本发明涉及植物提取技术领域，特别涉及一种防治脑溢血的中成药活性成分芸香甙制备工艺。
背景技术：
银杏叶中除含有大量的银杏黄酮和银杏内酯外，还含有丰富的叶绿素。现有的银杏叶利用时大多提取其中的药用成分即银杏叶提取物，其主要工艺路线为：银杏叶加乙醛回流提取，浓缩后分层，上层为银杏叶提取物粗提液，下层为固体状的银杏叶下脚料，离心分离后，上层的银杏叶提取物粗提液做进一步处理的银杏叶提取物，下层沉淀为银杏叶下脚料(即废料)。银杏叶提取物为浅黄棕色可流动性粉末，味苦。银杏叶提取物药用功效主要为：活血化瘀通络，用于瘀血阻络引起的胸痹心痛、中风、半身不遂、舌强语蹇；冠心病稳定型心绞痛、脑梗塞见上述证候者。但是在利用银杏叶提取银杏叶提取物(主要为银杏黄酮和银杏内酯)的生产过程中会产品大量的废弃物即银杏叶下脚料，可占银杏叶原料的60％-70％，银杏叶下脚料中含有大量叶绿素，既不溶于水也不易腐烂，很多厂家都是当成废物处理掉，这样造成较大的浪费。叶绿素在微生物和植物光合反应中起着重要作用，隶属卟啉类化合物。叶绿素难溶于水且不稳定，所以使用起来很不方便。而异芸香甙除了着色力强还有对热较稳定、易溶于水等特点，而且异芸香甙还具有一定的保健功能，如：消炎、促进肝功能恢复等功能，对治疗口腔溃疡、祛除口臭有明显疗效。所以和叶绿素相比，异芸香甙是一种更为理想的天然色素。异芸香甙目前国内外企业主要从苜蓿、蚕沙中提取，如cn102199153a公开了一种以蚕沙为原料制备异芸香甙的方法，包括如下步骤：原料选择；原料软化；取软化的原料装于索式提取器中，在底部烧瓶中加入丙酮水溶液和cuso4水溶液，浸提置镁，得到叶绿素镁提取液；皂化得叶绿素镁酸钠；除杂得叶绿素镁酸；将叶绿素镁酸用丙酮溶解后，过滤，向滤液中加入naoh乙醛溶液，搅拌反应，静置，过滤得滤饼，干燥、研碎，即得到异芸香甙。这样的方法生产成本较高，且产品的纯度也不理想。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服现有从苜蓿、蚕沙中提取异芸香甙存在的生产成本高、产品的纯度不理想，以及银杏叶提取物生产时产生的银杏叶下脚料当成废物处理，造成较大的浪费的问题，提供一种防治脑溢血的中成药活性成分芸香甙制备工艺，它以廉价的银杏叶提取物生产时产生的银杏叶下脚料为原料，大大降低了生产成本，提高了产品的竞争力，增加了经济效益，而且本发明的工艺提取时，除杂效果好，所得产品纯度高、质量稳定。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
一种防治脑溢血的中成药活性成分芸香甙制备工艺，所述的工艺步骤如下：
(1)提取、浓缩：银杏叶下脚料用质量浓度90-95％的乙醛70-80℃下加热回流提取1-2次，过滤除去残渣，所得滤液减压浓缩；
食品安全国家标准(gb26406-2011)对食品添加剂-异芸香甙的理化指标的要求是，总镁含量(w/％)≤8.0，游离镁含量(w/％)≤0.025。
本发明采用质量浓度90-95％的乙醛70-80℃下加热回流提取银杏叶下脚料，而非采用冷浸提取的方法，因为采用冷浸提取，产品的游离镁含量会超标，提取时间也较长。70-80℃下加热回流提取制得的异芸香甙游离镁含量达到了标准，而且不会破坏叶绿素的结构，提取速度也较快。
