本发明涉及天然产物分离工艺技术领域，具体的说，是一种从红景天中进行红景天苷制备的方法。
背景技术：
红景天属于蔷薇目景天科(Crassulaceae)红景天属植物,为多年生草本或亚灌木，分布于我国西藏、云贵、东北、甘肃、新疆、四川等地区，含有红景天苷、黄酮、氨基酸、酪醇、微量元素、香豆素等40 余种化合物，在抗缺氧、抗疲劳、抗病毒、增强机体免疫力、抗衰老、抗辐射、双向调节机体功能等方面具有显著功效。其中红景天甙是红景天植物的主要药理活性成分，在药品、化妆品和保健食品等行业具有广泛的需求和应用价值。
天然红景天中红景天甙的提取和分离方法主要有层析法、超滤纯化法、醇沉纯化法、大孔树脂吸附法等。柱层析法可得到较高纯度的红景天甙，但有效成分损失严重，收率太低，只适用于微量标准品的制备；超滤纯化法超滤膜使用过程中，膜污染易造成膜通量锐减，膜清洗过程要用到大量的碱和酸，而且分离选择性较差，产品质量不稳定；乙醇沉淀法在去除杂质的同时，所得干浸膏粘度较大，易吸潮，给后期工艺操作带来不便，此法耗醇量大，成本高，处理时间较长；大孔树脂吸附法对待处理液前处理要求较严格，工艺技术条件要求较高，吸附和解吸过程操作较复杂，产品浓度较低等。
那曲地区、山南地区，海拔均在4000m以上，具有气候恶劣的特性，所产天然红景天具有药用价值高的特性。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种从红景天中进行红景天苷制备的方法，利用海拔三千米以上的天然红景天，采用茎秆和皮分离制备的方式进行红景天有效成分水溶液的制备，并进一步制备得到红景天苷产品，分离纯化工艺具有有收率高、过程简单、操作方便，处理量大适于规模化生产等特点。
本发明通过下述技术方案实现：一种从红景天中进行红景天苷制备的方法，采用以下工艺步骤：
1）采用茎秆和皮分别制备的方式制备红景天有效成分水溶液，红景天采用海拔3000米以上生长环境的天然红景天；
2）对溶剂进行剥离及除杂；
3）对剥离和除杂后的溶剂进行萃取和反萃取；
4）进行结晶分离纯化，得到红景天苷产品。
进一步的为更好的实现本发明，特别采用下述设置方式：所述步骤1）包括以下步骤：
1-1）取天然红景天茎部剥皮后切片，切片厚度为0.3~0.8cm，将天然红景天的切片在温度为76~80℃水溶液中用超声波提取40~50min，过滤得到茎秆水浸提液；将天然红景天皮在温度为55~65℃水溶液中用超声波提取30~40min，过滤得到皮水浸提液；
1-2）将茎秆水浸提液降至室温后调节pH值至9~10，按照茎秆水浸提液与92.5%乙醇溶液的体积比为1:3~5加入92.5%的乙醇溶液，得茎秆混合浸液，将茎秆混合浸液在6~12℃条件下静止18h，分离茎秆沉淀物和茎秆上清液；
1-3）将皮水浸提液降至室温后调节pH值至8~9，按照皮水浸提液与95%乙醇溶液的体积比为1:3~4加入95%的乙醇溶液，得皮混合浸液，将皮混合浸液在15~18℃条件下静止12h，分离皮沉淀物和皮上清液；
1-4）将茎秆上清液在真空度为0.02~0.06MPa，温度为40~42℃条件下减压浓缩去除乙醇得到富含红景天有效成分的茎秆水提液；
1-5）将皮上清液在真空度为0.08~0.12MPa，温度为36~42℃条件下减压浓缩去除乙醇得到富含红景天有效成分的皮水提液。
进一步的为更好的实现本发明，特别采用下述设置方式：所述步骤2）包括以下步骤：
2-1）将茎秆水提液与高级脂肪醇溶剂在常温条件下快速混合，其中茎秆水提液与高级脂肪醇溶剂体积比为1~4:1, 离心分相后，得到净化的红景天茎秆水提液和富含酪醇的茎秆有机富集液，分相后所得茎秆水溶液可供进一步萃取纯化，茎秆有机相可作下一循环套用液使用；
2-2）将皮水提液与高级脂肪醇溶剂在15~18℃条件下快速混合，其中茎秆水提液与高级脂肪醇溶剂体积比为1~3:1, 离心分相后，得到净化的红景天皮水提液和富含酪醇的皮有机富集液，分相后所得皮水溶液可供进一步萃取纯化，皮有机相可作下一循环套用液使用。
