N—l—脯氨酸残基的三肽型减皱化合物及其制备方法和应用的制作方法
【专利摘要】本发明提供了一种含有15N—L—脯氨酸残基的三肽型化合物和/或其与酸形成的盐，所述三肽型化合物结构式如下：；其缩写为H—（β-Ala）—（15N-Pro）—Dab—NH—Bzl；其中：β-Ala指β—丙氨酸残基；15N-Pro指氮元素为氮15的L—脯氨酸残基；Dab指L—2,4二氨基丁酸残基；Bzl指苄基。该三肽型减皱化合物和/或其与酸形成的盐是一种带有氮15示踪剂的对人体安全无害的多肽化合物。它是一种乙酰胆碱受体抑制剂，可以使肌肉松弛，减皱效果显著，可用于减轻、减少皱纹的药物研究和治疗中。
【专利说明】-种含有15N-L一脯氨酸残基的三肽型减皱化合物及其制 备方法和应用
[0001]
【技术领域】 本发明属于药用化妆品【技术领域】，具体涉及一种含有15N-L一脯氨酸残基的三肽型减 皱化合物及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 皱纹的形成主要是由肌肉强烈收缩或肌肉长时间保持在强烈收缩位置所造成。
[0003]目前，治疗面部皱纹的主要方法是注射肉毒杆菌毒素A，通过将肉毒杆菌毒素A注 入面部肌肉的方式使面部肌肉麻痹。这样，位于眼部或额头的肌肉就不能再活动，从而使得 眼部或额头皱纹不易出现。然而，使用皮下注射肉毒杆菌毒素A的治疗必须由专业医生来 实施，同时与之相关的高额费用及较高的毒性也限制了肉毒杆菌毒素A的广泛应用。此外， 其作用仅能持续3- 6个月，之后就必须重复注射治疗。
[0004] 肉毒杆菌毒素A的作用机制在于其选择性地阻断乙酰胆碱在神经肌肉突触处的 释放，由此出现肌肉麻痹；这是通过一种被称为SNAP- 25蛋白质的裂解来实现的。
[0005]SNAP一25 蛋白的N-末端氨基酸序列（Glu-Glu一Met一Gln一Arg一Arg一NH2) 能抑制在突触中Ca++依赖性神经递质的释放，并导致肌肉松弛。由此开发的、可局部施用的 化合物Ac-Glu一Glu一Met一Gln一Arg一Arg一NH2 (阿基瑞林)比肉毒杆菌毒素A的作用 约弱5000倍，从而使其能更好地按剂量给药并且几乎无毒性。然而，它的松弛肌肉作用太 弱且极不稳定，甚至于不能达到较满意的减少皱纹的效果。
[0006]自然界的氮是由氮14和氮15两种稳定同位素组成的，其中氮14的含量约为 99. 63%，其原子量为14. 0037,氮15的含量约为0. 365%，其原子量为15. 0001。由于普通的 氮缺乏适用的放射性同位素示踪原子，氮15就成为化学、医学、农业科学等研究应用领域 中的重要示踪原子(稳定性同位素示踪原子)，它是一种对人体无辐射危害、损伤的安全的 示踪剂。至上世纪80年代初，国际上已有数百种氮15标记化合物用于各项研究和应用，为 此还有专用的氮15光谱分析仪。医学研究中，在对药物作用、药物分布、药物代谢等情况进 行了解掌握时，氮15标记化合物的应用发挥出其功能显著的示踪剂作用。
【发明内容】
[0007] 本发明目的在于提供一种含有15N-L一脯氨酸残基的三肽型减皱化合物及其制备 方法和应用。
[0008] 为实现上述目的，本发明采用如下技术方案： 一种含有15N-L一脯氨酸残基的三肽型化合物和/或其与酸形成的盐，所述三肽型化 合物结构式如下：
【权利要求】
1. 一种含有15N-L一脯氨酸残基的三肽型化合物和/或其与酸形成的盐，其特征在于， 所述三肽型化合物结构式如下：
其缩写为 H- ( P-Ala) -（15N-Pro) - Dab - NH-Bzl ;其中： 3 -Ala指0 -丙氨酸残基； 15N-Pro指氮元素为氮15的L一脯氨酸残基； Dab指L一 2, 4二氨基丁酸残基； Bzl指苄基。
2. 如权利要求1所述的三肽型化合物和/或其与酸形成的盐，其特征在于，所述盐为盐 酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐、甲酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、三氯乙酸盐、丙酸盐、乙醇酸 盐、琥珀酸盐、富马酸盐、丙二酸盐、马来酸盐、草酸盐、邻苯二甲酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、酒 石酸盐、苯甲酸盐、水杨酸盐、扁桃酸盐、肉桂酸盐、烟酸盐、甲磺酸盐或甲苯磺酸盐。
3. 如权利要求1所述的三肽型化合物和/或其与酸形成的盐，其特征在于，所述盐优选 为乙酸盐。
4. 权利要求1所述三肽型化合物和/或其与酸形成的盐的制备方法，其特征在于，包括 如下步骤： 1) 将 Fmoc - Dab (Boc) - OH 与 2-Cl-Trt 树脂连接，制得 Fmoc - Dab (Boc) - 2-Cl-Trt 树脂； 2) 对步骤1)制得产物的氨端进行脱保护，脱除保护基团； 3) 将步骤2)制得产物与Fmoc - L一（15N-Pro) - OH在缩合剂存在条件下进行缩合反 应，制得 Fmoc -（15N-Pro) - Dab (Boc) - 2-Cl-Trt 树脂； 4) 对步骤3)制得产物的氨端进行脱保护，脱除保护基团； 5) 将步骤4)制得产物与Boc-（ P -Ala) - OH在缩合剂存在条件下进行缩合反应，制 得 Boc-（ P -Ala) -（15N-Pro) - Dab (Boc) - 2-Cl-Trt 树脂； 6) 对步骤5)制得产物进行切割，得到Boc-（P-Ala) -（15N-Pro) - Dab (Boc) - OH ； 7) 将步骤6)制得产物与苄胺在缩合剂存在条件下进行缩合反应，制得Boc- (3-Ala) - (15N-Pro) -Dab(Boc) - NH-Bzl ； 8) 对步骤7)制得产物进行脱保护，得到H-（P-Ala) -（15N-Pro) - Dab - NH- Bzl 的粗品盐； 9) 将步骤8)制得的粗品盐进行柱层析纯化、脱盐，收集的洗脱液经浓缩、冷冻干燥，即 得无盐化合物；无盐化合物与相应的酸转化为相应的盐。
5. 权利要求1所述三肽型化合物和/或其与酸形成的盐在制备用于减皱药物中的应 用。
6. 权利要求1所述三肽型化合物和/或其与酸形成的盐在制备用于减皱的化妆品中的 应用。
7. 如权利要求5或6所述的应用，其特征在于，应用时施用方式为经皮涂抹施用。
8. 如权利要求6所述的应用，其特征在于，将所述三肽型化合物和/或其与酸形成的盐 制成软膏剂或凝胶剂，在软膏剂或凝胶剂中的添加量为〇. 001% - 5%。
【文档编号】A61K8/64GK104327155SQ201410556801
【公开日】2015年2月4日 申请日期:2014年10月20日 优先权日:2014年10月20日
【发明者】张嘎, 张贲, 丁文锋 申请人:张嘎