本发明属于医药技术领域，涉及一对三七三醇皂苷和其混合体的制备方法。这对化合物的名称为20(r)-25-甲氧基-达玛烷-3β，12β，20-三醇和20(s)-25-甲氧基-达玛烷-3β，12β，20-三醇[20(r)-25-methoxyl-dammarane-3β，12β，20-triol(简称25rmdt)和20(s)-25-me-thoxyl-dammarane-3β，12β，20-triol(简称25smdt)]。25rmdt和25smdt及它们的混合体(外消旋体)具有显著的抗肿瘤作用，并可被制成用于不同癌症治疗的任何药用及保健品剂型，主要应用于恶性肿瘤的防治，具有广阔的应用前景。
背景技术：
许多学者的研究表明三七皂苷具有明显的抗肿瘤和免疫调节作用、改善微循环作用、提高生命质量等多种生物活性。但是由于天然三七皂苷较难吸收，而由天然皂苷转化而来的低极性皂苷、苷元或二者的衍生物是天然三七皂苷发挥其药效的原型。因此，有关低极性皂苷、苷元或二者的衍生物的制备与抗肿瘤活性的研究非常活跃，已发现它们在具有多种抗肿瘤活性的同时，基本无毒副作用。至今发现具有抗肿瘤活性的低极性皂苷、苷元或二者的衍生物有：三七皂苷-rg3、rh2、c-k、mc、ppd以及3β，12β-二羟-20(22)，24(25)-二烯达玛烷和3β，6α，12β-三羟-20(22)，24(25)-二烯达玛烷等。已经上市的抗肿瘤药物参一胶囊(三七皂苷-rg3)、正在用于临床实验研究的抗肿瘤药物有三七皂苷-rh2和三七皂苷-c-k。
25rmdt和25smdt及它们的混合体(外消旋体)是ppd的衍生物，至今未发现该两种化合物及其混合体及其制备方法的报道。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一对三七三醇皂苷和其混合体的制备方法。这对化合物的名称为20(r)-25-甲氧基-达玛烷-3β，12β，20-三醇和20(s)-25-甲氧基-达玛烷-3β，12β，20-三醇[20(r)-25-methoxyl-dammarane-3β，12β，20-triol(简称25rmdt)和20(s)-25-me-thoxyl-dammarane-3β，12β，20-triol(简称25smdt)]。
25rmdt和25smdt及它们的混合体(外消旋体)的制备方法如下：a：酸水解i法：三七三醇皂苷溶解于酸性有机溶液中进行超声酸解，然后经过碱中和，有机溶剂萃取及硅胶柱层析分离后得到25rmdt和25smdt及它们的混合体(外消旋体)；b、酸水解ii法：即三七三醇皂苷溶解于酸性有机溶液中进行超声酸水解，然后加水沉淀，水洗至中性的沉淀经硅胶柱层析分离后得到25rmdt和25smdt及它们的混合体(外消旋体)；c、采用化学合成的方法，25rmdt和25smdt及它们的混合体(外消旋体)是采用20(r)和20(s)-25-羟基-达玛烷-3β，12β，20-三醇(20(r)和20(s)-25-oh-ppd)或它们的混合体(混合体(外消旋体))在碱催化下与碘甲烷/无水四氢呋喃溶剂中进行甲基化反应而得。d、合成法2，25rmdt和25smdt及它们的混合体(外消旋体)是采用20(r)和20(s)-25-oh-ppd或它们的混合体(混合体(外消旋体))在碱催化下与硫酸二甲酯/无水丙酮溶剂中反应而得。e、采用核磁共振光谱法对所得25rmdt和25smdt及它们的混合体(外消旋体)进行结构鉴定。
所述的三七三醇皂苷，是指来自五加科三七属具有达玛烷四环三萜结构骨架的所有植物的根、茎、叶、花(蕾)、果实(浆)、种子中及绞股蓝中含有的皂苷类化合物。所述的20(r)和20(s)-25-oh-ppd或它们的混合体可由三七三醇皂苷通过酸、碱、酶和微生物水解或转化制得，也可由20(r)和20(s)-原三七二醇经过结构改造制得。三七三醇皂苷是采用硅胶层析法：用10-99％乙醇提取、大孔吸附树脂纯化后得到的
