本发明涉及生物学技术领域，具体涉及一种具有生物调节功能的南瓜多糖的制备及应用。
背景技术：
天然产物是指动物、植物提取物或昆虫、海洋生物和微生物体内的组成成分或其代谢产物以及人和动物体内许许多多内源性的化学成分统称作天然产物，其中主要包括蛋白质、多肽、氨基酸、核酸、各种酶类、单糖、寡糖、多糖、糖蛋白等。
生物多糖只是众多天然产物中的一类，生物活性多糖是指具有某种特殊生理活性的多糖化合物，如真菌多糖、植物多糖等。生物活性多糖对生命有机体的组成和多种生理功能非常重要，是与人类生活紧密相关的一类生物大分子，对维持生命活动起着重要的作用。植物多糖比如枸杞多糖、香菇多糖、黑木耳多糖、海带多糖、南瓜多糖等，具有双向调节人体生理节奏的功能。
南瓜多糖由于具有显著的抗肿瘤、免疫调节、抗氧化、降血糖、降血脂、抗溃疡、抗病毒、对辐射损伤具有保护作用等功能而成为现代生物药物的研究热点，并且在临床上也取得明显的疗效，显示了很好的应用的效果和广阔的前景。
有关南瓜多糖的制备工艺报道很少，而且在不同条件下对制备的多糖产量和活性之间的相关性未见研究报道。传统工艺一般采用在乙醇终浓度为70％-90％的情况下，经4℃沉淀过夜，4000-10000r/min转速离心收集沉淀，真空冷冻干燥处理后获得多糖。不同的乙醇浓度对制备的多糖的产量有多大的影响？乙醇沉淀多糖时的温度是否必须在4℃低温下进行？多糖是否必须经过冷冻干燥处理？因为维持一个4℃过夜的低温沉淀条件和冷冻干燥的方式，都需要耗费大量的能源和时间，显然是不适合于产业化低成本快速制备的多糖的工艺；而对于沉淀溶液的离心速度，合适最好，较高的离心速度不仅需要耗费更多的能源，仪器设备也更加昂贵，也更易于损坏，也更容易引入更多的杂质。在传统工艺中，如何去除蛋白杂质，是一个难点，尚未解决。基于以上几点，我们采用单因素试验的方法研究了上述各种因素在不同条件下对制备多糖的产量的影响，获得了高产、低耗、快速、可大规模产业化制备高活性南瓜多糖的新方法。
现有技术中制备的关南瓜多糖通常存在抗氧化活性差，免疫调节作用差的缺陷。
技术实现要素：
为了克服现有技术存在的不足，本发明的目的是提供一种具有生物调节功能的南瓜多糖的制备及应用，有效的弥补了现有南瓜多糖存在抗氧化活性差，免疫调节作用差的缺陷。
本发明提供了一种步骤简单、高产、低耗、快速、可产业化的高活性南瓜多糖的制备方法以及这种高活性多糖的多方面的应用。
为了实现上述的目的，通过以下技术方案予以实现：
一种具有生物调节功能的南瓜多糖的制备及应用，该加工工艺包括如下几个步骤：
1)首先，将南瓜洗净，除去南瓜表面附着的污物，30℃烘干后粉碎、过筛，得颗粒均匀的粉碎物；
2)将步骤1)制得南瓜粉碎物，用乙醇浸泡除杂两次，抽滤取上清液，所得残留物自然晾干；
3)将步骤2)所得残留物按料液比40-80ml/g，加蒸馏水进行热水浸提，提取温度50℃，时间1-5h，提取次数1-5次，得提取液；
4)将步骤3)所得提取液在-20℃到室温之间，反复冻融7-8次，离心除去蛋白质，再加入sevag试剂除蛋白，得脱蛋白的提取液；
5)将步骤4)所得提取液抽滤取上清液；
6)将步骤5)所得的含有多糖的上清液的酸碱度调整为5.3-8.5；
7)将步骤6)所得的多糖溶液，缓慢加入适量乙醇至乙醇体积浓度为80-85％，混合均匀；
8)将上述混合液置于12℃温度下，沉淀1-2小时；
9)沉淀结束后，置于离心机中，4500-6000r/min，离心一定时间，收集多糖沉淀；
10)将收集的多糖置于40℃温度下干燥，获得的干燥粉即为高活性南瓜多糖。
优选的，所述步骤1)中粉碎物细度为60目。
优选的，所述步骤2)中采用的乙醇浓度为80％，浸泡时间为4小时。
优选的，所述步骤9)中离心时间为20min。
优选的，所述免疫或生物调节功能的食品或药品中的应用。
优选的，所述食品或药品在治疗因免疫功能异常而引起的疾病或在调节因疾病引起机体免疫功能异常的状态方面的药物组合物的应用。
采用上述的技术方案，本发明的有益效果如下：
本发明所得的南瓜多糖具有很好的抗氧化活性和免疫调节作用，可以显著提高巨噬细胞的吞噬能力，明显增强机体的非特异性免疫和细胞免疫系统，可以作为天然的抗氧化剂及机体免疫调节剂，具有良好的利用开发前景。
本发明具有的有益效果是：提取制备方法是一种工艺简单易行、提取率高、能规模化生产。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。基于本发明的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
