4985[c37h63n9o6+h]⁺.

实施例42

(2s，3s)-3-叠氮基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-(叔丁基氨基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(0.2ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-oh甲酸盐(24.0mg，0.029mmol)、叔丁基胺盐酸盐(7.9mg，0.072mmol)、hatu(24.5mg，0.064mmol)的搅拌室温溶液中添加胡尼碱(0.022ml，0.124mmol)。18小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexgemini-nx10μc-18柱(150x30mm)的，使用0.1％水性氢氧化铵中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应混合物。获得总共15.4mg的标题化合物(0.017mmol，59％)。lcmsrt＝1.27分钟(方法b)；esi-msm/z828.8[m+h]⁺；hrmsm/z828.5671[c39h66n6o8+h]⁺.

实施例43

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-缬氨酸甲酯

向ch2cl2(20ml)中boc-dap-oh二环己基胺盐(4.00g，8.54mmol)和h-val-omehcl盐(1.80g，10.7mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(4.44g，6.00ml，34.4mmol)，之后添加hatu(2.15g，2.00ml，0.013mol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物经真空蒸发以得到不需要进一步纯化使用的粗产物。获得总共6.80g的无色油状物的boc-dap-val-ome(17.0mmol，80％)。lcmsrt＝1.33分钟(方法b)；esi-msm/z401.6[m+h]⁺.

搅拌二噁烷(20ml)中4.0mhcl中boc-dap-val-ome(6.80g，17.0mmol)的23℃悬液。4小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物经真空蒸发以得到不需要进一步纯化使用的粗产物。获得总共4.57g的h-dap-val-ome的盐酸盐(13.6mmol，80％)。lcmsrt＝0.726分钟(方法b)；esi-msm/z301.45[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa盐(0.144g，0.253mmol)和h-dap-val-omehcl盐(0.332g，0.985mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(0.222g，0.300ml，1.72mmol)，之后添加hatu(0.240g，0.631mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemini-nx10μc-18柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共129mg的淡黄色固体的标题化合物(0.175mmol，55％)。lcmsrt＝1.15分钟(方法b)；esi-msm/z739.75[m+h]⁺；hrmsm/z739.5074[c36h66n8o8+h]⁺.

实施例44

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-6-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)1-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基己酰氨基1-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸甲酯

向etoac(20ml)中boc-lys(fmoc)-oh(5.60g，12.0mmol)和h-dil-otbu盐酸盐(3.06g，10.9mmol)的搅拌23℃溶液中添加diea(4.44g，6.00ml，34.4mmol)。溶液冷却至0℃并搅拌0.5小时。0.5小时后，向反应混合物中添加其他diea(4.44g，6.00ml，34.4mmol)并且0℃反应搅拌0.5小时。然后向反应混合物中添加cmpi(4.20g，16.4mmol)，其缓慢升温至室温并且搅拌10小时。用1mhcl(30mlx2)，之后用盐水(25mlx2)洗涤粗反应。有机馏分在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。获得总共7.38g的淡黄色固体的boc-lys(fmoc)-dil-otbu(10.4mmol，86％)。lcmsrt＝1.85分钟(方法b)；esi-msm/z710.1[m+h]⁺.

搅拌二嗯烷(10.0ml)中4.0mhcl中boc-lys(fmoc)-dil-otbu(7.38g，10.4mmol)的23℃悬液。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物经真空蒸发以得到不需要进一步纯化使用的粗产物。获得总共7.05g的淡黄色的h-lys(fmoc)一dil-oh的hcl盐(0.012mol，89％)。lcmsrt＝1.20分钟(方法b)；esi-msm/z554.54[m+h]⁺.

向dmf(20ml)中dov-oh(2.50g，17.2mmol)的搅拌23。℃悬液中添加diea(4.44g，6.00ml，0.034mol)，之后添加hatu(4.82g，12.6mmol)。5分钟后，向反应混合物中添加h-lys(fmoc)-dil-ohhcl盐(7.05g，0.012mol)。4小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810u柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共4.45g的淡黄色固体的dov-lys(fmoc)-dil-oh(6.54mmol，78％)。lcmsrt＝1.21分钟(方法b)；esi-msm/z681.68[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-lys(fmoc)-dil-oh(2.17g，3.19mmol)和h-dap-ometfa盐(1.78g，3.85mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(1.65g，2.20ml，12.7mmol)，之后添加hatu(1.94g，5.10mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemini10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共2.25g的淡黄色固体的dov-lys(fmoc)-dil-dap-phe-ome(2.23mmol，70％)。lcmsrt＝1.29分钟(方法b)；esi-msm/z1011.77[m+h]⁺.

