本发明涉及生物领域，特别涉及一种清洗液。
背景技术：
：化学发光免疫分析(chemiluminescenceimmunoassay,clia),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。具体地，化学发光免疫分析按照发光方式不同可分为酶促化学发光、直接化学发光和电化学发光。而全自动化学发光免疫分析仪正是基于以上技术原理研发而成，目前是医院临床应用最为频繁的仪器之一，临床医生常常依据化学发光免疫分析仪对临床病人体液相应生理指标的检测结果，来对患者疾病做出诊断。在化学发光免疫分析过程中，当免疫反应结束后，通常要使用清洗液对反应物进行洗涤，以去除未参加反应的物质。洗涤后，再利用全自动化学发光免疫分析仪检测保留下来的结合物信号，从而实现对临床病人体液相应生理指标的检测。cn105985871a公开了针对酶促化学发光系统全自动化学发光免疫仪废液针的清洗剂，主要针对废液针上的干涸物质和残留的酶，将碱性氢氧化物和表面活性剂组合使用，增加了蛋白及其它物质的溶解度，能将废液针上的干涸物质溶解。但该清洗液仅用于全自动化学发光免疫分析仪废液针的维护，不参与免疫反应，且仅针对酶促化学发光系统，不能用于直接化学发光和电化学发光系统。cn106226539a公开了一种电化学发光清洗缓冲液，其组分包括：氯化钠，多聚葡萄糖，proclin300，tween20，trist-1378，tris-hcl，3-巯基吲哚，羊毛硫氨酸。但该清洗剂仅针对电化学发光系统，不能用于直接化学发光和酶促化学发光系统。cn105754733a公开了一种化学发光免疫分析仪清洗液，其组分包括二水合磷酸二氢钠、十二水合磷酸氢二钠、氯化钠、氯化钾、表面活性剂、防腐剂和去离子水组成。但该清洗液仅用于直接化学发光系统，且有效期仅18个月。由此可见，根据发光方式不同，需要采用的清洗液也不尽相同，检测机构需要根据要求分别购买适合的清洗液，这无疑增加了检测成本；清洗液作为全自动化学发光免疫分析仪常规耗材，我国各大医院普遍使用的是原装清洗液，消耗量巨大且价格昂贵，也大大增加了检测成本；除此之外，市售清洗液有效期基本在18个月以内，对于常规耗材来讲，有效期偏短。为此，研制一种各系统通用、稳定性好、有效期远高于市售清洗液、准确度高、精密度高且成本低廉的全自动化学发光免疫分析清洗液，替代原装清洗液，显得尤为重要。技术实现要素：针对现有技术的不足，本发明的目的旨在于提供一种酶促化学发光系统、直接化学发光系统通用清洗液，具有稳定性好、有效期长达24个月、准确度高、精密度高且成本低廉等特点。为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：本发明提供了一种清洗液，包含磷酸缓冲体系、无机盐、表面活性剂a、表面活性剂b、防腐剂。所述磷酸缓冲体系为k2hpo4-kh2po4体系或na2hpo4.12h2o-kh2po4体系的一种，优选地，所述清洗液中磷酸缓冲体系浓度以磷酸根计为0.1mol/l-0.5mol/l，所述清洗液ph值为7.5-8.0，所述无机盐为nacl或kcl的一种或两种，优选地，所述清洗液中无机盐含量为90g/l-225g/l，所述表面活性剂a为tween-20或tritonx-100的一种，优选地，所述清洗液中表面活性剂a体积百分比为1％-2.5％，所述表面活性剂b为胆酸钠，优选地，所述清洗液中表面活性剂b含量为5g/l-25g/l，所述防腐剂为proclin300或proclin950的一种或两种，优选地，所述清洗液中防腐剂体积百分比为0.5％-3％。本发明清洗液成分来源如下：清洗液成分来源na2hpo4.12h2o成都科龙化工kh2po4成都科龙化工k2hpo4成都科龙化工kcl成都科龙化工nacl成都科龙化工tween-20amersco胆酸钠amerscoproclin950sigmaproclin300sigma本发明所述清洗液由以下步骤制得：称取各组分，加入纯化水溶解，混匀，过滤，即得本发明清洗液。相比于现有技术，本发明的有益效果在于：本发明提供的酶促化学发光系统、直接化学发光系统通用清洗液，在进行化学发光免疫分析时，其准确度、精密度均达到了与原装清洗液同一水平，且成本低廉，稳定性好，有效期长达24个月。具体实施方式实施例1本发明清洗液配制方法配制1l本发明清洗液，方法如下：以纯化水为溶剂，按如下重量、体积配制清洗液，配置完成后的清洗液总体积为1l：kh2po41.65gna2hpo4.12h2o67.84gkcl180gtween-2020ml胆酸钠10gproclin95010ml如上配制好的清洗液ph值为7.5-8.0，将配制好的清洗液用0.22μm滤膜过滤后，于室温保存。