一种改进的转氨酶及其在(R)‑3‑氨基丁醇制备上的应用的制作方法

文档序号:12411642阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种改进的转氨酶,其特征在于:

该改进的转氨酶的酶活性高于野生型转氨酶的酶活性;

所述酶活性是指催化酮类化合物发生不对称转氨反应生成手性胺的酶活性;

所述野生型转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示,且来源于土曲霉菌Aspergillus terreus NIH2624;

所述改进的转氨酶包含与SEQ ID No.2所示氨基酸序列有至少95%序列同源性的氨基酸序列,且对应于SEQ ID No.2所示氨基酸序列中的第215位为脯氨酸残基。

2.如权利要求1所述改进的转氨酶,其特征在于:所述酶活性是指催化4-羟基-2-丁酮发生不对称转氨反应生成(R)-3-氨基丁醇的酶活性。

3.如权利要求1所述改进的转氨酶,其特征在于:所述改进的转氨酶的氨基酸序列选自SEQ ID No.4、SEQ ID No.6或SEQ ID No.8。

4.如权利要求1所述改进的转氨酶,其特征在于:所述改进的转氨酶的酶活性是所述野生型转氨酶酶活性的至少2倍。

5.一种编码如权利要求1-4任一项所述的改进的转氨酶的基因,其特征在于:所述基因的核苷酸序列选自SEQ ID No.3、SEQ ID No.5或SEQ ID No.7。

6.一种基因工程菌,其特征在于:该菌种表达权利要求1-4中任意一项所述的改进的转氨酶。

7.如权利要求6所述的基因工程菌,其特征在于:所述基因工程菌使用的表达载体为pET-24a,宿主细胞为大肠杆菌BL21(DE3)。

8.如权利要求1-4任一项所述改进的转氨酶在催化4-羟基-2-丁酮发生不对称转氨反应生成(R)-3-氨基丁醇中的应用。

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