向乙腈(20ml)中dov-lys(fmoc)-dil-dap-phe-ome(2.25g，2.23mmol)的搅拌23℃悬液中添加哌啶(5ml)。2小时后，通过lcms的分析显示反应完全。向粗反应溶液中添加己烷。乙腈层经真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的使用0.1％水性nh4oh中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共898mg的白色固体的标题化合物(1.14mmol，51％)。lcmsrt＝0.840分钟(方法b)；esi-msm/z789.5[m+h]⁺；hrmsm/z789.5482[c42h72n6o8+h]⁺.

实施例45

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，4s)-4-叠氮基-1-(二甲基-l-缬氨酰基)-n-甲基吡咯烷-2-甲酰胺基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸甲酯

向etoac(20ml)中顺式-fmoc-pro(4-n3)-oh(2.00g，5.27mmol)和h-dil-otbuhcl(1.49g，5.27mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(2.22g，3.0ml，17.2mmol)。溶液冷却至0℃并搅拌0.5小时。向冷却的反应混合物中添加额外的diea(2.22g，3.0ml，17.2mmol)并且0℃反应混合物搅拌0.5小时。然后向反应混合物中添加cmpi(2.03g，7.93mmol)，其缓慢升温至室温并且搅拌10小时。用1mhcl(30mlx2)，之后用盐水(25mlx2)洗涤粗反应。有机馏分在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。该粗产物无需进一步纯化即可使用。获得总共3.13g的黄色油状物的顺式-fmoc-pro(4-n3)-dil-otbu(5.05mmol，76％)。lcmsrt＝1.73分钟(方法b)；esi-msm/z621.46[m+h]⁺.

向乙腈(20ml)中顺式-fmoc-pro(4-n3)-dil-otbu(3.13g，4.04mmol)的搅拌23℃溶液中添加哌啶(10ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。向粗反应混合物中添加己烷。乙腈层经真空浓缩，并且不需要进一步纯化使用粗产物。获得总共1.57g的澄清油的h-pro(4-n3)-dil-otbu(3.95mmol，88％)。lcmsrt＝1.19分钟(方法b)；esi-msm/z398.50[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-oh(1.03g，7.12mmol)和h-pro(4-n3)-dil-otbu(1.57g，3.56mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(1.84g，2.50ml，0.014mol)，之后添加hatu(2.03g，5.33mmol)。3小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共817mg的白色固体的dov-pro(4-n3)-dil-otbu(1.56mmol，44％)。lcmsrt＝1.21分钟(方法b)；esi-msm/z525.28[m+h]⁺.

搅拌3.0hcl中dov-pro(4-n3)-dil-otbu(0.817g，1.56mmol)的23℃悬液。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物经真空蒸发以得到不需要进一步纯化使用的粗产物。获得总共704mg的dov-pro(4-n3)-dil-oh的hcl盐(1.39mmol，89％)。lcmsrt＝0.676分钟(方法b)；esi-msm/z469.44[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-pro(4-n3)-dil-ohhcl盐(0.120g，0.256mmol)和h-dap-phe-ometfa盐(0.143g，0.310mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(0.132g，0.200ml，1.02mmol)，之后添加hatu(0.156g，0.410mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共37.0mg的黄色固体的标题化合物(0.046mmol，18％)。lcmsrt＝1.13分钟(方法b)；esi-msm/z799.43[m+h]⁺；hrmsm/z799.5064[c41h66n8o8+h]⁺.

实施例46

(s)-3-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-4-(((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-3-(((s)-1-甲氧基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基-4-氧代丁酸

向etoac(20ml)中boc-asp(obzl)-oh(5.00g，15.5mmol)和h-dil-otbutfa盐(4.36g，15.5mmol)的搅拌23℃溶液中添加diea(6.00g，8.10ml，46.41mmol)。反应混合物冷却至0℃并搅拌0.5小时。0.5小时后，向反应混合物中添加其他diea(6.00g，8.01ml，46.4mmol)并且搅拌0.5小时。然后向反应混合物中添加cmpi(5.93g，23.2mmol)，其缓慢升温至室温并且搅拌10小时。用1mhcl(30mlx2)，之后用盐水(25mlx2)洗涤粗反应。有机馏分在无水硫酸钠上干燥，过滤并真空浓缩。该粗产物无需进一步纯化即可使用。获得总共7.85g的棕色油状物的boc-asp(obzl)-dil-otbu(13.9mmol，90％)。lcmsrt＝1.72分钟(方法b)；esi-msm/z565.3[m+h]⁺.

搅拌二噁烷(20ml)中4.0mhcl中boc-asp(obzl)-dil-otbu(7.85g，13.9mmol)的23℃溶液。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物经真空蒸发以得到不需要进一步纯化使用的粗产物。获得总共7.85g的富集h-asp(obzl)-dil-oh的盐酸盐。lcmsrt＝0.951分钟(方法b)；esi-msm/z409.40[m+h]⁺.