使用前用纯化水稀释20倍配成工作液。实施例2本发明清洗液配制方法配制1l本发明清洗液，方法如下：以纯化水为溶剂，按如下重量、体积配制清洗液，配置完成后的清洗液总体积为1l：kh2po40.82gna2hpo4.12h2o33.92gnacl90gtrionx-10010ml胆酸钠5gproclin9505ml如上配制好的清洗液ph值为7.5-8.0，将配制好的清洗液用0.22μm滤膜过滤后，于室温保存。使用前用纯化水稀释10倍配成工作液。实施例3本发明清洗液配制方法配制1l本发明清洗液，方法如下：以纯化水为溶剂，按如下重量、体积配制清洗液，配置完成后的清洗液总体积为1l：如上配制好的清洗液ph值为7.5-8.0，将配制好的清洗液用0.22μm滤膜过滤后，于室温保存。使用前用纯化水稀释25倍配成工作液。实施例4直接化学发光免疫分析测定步骤使用本发明清洗液和原装清洗液进行直接化学发光免疫分析测定，具体步骤如下：1)用纯化水将实施例1清洗液和原装清洗液(购自abbott)按如下比例稀释：本发明实施例1清洗液20倍稀释成工作液，即100ml实例1清洗液加入1900ml纯化水；原装清洗液10倍稀释成工作液，即100ml原装清洗液加入900ml纯化水；2)在室温条件下，将清洗液放置在雅培i2000sr化学发光免疫分析仪指定位置上；3)将待测样本和诊断试剂放在雅培i2000sr化学发光免疫分析仪的指定位置上，启动雅培i2000sr化学发光免疫分析仪的自动检测程序；4)按顺序加入各反应物，反应一段时间后，加入清洗液清洗，再加入预激发液和激发液，进行测值；5)检测完毕，读取结果。实施例5准确度实验将实施例1清洗液和原装清洗液按实施例4所示比例进行稀释，然后采用美国雅培i2000sr化学发光免疫分析仪分别对两种清洗液进行测定，每个项目测定10例样本，测定项目选择夹心法的乙型肝炎表面抗原(hbsag)，竞争法的总三碘甲状腺原氨酸(tt3)，间接法的乙型肝炎核心抗体(hbcab)，测试结果如表1所示。表1实施例1清洗液和原装清洗液准确度检验结果实施例1清洗液和原装清洗液3项测定值的偏差在5％以内，说明本发明清洗液测试准确度良好，与原装清洗液达同一水平。实施例6精密度实验按实施例1清洗液配制方法配制2批清洗液，分别为第1批和第2批。将原装清洗液、第1批清洗液、第2批清洗液按实施例4所示比例进行稀释。然后采用美国雅培i2000sr化学发光免疫分析仪分别对三种清洗液进行测定，每个项目测定1份样本(重复20次)，测定项目选择夹心法的乙型肝炎表面抗原(hbsag)，竞争法的总三碘甲状腺原氨酸(tt3)。分别计算每个项目的批内精密度和批间精密度。表2实施例1清洗液和原装清洗液精密度检验结果本发明的清洗液批内变异系数(cv)<5％，批间变异系数(cv)<5％，符合一般诊断试剂的批内变异系数小于10％，批间变异系数小于15％的要求。本发明变异系数的计算公式为：变异系数c·v＝(标准偏差sd/平均值mean)×100％(下同)，以上结果说明本发明清洗液检测的精密度及重复性良好。实施例7稳定性试验按实施例1、2、3清洗液配制方法分别配制10l清洗液，每种清洗液分成10瓶，每瓶1l，室温分别放置0天、3个月、6个月、9个月、12个月、15个月、18个月、24个月后进行检测，检测前按实施例4所示比例进行稀释。用浓度为hbsag(50iu/ml)样本各重复检测10次，观察其变异系数(cv)，结果如表3所示。表3实施例1、2、3清洗液和原装清洗液稳定性检验结果结果表明：室温下，原装清洗液在15个月时，样本cv值在5％以内，随着时间的延长，cv值越来越高，在18个月时，样本cv值已经超过5％。而本发明清洗液室温放置了24个月后，重复性好，稳定性高，有效期长达24个月。实施例8酶促化学发光免疫分析测定步骤使用本发明清洗液和原装清洗液进行酶促化学发光免疫分析测定，具体步骤如下：1)用纯化水将实施例1清洗液和原装清洗液(购自maccura)按如下比例稀释：本发明实施例1清洗液20倍稀释成工作液，即100ml实例1清洗液加入1900ml纯化水；原装清洗液10倍稀释成工作液，即100ml原装清洗液加入900ml纯化水；2)在室温条件下，将稀释后清洗液放置在maccurais1200化学发光免疫分析仪指定位置上；3)将待测样本和诊断试剂放在maccurais1200化学发光免疫分析仪的指定位置上，启动maccurais1200化学发光免疫分析仪的自动检测程序；4)按顺序加入各反应物，反应一段时间后，加入清洗液清洗，再加入底物液a(maccura)和底物液b(maccura)，进行测值；5)检测完毕，读取结果。