一种香椿内生真菌56‑50及其次级代谢产物、制备方法和应用与流程

文档序号:12096791阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种香椿内生真菌56-50,其特征在于:该真菌为半知菌类、丝孢菌纲、丝孢菌目、暗色丝孢菌、链格孢属、苹果链格孢Alternaria mali,并于2016年9月30日,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号:CGMCC No.12980。

2.一种制备香椿内生真菌56-50的次级代谢产物的方法,其特征在于,步骤如下:

(1)菌株发酵:

将保藏号为CGMCC No.12980的香椿内生真菌56-50接种到PDA平板培养基上,25-28℃活化培养3-5d,然后接种到盛有PDA液体发酵培养基的锥形三角瓶中,25-28℃、150-180rpm摇床发酵培养6-8d;

(2)菌株次级代谢产物的制备:

将步骤(1)所得菌株56-50的发酵培养液先搅碎,再过滤,得到发酵液和菌丝体;然后采用乙酸乙酯分别对发酵液和菌丝体进行萃取,重复萃取数次,合并萃取液,浓缩制备得到香椿内生真菌56-50的次级代谢产物;其中,对发酵液进行萃取时,乙酸乙酯的用量与发酵液等体积;对菌丝体进行萃取时,乙酸乙酯的用量以浸泡住菌丝体为准。

3.一种制备香椿内生真菌56-50的次级代谢产物的方法,其特征在于,步骤如下:

(1)菌株发酵:

将保藏号为CGMCC No.12980的香椿内生真菌56-50接种到PDA平板培养基上,25-28℃活化培养3-5d,然后接种到盛有PDA液体发酵培养基的锥形三角瓶中,室温静置发酵培养25-30d;

(2)菌株次级代谢产物的制备:

将步骤(1)所得菌株56-50的发酵培养液先搅碎,再过滤,得到发酵液和菌丝体;发酵液用等体积乙酸乙酯萃取,重复萃取数次,合并萃取液,真空浓缩至干,得到发酵液的乙酸乙酯层萃取物;菌丝体用80v%的丙酮水溶液浸泡提取,反复提取数次,合并提取液,真空浓缩至不含丙酮后,再用等体积的乙酸乙酯萃取,重复萃取数次,然后合并萃取液并且真空浓缩至干,得到菌丝体的乙酸乙酯层萃取物;最后合并发酵液与菌丝体的乙酸乙酯层萃取物,即得香椿内生真菌TS8的次级代谢产物。

4.一种利用如权利要求2或3所述制备方法制备的香椿内生真菌56-50的次级代谢产物。

5.一种如权利要求4所述香椿内生真菌56-50的次级代谢产物在降解铜绿假单胞菌和/或变形杆菌中的应用。

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