向dmf(20ml)中dov-oh(3.00g，20.7mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(6.96g，9.40ml，0.054mol)和hatu(7.60g，19.9mmol)，之后添加富集h-asp(obzl)-dil-ohhcl盐(7.85g)。4小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共2.00g的白色固体的dov-asp(obzl)-dil-oh(3.74mmol，28％)。lcmsrt＝1.10分钟(方法b)；esi-msm/z536.5[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-asp(obzl)-dil-oh(1.00g，1.87mmol)和h-dap-phe-ometfa盐(1.04g，2.25mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(0.970g，1.30ml，7.47mmol)，之后添加hatu(1.14g，2.99mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共1.25g的橙色固体的dov-asp(obzl)-dil-dap-phe-ome(1.44mmol，77％)。lcmsrt＝1.21分钟(方法b)；esi-msm/z866.6[m+h]⁺.

向meoh(10ml)中dov-asp(obzl)-dil-dap-phe-ome(0.525g，0.606mmol)的搅拌23℃悬液中添加10％pd/c(50mg)，之后添加氢气氛。5小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物在硅藻土垫上过滤，之后蒸发挥发性有机物。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共6.00mg的白色固体的标题化合物(0.008mmol，1％)。lcmsrt＝1.04分钟(方法b)；esi-msm/z776.43[m+h]⁺；hrmsm/z776.4794[c40h65n5o10+h]⁺.

实施例47

(2s，3r)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氧基)-3-羟基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((1s，2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(20ml)中dov-dab(fmoc)-dil-ohtfa盐(561mg，0.883mmol)和h-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黄碱tfa盐(345mg，0.794mmol)的搅拌23℃溶液中添加diea(417mg，562μl，3.23mmol)，之后添加hatu(820mg，2.15mmol)。8小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的使用0.1％水性nh4oh中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共326mg的白色固体的dov-thr(bzl)-dil-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黄碱(0.396mmol，37％)。lcmsrt＝1.20分钟(方法b)；esi-msm/z824.76[m+h]⁺.

将meoh(10ml)中dov-thr(bzl)-dil-dap-(1r，2s)-(-)-降麻黄碱(326mg，0.396mmol)的搅拌23℃悬液加载到使用rani(catcart)以及升高的温度(120℃)和压力(80巴)的连续流氢化反应器中。洗脱后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物经真空蒸发以得到粗产物，其通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化。获得总共15mg的白色固体的标题化合物(0.020mmol，5％)。lcmsrt＝1.17分钟(方法b)；esi-msm/z734.5[m+h]⁺；hrmsm/z734.5053[c39h67n5o8+h]⁺.

实施例48

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n，3-二甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-丝氨酸甲酯

向dmf(10ml)中dov-val-dil-ohtfa盐(583mg，1.07mmol)和h-dap-ser-ometfa盐(783mg，1.97mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(223mg，0.324ml，1.72mmol)，之后添加hatu(1.03g，2.71mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共704mg的淡黄色固体的标题化合物(1.01mmol，74％)。lcmsrt＝0.917分钟(方法b)；esi-msm/z700.43[m+h]⁺；hrmsm/z700.4843[c35h65n5o9+h]⁺.

实施例49

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-异亮氨酸甲酯

向ch2cl2(20ml)中boc-dap-oh二环己基胺盐(6.62g，14.1mmol)和h-ile-ome(3.08g，21.2mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(7.30g，9.90ml，56.5mmol)，之后添加hatu(3.44g，3.20ml，0.021mol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物经真空蒸发以得到不需要进一步纯化使用的粗产物。获得总共8.56g的棕色油状物的boc-dap-ile-ome(20.7mmol，88％)。lcmsrt＝1.51分钟(方法b)；esi-msm/z415.16[m+h]⁺.

向ch2cl2(20ml)中boc-dap-ile-ome(6.62g，16.0mmol)的搅拌23℃悬液添加tfa(10ml)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共3.55g的黄色固体的h-dap-ile-ome(8.29mmol，52％)。lcmsrt＝0.691分钟(方法b)；esi-msm/z315.16[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa盐(150mg，0.329mmol)和h-dap-ile-ome(207mg，0.657mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(170mg，0.220ml，1.31mmol)，之后添加hatu(251mg，0.657mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共148mg的淡黄色固体的标题化合物(0.197mmol，60％)。lcmsrt＝1.43分钟(方法b)；esi-msm/z753.48[m+h]⁺；hrmsm/z753.5224[c37h68n8o8+h]⁺.

