本发明涉及农业领域，具体涉及一种核丛青霉素化合物作为农业杀菌剂的应用。
背景技术：
真菌病原病害是严重危害农业生产的自然灾害之一，对农业生产造成巨大损失，全世界的农作物由此平均每年减少产量约500mt。真菌病原病害不仅可以引起农作物产量的减少，而且还严重威胁到农产品的质量安全及其国际贸易。例如，核盘菌(sclerotiniasclerotiorum)是一种危害作物和蔬菜的世界性的重要的植物病原菌。它可以广泛地侵染很多单子叶和双子叶植物；小麦雪霉叶枯病(monographellanivalis)自幼苗到灌浆期均可危害，造成芽腐、叶枯、鞘腐和穗腐等症状，其中以叶枯为主；禾顶囊壳（gaeumannomycesgraminis）和小麦壳针孢（septoriatritici）引起小麦产量的严重降低，瓜类炭疽病（glomerellalagenarium）对瓜类造成的危害；花生球腔菌（mycosphaerellaarachidis）造成花生的减产；由霜霉病菌(plasmoparaviticola)是葡萄生产中的重要病害，近年来严重蔓延,造成病叶焦枯早落,影响长势、品质和产量。更为严重的是，这些农业致病菌对其他农作物也造成严重损害，如番茄、黄瓜、甘蔗、大豆等。杀菌剂的使用是防治农业病害的一种经济有效的方法，目前的杀菌剂种类主要有三唑类、酰胺类、嘧啶胺类、甲氧基丙烯酸酯类等。然而，杀菌剂的过度使用也带来一系列问题，如杀菌剂毒性对人类的危害，以及抗药性导致的杀菌剂残留增加及病害再猖獗等，因此急需开发高效、低毒、低残留和环境友好型杀菌剂。海洋高盐、高压、低温、寡营养、低光照等特殊环境使海洋微生物能够产生大量结构新颖、活性独特的次级代谢产物，其中有些化合物具有杀菌活性；且海洋微生物可以大规模发酵，不受资源限制，为开发农业杀菌剂提供了重要来源。目前尚未见从海洋微生物中开发成功的针对农业病原真菌的杀菌剂。
文献shu-weiyang,tze-mingchan,josephterracciano1,etal.journalofantibiotics(2009)62,401–403公开了化合物sch1385568抑制酿酒酵母saccharomycescerevisiae的活性；文献somdejkanokmedhakul,kwanjaikanokmedhakul,pitaknasomjai,etal.journalofnaturalproducts2006,69,891-895公开了系列嗜氮酮化合物对白色念珠菌的抑制活性；
本发明描述的天然产物scleroriorin化合物对农业致病菌的活性还未见报道，虽然硕士论文“sclerotiorin衍生物的合成及杀菌活性研究”公开了化合物sclerotiorin衍生物的抗菌活性；与本发明研究有类似，但是本发明所研究的农业致病菌与论文中的致病菌并不相同。本发明化合物对所研究农业致病菌的活性不仅明显强于文献报道的活性，而且本发明化合物结构稳定，没有文献报道的化合物的光不稳定性、酸碱敏感性等缺点。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种来源于海洋真菌的核丛青霉素的制备方法与作为农业杀菌剂的应用，它能满足现有技术的上述需求。菌种保藏信息：保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所；保藏日期：2014年4月3日；保藏编号：cgmccno.8994；分类命名：青霉penicilliumsp.
本发明提供式i化合物其互变异构体、立体异构体、外消旋体、对映异构体的非等量混合物、几何异构体、溶剂化物、药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物在制备农业杀虫剂方面的应用，其特征在于式i具有如下结构：
本发明从海洋真菌中获得核丛青霉素对多种农业致病真菌有抑制活性，可用作农业杀菌剂，应用前景广阔。
本发明的另一实施方式中提供一种农业杀菌剂的应用，其特征在于包括式ⅰ化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分。
本发明中术语“药学上可接受的盐”是指非毒性的无机或有机酸和/或碱的加成盐。可参见“saltselectionforbasicdrugs”,int.j.pharm.1986,33,201–217。
上述的一种核丛青霉素作为农业杀菌剂的应用。
下面提及的病害的例子仅用来说明本发明，但绝不限定本发明。