进一步的为更好的实现本发明，特别采用下述设置方式：所述步骤3）包括以下步骤：
3-1）取净化的红景天茎秆水提液将pH调节至8~10，加入中性磷氧萃取剂使两相充分混合接触，其中水相和有机相体积比为3~1：1；静止分相，分离茎秆下相萃余液；
3-2）在茎秆有机上相中加入0.5~1倍体积的0.1摩尔/升氢氧化钠水溶液，充分混合接触30分钟后，得到高纯度的茎秆红景天苷水溶液，茎秆有机上相得到再生，茎秆有机上相可循环使用；
3-3）取净化的红景天皮水提液将pH调节至8~9，加入中性磷氧萃取剂使两相充分混合接触，其中水相和有机相体积比为2.5~1.5：1；静止分相，分离皮下相萃余液；
3-4）在皮有机上相中加入0.6~8倍体积的0.12摩尔/升氢氧化钠水溶液，充分混合接触24分钟后，得到高纯度的皮红景天苷水溶液，皮有机上相得到再生，皮有机上相可循环使用。
进一步的为更好的实现本发明，特别采用下述设置方式：所述步骤4）具体为：
将高纯度的茎秆红景天苷水溶液和高纯度的皮红景天苷水溶液在常温下溶合并静止20min，得到高纯度的红景天苷水溶液，将高纯度的红景天苷水溶液在真空度为0.03~0.05MPa条件下减压浓缩后，加入12~18倍体积的无水乙醇在10~20℃下进行常规溶析结晶，晶体分离后真空干燥得到红景天苷产品。
进一步的为更好的实现本发明，特别采用下述设置方式：所述高级脂肪醇溶剂采用正己醇、正庚醇、正辛醇、异辛醇、正壬醇中的任意一种。
进一步的为更好的实现本发明，特别采用下述设置方式：所述中性磷氧萃取剂采用磷酸三丁酯、二丁基膦酸丁酯、三辛基氧化膦和三己基氧化膦中的任意一种或多种的混合物。
进一步的为更好的实现本发明，特别采用下述设置方式：所述天然红景天是那曲地区的红景天、山南地区的红景天。
本发明与现有技术相比，具有以下优点及有益效果：
本发明利用海拔三千米以上的天然红景天，采用茎秆和皮分离制备的方式进行红景天有效成分水溶液的制备，并进一步制备得到红景天苷产品，分离纯化工艺具有有收率高、过程简单、操作方便，处理量大适于规模化生产等特点。
本发明提供的分离纯化工艺分离效率高，分离效果好，分离选择性好，操作方便、过程快速且净化效果好，产品损失少；萃取率可高达95%以上，反萃取具有浓缩和纯化作用，提取的红景天甙纯度可达98%以上.
本发明期间收率大幅提高，由溶剂剥离、萃取纯化期间总收率可达80%以上，提高了原料利用率。
本发明对溶剂进行剥离及除杂时，可得到附加值较高酪醇富集液产品，可以进一步对天然红景天资源进行综合利用。
本发明分离纯化方法步骤简单，操作方便，便于实现连续化生产。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步地详细说明，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1：
一种从红景天中进行红景天苷制备的方法，利用海拔三千米以上的天然红景天，采用茎秆和皮分离制备的方式进行红景天有效成分水溶液的制备，并进一步制备得到红景天苷产品，分离纯化工艺具有有收率高、过程简单、操作方便，处理量大适于规模化生产等特点，特别采用下述设置方式：采用以下工艺步骤：
1）采用茎秆和皮分别制备的方式制备红景天有效成分水溶液，红景天采用海拔3000米以上生长环境的天然红景天；
2）对溶剂进行剥离及除杂；
3）对剥离和除杂后的溶剂进行萃取和反萃取；
4）进行结晶分离纯化，得到红景天苷产品。
实施例2：
本实施例是在上述实施例的基础上进一步优化，进一步的为更好的实现本发明，特别采用下述设置方式：所述步骤1）包括以下步骤：
1-1）取天然红景天茎部剥皮后切片，切片厚度为0.3~0.8cm，将天然红景天的切片在温度为76~80℃水溶液中用超声波提取40~50min，过滤得到茎秆水浸提液；将天然红景天皮在温度为55~65℃水溶液中用超声波提取30~40min，过滤得到皮水浸提液；