实施例50

(2s，3s)-3-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向thf(0.1ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-nh2(13.4mg，0.017mmol)的搅拌室温溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.035ml，0.035mmol)。3小时后，添加额外的三甲基膦(1m，0.020ml，0.020mmol)。另外1小时后，通过lcms的分析显示反应完全。溶液用水和dmf稀释并放置30分钟。通过用phenomenexgemini-nx10μc18，柱(150x30mm)的，使用0.1％水性氢氧化铵中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应混合物。获得总共5.8mg的标题化合物(0.008mmol，45％)。lcmsrt＝0.85分钟(方法b)；esi-msm/z746.6[m+h]⁺；hrmsm/z746.5173[c39h67n7o7+h]⁺.

实施例51

(2s，3s)-3-氨基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-(叔丁基氨基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰胺

向thf(0.1ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-nht-bu(15.4mg，0.019mmol)的搅拌室温溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.037ml，0.037mmol)。3小时后，添加额外的三甲基膦(1m，0.020ml，0.020mmol)。另外1小时后，通过lcms的分析显示反应完全。反应溶液用水和dmf稀释并放置30分钟。通过用phenomenexgemini-nx10μc-18，柱(150x30mm)的，使用0.1％水性氢氧化铵中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应混合物。获得总共2.7mg的标题化合物(0.003mmol，18％)。lcmsrt＝0.85分钟(方法b)；esi-msm/z746.6[m+h]⁺；hrmsm/z802.5799[c43h75n7o7+h]⁺.

实施例52

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((s)-3-叠氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丙酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸甲酯

向dmf(10ml)中fmoc-meval-oh(1.03g，2.90mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(1.35ml，7.74mmol)，之后添加hatu(1.11g，2.90mmol)。在5分钟后，向反应混合物中添加h-4-叠氮基-ala-dil-oh(0.610g，2.90mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(15ml)稀释，并用etoac(40mlx2)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共348mgfmoc-meval-4-叠氮基-ala-dil-oh的黄色油状物(0.535mmol，28％)。lcmsrt＝1.80分钟(方法b)；esi-msm/z651.3[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中fmoc-meval-4-叠氮基-ala-dil-oh(348.00mg，0.535mmol)和h-dap-phe-ome(372.66mg，1.07mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(276mg，0.400ml，2.14mmol)，之后添加hatu(408mg，1.07mmol)。10小时后，通过lcms分析显示反应完全，同时出现fmoc基团去保护。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共5.00mg的标题化合物(0.006mmol，1％)。lcmsrt＝1.08分钟(方法b)；esi-msm/z759.5[m+h]⁺；hrmsm/z759.4753[c38h62n8o8+h]⁺.

实施例53

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-叠氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸甲酯

向dmf(10ml)中fmoc-meval-oh(2.46g，6.96mmol)和h-abu(3-n3)-dil-otbu(2.46g，6.38mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(3.30g，4.5ml，25.5mmol)，之后添加hatu(3.65g，9.57mmol)。6小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应混合物。获得总共3.16g的fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-otbu的甲酸盐(4.12mmol，65％)。lcmsrt＝2.08分钟(方法a)；esi-msm/z722.7[m+h]⁺.

向ch2cl2(5.0ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-otbu甲酸盐(3.16g，4.12mmol)的搅拌23℃悬液中添加tfa(10.0ml)。14小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物经真空蒸发得到油。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性tfa中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共2.26g的fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-oh的tfa盐(2.90mmol，66％)。lcmsrt＝1.80分钟(方法b)；esi-msm/z665.3[m+h]⁺.

向dmf(2ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-ohtfa盐(80.0mg，0.103mmol)和h-dap-phe-ometfa盐(83.9mg，0.182mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(0.083mmol，0.481mmol)，之后添加hatu(91.8mg，0.241mmol)。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用dmf稀释并通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化。获得总共97.0mg的fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-phe-ome的甲酸盐(0.093mmol，77％)。lcmsrt＝1.90分钟(方法b)；esi-msm/z995.6[m+h]⁺.

向乙腈(10ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-phe-ome(97.0mg，0.093mmol)的搅拌23℃溶液中添加哌啶(5ml)。5小时后，通过lcms的分析显示反应完全。向粗反应溶液中添加己烷(25mlx3)以萃取非极性副产物。乙腈层经真空浓缩并且通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性nh4oh中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共74.0mg的白色固体的标题化合物(0.096mmol，103％)。lcmsrt＝1.09分钟(方法b)；esi-msm/z773.5[m+h]⁺；hrmsm/z773.4911[c39h64n8o8+h]⁺.