实施例9准确度实验将实施例1清洗液和原装清洗液按实施例4所示比例进行稀释，然后采用maccurais1200化学发光免疫分析仪分别对两种清洗液进行测定，每个项目测定10例样本，测定项目选择夹心法的乙型肝炎表面抗原(hbsag)，竞争法的总三碘甲状腺原氨酸(tt3)，间接法的抗甲状腺过氧化物酶抗体(anti-tpo)结果如表4所示。表4实施例1清洗液和原装清洗液准确度检验结果原装清洗液和本发明实施例1清洗液3项测定值的偏差在5％以内，说明本发明清洗液测试准确度良好，与原装清洗液达同一水平。实施例10精密度实验按实施例1清洗液配制方法配制2批清洗液，分别为第1批和第2批。将原装清洗液、第1批清洗液、第2批清洗液按各自比例稀释。然后采用maccurais1200化学发光免疫分析仪分别对三种清洗液进行测定，每个项目测定1份样本(重复20次)，测定项目选择夹心法的乙型肝炎表面抗原(hbsag)，竞争法的总三碘甲状腺原氨酸(tt3)。分别计算每个项目的批内精密度和批间精密度，结果见表5。表5实施例1清洗液原和装清洗液精密度检验结果本发明的清洗液批内变异系数(cv)<5％，批间变异系数(cv)<5％，符合一般诊断试剂的批内变异系数小于10％，批间变异系数小于15％的要求。以上结果说明本发明清洗液检测的精密度及重复性良好。实施例11稳定性试验按实施例1、2、3清洗液配制方法分别配制10l清洗液，每种清洗液分成10瓶，每瓶1l，室温分别放置0天、3个月、6个月、9个月、12个月、15个月、18个月、24个月后进行检测，检测前按实施例4所示比例进行稀释。用浓度为hbsag(50iu/ml)样本各重复检测10次，观察其变异系数(cv)，结果如表6所示。表6原装清洗液和实施例1清洗液稳定性检验结果结果表明：室温下，原装清洗液在18个月时，物理性状发生明显改变，出现白色絮状沉淀，而本发明清洗液室温放置了24个月后，物理性状未发生明显改变，且重复性好，稳定性高，有效期长达24个月。实施例12本发明清洗液成分含量筛选实验按如下配方配制清洗液，磷酸缓冲体系<0.1mol/l、无机盐浓度<9％、表面活性剂a<10ml/l、表面活性剂b<5g/l时，清洗液ph值为7.5-8.0。使用上述配方按实施例4所示比例进行稀释，在is1200上与原装清洗液测定同一份阴性血清样本(重复10次)，数据如下：结论：使用实施例12清洗液与原装清洗液对同一份阴性血清样本测定，测定结果浓度差异大，且使用实施例12清洗液的测试结果中出现假阳性结果。当磷酸缓冲体系>0.25mol/l、无机盐浓度>22.5％、表面活性剂1>25ml/l、表面活性2>25g/l时，由于物质溶解性问题，配制出的清洗液不稳定，易结晶析出。实施例13表面活性剂筛选实验按下表所示清洗液成分,以纯化水为溶剂，分别配制清洗液a-d。将上述4种清洗液按实施例4所示比例进行稀释，在maccurais1200上测定同一份血清样本(重复10次)，结果如下表：结论：以上测试结果显示，当同时使用表面活性剂op-10和tetronic1307时(即清洗液d)，cv值高达163％；当不使用tween-20，仅使用胆酸钠时(即清洗液b)，cv值也高达123％；当不使用胆酸钠时(即清洗液c)，cv值为12.99％，表明不同表面活性剂组合对测试结果的影响非常显著，本发明的表面活性剂组合稳定。实施例14缓冲体系筛选实验将本发明磷酸缓冲体系更换为tris-hcl体系，并按下表所示清洗液成分,以纯化水为溶剂，配制1l清洗液,ph7.5-8.0。tris(购自angus)30.28ghcl(购自成都科龙化工)16.60mlnacl90gtween-2010ml胆酸钠5gproclin30010ml将该配方清洗液室温放置，每隔一段时间观察外观，结果如下表：结论：当本发明磷酸缓冲体系更换为tris-hcl体系时，清洗液稳定性发生显著变化，表明本清洗液采用的缓冲体系稳定。将本发明缓冲体系更换为nah2po4-na2hpo4体系，并按下表所示清洗液成分,以纯化水为溶剂，配制1l清洗液,ph7.5-8.0。nah2po42.06gna2hpo484.8gnacl225gtween-2025ml胆酸钠25gproclin30030ml将该配方清洗液室温放置，每隔一段时间观察外观，结果如下表：结论：当本发明缓冲体系更换为nah2po4-na2hpo4体系时，清洗液稳定性发生显著变化，表明本清洗液采用的缓冲体系稳定。上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。当前第1页12