本发明涉及生物技术领域,特别涉及一种细胞学dna检测样本清洁液的制备方法,同时本发明还涉及该清洁液应用。
背景技术:
在目前的疾病诊断过程中,病理诊断是诊断信息的重要来源,具有重要临床意义。病理细胞制片技术是病理诊断学不可分割的一部分,制片技术的优劣直接影响病理诊断的判断结果。目前市场上的清洗液是简单的盐类缓冲液为主,起到简单的清洗作用,血液细胞和粘液蛋白成分清洗效果不彻底,经过后续制片及染色后,效果较差,影响整个病理诊断的判断,无法获得真实有效的临床诊断结果。
技术实现要素:
本发明为解决上述现有技术所存在的不足,提供一种细胞学dna检测样本清洁液。该清洁液能有效去除血液细胞和样本中的粘液蛋白成分,调节ph环境,有利于玻片粘附,进行后续制片及染色。该细胞清洁液配置简便,操作简单,处理后的玻片制片效果背景干净,平铺均匀。
具体来说:该细胞清洁液的组分为1~5%抗凝剂,20~45%ph缓冲剂,0.1~5%粘液消化成分,0.1~1.2%红细胞处理成分,余量为纯化水。
上述清洁液中的抗凝剂为乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸钾、肝素中的一种或几种;ph缓冲剂为tris缓冲盐溶液、磷酸缓冲盐溶液、柠檬酸缓冲溶液中的一种或几种;粘液消化成分为二硫苏糖醇、三羟甲基氨基甲烷、te中的一种或几种;红细胞处理成分为红细胞裂解液、碳酸氢钠、磷酸三钠中的一种或几种。
上述细胞清洁液制备方法为:
1)取缓冲剂、抗凝剂依次加入适量纯化水中,搅拌均匀,备用;
2)向前述溶液中加入粘液消化成分搅拌均匀,备用;
3)向前述溶液中加入红细胞处理成分搅拌均匀,加纯化水至全量,搅拌均匀,虑过,即得。
上述细胞清洁液的使用方法为:
1)取处理后的细胞沉淀物加入适量的细胞清洁液,震荡混匀后,静置;
2)吸出上浮杂质弃去,留取细胞沉降物制片,染色。
本发明制备的细胞清洁液能够较好地清洁处理脱落细胞,避免细胞溶解和膨胀;粘液处理能力与血细胞崩解能力强,调节细胞液体系环境。该细胞清洁液配置简便,操作简单,制片效果背景干净,平铺均匀。
附图说明
附图1本发明实施例一镜检图片。
附图2本发明实施例二镜检图片。
具体实施方式
实施例一:
细胞清洁液1,制备方法为:取乙二胺四乙酸2g,磷酸缓冲盐溶液30ml,依次加入50ml纯化水中,搅拌至乙二胺四乙酸全部溶解,再加入二硫苏糖醇1g,搅拌15分钟至全部溶解,再加入碳酸氢钠0.8g,搅拌5分钟至全部溶解,再加入纯化水至100ml全量,搅拌均匀,用0.22μm滤膜抽虑,即得细胞清洁液1。
使用方法为:取处理后的细胞沉淀物加入2ml的细胞清洁液,震荡1分钟,混匀后静置30s,吸出上浮杂质弃去,留取细胞沉降物制片,染色。
使用结果:制片效果背景干净,平铺均匀。
实施例二:
细胞清洁液2,制备方法为:取肝素3g,tris缓冲盐溶液40ml,依次加入50ml纯化水中,搅拌至肝素全部溶解,再加入三羟甲基氨基甲烷1.5g,搅拌15分钟至全部溶解,再加入磷酸三钠1g,搅拌5分钟至全部溶解,再加入纯化水至100ml全量,搅拌均匀,用0.22μm滤膜抽虑,即得细胞清洁液2。
使用方法为:取处理后的细胞沉淀物加入2ml的细胞清洁液,震荡1分钟,混匀后静置30s,吸出上浮杂质弃去,留取细胞沉降物制片,染色。
使用结果:制片效果背景干净,平铺均匀。