实施例54

(2s，3s)-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-氨基-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-3-叠氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰胺

向ch2cl2(20.0ml)中bod-dap-oh二环己基胺盐(10.0g，21.3mmol)和h-phe-nh2hcl盐(6.42g，32.0mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(11.0g，14.9ml，85.3mmol)，之后添加depc(5.19g，4.80ml，0.032mol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用h2o(25mlx2)，之后用盐水(25mlx2)洗涤粗反应。有机馏分在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。使用ch2cl2中2％至10％甲醇作为洗脱剂，通过快速色谱(硅胶40μm，尺寸)纯化粗制橙色油状物。获得总共7.25g的boc-dap-phe-nh2的黄色油(16.7mmol，78％)。lcmsrt＝1.28分钟(方法b)；esi-msm/z434.19[m+h]⁺.

向ch2cl2(10ml)中boc-dap-phe-nh2(7.25g，16.7mmol)的搅拌23℃悬液添加tfa(10ml)。5小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物经真空蒸发以得到不需要进一步纯化使用的粗产物。获得总共6.00g的黄色固体的h-dap-phe-nh2(13.4mmol，80％)。lcmsrt＝0.691分钟(方法b)；esi-msm/z334.17[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-ohtfa盐(456mg，0.586mmol)和h-dap-phe-nh2tfa盐(457mg，1.02mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(0.350g，0.500ml，2.74mmol)，之后添加hatu(0.520g，1.37mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应。获得总共526mg的fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-phe-nh2的甲酸盐(0.513mmol，75％)。lcmsrt＝1.81分钟(方法b)；esi-msm/z980.39[m+h]⁺.

向乙腈(10ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-phe-nh2(525mg，0.513mmol)的搅拌23℃溶液中添加哌啶(5ml)。2小时后，通过lcms的分析显示反应完全。向粗反应中添加己烷(15mlx3)。乙腈层经真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性tfa中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共354mg的标题化合物的tfa盐(0.406mmol，79％)。lcmsrt＝1.15分钟(方法b)；esi-msm/z758.24[m+h]⁺；hrmsm/z758.4915[c38h63n9o7+h]⁺.

实施例５５

((2s，3s)-3-叠氮基-n-((3r，4s，5s)-1-((s)-2-((1r，2r)-3-(((s)-1-(叔丁基氨基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰胺

向dmf(1.0ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-phe-oh(111mg，0.113mmol)、叔丁基胺盐酸盐(31.5mg，0.287mmol)、hatu(92.0mg，0.242mmol)的搅拌室温溶液中添加胡尼碱(0.079ml，0.454mmol)。1小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用乙酸乙酯稀释粗反应混合物并且用1nhcl和盐水洗涤有机馏分。有机馏分在硫酸镁上干燥，过滤，并减压浓缩。粗制黄色油状物溶于哌啶(2.0ml)和乙腈(5.0ml)。1小时后，通过lcms的分析显示反应完全。乙腈层用乙烷(2x)萃取并且乙腈层经减压浓缩。通过用phenomenexgemini-nx10μc-18，柱(150x30mm)的，使用0.1％水性氢氧化铵中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共50.3mg的标题化合物(0.062mmol，55％)。lcmsrt＝1.29分钟(方法b)；esi-msm/z814.1[m+h]⁺；hrmsm/z814.5541[c42h71n9o7+h]⁺.

实施例56

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-叠氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸叔丁酯

向dcm(20ml)中boc-dap-oh二环己基胺盐(6.47g，13.8mmol)和h-phe-otbu(3.91g，15.2mmol)的搅拌25℃溶液中添加diea(8.76ml，55.2mmol)，之后添加depc(3.12ml，20.7mmol)。8小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物经真空蒸发以得到不需要进一步纯化使用的粗产物。获得总共5.35g的boc-dap-phe-otbu(10.9mmol，79％)。lcmsrt＝2.89分钟(方法a)；esi-msm/z491.48[m+h]⁺.

向ch2cl2(10.0ml)中boc-dap-phe-otbu(5.25g，10.7mmol)的搅拌室温溶液添加tfa(10.0ml)。12小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexsynergi10μmax-rp柱(150x30mm)的，使用0.05％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共2.85g的h-dap-phe-otbu的tfa盐(5.65mmol，68％)。lcmsrt＝1.82分钟(方法a)；esi-msm/z391.02[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-ohtfa盐(410mg，0.527mmol)和h-dap-phe-otbutfa盐(482mg，0.956mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(319mg，430μl，2.47mmol)，之后添加hatu(470mg，1.23mmol)。10小时后，通过lcms分析显示反应完全，同时去除10％的fmoc基团。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应混合物。获得总共26.0mg的标题化合物的白色甲酸盐(0.030mmol，5％)。lcmsrt＝1.41分钟(方法b)；esi-msm/z815.33[m+h]⁺；hrmsm/z815.5383[c42h70n8o8+h]⁺.