(2)皂化：将步骤(1)处理完的滤液用质量浓度20-40％的氢氧化钠水溶液调节ph为11-12，加热至30-40℃，皂化20-60min，冷却至室温后，过滤除去不皂化的粘稠状杂质得滤液；
本发明考察了ph值和皂化时间对皂化效果的影响：
95％的乙醛80℃下加热回流提取银杏叶下脚料，在不同ph值和皂化时间条件下，加入40％氢氧化钠水溶液，30℃加热搅拌，进行皂化反应，皂化结果通过用石油醚萃取分层结果来判断。
ph是影响皂化效果的主要因素，控制ph为11-12可保证皂化效果。
控制皂化温度在30-40℃可保证叶绿素在皂化时的稳定性。
(3)聚氧乙烯醚萃取除杂：将步骤(2)所得滤液减压蒸去乙醛，加入与蒸去乙醛的滤液等体积的水，搅拌均匀得混合液，向混合液中加入混合液体积1-2倍的聚氧乙烯醚，萃取4-5次，减压蒸馏回收聚氧乙烯醚，得萃取液；
聚氧乙烯醚萃取除杂用于去除提取物中存在的有机杂质。萃取溶剂的选择是本发明的关键点之一，按照下述实验方案制备异芸香甙，在变化萃取溶剂的条件下进行考察：
95％的乙醛80℃下加热回流提取银杏叶下脚料100g，过滤除去残渣，所得滤液减压浓缩，加入40％氢氧化钠水溶液调节ph＝11，30℃加热皂化60min，冷却至室温后，过滤除去不皂化的粘稠状杂质得滤液，所得滤液减压蒸去乙醛，加入与蒸去乙醛的滤液等体积的水，搅拌均匀得混合液，向混合液中加入混合液等体积的聚氧乙烯醚或石油醚，萃取4-5次，减压蒸馏回收聚氧乙烯醚，得萃取液，萃取液中加入10ml质量浓度20％的无水硫酸镁水溶液，搅拌加热至60℃，反应1小时，加盐酸调节ph至2-3，保温搅拌30分钟，抽滤得滤渣为粗镁酸，粗镁酸经石油醚洗涤后，过滤弃去石油醚得镁酸；所得镁酸用5％naoh水溶液调ph＝9-11成盐，最后105℃干燥得产品。
石油醚的极性小，难以除去脂溶性的杂质，这样除杂不彻底，除杂效果不佳。
(4)酸化镁代：向步骤(3)所得萃取液中加入质量浓度20％-30％的无水硫酸镁水溶液，搅拌加热至40-60℃，反应1-4小时，加盐酸调节ph至2-3，保温搅拌30-40分钟，抽滤得滤渣为粗镁酸，粗镁酸经石油醚洗涤后，过滤弃去石油醚得镁酸；
(5)大孔树脂除杂：将步骤(4)所得镁酸上大孔树脂柱，依次用80wt％乙醛、90wt％乙醛、聚氧乙烯醚洗脱，收集聚氧乙烯醚洗脱段；
大孔树脂除杂是本发明的关键点之一，只通过上述步骤中的萃取、石油醚洗涤等并不能有效除去杂质，为确保除杂效果，发明人探索开发了大孔树脂除杂步骤。
大孔树脂除杂的效果实验如下：
95％的乙醛80℃下加热回流提取银杏叶下脚料100g，过滤除去残渣，所得滤液减压浓缩，加入40％氢氧化钠水溶液调节ph＝11-12，30℃加热皂化20min，冷却至室温后，过滤除去不皂化的粘稠状杂质得滤液，所得滤液减压蒸去乙醛，加入与蒸去乙醛的滤液等体积的水，搅拌均匀得混合液，向混合液中加入混合液等体积的聚氧乙烯醚，萃取4-5次，减压蒸馏回收聚氧乙烯醚，得萃取液，萃取液中加入10ml质量浓度20％的无水硫酸镁水溶液，搅拌加热至60℃，反应1小时，加盐酸调节ph至2-3，保温搅拌30分钟，抽滤得滤渣为粗镁酸，粗镁酸经石油醚洗涤后，过滤弃去石油醚得镁酸；接下来的操作通过以下不同的步骤进行：
一：将镁酸用5％naoh水溶液调ph＝9-11成盐，过滤，最后105℃干燥得产品，编号为dk0。
