一种两栖类动物细胞解离试剂盒的制作方法

文档序号:21407319发布日期:2020-07-07 14:41阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于解离两栖类动物组织获得细胞的试剂盒,所述试剂盒包括以下试剂:试剂c、试剂d、试剂e和试剂f;

所述试剂c含有胶原酶ⅰ和分散酶ⅱ,胶原酶ⅰ的浓度为43000-53000u/100ml,分散酶ⅱ的浓度为90-110units/100ml;

所述试剂d含有胶原酶ⅰ,胶原酶ⅰ的浓度为55000-65000u/100ml;

所述试剂e含有胰蛋白酶和金属离子螯合剂,胰蛋白酶的浓度为120000-180000uspu/100ml,金属离子螯合剂的浓度为0.03-0.07g/100ml;

试剂f含有胶原酶ⅱ,胶原酶ⅱ的浓度为50000-55000u/100ml。

2.权利要求1所述试剂盒的应用,为解离两栖类动物组织获得细胞。

3.一种用于解离两栖类动物皮肤组织获得细胞的试剂盒,包括权利要求1中所述的试剂c。

4.权利要求3所述试剂盒的应用,为解离两栖类动物皮肤组织获得细胞。

5.一种用于解离两栖类动物肌肉组织获得细胞的试剂盒,包括权利要求1所述的试剂d和试剂e。

6.权利要求5所述试剂盒的应用,为解离两栖类动物肌肉组织获得细胞。

7.一种用于解离两栖类动物骨骼组织获得细胞的试剂盒,包括权利要求1所述的试剂f。

8.权利要求7所述试剂盒的应用,为解离两栖类动物骨骼组织获得细胞。

9.一种解离两栖动物组织获得单细胞的方法,包括如下步骤:

取皮肤组织,剪碎,用权利要求1所述的试剂c进行处理;

取肌肉组织,剪碎,先加入权利要求1中所述的试剂d进行处理,再加入权利要求1中所述的试剂e进行处理;

取骨骼组织,切碎,用权利要求1所述的试剂f进行处理。

10.方法甲或方法乙或方法丙;

所述方法甲为解离两栖类动物皮肤组织获得细胞的方法,包括如下步骤:取皮肤组织,剪碎,用权利要求1所述的试剂c处理;

所述方法乙为解离两栖类动物肌肉组织获得细胞的方法,包括如下步骤:取肌肉组织,剪碎,先加入权利要求1中所述的试剂d进行处理,再加入权利要求1中所述的试剂e进行处理;

所述方法丙为解离两栖类动物骨骼组织获得细胞的方法,包括如下步骤:取骨骼组织,切碎,用权利要求1所述的试剂f进行处理。


技术总结
本发明公开了一种两栖类动物细胞解离试剂盒。本发明的试剂盒包括以下试剂:试剂C含有胶原酶Ⅰ和分散酶Ⅱ,浓度依次为43000‑53000U/100ml、90‑110units/100ml;试剂D含有胶原酶Ⅰ,浓度为55000‑65000U/100ml。试剂E含有胰蛋白酶和金属离子螯合剂,浓度依次为120000‑180000USPU/100ml、0.03‑0.07g/100ml。试剂F含有胶原酶Ⅱ,浓度为50000‑55000U/100ml。本发明还保护一种解离两栖动物组织获得单细胞的方法:皮肤组织,剪碎,用试剂C处理;肌肉组织,剪碎,先加入试剂D处理,再加入试剂E处理;骨骼组织,切碎,用试剂F处理。本发明可以应用到各种两栖动物肢体皮肤、肌肉,骨骼组织的单细胞研究。

技术研发人员:王晨;黎瀚博;刘田宾;刘姗姗;范广益;顾颖;刘心;徐讯
受保护的技术使用者:深圳华大生命科学研究院;青岛华大基因研究院
技术研发日:2018.12.27
技术公布日:2020.07.07
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