1.沟叶结缕草耐盐基因ZmPDI,其特征在于该基因的序列为SEQ ID NO. 1。
2.含有权利要求1所述的沟叶结缕草耐盐基因ZmPDI的植物表达载体,其特征在于由权利要求1所述的沟叶结缕草耐盐基因ZmPDI与植物表达载体构成。
3.根据权利要求2所述的含有权利要求1所述的沟叶结缕草耐盐基因ZmPDI的植物表达载体,其特征在于所述的植物表达载体为BamHⅠ和EcoRⅤ双酶切ZmPDI后插入到gateway入门载体pENTR1A,经线性化后与pEarleyGate103表达载体质粒进行重组反应得到。
4.权利要求3所述的沟含有权利要求1所述的沟叶结缕草耐盐基因ZmPDI的植物表达载体的构建方法,其特征在于包括如下步骤:(1)ZmPDI基因全长的获得:设计引物ZmPDI- F: SEQ ID NO.2和ZmPDI-R: SEQ ID NO.3,以沟叶结缕草cDNA为模板进行PCR反应,PCR产物连接到pMD19-T Simple载体,转化TOP10感受态细胞,提取阳性质粒并测序获得ZmPDI全长序列SEQ ID NO. 1;(2)pENTR1A-ZmPDI质粒构建:设计引物ZmPDI-BamH Ⅰ-F: SEQ ID NO.4和ZmPDI-EcoRⅤ-R: SEQ ID NO.5,以步骤(1)测序的阳性质粒为模板,用高保真酶进行PCR反应,获得在上游和下游分别引入BamHⅠ和EcoRⅤ酶切位点的ZmPDI基因,PCR产物连接到pMD19-T Simple载体,转化TOP10感受态细胞,提取阳性质粒pMD19-T Simple-ZmPDI;BamHⅠ和EcoRⅤ分别对阳性质粒pMD19-T Simple-ZmPDI和pENTR1A进行双酶切,取酶切后的ZmPDI片段与BamHⅠ和EcoRⅤ双酶切的pENTR1A连接,连接产物转化TOP10感受态细胞;37 ℃过夜培养,挑取阳性单克隆扩大培养,提取质粒pENTR1A-ZmPDI;(3)提取的阳性质粒pENTR1A-ZmPDI经NsiⅠ单酶切线性化后与pEarleyGate103载体质粒进行LR重组反应,转化,提取阳性质粒,电泳检测并测序验证为SEQ ID NO. 1,植物表达载体pEarleyGate103-ZmPDI构建成功。
5.权利要求1所述的沟叶结缕草耐盐基因ZmPDI在创建耐盐新种质中的应用。
6.权利要求2所述的植物表达载体在创建耐盐新种质中的应用。