本发明采用碱解法：即以三七三醇皂苷溶解于低级醇溶液中，用碱金属氢氧化物作为水解试剂进行碱水解，然后经过酸中和、有机溶剂萃取、硅胶柱层析分离后得到25rmdt和25smdt及它们的混合体或采用酸解法即三七三醇皂苷溶解于低级醇中在超声条件下进行酸水解，然后经过碱金属氢氧化物中和，有机溶剂萃取及硅胶柱层析分离得到25rmdt和25smdt及它们的混合体。所说的低级醇为甲醇；有机溶剂为石油醚、正己烷、苯、甲苯、二甲苯、氯仿、二氯甲烷、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇之一种或其中2-3种任意比例的混合物；所说的碱金属氢氧化物包括钠、钾和钙的氢氧化物；碱金属氢氧化物的浓度为0.02-9％w/v。
酸水解为三七三醇皂苷的水解在酸性水溶液和有机溶剂中在超声条件下进行；其条件如下：三七三醇皂苷的用量10-800g/l；
低级醇为甲醇，浓度为1-95％v/v；
酸为盐酸、硫酸、高氯酸、磷酸、草酸、冰乙酸、甲酸，浓度为0.2-9mol/l和它们的饱和酸；
超声条件：频率：20-70khz；功率：2.4-6kw；时间：1-120分钟；水温：15-100℃；
水解后的反应液用氢氧化钠或氢氧化钾中和，使用浓度为0.2-9mol/l；萃取用的有机溶剂为石油醚、正己烷、苯、甲苯、二甲苯、氯仿、二氯甲烷、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇；
柱层析用硅胶粒度为100-400目；
水解温度为：4-100℃，时间1min-5d。
本发明所提供的新型抗肿瘤制剂中，以25rmdt和25smdt及它们的混合体(外消旋体)为有效成分，其总有效剂量为1-100mg/kg/d。
本发明所提供的新型抗肿瘤制剂中，25rmdt和25smdt及它们的混合体(外消旋体)可与任何法定药用配合剂和赋形剂制成各种药用剂型的制剂。
本发明所提供的新型抗肿瘤制剂中，25rmdt和25smdt及它们的混合体(外消旋体)可与目前市场上的任何化疗药、生物制剂，包括激素类、烷化剂类、铂类、抗代谢类、拓扑异构酶抑制剂类、抗微丝微管类、诱导分化类、抗肿瘤生长类、提高机体免疫类及其他药物，制备成复方制剂。
本发明所提供的新型抗肿瘤制剂中，制剂剂型为口服、注射或局部用药剂型。
本发明所提供的新型抗肿瘤制剂中，口服剂型包括片剂、粉剂、悬浊液、乳浊液、胶囊、颗粒剂、糖衣片、药丸、液体、糖浆和柠檬水剂等。
本发明所提供的新型抗肿瘤制剂中，注射剂型包括水剂、冻干粉针、静脉乳剂、多相质脂体制剂、静脉微乳剂、悬浊液等。
本发明所提供的新型抗肿瘤制剂中，局部用药剂型包括软膏、固体、悬浊液、水剂、粉剂、糊剂、栓剂、气溶胶、泥敷剂、涂抹剂、灌肠剂和乳剂等。
本发明提供了25rmdt和25smdt化合物及它们的混合体的，并可使该两种化合物及其混合体在抗肿瘤制剂中应用。为抗肿瘤提供了新的途径。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明
实施例：氢氧化钠水解法制备25rmdt和25smdt及它们的混合体(外消旋体)
称取三七果总皂苷10g，溶于1000ml氢氧化钠浓度为2.5mol/l、浓度为80％的甲醇水溶液中加热回流水解24h，用2.5mol/l盐酸中和反应液，减压回收甲醇，用氯仿萃取反应液，氯仿相经水洗、无水硫酸钠干燥、蒸干收集残余物，经硅胶柱层析分离、石油醚∶乙酸乙酯(10∶1-1∶1)梯度洗脱得86个流分，流分52-55经乙酸乙酯重结晶后得25rmdt；流分56-58经tlc检查后合并，除去溶剂后乙酸乙酯重结晶后得25rmdt和25smdt的混合体(外消旋体)；流分59-62经经tlc检查后合并，乙酸乙酯重结晶后得25smdt。