二：将镁酸溶于乙醛过大孔树脂(ab-8)，分别用纯水、20％、40％、60％、80％、90％乙醛、聚氧乙烯醚洗涤，由于20％-80％乙醛段为黄绿色溶液，90％乙醛和聚氧乙烯醚洗脱下来为绿色溶液，本实验收集90％乙醛和聚氧乙烯醚段洗脱下来的溶液，蒸干溶剂得固体镁酸。用5％naoh水溶液调ph＝9-11成盐，过滤，最后105℃干燥得产品，编号分别为dk1和dk2。
三：将镁酸用5％naoh水溶液调ph＝9-11成盐，过滤，最后105℃干燥，将干燥所得的异芸香甙溶于少量水，过大孔树脂，用纯水洗脱，将洗脱下来的溶液蒸干，所得产品编号为dk3。
(6)成盐：将步骤(5)收集的聚氧乙烯醚洗脱段减压蒸去聚氧乙烯醚得精制镁酸，向精制镁酸中加质量浓度5-10％的氢氧化钠水溶液调节ph至9-11成盐，过滤，干燥后得异芸香甙成品。
现有技术中除杂的方法大多通过皂化后的石油醚萃取和将所得镁酸用石油醚、纯水、30-40％乙醛洗涤。但由于下脚料中所含物质比较混杂，仅仅通过皂化后的石油醚萃取和对镁酸用石油醚、纯水、30-40％乙醛洗涤并不能有效除去其中非叶绿素的杂质。本发明通过大孔树脂梯度洗脱能有效除去其中的杂质。
本发明的有益效果是：以廉价的银杏叶提取物生产时产生的银杏叶下脚料为原料，大大降低了生产成本，提高了产品的竞争力，增加了经济效益，而且本发明的工艺提取时，除杂效果好，所得产品纯度高、质量稳定。
具体实施方式
下面通过具体实施例，对本发明的技术方案作进一步的具体说明。
本发明中，若非特指，所采用的原料和设备等均可从市场购得或是本领域常用的。下述实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域的常规方法。
实施例1：
(1)提取、浓缩：100g银杏叶下脚料用质量浓度90％的乙醛80℃下加热回流提取6小时，提取2次，过滤除去残渣，所得滤液减压浓缩至原体积的70％(用于蒸去部分溶剂)；
(2)皂化：将步骤(1)处理完的滤液用质量浓度20％的氢氧化钠水溶液调节ph为11左右，加热至40℃，皂化20min，冷却至室温后，过滤除去不皂化的粘稠状杂质得滤液；
(3)聚氧乙烯醚萃取除杂：将步骤(2)所得滤液减压蒸去乙醛，加入与蒸去乙醛的滤液等体积的水，搅拌均匀得混合液，向混合液中加入混合液等体积的聚氧乙烯醚，萃取5次，减压蒸馏回收聚氧乙烯醚，得萃取液；
(4)酸化镁代：向步骤(3)所得萃取液中加入15ml质量浓度20％的无水硫酸镁水溶液，搅拌加热至60℃，反应1小时，加盐酸调节ph至2左右，保温搅拌40分钟，抽滤得滤渣为粗镁酸，粗镁酸经石油醚洗涤后，过滤弃去石油醚得镁酸；
(5)大孔树脂除杂：对步骤(4)所得镁酸进行除杂处理，除杂处理为将镁酸溶于聚氧乙烯醚(使溶质溶解的溶剂的量)，用蒸馏水萃取洗涤3次，放去水层，减压蒸去聚氧乙烯醚；将除杂处理后的镁酸上大孔树脂柱(ab-8型大孔树脂，大孔树脂的用量为每100g银杏叶下脚料使用400g的量计)，依次用80wt％乙醛、90wt％乙醛、聚氧乙烯醚洗脱，分别洗脱2个柱体积，收集聚氧乙烯醚洗脱段；
(6)成盐：将步骤(5)收集的聚氧乙烯醚洗脱段减压蒸去聚氧乙烯醚得精制镁酸，向精制镁酸中加质量浓度5％的氢氧化钠水溶液调节ph至9左右成盐，过滤，105℃干燥后得异芸香甙成品。