1-2）将茎秆水浸提液降至室温后调节pH值至9~10，按照茎秆水浸提液与92.5%乙醇溶液的体积比为1:3~5加入92.5%的乙醇溶液，得茎秆混合浸液，将茎秆混合浸液在6~12℃条件下静止18h，分离茎秆沉淀物和茎秆上清液；
1-3）将皮水浸提液降至室温后调节pH值至8~9，按照皮水浸提液与95%乙醇溶液的体积比为1:3~4加入95%的乙醇溶液，得皮混合浸液，将皮混合浸液在15~18℃条件下静止12h，分离皮沉淀物和皮上清液；
1-4）将茎秆上清液在真空度为0.02~0.06MPa，温度为40~42℃条件下减压浓缩去除乙醇得到富含红景天有效成分的茎秆水提液；
1-5）将皮上清液在真空度为0.08~0.12MPa，温度为36~42℃条件下减压浓缩去除乙醇得到富含红景天有效成分的皮水提液。
实施例3：
本实施例是在上述任一实施例的基础上进一步优化，进一步的为更好的实现本发明，特别采用下述设置方式：所述步骤2）包括以下步骤：
2-1）将茎秆水提液与高级脂肪醇溶剂在常温条件下快速混合，其中茎秆水提液与高级脂肪醇溶剂体积比为1~4:1, 离心分相后，得到净化的红景天茎秆水提液和富含酪醇的茎秆有机富集液，分相后所得茎秆水溶液可供进一步萃取纯化，茎秆有机相可作下一循环套用液使用；
2-2）将皮水提液与高级脂肪醇溶剂在15~18℃条件下快速混合，其中茎秆水提液与高级脂肪醇溶剂体积比为1~3:1, 离心分相后，得到净化的红景天皮水提液和富含酪醇的皮有机富集液，分相后所得皮水溶液可供进一步萃取纯化，皮有机相可作下一循环套用液使用。
实施例4：
本实施例是在上述任一实施例的基础上进一步优化，进一步的为更好的实现本发明，特别采用下述设置方式：所述步骤3）包括以下步骤：
3-1）取净化的红景天茎秆水提液将pH调节至8~10，加入中性磷氧萃取剂使两相充分混合接触，其中水相和有机相体积比为3~1：1；静止分相，分离茎秆下相萃余液；
3-2）在茎秆有机上相中加入0.5~1倍体积的0.1摩尔/升氢氧化钠水溶液，充分混合接触30分钟后，得到高纯度的茎秆红景天苷水溶液，茎秆有机上相得到再生，茎秆有机上相可循环使用；
3-3）取净化的红景天皮水提液将pH调节至8~9，加入中性磷氧萃取剂使两相充分混合接触，其中水相和有机相体积比为2.5~1.5：1；静止分相，分离皮下相萃余液；
3-4）在皮有机上相中加入0.6~8倍体积的0.12摩尔/升氢氧化钠水溶液，充分混合接触24分钟后，得到高纯度的皮红景天苷水溶液，皮有机上相得到再生，皮有机上相可循环使用。
实施例5：
本实施例是在上述任一实施例的基础上进一步优化，进一步的为更好的实现本发明，特别采用下述设置方式：所述步骤4）具体为：
将高纯度的茎秆红景天苷水溶液和高纯度的皮红景天苷水溶液在常温下溶合并静止20min，得到高纯度的红景天苷水溶液，将高纯度的红景天苷水溶液在真空度为0.03~0.05MPa条件下减压浓缩后，加入12~18倍体积的无水乙醇在10~20℃下进行常规溶析结晶，晶体分离后真空干燥得到红景天苷产品。
实施例6：
本实施例是在上述任一实施例的基础上进一步优化，进一步的为更好的实现本发明，特别采用下述设置方式：所述高级脂肪醇溶剂采用正己醇、正庚醇、正辛醇、异辛醇、正壬醇中的任意一种。
实施例7：
本实施例是在上述任一实施例的基础上进一步优化，进一步的为更好的实现本发明，特别采用下述设置方式：所述中性磷氧萃取剂采用磷酸三丁酯、二丁基膦酸丁酯、三辛基氧化膦和三己基氧化膦中的任意一种或多种的混合物。
实施例8：
本实施例是在上述任一实施例的基础上进一步优化，进一步的为更好的实现本发明，特别采用下述设置方式：所述天然红景天是那曲地区的红景天、山南地区的红景天。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明做任何形式上的限制，凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化，均落入本发明的保护范围之内。