式i化合物可用于防治下列病害：卵菌纲病害，如霜霉病(黄瓜霜霉病、油菜霜霉病、大豆霜霉病、甜菜霜霉病、甘蔗霜霉病、烟草霜霉病、豌豆霜霉病、丝瓜霜霉病、冬瓜霜霉病、甜瓜霜霉病、白菜类霜霉病、菠菜霜霉病、萝卜霜霉病、葡萄霜霉病、葱霜霉病)，白锈菌(油菜白锈病、白菜类白锈病)，猝倒病(油菜猝倒病、烟草猝倒病、番茄猝倒病、辣椒猝倒病、茄子猝倒病、黄瓜猝倒病、棉苗猝倒病)，绵腐病(辣椒绵腐病、丝瓜绵腐病、冬瓜绵腐病)，疫病(蚕豆疫病、黄瓜疫病、南瓜疫病、冬瓜疫病、西瓜疫病、甜瓜疫病、辣椒疫病、韭菜疫病、大蒜疫病、棉花疫病)，晚疫病(马铃薯晚疫病、番茄晚疫病)等；半知菌病害，如枯萎病(甘薯枯萎病、棉花枯萎病、芝麻枯萎病、蓖麻枯萎病、番茄枯萎病、菜豆枯萎病、黄瓜枯萎病、丝瓜枯萎病、南瓜枯萎病、冬瓜枯萎病、西瓜枯萎病、甜瓜枯萎病、辣椒枯萎病、蚕豆枯萎病、油菜枯萎病、大豆枯萎病)，根腐病(辣椒根腐病、茄子根腐病、菜豆根腐病、黄瓜根腐病、苦瓜根腐病、棉黑根腐病、蚕豆根腐病)，立枯病(棉苗立枯病、芝麻立枯病、辣椒立枯病、黄瓜立枯病、白菜立枯病)，炭疽病(高粱炭疽病、棉花炭疽病、红麻炭疽病、黄麻炭疽病、亚麻炭疽病、烟草炭疽病、桑炭疽病、辣椒炭疽病、茄子炭疽病、菜豆炭疽病、黄瓜炭疽病、苦瓜炭疽病、西葫芦炭疽病、冬瓜炭疽病、西瓜炭疽病、甜瓜炭疽病、荔枝炭疽病)，黄萎病(棉花黄萎病、向日葵黄萎病、番茄黄萎病、辣椒黄萎病、茄子黄萎病)，黑星病(西葫芦黑星病、冬瓜黑星病、甜瓜黑星病)，灰霉病(棉铃灰霉病、红麻灰霉病、番茄灰霉病、辣椒灰霉病、菜豆灰霉病、芹菜灰霉病、菠菜灰霉病、猕猴桃灰霉病)，褐斑病(棉花褐斑病、黄麻褐斑病、甜菜褐斑病、花生褐斑病、辣椒褐斑病、冬瓜褐斑病、大豆褐斑病、向日葵褐斑病、豌豆褐斑病、蚕豆褐斑病)，黑斑病(亚麻假黑斑病、油菜黑斑病、芝麻黑斑病、向日葵黑斑病、蓖麻黑斑病、番茄黑斑病、辣椒黑斑病、茄子黑斑病、菜豆黑斑病、黄瓜黑斑病、芹菜黑斑病、胡萝卜黑腐病、胡萝卜黑斑病、苹果黑斑病、花生黑斑病)，斑枯病(番茄斑枯病、辣椒斑枯病、芹菜斑枯病)，早疫病(番茄早疫病、辣椒早疫病、茄子早疫病、马铃薯早疫病、芹菜早疫病)，轮纹病(大豆轮纹病、芝麻轮纹病、菜豆轮纹病)，叶枯病(芝麻叶枯病、向日葵叶枯病、西瓜叶枯病、甜瓜叶枯病)，茎基腐病(番茄茎基腐病、菜豆茎基腐病)，及其他(玉米圆斑病、红麻腰折病、稻瘟病、栗黑鞘病、甘蔗眼斑病、棉铃曲霉病、花生冠腐病、大豆茎枯病、大豆黑点病、甜瓜大斑病、花生网斑病、茶赤叶斑病、辣椒白星病、冬瓜叶斑病、芹菜黑腐病、菠菜心腐病、红麻叶霉病、红麻斑点病、黄麻茎斑病、大豆紫斑病、芝麻叶斑病、蓖麻灰斑病、茶褐色叶斑病、茄子褐色圆星病、菜豆红斑病、苦瓜白斑病、西瓜斑点病、黄麻枯腐病、向日葵根茎腐病、菜豆炭腐病、大豆靶点病、茄子棒孢叶斑病、黄瓜靶斑病、番茄叶霉病、茄子叶霉病、蚕豆赤斑病等)等；担子菌病害，如锈病(小麦条锈病、小麦杆锈病、小麦叶锈病、花生锈病、向日葵锈病、甘蔗锈病、韭菜锈病、葱锈病、栗锈病、大豆锈病)，黑穗病(玉米丝黑穗病、玉米黑粉病、高粱丝黑穗病、高粱散黑穗病、高粱坚黑穗病、高梁柱黑粉病、栗粒黑穗病、甘蔗黑穗病、菜豆锈病)及其他(如小麦纹枯病、水稻纹枯病等)等；子囊菌病害，如白粉病(小麦白粉病、油菜白粉病、芝麻白粉病、向日葵白粉病、甜菜白粉病、茄子白粉病、豌豆白粉病、丝瓜白粉病、南瓜白粉病、西葫芦白粉病、冬瓜白粉病、甜瓜白粉病、葡萄白粉病、蚕豆白粉病)，菌核病(亚麻菌核病、油菜菌核病、大豆菌核病、花生菌核病、烟草菌核病、辣椒菌核病、茄子菌核病、菜豆菌核病、豌豆菌核病、黄瓜菌核病、苦瓜菌核病、冬瓜菌核病、西瓜菌核病、芹菜菌核病)，黑星病(苹果黑星病、梨黑星病)等。特别地，对玉米锈病、水稻稻瘟病、番茄黑斑病和黄瓜霜霉病，在较低剂量下仍具有很好的防治效果。
具体实施方式
为了便于对本发明的进一步理解，下面提供的实施例对其做了更详细的说明。但是这些实施例仅供更好地理解发明而并非用来限定本发明的范围或实施原则，本发明的实施方式不限于以下内容。
实施例1
(1)花柳珊瑚内生真菌penicilliumsp.(ta33-1)的菌种培养
菌种培养所用的培养基含有葡萄糖1.0%(重量百分比，下同)、酵母膏0.2%、蛋白胨0.2%、琼脂1.0%、氯化钠3.0%，其余为水，使用时制成试管斜面，真菌菌株在30°c下培养3天。
(2)花柳珊瑚内生真菌penicilliumsp.(ta33-1)的发酵
