一种PRR11在食管癌组织及食管癌细胞系中使用方法与流程

本发明涉及食管癌技术领域，具体为一种prr11在食管癌组织及食管癌细胞系中使用方法。

背景技术：

在全球范围内，恶性肿瘤成为威胁人类生命健康的主要杀手。根据卫生部2006年发布的中国卫生事业发展情况统计公报显示，在我国，自上世纪90年代以来，恶性肿瘤一直处于城市居民的死亡原因的首位；在农村居民死亡原因中也于2006年跃居第一位。因此，开展恶性肿瘤的相关研究，开发出基础理论和应用研究对于阐明肿瘤发生发展的机制、肿瘤防治、降低恶性肿瘤的发病率死亡率等都具有重要的理论和现实意义。恶性肿瘤的发生是一个多因素作用、多基因参与、经过多个阶段才最终形成的极其复杂的生物学现象，其中癌基因和抑癌基因的表达失调进而诱发的细胞生长失控在肿瘤的发生发展中起着至关重要的作用。目前，仍有大量的新的肿瘤相关基因有待发现，对其功能的阐明不仅直接有助于对肿瘤发生机制的阐明，而且可能作为有效的生物靶点用于新型肿瘤诊断方法、抗肿瘤药物的开发。prr11基因是最近在恶性肿瘤相关新基因挖掘与筛选研究中发现的一个新的肿瘤相关基因，在国内外开展该基因的生物学功能和表达调控机制等相关研究，该基因参与细胞增殖、细胞周期和细胞癌变等多种生物学过程，目前pr11多在在肺癌、胃癌和胰腺导管腺癌得到极大的使用，但是在食管癌中还未有重大且凸出的使用。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种prr11在食管癌组织及食管癌细胞系中使用方法，以解决上述背景技术中提出的prr11基因是最近在恶性肿瘤相关新基因挖掘与筛选研究中发现的一个新的肿瘤相关基因，在国内外开展该基因的生物学功能和表达调控机制等相关研究，该基因参与细胞增殖、细胞周期和细胞癌变等多种生物学过程，目前pr11多在在肺癌、胃癌和胰腺导管腺癌得到极大的使用，但是在食管癌中还未有重大且凸出的使用的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种prr11在食管癌组织及食管癌细胞系中使用方法，其特征在于：该prr11在食管癌组织及食管癌细胞系中使用方法包括如下步骤：

s1：prr11在食管癌组织中的表达及意义；

s2：prr11在食管癌细胞系ec109中的表达及构建prr11稳定低表达的食管癌细胞系；

s3：prr11对食管癌细胞系生物学行为的影响。

优选的，所述prr11在食管癌组织中的表达及意义包括如下步骤：

a1：免疫组化方法检测食管鳞癌组织及肿瘤周围2cm以上癌旁组织中prr11的蛋白表达；

a2：使用实时荧光定量pcr技术测定食管鳞癌组织及癌旁组织中prr11mrna表达水平；

a3：分析食管鳞癌组织中prr11的表达与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤分期、组织分级、浸润深度和淋巴结转移等临床病理特征的相关性，通过构建logistic回归模型探讨prr11对食管癌患者预后的预测意义。

优选的，所述prr11在食管癌细胞系ec109中的表达及构建prr11稳定低表达的食管癌细胞系包括如下步骤：

b1：利用westernblot和realtime-pcr技术检测prr11在人源性食管鳞癌细胞系ec109中的表达水平；

b2：选择prr11mrna表达水平较高的细胞系，采用慢病毒转染法构建prr11稳定低表达的食管鳞癌细胞系，并经过westernblot和realtime-pcr技术检测确认，为进一步研究prr11对人源性食管鳞癌细胞系部分生物学行为的影响奠定基础。

优选的，所述prr11对食管癌细胞系生物学行为的影响包括如下步骤：

c1：通过体外的细胞增殖活力实验(cck-8)、平板克隆形成实验、细胞侵袭实验、流式细胞术研究prr11表达对食管鳞癌细胞生物学行为的影响，为食管癌的诊断、治疗及预后提供参考价值。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明通过分析食管鳞癌组织中prr11的表达与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤分期、组织分级、浸润深度、淋巴结转移等临床病理特征的相关性，通过构建logistic回归模型探讨prr11对食管癌患者预后的预测，并通过选择prr11mrna表达水平较高的ec109细胞系，采用慢病毒转染法构建prr11稳定低表达的食管鳞癌细胞系，并经过westernblot和realtime-pcr技术检测确认,通过体外的细胞增殖活力实验(cck-8)、平板克隆形成实验、细胞侵袭实验、流式细胞术等研究prr11表达对食管鳞癌细胞生物学行为的影响，能够通过对prr11的使用从而提高食管癌的诊断、治疗及预后。

附图说明

图1为本发明使用流程图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

请参阅图1，本发明提供一种prr11在食管癌组织及食管癌细胞系中使用方法：

该prr11在食管癌组织及食管癌细胞系中使用方法包括如下步骤：

s1：prr11在食管癌组织中的表达及意义；

s2：prr11在食管癌细胞系ec109中的表达及构建prr11稳定低表达的食管癌细胞系；

s3：prr11对食管癌细胞系生物学行为的影响。

本实施例中，所述prr11在食管癌组织中的表达及意义包括如下步骤：a1：免疫组化方法检测食管鳞癌组织及肿瘤周围2cm以上癌旁组织中prr11的蛋白表达；a2：使用实时荧光定量pcr(realtime-pcr)技术测定食管鳞癌组织及癌旁组织中prr11mrna表达水平；a3：分析食管鳞癌组织中prr11的表达与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤分期、组织分级、浸润深度和淋巴结转移等临床病理特征的相关性，通过构建logistic回归模型探讨prr11对食管癌患者预后的预测意义,所述prr11在食管癌细胞系ec109中的表达及构建prr11稳定低表达的食管癌细胞系包括如下步骤：b1：利用westernblot和realtime-pcr技术检测prr11在人源性食管鳞癌细胞系ec109中的表达水平；b2：选择prr11mrna表达水平较高的细胞系，采用慢病毒转染法构建prr11稳定低表达的食管鳞癌细胞系，并经过westernblot和realtime-pcr技术检测确认，为进一步研究prr11对人源性食管鳞癌细胞系部分生物学行为的影响奠定基础，所述prr11对食管癌细胞系生物学行为的影响包括如下步骤：c1：通过体外的细胞增殖活力实验(cck-8)、平板克隆形成实验、细胞侵袭实验、流式细胞术研究prr11表达对食管鳞癌细胞生物学行为的影响，为食管癌的诊断、治疗及预后提供参考价值。

综合以上所述，本发明通过分析食管鳞癌组织中prr11的表达与性别、年龄等临床病理特征的相关性，通过构建logistic回归模型探讨prr11对食管癌患者预后的预测，并通过选择prr11mrna表达水平较高的ec109细胞系，采用慢病毒转染法构建prr11稳定低表达的食管鳞癌细胞系，并经过westernblot和realtime-pcr技术检测确认,通过体外的细胞增殖活力实验(cck-8)、平板克隆形成实验、细胞侵袭实验、流式细胞术等研究prr11表达对食管鳞癌细胞生物学行为的影响，能够通过对prr11的使用从而提高食管癌的诊断、治疗及预后。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。