一种具有生物调节功能的南瓜多糖的制备及应用，该加工工艺包括如下几个步骤：
1)首先，将南瓜洗净，除去南瓜表面附着的污物，30℃烘干后粉碎、过60目筛，得颗粒均匀的粉碎物；
2)将步骤1)制得南瓜粉碎物，用80％乙醇浸泡除杂两次，抽滤取上清液，所得残留物自然晾干；
3)将步骤2)所得残留物按料液比40ml/g，加蒸馏水进行热水浸提，提取温度50℃，时间5h，提取次数1次，得提取液；
4)将步骤3)所得提取液在20℃条件下，反复冻融8次，离心除去蛋白质，再加入sevag试剂除蛋白，得脱蛋白的提取液；
5)将步骤4)所得提取液抽滤取上清液；
6)将步骤5)所得的含有多糖的上清液的酸碱度调整为5.3；
7)将步骤6)所得的多糖溶液，缓慢加入适量乙醇至乙醇体积浓度为85％，混合均匀；
8)将上述混合液置于12℃温度下，沉淀1小时；
9)沉淀结束后，置于离心机中，6000r/min，离心20min，收集多糖沉淀；
10)将收集的多糖置于40℃温度下干燥，获得的干燥粉即为高活性南瓜多糖。
实施例2：
一种具有生物调节功能的南瓜多糖的制备及应用，该加工工艺包括如下几个步骤：
1)首先，将南瓜洗净，除去南瓜表面附着的污物，30℃烘干后粉碎、过60目筛，得颗粒均匀的粉碎物；
2)将步骤1)制得南瓜粉碎物，用80％乙醇浸泡除杂两次，抽滤取上清液，所得残留物自然晾干；
3)将步骤2)所得残留物按料液比80ml/g，加蒸馏水进行热水浸提，提取温度50℃，时间1h，提取次数5次，得提取液；
4)将步骤3)所得提取液在10℃条件下，反复冻融7次，离心除去蛋白质，再加入sevag试剂除蛋白，得脱蛋白的提取液；
5)将步骤4)所得提取液抽滤取上清液；
6)将步骤5)所得的含有多糖的上清液的酸碱度调整为8.5；
7)将步骤6)所得的多糖溶液，缓慢加入适量乙醇至乙醇体积浓度为80％，混合均匀；
8)将上述混合液置于12℃温度下，沉淀2小时；
9)沉淀结束后，置于离心机中，4500r/min，离心20min，收集多糖沉淀；
10)将收集的多糖置于40℃温度下干燥，获得的干燥粉即为高活性南瓜多糖。
实施例3：
一种具有生物调节功能的南瓜多糖的制备及应用，该加工工艺包括如下几个步骤：
1)首先，将南瓜洗净，除去南瓜表面附着的污物，30℃烘干后粉碎、过60目筛，得颗粒均匀的粉碎物；
2)将步骤1)制得南瓜粉碎物，用80％乙醇浸泡除杂两次，抽滤取上清液，所得残留物自然晾干；
3)将步骤2)所得残留物按料液比60ml/g，加蒸馏水进行热水浸提，提取温度50℃，时间3h，提取次数3次，得提取液；
4)将步骤3)所得提取液在0℃条件下，反复冻融8次，离心除去蛋白质，再加入sevag试剂除蛋白，得脱蛋白的提取液；
5)将步骤4)所得提取液抽滤取上清液；
6)将步骤5)所得的含有多糖的上清液的酸碱度调整为5.3；
7)将步骤6)所得的多糖溶液，缓慢加入适量乙醇至乙醇体积浓度为80％，混合均匀；
8)将上述混合液置于12℃温度下，沉淀1小时；
9)沉淀结束后，置于离心机中，5000r/min，离心20min，收集多糖沉淀；
10)将收集的多糖置于40℃温度下干燥，获得的干燥粉即为高活性南瓜多糖。
实施例4：
一种具有生物调节功能的南瓜多糖的制备及应用，该加工工艺包括如下几个步骤：
将热水法提取的南瓜多糖水提液在-20℃条件下，反复冻融7次，离心除去蛋白质，再加入sevag试剂除蛋白，得脱蛋白的提取液；将脱蛋白上清提取液的酸碱度调整为5.3后，向提取液中加入乙醇至浓度为80％，然后在12℃温度下沉淀2小时，沉淀结束后，将混合溶液在6000r/min离心20min，收集多糖沉淀，将收集到的多糖沉淀置于40℃温度下完全干燥，即获得活性南瓜多糖。
实施例5：
一种具有生物调节功能的南瓜多糖的制备及应用，该加工工艺包括如下几个步骤：
将热水法提取的南瓜多糖水提液在25℃条件下，反复冻融7-8次，离心除去蛋白质，再加入sevag试剂除蛋白，得脱蛋白的提取液；将脱蛋白上清提取液的酸碱度调整为8.5后，向提取液中加入乙醇至浓度为85％，然后在12℃温度下沉淀1小时，沉淀结束后，将混合溶液在4500r/min离心20min，收集多糖沉淀，将收集到的多糖沉淀置于40℃温度下完全干燥，即获得活性南瓜多糖。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。