实施例57

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-叠氮基-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸

向dmf(10ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-ohtfa盐(410mg，0.527mmol)和h-dap-phe-otbutfa盐(482mg，0.956mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(319mg，430μl，2.47mmol)，之后添加hatu(470mg，1.23mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应混合物。获得总共648mg的fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-phe-otbu的白色甲酸盐(0.598mmol，97％)。lcmsrt＝1.41分钟(方法b)；esi-msm/z1037.41[m+h]⁺.

向ch2cl2(5.00ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-phe-otbu甲酸盐(648mg，0.598mmol)的搅拌23℃悬液中添加tfa(5.00ml)。2小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物经真空蒸发得到棕色油状物。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性tfa中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共502mg的fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-phe-oh的tfa盐(0.458mmol，77％)。lcmsrt＝1.81分钟(方法b)；esi-msm/z981.22[m+h]⁺.

向乙腈(10ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-phe-ohtfa盐(392mg，0.382mmol)的搅拌23℃溶液中添加哌啶(5ml)。2小时后，通过lcms的分析显示反应完全。向粗反应中添加己烷(15mlx3)。乙腈层经真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性tfa中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共360mg的标题化合物的tfa盐。lcmsrt＝1.19分钟(方法b)；esi-msm/z759.13[m+h]⁺；hrmsm/z759.4755[c38h62n8o8+h]⁺.

实施例58

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸叔丁酯

向dmf(10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa盐(327mg，0.574mmol)和h-dap-phe-otbutfa盐(0.340g，0.675mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(0.370g，0.500ml，2.87mmol)，之后添加hatu(0.550g，1.43mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应。获得总共453mg的标题化合物的甲酸盐(0.518mmol，72％)。lcmsrt＝1.42分钟(方法b)；esi-msm/z828.94[m+h]⁺；hrmsm/z829.5536[c43h72n8o8+h]⁺.

实施例59

(2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向ch2cl2(20.0ml)中boc-dap-oh二环己基胺盐(2.48g，5.29mmol)和(s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基胺(1.00g，5.29mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(2.73g，3.7ml，21.1mmol)，之后添加depc(1.29g，1.20ml，7.93mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共2.52g的boc-dap-(s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基胺的甲酸盐(4.99mmol，94％)。lcmsrt＝1.35分钟(方法b)；esi-msm/z459.2[m+h]⁺.

向ch2cl2(10ml)中boc-dap-(s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基胺(2.52g，4.99mmol)的搅拌23℃悬液添加tfa(5.00ml)。5小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物经真空蒸发以得到不需要进一步纯化使用的粗产物。获得总共2.43g的h-dap-(s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基胺的tfa盐(5.14mmol，84％)。lcmsrt＝0.575分钟(方法b)；esi-msm/z359.2[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa盐(305mg，0.668mmol)和h-dap-(s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基胺tfa盐(0.36g，1.002mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(0.35g，0.5ml，2.67mmol)，之后添加hatu(509mg，1.34mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共47.0mg的标题化合物的甲酸盐(0.056mmol，8％)。lcmsrt＝1.24分钟(方法b)；esi-msm/z797.3[m+h]⁺；hrmsm/z797.5139[c39h64n12o6+h]⁺.

实施例60

(2s，3s)-3-叠氮基-n-((3r，4s，s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰氨基)丁酰胺

同dmf(10ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-ohtfa盐(0.491g，0.631mmol)和h-dap-(s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基胺tfa盐(0.532g，1.13mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(0.381g，0.500ml，2.97mmol)，之后添加hatu(0.57g，1.486mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共125mg的fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-(s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基胺的甲酸盐(0.119mmol，16％)。lcmsrt＝1.94分钟(方法b)；esi-msm/z1005.35[m+h]⁺.

向乙腈(10ml)中fmoc-meval-abu(3-n3)-dil-dap-(s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基胺(525mg，0.499mmol)的搅拌23℃溶液中添加哌啶(5ml)。2小时后，通过lcms的分析显示反应完全。向粗反应溶液中添加己烷(x3)。乙腈层经真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性tfa中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共20.0mg的标题化合物的tfa盐(0.022mmol，5％)。lcmsrt＝1.37分钟(方法b)；esi-msm/z783.42[m+h]⁺；hrmsm/z783.4979[c38h62n12o6+h]⁺.

实施例61

(2s，3s)-3-叠氮基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(噻唑-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向ch2cl2(20.0ml)中boc-dap-oh二环己基胺盐(1.95g，4.154mmol)和(s)-2-苯基-1-(2-四唑2-基)乙基胺(1.00g，4.154mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(2.15g，2.9ml，16.615mmol)，之后添加depc(1.01g，0.9ml，0.006mol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。用h2o(25mlx2)，之后用盐水(25mlx2)洗涤粗反应混合物。有机馏分在mgso4垫上干燥、过滤并真空浓缩。获得总共1.65g的黄色油状物的boc-dap-(s)-2-苯基-1-(噻唑-2-基)乙基胺(3.48mmol，84％)。lcmsrt＝1.59分钟(方法b)；esi-msm/z475.2[m+h]⁺.