发酵培养所用的培养基含有大米40.0%(重量百分比，下同)、氯化钠3.0%，其余为水；真菌菌株于28°c培养90天。
(3)式i化合物的提取分离
取60瓶步骤(2)得到的菌丝体，用氯仿-甲醇混合液(1:1)浸提3次减压浓缩后，用乙酸乙酯萃取3次得粗浸膏；乙酸乙酯相粗浸膏分别进行正相硅胶柱层析(固定相为200–300目硅胶；流动相为100%乙酸乙酯溶剂)、sephadexlh-20凝胶柱层析(氯仿：甲醇=1：1的混合溶剂，体积比)后，再经hplc高效液相制备色谱分离(色谱柱为kromasil10×250mm，5μm，流速为2.0ml/min，流动相为35%的甲醇-水混合溶剂，体积比)，将所得洗脱液浓缩，得黄色粉末，即为式i化合物。
式i化合物的结构确证数据：
式i化合物:黄色无定型粉末;1hnmr(600mhz,cdcl3)δh7.94(1h,s,h-1),7.07(1h,d,j=15.6hz,h-10),6.65(1h,s,h-4),6.09(1h,d,j=15.6hz,h-9),5.71(1h,d,j=9.6hz,h-12),2.49(1h,m,h-13),2.17(3h,s,h-20),1.85(3h,s,h-17),1.57(3h,s,h-18),1.44(1h,m,h-14),1.34(1h,m,h-14),1.02(3h,d,j=6.6hz,h-16),0.87(3h,t,j=7.2hz,h-15);13cnmr(150mhz,cdcl3)δc191.9(c6),186.0(c8),170.2(coch3),158.2(c3),152.7(c1),148.9(c12),143.0(c10),138.8(c4a),132.1(c11),115.8(c9),114.7(c5),110.9(c8a),106.4(c4),84.7(c7),35.2(c13),30.2(c14),22.6(c18),20.3(c16),20.1(coch3),12.5(c17),12.0(c15);esimsm/z390.95/392.96[m+h]+/[m+h+2]+(3:1);hresimsm/z391.1314[m+h]+。
实施例2
本发明式i化合物杀菌活性测试按照如下参考文献测试方法进行测试：thiyagarajan,v.;harder,t.;qiu,j.w.;qian,p.y.marbiol(berl)2003,143,543–554.liu,q.a.;shao,c.l.;gu,y.,c.;blum,m.;gan,l.s.;wang,k.l.;chen,m.;wang,c.y.j.agric.foodchem.2014,62,3183–3191。
测试结果显示，本发明式i化合物在浓度为20ppm时，对瓜类炭疽病glomerellalagenarium,小麦壳针孢septoriatritici,禾顶囊壳gaeumannomycesgraminis,小麦雪霉叶枯病monographellanivalis,花生球腔菌mycosphaerellaarachidis和核盘菌sclerotiniasclerotiorum的抑菌率分别为100%、100%、100%、100%、50%和50%，在浓度为200ppm时，本发明式ⅰ化合物对霜霉病plasmoparaviticola的抑菌率为50%。
实施例4中本发明式ⅰ结构的化合物对感染核盘菌sclerotiniasclerotiorum、小麦雪霉叶枯病monographellanivalis、禾顶囊壳gaeumannomycesgraminis、小麦壳针孢septoriatritici、瓜类炭疽病glomerellalagenarium、花生球腔菌mycosphaerellaarachidis和霜霉病菌plasmoparaviticola农作物的防治应用不限于上述小麦、瓜类和花生等农作物。
本发明提供一种农业杀菌剂，其特征在于以式ⅰ核丛青霉素或其盐作为有效成分，用于防治核盘菌sclerotiniasclerotiorum、小麦雪霉叶枯病monographellanivalis、禾顶囊壳gaeumannomycesgraminis、小麦壳针孢septoriatritici、瓜类炭疽病glomerellalagenarium、花生球腔菌mycosphaerellaarachidis和霜霉病菌plasmoparaviticola引起的农业病害，并且花珊瑚内生真菌penicilliumsp.(ta33-1)可进行大规模发酵生产，保证了式i化合物的天然来源，具有广阔的应用前景。