向ch2cl2(10.0ml)中boc-dap-(s)-2-苯基-1-(噻唑-2-基)乙基胺(1.65g，3.49mmol)的搅拌23℃悬液添加tfa(10.0ml)。4小时后，通过lcms的分析显示反应完全。挥发性有机物真空蒸发。粗制油状物溶于dmf(5ml)和三乙基胺(1ml)以实现ph8。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性tfa中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共935mg的h-dap-(s)-2-苯基-1-(噻唑-2-基)乙基胺的tfa盐(1.92mmol，55％)。lcmsrt＝1.04分钟(方法b)；esi-msm/z375.0[m+h]⁺.

向dmf(10ml)中dov-abu(3-n3)-dil-ohtfa盐(302mg，0.661mmol)和h-dap-(s)-2-苯基-1-(噻唑-2-基)乙基胺tfa盐(247mg，0.661mmol)的搅拌23℃悬液中添加diea(0.34g，0.5ml，2.65mmol)，之后添加hatu(504mg，1.32mmol)。10小时后，通过lcms的分析显示反应完全。粗反应混合物用饱和碳酸氢钠(10ml)稀释，并用etoac(20mlx3)萃取。合并的有机馏分用盐水洗涤、在硫酸镁垫上干燥、过滤并真空浓缩。通过用phenomenexgemininx-c1810μ柱(150x30mm)的，使用0.1％水性tfa中10％至90％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗制油状物。获得总共111mg的标题化合物的tfa盐(0.120mmol，18％)。lcmsrt＝1.33分钟(方法b)；esi-msm/z812.2[m+h]⁺；hrmsm/z812.4835[c41h65n9o6s+h]⁺.

实施例62

((2r，3r)-3-((s)-1-((3r，4s，5s)-4-((2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-甲基丁酰氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰基)-l-苯丙氨酸叔丁酯

向dmf(1.0ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-ot-bu甲酸盐(102.5mg，0.117mmol)的搅拌室温溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.350ml，0.350mmol)。2小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexgemini-nx10μc-18，柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应混合物。获得总共70.1mg的标题化合物的甲酸盐(0.083mmol，70％)。lcmsrt＝1.22分钟(方法b)；esi-msm/z803.3[m+h]⁺；hrmsm/z803.5642[c43h74n6o8+h]⁺.

实施例63

(2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(1h-四唑-5-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(0.2ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-四唑甲酸盐(19.4mg，0.023mmol)的搅拌室温溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.068ml，0.068mmol)。2小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexgemini-nx10μc-18，柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应混合物。获得总共9.9mg的标题化合物的甲酸盐(0.012mmol，53％)。lcmsrt＝1.07分钟(方法b)；esi-msm/z771.2[m+h]⁺；hrmsm/z771.5233[c39h66n10o8+h]⁺.

实施例64

(2s，3s)-3-氨基-2-((s)-2-(二甲基氨基)-3-甲基丁酰氨基)-n-((3r，4s，5s)-3-甲氧基-1-((s)-2-((1r，2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((s)-2-苯基-1-(噻唑-2-基)乙基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-n-甲基丁酰胺

向dmf(0.2ml)中dov-abu(3-n3)-dil-dap-phe-噻唑甲酸盐(37.2mg，0.043mmol)的搅拌室温溶液中添加thf中三甲基膦(1m，0.090ml，0.090mmol)。1小时后，通过lcms的分析显示反应完全。通过用phenomenexgemini-nx10μc-18，柱(150x30mm)的，使用0.1％水性甲酸中5％至95％mecn作为洗脱液的制备型rp-hplc纯化粗反应混合物。获得总共16.8mg的标题化合物的甲酸盐(0.020mmol，47％)。lcmsrt＝1.15分钟(方法b)；esi-msm/z786.2[m+h]⁺；hrmsm/z786.4940[c41h67n7o6s+h]⁺.

实施例b1

体外细胞毒性实验

通过评价化合物对各种癌细胞系的细胞毒性活性测量它们的体外效力。在用透明组织培养处理的96-孔板中进行该试验。使用的细胞系是pc3(人前列腺癌)、hcc-1954(人乳腺导管癌)、和hct15(人结直肠腺癌，pgp-表达)。细胞以约1,000-1,500个细胞/孔接种到50μl的生长培养基(rpmi-1640+10％热灭活胎牛血清)中并在37℃和5％co2下过夜孵育使它们贴壁。第二天，一式三份向各孔中添加50μl的载剂对照(dmso)的2x母液或不同浓度的化合物。另外，使用没有细胞或仅未处理细胞的对照孔。在添加化合物之后，板在37℃下5％co2的加湿组织培养孵育器中孵育4-6天以测量细胞毒性。在4-6天后，每孔添加20μl的prestoblue^tm细胞活力试剂(生命技术公司(lifetechnologies)#a13261)。板在37℃下孵育1-2小时。使用bioteksynergy^tmh4酶标仪记录540ex/590em下的荧光。代表性数据绘制为与未处理的对照孔相比的存活百分比。该试验中测试的化合物的数据绘制为与未处理的对照孔相比的存活百比分，如图9-30所示。

实施例b2

微管蛋白聚合的测定

在牛脑微管蛋白上评价本文所述的化合物对微管蛋白聚合的抑制。为了评价化合物的活性，以约400μg/孔在100μl通用微管蛋白缓冲液中接种微管蛋白，然后在试验开始时一式两份用10μm终浓度的化合物处理。在添加测试化合物之后，通常在37℃下进行微管蛋白聚合试验持续60分钟。通过利用340nm处的光学密度值的吸光度光谱分析确定微管蛋白聚合。为了测试聚合的微管蛋白的量，在添加测试化合物之后，获取每分钟的340nm处的光学密度值。对于分析，化合物处理的微管蛋白的微管蛋白聚合程度与对照的程度相比，对照是缓冲液处理的微管蛋白。具体地，使用hts-微管蛋白聚合试验试剂盒(细胞骨架公司(cytoskeletoninc.)；目录号bk004p)进行微管蛋白抑制研究，采用以下取样方案：

1.在试验开始之前，预热光度计和96-孔板至37℃持续30分钟。热板对于高聚合活性和可重复结果而言是必要的。

2.输入所有的酶标仪参数(340nm处吸光度，37℃，每分钟一个读数)使光度计备用。一旦微管蛋白分装到37℃孔中，必须立即开始读取。

3.使500μl的通用微管蛋白缓冲液升温至室温。微管蛋白配体稀释需要温热缓冲液。

4.包括紫杉醇作为对照。使用10μl的紫杉醇/孔，其使终浓度最终达到10μm。

5.制备冷试验缓冲液：通用微管蛋白缓冲液，1mmgtp，10％甘油。

6.用1ml的冷试验缓冲液重悬4mg的微管蛋白以使最终蛋白质浓度达到4mg/ml。将管放在冰上并且使蛋白质完全重悬3分钟。

7.在试验缓冲液中制备10x浓度的选择化合物。

8.移取10μl的10x浓缩化合物到预热板的所需数量的孔中。在37℃下孵育板2分钟。

9.移取10μl的仅试验缓冲液到2的对照孔中(缓冲液处理的微管蛋白)。

10.移取100μl的微管蛋白到所需数量的孔中(2个孔应该是零化合物对照，其经缓冲液处理)。

11.立即将板放入37℃的光度计中，并且开始读取每分钟的340nm处的光密度。340nm处增加的光密度等同于增加的微管蛋白聚合。

该试验中测试的化合物的数据如图1-8所示。

实施例b3

测试化合物体外效力的测定：在icrscid小鼠中植入的皮下建立的人膀胱癌细胞系sw780中的效力评价

对于动物体内研究，用20mm组氨酸，5％蔗糖，ph6和15％dmso稀释测试化合物。雄性icrscid小鼠(纽约州哈德逊的塔科尼农场(taconicfarm，hudson，ny))饲养在标准啮齿类微隔离器笼中。动物室的环境控制设为维持温度20-24℃，相对湿度30％至70％，和大约12小鼠光/12小时黑暗循环。自由提供水和食物。在72小时顺应后，用在与pbs(吉布可公司(gibco))混合的50％完全培养混合物(艾美捷(trevigen，inc.))中悬浮的sw780人膀胱癌细胞(2x10⁶个细胞/小鼠)植入小鼠，并且监测肿瘤生长速率。当平均肿瘤体积达到约200mm³时，肿瘤经尺寸匹配并且小鼠随机分成治疗组(n＝8或10)。在qw剂量方案上用2或4mg/kg(mpk)的测试化合物或载剂静脉内处理荷瘤小鼠持续3周。使用卡尺测量肿瘤体积，每周2次。

虽然本发明中所述的化合物、用途和方法使本领域普通技术人员能够制备并使用本文所述的化合物、用途和方法，本领域普通技术人员会理解并认同存在本文的具体实施方式、方法和实施例的变化、组合和等同方式。因此，本文提供的化合物、用途和方法不应受到上述实施方式、方法或实施例的限制，而是包括本文提供的化合物、用途和方法的范围和精神内的所有实施方式和方法。